RESUMO
In recent times, there has been an increase in the number of reports for new and rare variants of cutaneous leishmaniasis (CL). Here, we describe three unusual clinical forms of CL identified in Ecuadorian children. A total of 131 patients with CL were diagnosed over a 2-year period of active search. In 3 (2.29%), the lesions were very unusual; these included erysipeloid, recidiva cutis (LRC), and disseminated leishmaniasis (DL). The erysipeloid case is characterized by erythematous and indurated plaque seen on the face of a 5-year-old boy; the LRC one is differentiated by slowly progressing red-brown papules around large scars of healed sores in a 6-year-old girl, and the DL case is characterized by dozens of cutaneous ulcers distributed in the whole body of a 1-year-old girl. Leishmania parasites were isolated by lesion aspirate and analyzed by the technique multilocus enzyme electrophoresis (MLEE). All three isolates were identified as Leishmania (Viannia) panamensis. These distinct clinical variants rarely have been reported previously in the American cutaneous leishmaniasis, and for the first time L. (V.) panamensis was identified as the etiologic agent. Our cases extend the spectrum of clinical presentations in New World leishmaniasis.
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Leishmania/classificação , Leishmania/patogenicidade , Leishmaniose Cutânea/patologia , Animais , Criança , Pré-Escolar , Cicatriz/patologia , Equador , Eletroforese em Acetato de Celulose/métodos , Enzimas/análise , Face/patologia , Feminino , Humanos , Lactente , Isoenzimas , Leishmania/enzimologia , Leishmania/isolamento & purificação , Leishmaniose Cutânea/parasitologia , Masculino , Úlcera Cutânea/patologiaRESUMO
The Triatiominae (Hemiptera: Reduviidae) are hematophagous hemipters of importance because they transmit Trypanosoma cruzi, the causal agent of Chagas disease. The aim of this study was to define the possible relationships between species of the Phyllosoma complex (Triatoma mazzottii, Triatoma pallidipennis, and Triatoma longipennis) and species of other complexes present in Mexico that have not been previously analyzed (Triatoma lecticularia and Triatoma rubida). In addition, it was determined the inclusion of Triatoma bassolsae in the Phyllosoma complex by using 10 isoenzymatic systems (corresponding to the 14 loci). Results of isoenzymatic study show that between the species of the Phyllosoma complex including Triatoma bassolsae, the polymorphism of the analyzed enzymes ranges from 14% to 50% (P < or = 0.95) and the species from external complexes showed polymorphism values of 43% (Triatoma lecticularia), 43% (Triatoma rubida), and 36% (Triatoma infestans). The genetic tree shows a clear difference between species of the Phyllosoma complex and the other complexes.
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Doença de Chagas/transmissão , Insetos Vetores/classificação , Isoenzimas/genética , Triatoma/classificação , Animais , Eletroforese em Acetato de Celulose/métodos , Insetos Vetores/enzimologia , Insetos Vetores/genética , México , Filogenia , Polimorfismo Genético , Especificidade da Espécie , Triatoma/enzimologia , Triatoma/genética , Trypanosoma cruziRESUMO
El presente estudio permitió determinar dos perfiles proteicos, mediante SDS-PAGE con tinción argéntica, en 104 líquidos cefalorraquídeos (LCR) de pacientes con diversas patologías. En el perfil A (PA) se observaron bandas de peso molecular (PM) 67 KDa. En el perfil B (PB) se observaron, además, bandas correspondientes a proteínas de bajo PM (20-25 KDa y 13 KDa). Se analizó la presencia de bandas oligoclonales (BO) mediante electroforesis y electroinmunofijación en acetato de celulosa con tinción argéntica, sin concentración previa. El análisis estadístico estableció una asociación entre la presencia de PB y esclerosis múltiple (EM) (p<0,0001) y la presencia de BO y EM (p<0,001) comparada con el resto de las neuropatías. Dentro del grupo de pacientes con PB se observó una asociación significativa entre la presencia de BO y el diagnóstico de EM (p<0,05). Tres pacientes sin EM presentaron BO positivas. El perfil proteico y la presencia de BO fueron útiles como herramientas diagnósticas adicionales para definir a la población de pacientes con EM. La utilización de ambas determinaciones fortalecería el aporte del Laboratorio al diagnóstico de EM, al evaluar dos eventos patológicos complementarios, la síntesis local de IgG (BO) y la destrucción axonal con liberación de proteínas de origen cerebral (PB) (AU)
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Humanos , Esclerose Múltipla/diagnóstico , Proteínas do Líquido Cefalorraquidiano/diagnóstico , Esclerose Múltipla/líquido cefalorraquidiano , Esclerose Múltipla/fisiopatologia , Eletroforese em Acetato de Celulose/métodos , BiomarcadoresRESUMO
A set of 65 Trypanosoma cruzi stocks from dogs, opossums, insect vectors and humans was isolated in a geographically restricted endemic area for Chagas' disease in Argentina and was analysed by multilocus enzyme electrophoresis for 15 loci. The results show that at least five multilocus genotypes (clonets) circulate in the study area, one belonging to T. cruzi IIe, one to T. cruzi IId and three clonets belonging to T. cruzi I; and they confirm the presence of these lineages in the country. The three clonets attributed to T. cruzi I were identical to each other for all loci except for Sod-2, where three different patterns were identified. These patterns suggest the presence of two homozygous genotypes and one heterozygous genotype. Our results also suggest association of clonet IIe with dogs, clonet IId with humans and the three T. cruzi I clonets with Didelphis albiventris. On the other hand, there was no significant association between Triatoma infestans and any particular clonet circulating in the area. These findings are consistent with the hypothesis of natural selection, from mixed populations of T. cruzi in vectors, toward more restricted populations in mammals. The epidemiological implications of the possible selection of different clonets by different mammal hosts and the significance of two homozygous genotypes and one heterozygous genotype for the Sod-2 locus are discussed.
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Doença de Chagas/parasitologia , Trypanosoma cruzi/classificação , Animais , Argentina/epidemiologia , Doença de Chagas/epidemiologia , Doença de Chagas/veterinária , Doenças do Cão/parasitologia , Cães , Eletroforese em Acetato de Celulose/métodos , Doenças Endêmicas , Variação Genética , Genótipo , Humanos , Insetos Vetores/parasitologia , Desequilíbrio de Ligação , Camundongos , Camundongos Endogâmicos BALB C , Gambás/parasitologia , Especificidade da Espécie , Superóxido Dismutase/genética , Trypanosoma cruzi/genética , Trypanosoma cruzi/isolamento & purificaçãoRESUMO
We present the first report of a co-infection by Leishmania amazonensis and L. infantum/L. chagasi isolated in 1993 from a patient with diffuse cutaneous leishmaniasis (DCL), living in the sub-Andean region of Bolivia. This is the third reported case of DCL in Bolivia, but the first one with isoenzymatic identification of the aetiological agents involved and the first one giving evidence for a mixed infection by 2 Leishmania parasites in the same lesion.
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Antiprotozoários/administração & dosagem , Leishmaniose Tegumentar Difusa/parasitologia , Leishmaniose Visceral/parasitologia , Meglumina/administração & dosagem , Animais , Eletroforese em Acetato de Celulose/métodos , Feminino , Humanos , Lactente , Leishmania infantum , Leishmania mexicana , Leishmaniose Tegumentar Difusa/complicações , Leishmaniose Tegumentar Difusa/tratamento farmacológico , Leishmaniose Visceral/complicações , Leishmaniose Visceral/tratamento farmacológico , Resultado do TratamentoRESUMO
The detection of cryptic species by biochemical methods indicates that within the phlebotomine fauna morphological data are not always adequate for species diagnosis. Cellulose acetate and polyacrylamide enzyme electrophoresis methods were compared for their effectiveness in identifying 13 species of Venezuelan phlebotomine sand flies and resolving alleles. Eight diagnostic loci unambiguously separated these 13 species of sand flies. Although acrylamide was as effective as cellulose acetate in species separation, differences were detected in the resolution of some alleles. Cellulose acetate identified more alleles at Ak and Fum, and resolved better at Pgm, whereas acrylamide identified more alleles at Gpi, Mdh, and Me. Therefore, erroneous species diagnoses may occur, if diagnostic loci detected by one technique are used by a second technique without adequate reference standards.
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Enzimas/análise , Psychodidae/enzimologia , Animais , Eletroforese em Acetato de Celulose/métodos , Eletroforese em Gel de Poliacrilamida/métodos , Feminino , Masculino , Psychodidae/classificação , VenezuelaRESUMO
The taxonomic attribution of four Leishmania stocks isolated from humans in Ecuador has been explored by both multilocus enzyme electrophoresis and random amplified polymorphic DNA. For three loci, MLEE results showed patterns suggesting a heterozygous state for a diploid organism, while the corresponding homozygous states are characteristic of the Leishmania panamensis/guyanensis complex and Leishmania braziliensis, respectively. Other enzyme loci showed characters attributable to either the L. panamensis/ guyanensis complex or L. braziliensis. RAPD profiles exhibited for several primers a combination of the Leishmania panamensis/ guyanensis complex and L. braziliensis characters. These data hence suggest that the four stocks are the result of hybridization between L. panamensis/guyanensis and L. braziliensis. MLEE data show that the results cannot be attributed to either mixture of stocks, or an F1 in the framework of a simple Mendelian inheritance.
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Quimera/genética , Leishmania braziliensis/genética , Leishmania guyanensis/genética , Filogenia , Animais , DNA de Protozoário/análise , Equador , Eletroforese em Acetato de Celulose/métodos , Humanos , Isoenzimas/análise , Leishmania braziliensis/enzimologia , Leishmania guyanensis/enzimologia , Leishmaniose Cutânea/parasitologia , Leishmaniose Mucocutânea/parasitologia , Técnica de Amplificação ao Acaso de DNA PolimórficoRESUMO
Se describe un nuevo método para la caracterización de macroenzimas de la fosfatasa alcalina. El método combina una separación previa de las formas isoenzimáticas por gel filtración en capa fina de Sephadex G-200, y el posterior revelado de la correspondiente actividad enzimática in situ. Entre otras ventajas, este sistema no sólo separa adecuadamente las formas macroenzimáticas, sino que mantiene todas las isoenzimas en estado nativo, a diferencia de las técnicas con desnaturalizantes, por lo que es posible su detección y eventual aislamiento. Permite además la resolución simultánea de un gran número de muestras, así como la inclusión de controles de distinto peso molecular (PM) dentro de una misma corrida, lo que facilita en forma significativa la posterior interpretación del perfil obtenido, aportando una gran ventaja con respecto a la técnica de gel filtración en columna. El método propuesto se presenta como una técnica relativamente simple y rápida para el screening de macroenzimas en el laboratorio clínico (AU)
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Humanos , Fosfatase Alcalina/análise , Isoenzimas/análise , Isoenzimas/isolamento & purificação , Isoenzimas/classificação , Eletroforese em Acetato de Celulose/instrumentação , Eletroforese em Acetato de Celulose/métodos , Ensaios Enzimáticos Clínicos/métodos , Cromatografia em Gel/métodos , Bile/enzimologia , Colestase/enzimologia , Métodos de Análise Laboratorial e de Campo , Saúde AmbientalRESUMO
El estudio de las alteraciones del metabolismo de los aminoacidos urinarios ha motivado el desarrollo de dos tecnicas simples, rapidas y economicas, para el uso en Quimica clinica. Se describe la celda electroforetica disenada, asi como todas las operaciones requeridas para lograr dicho objetivo (tratamiento de los soportes usados y de las muestras, buffers, condiciones de corrida, distintos metodos y reactivos de revelado, desintometria). Se comparan los resultados obtenidos para los soportes empleados, papel y acetato de celulosa gelatinizado, usando para ambos igual sistema de refrigeracion y los resultados obtenidos en comparacion con otra forma de enfriamiento del sistema, utilizada previamente. Tambien se discute la aplicacion de mayores voltajes y la importancia de la estandarizacion en la coloracion. Trabajando con acetato de celulosa gelatinizado se pueden valorar por densitometria las corridas, lo cual brinda una util herramienta a los laboratorios clinicos
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Recém-Nascido , Humanos , Estudo Comparativo , Eletroforese em Acetato de Celulose/métodos , Eletroforese em Papel/métodos , Aminoácidos/urina , Aminoácidos/análise , Densitometria/métodos , Aminoacidúrias Renais/diagnósticoRESUMO
Three different methods to assess haemoglobin A2 concentration (microchromatography and cellulose acetate electrophoresis with further elution of the bands or measured by densitometry) were compared among them. A statistical significant difference (P less than 0.05) was found between densitometry and the other two methods. Microchromatography and the elution method showed no statistical difference between them. The most important technical aspects of each method as well as some possible error factors were also discussed.
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Cromatografia DEAE-Celulose/métodos , Eletroforese em Acetato de Celulose/métodos , Eletroforese/métodos , Hemoglobina A2/análise , Hemoglobina A/análise , Pré-Escolar , Densitometria , Feminino , Humanos , Lactente , MasculinoRESUMO
Se desarrolla un método electroforético en gel de acetato de celulosa que logra una buena separación de las isoenzimas de la creatina quinasa (CK). El empleo de patrones de las isoenzimas, para las cuales se plantea una metodología de obtención, permite que el método pueda ser utilizado en el diagnóstico de distrofia muscular de Duchenne