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BACKGROUND: In the last decade, new therapies with different mechanisms of action have been approved for the treatment of moderate to severe Crohn's disease (CD) and ulcerative colitis (UC). Due to the lack of comparative head-to-head trials, the ideal positioning of agents as the most appropriate first- or second-line therapies remains to be defined. OBJECTIVE: This survey aimed to evaluate the perception and decisions of Brazilian Inflammatory Bowel Diseases (IBD) specialists in positioning of new therapies (vedolizumab [VEDO], ustekinumab [UST] and tofacitinib [TOFA]) in the management of IBD in different clinical scenarios. METHODOLOGY: An anonymous national web-based questionnaire was used to determine the positioning of treatment options in different clinical scenarios (using Google Forms platform), which involved different age ranges, phenotypes, clinical situations and previous exposure to anti-TNF agents (14 scenarios for CD and 10 scenarios for UC). In CD, physicians could choose between UST or VEDO, whilst in UC, between UST, VEDO or TOFA. Six reasons for the specific choice were proposed, such as mechanism of action, safety, method of administration or onset of action. Statistical analysis was carried out with chi-square and t-tests. RESULTS: A total of 150 out of 672 GEDIIB IBD specialists (22.32%) responded to the survey. In CD scenarios, UST was the most dominant choice (11/14 scenarios), with VEDO dominating only 3 clinical situations. In UC scenarios, VEDO was the dominant choice (8/10), with UST being chosen for scenarios that included extraintestinal manifestations. Among the reasons for specific choices, the most commonly chosen were the higher efficacy due to the intrinsic mechanism of action and safety profile. CONCLUSIONS: UST was the dominant choice as compared to VEDO in CD in most scenarios, especially due to its mechanism of action and safety. VEDO was the dominant choice as compared to UST and TOFA in UC scenarios, mainly for reasons also related to its mechanism of action and safety profile. Comparative studies including patient outcomes are needed to better define the positioning of new IBD therapeutic options in our country.

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Este estudo busca avaliar quantitativamente a expressão do RNA mensageiro (mRNA) das integrinas alfa1, alfa4, alfa 5, alfa L, citocinas e quimiocinas, a partir de células presentes no líquido intersticial periapical adjacente a dentes com infecção do canal radicular. Foram selecionados 22 indivíduos com necessidade de tratamento endodôntico e encaminhados à Faculdade de Odontologia da Universidade Federal de Minas Gerais (Belo Horizonte, MG, Brasil). As amostras foram coletadas em 11 dentes necróticos e portadores de infecções endodônticas e 11 dentes hígidos que necessitavam de tratamento endodôntico por motivos protéticos. Após a cirurgia de acesso e antes dos procedimentos de limpeza e modelagem do sistema de canais radiculares (T0), imediatamente após a limpeza e formatação do sistema de canais radiculares(T1), em 7 (T2) e 14 dias (T3), um cone de papel esterilizado endodôntico # 20 foi inserido no SCR, mantido por 2 min, e posteriormente armazenado a -70°C. Real-Time PCR analisou microbiologicamente essas amostras para ler a expressão gênica do rRNA microbiano 16S e fragmentos da região ITS do gDNA fúngico da espécie Candida. Após os procedimentos de limpeza e formatação do SCR, três cones de papel absorvente esterilizados foram inseridos. Passivamente, a ponta do papel ultrapassou o ápice radicular em 2 mm e permaneceu por 2 minutos. As amostras foram coletadas imediatamente após a limpeza e modelagem do RCS, 7 e 14 dias após a primeira sessão. As pontas de papel tiveram os 4 mm finais cortados, inseridos em Eppendorf e armazenados a - 70°C. Com este procedimento, o RNA foi extraído do líquido intersticial periapical para caracterizar as expressões dos genes ITGA1, ITGA4, ITGA5, ITGAL, IL-1ß, TNF-α, IL-17A, IL-10, IFN-γ, CCL2/MCP-1, CCL5, CXCR4, e 16S usando PCR em tempo real. O DNA genômico (gDNA) foi extraído para se avaliar a abundância de Candida utilizando-se sequências ITS, por PCR em tempo real. Os resultados demonstraram que os níveis de expressão de mRNA do 16S diminuíram após os procedimentos de limpeza e modelagem e que a abundância de Candida foi insipiente na amostra analisada. As citocinas pro- inflamatórias IL-1ß e IL-17 apresentaram níveis de expressão elevados frente a infecção, reduzindo significativamente após os procedimentos de limpeza e formatação. Os níveis de expressão gênica de TNF-α significantemente aumentaram, em ambos os grupos. Não se observou diferença significativa quanto a expressão gênica das citocinas IFN-γ, IL-10, CCL-2 e CCL-5 e das integrinas ITGAL e ITGA5 nos tempos avaliados. A expressão gênica de CXCR4 reduziu significativamente do tempo T1 para o T2, no grupo experimental. As expressões gênicas de ITGA1 e ITGA4, no grupo experimental, reduziram significativamente de maneira tempo dependente. Finalmente, não houve alteração significativa na expressão de marcadores de macrófagos (CD64), enquanto expressão de marcadores de fibroblastos (S100A4) aumentou significativamente no grupo controle. Concluiu-se que a carga microbiana e a abundância de leveduras correlacionam-se positivamente com a expressão de mediadores pró-inflamatórios e que a que terapia endodôntica negativamente impacta a expressão dos mediadores pró-inflamatórios e das integrinas nos tecidos perirradiculares.

This study seeks to quantitatively evaluate the expression of messenger RNA (mRNA) of integrins alpha1, alfa4, alpha 5, alpha L, cytokines, and chemokines, from cells present in the periapical interstitial fluid adjacent to teeth with root canal infection. Twenty-two individuals needing endodontic treatment and referred to the School of Dentistry of the Federal University of Minas Gerais (Belo Horizonte, MG, Brazil) were selected. The samples were collected in 11 necrotic teeth and carriers of endodontic infections and 11 healthy teeth needing endodontic treatment for prosthetic reasons. After access surgery and before root canal system (RCS) cleaning and shaping procedures (T0), immediately after cleaning and shaping the root canal system (T1), in 7 (T2) and 14 days (T3) an endodontic sterilized paper point #20 was inserted into the RCS, maintained for 2 min, and subsequently stored at -70°C. Real-Time PCR microbiologically analyzed these samples to read the gene expression of microbial rRNA 16S and fragments of the ITS region of the Fungus Candida species gDNA. After RCS cleaning and shaping procedures, three sterilized absorbent paper cones were inserted. Passively, the paper point exceeded the root apex by 2 mm and remained for 2 minutes. Samples were collected immediately after RCS cleaning and shaping, 7 and 14 days after the first session. The paper points have the 4 mm of their tip cut, inserted in Eppendorf, and stored at - 70°C. This procedure extracted RNA from the periapical interstitial fluid to characterize the expressions of the genes ITGA1, ITGA4, ITGA5, ITGAL, IL-1ß, TNF- α, IL-17A, IL-10, IFN-γ, CCL2/MCP-1, CCL5, CXCR4, ITS using Real-Time PCR. The results showed that 16S mRNA expression levels decreased after cleaning and modeling procedures and that Candida abundance was incipient in the analyzed sample. Pro-inflammatory cytokines IL-1ß and IL-17 showed high expression levels against infection, significantly reduced after cleaning and formatting procedures. TNF-α gene expression levels significantly increased in both experimental and control groups. No significant difference was observed regarding the gene expression of the cytokines IFN-γ, IL-10, CCL-2, and CCL-5 and the integrins ITGAL and ITGA5. The gene expressions of ITGA1 and ITGA4 in the experimental group were significantly reduced time-dependent. Finally, there was no significant change in their macrophage markers (CD64) expression, while fibroblast markers (S100A4) expression significantly increased in the control group. It was concluded that microbial load and yeast abundance are positively correlated with the expression of pro-inflammatory mediators and that endodontic therapy negatively impacts the expression of pro-inflammatory mediators and integrins in periradicular tissues.

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Abstract Background: Viruses are being used as alternative and complementary tools for treating cancers. Oncolytic viruses exhibit tumor tropism, ability to enhance anti-tumor immunity and ability to be used in combination with conventional chemotherapy and radiotherapy. We have recently selected some rotavirus isolates which are adapted to efficiently infect and kill tumor cell lines. Aim: We tested five tumor cell-adapted rotavirus isolates for their ability to infect the human adenocarcinoma cell line MCF-7. Methods: Cell surface membrane-associated proteins mediating virus particle attachment were characterized using ELISA, immunoprecipitation, FACS analysis, and antibody blocking. Results: It was found that heat shock proteins (HSPs) such as Hsp90, Hsp70, Hsp60, and Hsp40 are expressed on the cell surface forming complexes with protein disulfide isomerase (PDI), integrin β3, and heat shock cognate protein 70 (Hsc70) in lipid raft microdomains. Interaction of rotavirus isolates with these cellular proteins was further confirmed by a competition assay and an inhibition assay involving the HSPs tested. Conclusion: Our findings suggest that the tumor cell-adapted rotavirus isolates studied here offer a promising tool for killing tumor cells, thus encouraging further research into this topic, including animal models.

Resumen Antecedentes: Los virus se utilizan como herramientas alternativas y complementarias para el tratamiento del cáncer. Los virus oncolíticos exhiben tropismo por tumores, capacidad para intensificar la inmunidad antitumoral y la capacidad para utilizarse en combinación con quimioterapia y radioterapia convencionales. Recientemente, hemos seleccionado algunos aislamientos de rotavirus que están adaptados para infectar y eliminar de manera eficiente líneas de células tumorales. Objetivo: Se ensayaron cinco aislamientos de rotavirus adaptados a células tumorales para determinar su capacidad para infectar la línea celular de adenocarcinoma humano MCF-7. Métodos: Las proteínas asociadas a la membrana de la superficie celular que median la unión de partículas de virus se caracterizaron mediante ELISA, inmunoprecipitación, análisis FACS y bloqueo de anticuerpos. Resultados: Se encontró que las proteínas de choque térmico (HSPs) como Hsp90, Hsp70, Hsp60 y Hsp40 se expresan en la superficie celular formando complejos con la proteína disulfuro isomerasa (PDI), la integrina β3 y la proteína análoga de choque térmico 70 (Hsc70) en microdominios lipídicos (rafts). La interacción de los aislamientos de rotavirus con estas proteínas celulares se confirmó adicionalmente mediante un ensayo de competición y un ensayo de inhibición que incluía las HSP ensayadas. Conclusión: Nuestros hallazgos sugieren que los aislamientos de rotavirus adaptados a las células tumorales estudiados aquí ofrecen una herramienta prometedora para eliminar las células tumorales, lo que estimula más investigaciones sobre este tema, incluidos los modelos animales.

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ABSTRACT BACKGROUND: There is scarce data regarding efficacy and safety of vedolizumab in inflammatory bowel diseases in Latin America. OBJECTIVE: To describe the first observational real-world experience with vedolizumab in Latin American inflammatory bowel diseases patients. METHODS: Retrospective observational multicentric study of patients with Crohn's disease (CD) and ulcerative colitis (UC) who used vedolizumab at any phase of their treatment. Clinical remission and response (according to Harvey-Bradshaw index for CD and Mayo score for UC), mucosal healing, need for surgery and adverse events were evaluated. RESULTS: A total of 90 patients were included (52 with CD and 38 with UC), the majority with previous exposure to anti-TNF agents (88.46% in CD and 76.31% in UC). In CD (as observed analysis) remission rates at weeks 12, 26 and 52 were 42.89% (21/49), 61.9% (26/42) and 46.15% (12/26), respectively. In UC, remission rates at weeks 12, 26 and 52 were 28.94% (11/38), 36.66% (11/30) and 41.17% (7/17). Mucosal healing rates were 36.11% in CD and 43.4% in UC. During the study period, 7/52 CD patients underwent major abdominal surgery and 4/38 UC patients needed colectomy. CONCLUSION: Vedolizumab was effective in induction and maintenance of clinical response and remission in CD and UC, with no new safety signs.

RESUMO CONTEXTO: Há escassez de dados sobre a eficácia e segurança do vedolizumabe nas doenças inflamatórias intestinais na América Latina. OBJETIVO: Descrever a primeira experiência observacional de mundo real com vedolizumabe em pacientes latino-americanos com doenças inflamatórias intestinais. MÉTODOS: Estudo retrospectivo multicêntrico observacional de pacientes com doença de Crohn (DC) e retocolite ulcerativa inespecífica (RCUI) que utilizaram vedolizumabe em qualquer fase de seu tratamento. Foram avaliadas a remissão e resposta clínicas (de acordo com o índice de Harvey-Bradshaw para DC e escore de Mayo para RCUI), cicatrização da mucosa, necessidade de cirurgia e eventos adversos. RESULTADOS: Foram incluídos 90 pacientes (52 com DC e 38 com RCUI), a maioria com exposição prévia a agentes anti-TNF (88,46% na DC e 76,31% na RCUI). Na DC (em análise conforme observado), as taxas de remissão nas semanas 12, 26 e 52 foram 42,89% (21/49), 61,9% (26/42) e 46,15% (12/26), respectivamente. Na RCUI, as taxas de remissão nas semanas 12, 26 e 52 foram de 28,94% (11/38), 36,66% (11/30) e 41,17% (7/17). As taxas de cicatrização da mucosa foram 36,11% na DC e 43,4% na RCUI. Durante o período do estudo, 7/52 pacientes com DC foram submetidos a cirurgia abdominal maior e 4/38 pacientes com RCUI necessitaram de colectomia. CONCLUSÃO: O vedolizumabe foi eficaz na indução e manutenção da resposta e remissão clínicas em população refratária na DC e RCUI, com perfil de segurança favorável.

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Los síndromes de deficiencia de adhesión leucocitaria (leukocyte adhesion deficiency [LAD por sus siglas en inglés]) engloban un conjunto de patologías causadas por defectos en el reconocimiento, la adhesión y la migración de los leucocitos mieloides hacia los lugares de invasión microbiana, lo que provoca la falta de defensa innata del huésped frente a bacterias, hongos u otros microrganismos. Se identifica en lactantes por antecedentes como la demora en la caída del cordón umbilical cuando los niños empiezan a tener complicaciones infecciosas. No es común identificar LAD en niños recién nacidos, posiblemente la presencia de la fistula ano rectal y el tratamiento quirúrgico aceleran la presentación clínica en el paciente facilitando así su diagnóstico. Por ser una enfermedad autosómica recesiva y teniendo el importante antecedente de los fallecimientos en sus dos hermanos anteriores a mayor edad. Poder contar con mecanismos de diagnóstico efectivos facilitan el llegar a una conclusión pronta, mejor manejo en general mejorando las expectativas de vida de los pacientes con este tipo de alteraciones hematológicas.

The syndromes of leukocyte adhesion deficiency (LAD) encompass a group of pathologies caused by defects in the recognition, adhesion and migration of myeloid leukocytes to microbial invasion sites. Causes the lack of innate host defense against bacteria, fungi or other microorganisms. It is identified in infants due to antecedents such as the delay in the fall of the umbilical cord when children begin to have infectious complications. It is not common to identify HDL in newborn children, possibly the presence of anus rectal fistula and surgical treatment accelerate the clinical presentation in the patient, thus facilitating its diagnosis. For being an autosomal recessive disease and having the important antecedent of the deaths in his two older brothers at older age. Being able to count on effective diagnostic mechanisms makes it easier to arrive at a quick conclusion better management in general, improving the life expectancy of patients with this type of hematological alterations.

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A leishmaniose é considerada como um grupo de doenças, causadas por parasitos do gênero Leishmania. O gênero inclui mais de 20 espécies de parasitos que são transmitidas ao homem pela picada da fêmea, infectada, dos insetos da família dos flebotomíneos e as diferentes espécies estão associadas a diferentes manifestações clínicas da doença. Uma característica marcante na infecção é a presença de macrófagos infectados no sítio de inoculação do parasito e em órgãos internos do hospedeiro. Estudos prévios, demonstraram que a infecção de fagócitos mononucleares com Leishmania amazonensis, L. infantum ou L. braziliensis promove uma diminuição na adesão celular ao tecido conjuntivo inflamado da pele. Esta diminuição da adesão é decorrente, principalmente, de mecanismos envolvidos na regulação da molécula VLA-4, uma integrina da família beta 1 que se liga à VCAM-1...

Leishmaniasis is considered a group of diseases, caused by parasites of the genus Leishmania. The genus includes more than 20 species of parasites that are transmitted to humans by the bite of vector female insect, of the phlebotomine family, and the different species are associated with different clinical manifestations of the disease. A striking feature of infection is the presence of infected macrophages at the site of inoculation of the parasite and internal organs of the host. Previous studies have demonstrated that infection of mononuclear phagocytes with Leishmania amazonensis, L. infantum or L. braziliensis promotes a decrease in cellular adhesion to the inflamed connective tissue of the skin. This decrease in adhesion results mainly from mechanisms involved in the regulation of the VLA-4 molecule, a beta 1 integrin that binds to VCAM-1...

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As doenças cardiovasculares representam a principal causa de morte nos países ocidentais. Dentre essas doenças, a aterosclerose é que mais se destaca, sendo caracterizada pelo acúmulo de células musculares lisas vasculares (CMLV). O efeito patológico das CMLV em resposta a diferentes estímulos pode acarretar em disfunções nestas células. É notável que a aterosclerose ocorra principalmente em vasos sinuosos onde ocorre um forte turbilhonamento do fluxo sanguíneo, que pode acarretar em hemólise e, consequentemente, acúmulo de heme livre. Além disso, no processo de aterogênese as moléculas de adesão, principalmente integrinas, são de crucial importância durante a resposta de CMLV. Nesse trabalho nosso objetivo inicial foi avaliar o efeito do heme livre nas funções de CMLV, bem como os mecanismos moleculares por trás desses efeitos. Em uma segunda parte, investigamos o envolvimento da integrina α1ß1 no efeito da Angiotensina II (Ang II) em CMLV. Nós observamos que o heme livre é capaz de induzir a proliferação e migração de CMLV via espécies reativas de oxigênio (ERO) provenientes da NADPHoxidase (NADPHox). Adicionalmente vimos que o heme ativa vias de sinalização redox-sensíveis relacionadas à proliferação celular, como MAPKinases e o fator de transcrição NFκB. Também observamos que há uma ligação entre a NADPHox e o sistema heme oxigenase (HO), uma vez que o heme induz a expressão de HO-1 e o pré-tratamento das CMLV com inibidores de HO levam ao aumento tanto o efeito proliferação quanto a indução de ERO promovidas pelo heme. Além disso, vimos que o efeito contra-regulatório promovido pela HO ocorre devido as metabolites do heme: biliverdina, bilirrubina e monóxido de carbono. Por último, quando bloqueamos tanto a NADPHox quanto o sistema HO o heme não teve efeito algum na proliferação de CMLV...

Cardiovascular diseases represent the major mortality reason in western countries. Among these diseases, atherosclerosis is the most prominent one, which is characterized by vascular smooth muscle cell (VSMC) accumulation. The pathological effect of VSMC in response to different stimuli is able to induce VSMC dysfunctions. Notably, this cardiovascular disease occurs mainly in sinuous vessels with turbulent blood flow, which may lead to hemolysis and consequent free heme accumulation. Furthermore, in atherogenesis the adhesion molecule, mainly integrins, were of crucial importance during the VSMC response. In this work our aim was to elucidate the effect of free heme in VSMC, as well the molecular mechanisms underlying this process. In a second part, we investigated the role of α1ß1 integrin in Angiotensin II (Ang II) effect on VSMC. We observed that free heme is able to induce VSMC proliferation in a Reactive Oxygen Species (ROS) derived from NADPHoxidase (NADPHox) dependent manner. Additionally, heme activates proliferation-relationed redox-sensitive signaling routes, such as MAPKinases and the transcription factor NFκB. It was also observed a critical crosstalk between NADPHox and heme oxygenase (HO) system, once heme induces HO-1 expression and VSMC pretreatment with HO inhibitors increased heme proliferative effect and ROS production. Accordingly, we observed that the counter-regulatory effect promoted by HO occurs due heme metabolites: biliverdin, bilirubin and carbon monoxide. Finally, when both NADPHox and HO system were blocked, heme had no effect on VSMC proliferation...

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Objetivo: As moléculas de adesão celular (MAC) são essenciais para a manutenção do fenótipo epitelial. Alguns estudos têm relatado associação entre as alterações de sua expressão e a carcinogênese, mas o seu papel no câncer de próstata não é claro. Nosso objetivo foi estudar o perfil de expressão de E-caderina, cateninas e integrinas em espécimes cirúrgicos de câncer de próstata e associar as suas expressões com a evolução do tumor. Avaliamos também o perfil de expressão em metástases ósseas e linfonodais, a fim de compreender a influência destes marcadores na progressão do câncer de próstata. Materiais e Métodos: Foram selecionados 111 pacientes com câncer de próstata localizado tratados com prostatectomia radical pelo mesmo cirurgião. Sessenta pacientes não apresentaram recidiva tumoral após acompanhamento médio de 123 meses. A expressão das MAC foi avaliada por imuno-histoquímica (IH) em microarranjo tecidual (TMA), contendo duas amostras de cada tumor. Empregamos análise semiquantitativa para avaliação da expressão e determinamos a associação entre a expressão de cada MAC com a recorrência do tumor após a cirurgia. Avaliamos também a expressão das MAC por IH em TMA contendo espécimes de 28 metástases ósseas e em outro TMA contendo 19 metástases linfonodais com seus 19 tumores primários correspondentes. Resultados: Nos tumores primários a análise multivariada mostrou que a expressão das integrinas 3 e 3 1 relaciona-se com recidiva da doença. Quando a expressão de 3 foi forte e a expressão de 3 1 foi positiva, as chances de recorrência foram de 3,0 e 2,5 vezes maior. Apenas 19% e 28% dos pacientes estavam livres de recidiva após seguimento médio de 123 meses, quando os tumores apresentavam forte imunoexpressão de 3 ou positiva para 3 1 respectivamente. Outras integrinas apresentaram expressão reduzida, exceto 6 que foi expressa pela maioria dos tumores primário e metástases. A E-Caderina e as cateninas não mostraram associação com o prognóstico no tumor...

Purpose: Cell adhesion molecules (CAM) are essential for the maintenance of epithelial phenotype. Some studies have reported correlations between abnormalities in their expression and carcinogenesis, but their role in prostate cancer is unclear. Our aim was to study the expression profile of E-cadherin, catenins and integrins in surgical specimens of prostate cancer and associate their expression with outcome. We also assessed these expressions in bone and lymph node metastases in order to understand their influence in the progression of prostate cancer. Materials and Methods: We selected 111 patients with localized prostate cancer who underwent radical prostatectomy performed by the same surgeon. Sixty patients had no tumor recurrence after a median follow-up of 123 months. The CAM expression was evaluated by immunohistochemistry in a tissue microarray (TMA) containing two samples of each tumor. A semiquantitative analysis was employed and we measured the association between the expression of CAM and tumor recurrence. We also evaluated CAM expression by immunohistochemistry in a TMA containing 28 bone metastases and in other TMA containing 19 lymph node metastases with their corresponding 19 primary tumors. Results: In primary tumors, multivariate analysis showed that expression of 3 and 31 integrins was related to worse outcome. When 3 expression was strong and 31 expression was positive,the odds of recurrence were 3.0 and 2.5 fold higher. Only 19% and 28% of patients were recurrence-free in a mean follow up period of 123 months, when tumors showed strong 3 or positive 31 immuno-expression respectively. Other integrins have shown reduced expression, except 6 , which was expressed in most primary and metastatic cases. E-cadherin and catenins expressions were not associated with primary tumor outcome. At the metastatic setting, there was a global loss of CAM expression. We observed reliable gain of expression with prostate cancer progression...

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A interação entre as vias de sinalização do ER, do IGF-I e da integrina 1 é essencial para a manutenção da homeostase da glândula mamária normal, e alterações nessas vias de sinalização estão associadas ao processo de tumorigênese da mama. Portanto, o objetivo deste trabalho foi investigar a influência e inter-relação entre as vias de sinalização do IGF-I, do ER e da integrina 1 na regulação da transcrição dos genes PHLDA1 e PAWR. Para isso, células MCF-7 foram tratadas, por diferentes tempos, com 10nM de 17- estradiol (E2), 12,5nM de IGF-I, 30M de LY294002 (inibidor da PI-3K), 30M de SB202190 (inibidor da p38MAPK) e 1M de ICI182780 (antagonista do ER), ou transfectadas com 40nM de siRNA para integrina 1. A expressão gênica foi avaliada por PCR em tempo real e a expressão protéica por Western Blot. A expressão do gene PHLDA1 aumentou após tratamento com E2 por 6h (p=0,05), e esse efeito foi inibido pelo tratamento com ICI (p<0,05). O tratamento com E2 por 24h inibiu a expressão do gene PAWR (p<0,05), e esse efeito foi dependente de ER, pois foi inibido pelo tratamento com ICI (p<0,05). O tratamento com IGF-I por 1,5h causou aumento na expressão do gene PHLDA1 (p<0,05); e o tratamento com IGF-I por 24h causou diminuição na expressão do gene PAWR (p<0,05). Foi observado aumento na expressão protéica de PHLDA1 após tratamento das MCF-7 com E2 ou IGF-I por 1:30h. A regulação da expressão do PAWR pelo IGF-I ocorreu através das vias da PI-3K e p38MAPK. O efeito do IGF-I sobre a expressão dos dois genes foi independente da ativação do ER, mas foi observado sinergismo entre E2 e IGFI na inibição da expressão dos transcritos do PAWR, com diminuição na expressão para nível menor do que o observado após tratamento com E2 ou IGF-I sozinhos (p<0,05). A repressão da expressão da integrina 1 resultou na diminuição dos níveis de expressão dos genes PHLDA1 e PAWR. Não foi observada interação entre o IGF-I e a integrina 1 na regulação dos genes PHLDA1 e PAWR. Portanto, o gene...

The interactions among ER, IGF-I and 1 integrin signaling pathways are essential for the maintenance of normal mammary gland homeostasis, and alterations in these pathways have been associated with mammary tumorigenesis. Therefore, the goal of this work was to investigate the influence and interaction among IGF-I, ER and 1 integrin signaling pathways on the regulation of PHLDA1 and PAWR transcription regulation. To accomplish that, MCF-7 cells were treated with 10nM 17-estradiol (E2), 12.5nM IGF-I, 30M LY294002 (a PI3-K inhibitor), 30M SB202190 (a p38MAPK inhibitor) and 1M ICI182,780 (ICI an ER antagonist), or transfected with 40nM siRNA aiming 1 integrin. Real time PCR and western blot were used to evaluate gene and protein expression, respectively. PHLDA1 mRNA expression increased after 6h of treatment with E2 (p=0.05), and this effect was inhibited by ICI (p<0.05). Treatment with E2 for 24h repressed PAWR gene expression (p<0.05) and this effect was dependent on ER, since treatment with ICI inhibited it (p<0.05). Treatment with IGF-I for 1.5h resulted in increased PHLDA1 gene expression (p<0,05) and also PHLDA1 protein expression; and treatment with IGF-I for 24h inhibited PAWR mRNA expression (p<0.05). IGF-I regulation of PAWR expression was dependent on PI3-K and p38MAPK activation. The regulation of both genes by IGF-I was independent of ER activation; however, IGF-I acted in synergism with E2 on PAWR expression resulting in lower PAWR expression than the observed after the treatments alone (p<0.05). Repression of 1 integrin expression resulted in downregulation of PHLDA1 and PAWR expression levels. No interaction was observed between IGF-I and 1 integrin on PHLDA1 and PAWR gene expression. In conclusion, PHLDA1 is positively regulated by E2 and IGF-I, but there is no interaction between them on PHLDA1 regulation. On the other hand, PAWR is negatively regulated by E2 and IGF-I; IGF-I effect is dependent on PI3-K and p38MAPK, but not on ER...

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A imprevisibilidade do comportamento biológico do carcinoma epidermóide oral vem justificando um grande número de pesquisas utilizando biomarcadores que possam contribuir para um melhor entendimento do curso evolutivo dessa neoplasia. Por estarem envolvidas em relações entre as células tumorais e constituintes da matriz extracelular, as integrinas vêm sendo estudadas como possíveis marcadores preditivos desse comportamento. Este estudo se propôs a analisar, através do método da imuno- histoquímica, a expressão das integrinas α2ß1, α3ß1 e α5ß1, ligantes para o colágeno, laminina e fibronectina respectivamente, em 15 casos de carcinoma epidermóide de lábio inferior e 15 de língua, com diferentes escores de malignidade histológica. Observou-se uma imunomarcação predominantemente difusa, citoplasmática e granular na maioria dos casos analisados. Quanto à intensidade de marcação, a integrina α2ß1 mostrou-se de forma positiva em 80% dos casos de lábio e em 93,3% dos de língua. A imunorreatividade da integrina α3ß1 foi classificada como positiva em 60% dos casos de lábio e de língua. Para esta integrina, 20% e 33,3% dos casos de lábio e língua, respectivamente, mostraram-se negativos. Já com relação à integrina α5ß1 a intensidade foi classificada como positiva em 53,3% dos casos e fortemente positiva em 46,7% daqueles localizados em lábio. Nos carcinomas de língua, a intensidade mostrou-se positiva em 46,7% dos casos e fortemente positiva em 53,3%. A análise estatística não demonstrou diferenças nem correlações significativas da expressão dessas integrinas nem entre os sítios anatômicos, nem entre diferentes escores de gradação histológica de malignidade. A expressiva imunomarcação das integrinas α2ß1, α3ß1 e α5ß1 nos casos de carcinomas epidermóides estudados nos leva a sugerir uma ampla participação dessas proteínas na carcinogênese oral; no entanto, nossos resultados não nos permitem correlacionar sua expressão como indicador de variações no comportamento biológico desta neoplasia (AU).

The unpredictable biologic behavior of the oral squamous cells carcinoma has determined extensive research on the evolution of such tumor. Due to the existing relation between the outer cell matrix and the tumor cells, the integrins have been used as markers in the predictive study of the cell behavior. This study aims to analyze immunohistochemically the expression of the integrin α2ß1, α3ß1, and α5ß1 connections for the collagen, the laminin and the fibronectin respectively in 15 cases of squamous cells carcinoma from the lower lip and 15 from the tongue, with different scores of malignance grading. A predominantly diffuse, cytoplasm and granular immunological marking was observed in the majority of the analyzed cases. According to the marking intensity, integrin α2ß1 appeared positive in 80% of the lip and in 93,3% of the tongue cases. The immunological reactivity of integrin α3ß1 was classified as positive in 60% of both the tongue and lip cases. For this integrin, 20% and 33.3% of the tongue and lip cases, respectively, were negative. In relation to integrin α5ß1 the intensity was classified as positive in 53,3% of the cases and strongly positive in 46,7% of those located in the lip. In the tongue carcinomas, the intensity was positive in 46,7% of the cases and strongly positive in 53,3%. The statistic analysis did not show any significant differences or correlation of expression between these integrins nor between the anatomical sites or between different scores of malignancy grading. The expressive immunological marking of the integrins, α2ß1, α3ß1, and α5ß1 in the studied cases of squamous cell carcinomas leads us to think of a great participation of these proteins in oral carcinogenesis; however, our results do not allow us to correlate its expression as an indicator of variations in the biological behavior of this neoplasia (AU).

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Este estudo se propôs analisar através da técnica da estreptoavidina-biotina a expressão imuno-histoquímica das integrinas α2ß1, α3ß1 e α5ß1 em 11 espécimes de mucosa oral normal (MON), 16 de hiperplasia fibroepitelial inflamatória oral (HFIO) e 25 de displasia epitelial oral (DEO) (16 leves, 2 moderadas e 7 graves), procurando determinar se existe alteração qualitativa na expressão destas integrinas e se a mesma guarda relação com as modificações sofridas pelo epitélio oral. Para a integrina α2ß1 a maioria dos espécimes exibiu uma marcação predominantemente intensa e difusa nos contatos intercelulares e no citoplasma celular das camadas basal e suprabasal, sem diferença desse perfil entre os diferentes tipos de espécimes, porém com uma tendência a fraca ou perda da expressão em 21.1% das DEOs, sendo todos os espécimes que não expressaram marcação para este heterodímero DEOs graves. Para a integrina α3ß1 a maioria da amostra exibiu uma marcação fraca ou ausente predominantemente em camada basal. A integrina α5ß1 exibiu uma forte marcação difusa nos contatos intercelulares e citoplasmática na camada suprabasal, com diferença apenas na intensidade de marcação entre os tipos de espécimes, residindo essa diferença nas DEOs, onde 12 (48%) espécimes exibiram uma fraca marcação. Concluiu-se que as integrinas avaliadas podem estar envolvidas nas interações célula-célula e célula-MEC que garantem a diferenciação celular e manutenção do arranjo estrutural tecidual. A variável expressão da integrina α5ß1 nas DEOs, poderia sugerir, respectivamente, um papel dessa molécula na sobrevida celular, com o intuito de perpetuar o fenótipo alterado nessas lesões, ou uma ação supressora desse fenótipo devido à falta de interação desta molécula com a fibronectina da MEC (AU).

The objective of this study was perform by the streptoavidin-biotin technique an immunohistochemical analysis of α2ß1, α3ß1 e α5ß1 integrins in 11 normal oral mucosa (NOM), 16 oral inflammatory fibroepithelial hyperplasia (OIFH) and 25 oral epithelial dysplasia (OED) (16 mild, 2 moderates and 7 severe), to determine if exists qualitative alteration in the expression of these integrins and if this guard relation with the oral epithelial modifications. It was observed that for the α2ß1 integrin the majority of the sample showed a predominantly intense labeling diffusely distributed in the intercellular contacts and the cytoplasm of cells of the basal and suprabasal layers, without difference of this profile between the different types of specimens, however with a trend to weak or loss of expression in 21.1% of the OEDs, being all the specimens that had not expressed this heterodimer, severe OEDs. For the α3ß1 integrin the majority of the sample showed a weak or absent labeling in basal layer. The α5ß1 integrin showed a predominant strong diffuse labeling in the intercellular contacts and cytoplasm in the suprabasal layer, with difference only in the labeling intensity between the types of specimens, inhabiting this difference in the OEDs, where 12 (48%) specimens had shown a weak labeling. It was concluded that the evaluated integrins can be involved in the cell-cell, cell-ECM interactions modulating the cellular differentiation and maintenance of the epithelial structural arrangement. The variable expression of the α5ß1 integrin in the OEDs, could suggest, respectively, a role of this molecule in the cellular survival, with intention to perpetuate the modified phenotype in these lesions, or a suppressor role on the modified phenotype due to lack of interaction of this molecule with the fibronectina of the MEC (AU).

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Introdução: O estudo de proteínas envolvidas na adesão e ciclo celular de células de melanoma é importante para compreendermos o comportamento biológico e a capacidade em produzir metástases destes tumores que mantém sua incidência crescente em todo mundo. A pesquisa sistemática do primeiro linfonodo de drenagem (sentinela) representa o status linfonodal loco regional e sua positividade é indicativa de doença metastática, fazendo parte do sistema de estadiamento clínico do melanoma atual. O Hospital do Câncer A. C. Camargo de São Paulo realiza pesquisa de linfonodo sentinela em melanoma cutâneo desde 1997 sendo considerado referência no estadiamento e tratamento destes tumores. Procurar as razões que levariam melanomas com fatores histopatológicos semelhantes a desenvolverem metástases seria muito importante. Objetivo Estudar a expressão das proteínas controladoras do ciclo celular (Ciclina D1, CDK4, p16ink4, p21WAF1), da adesão celular (integrina &*61537;v&*61538;3) e enzimas proteolíticas através da ativação da metaloproteinase-2 (MMP-02) e metaloproteinase-9 (MMP-09) em lesões cutâneas de melanomas que evoluíram com e sem metástases em linfonodo sentinela, por estudo imunoistoquímico. Pacientes e métodos: estudo retrospectivo de 84 pacientes com diagnóstico de melanoma cutâneo primário realizado no Departamento de Anatomia Patológica do Centro de Tratamento e Pesquisa Hospital do Câncer A C Camargo, submetidos à pesquisa de linfonodo sentinela, no período de 1998 a 2002. O estudo imunoistoquímico para os marcadores acima mencionados, foi realizado em lâminas convencionais para os casos de melanomas com espessura de Breslow menor que 1mm (17 casos) e em lâminas de Tissue micro array (TMA) para os demais casos de melanoma. O bloco de TMA foi confeccionado com cilindros de 1mm de diâmetro de 134 amostras de tumores que correspondem a melanomas de 67 pacientes representados em duplicata. Foram incluídas amostras de 12 nevos melanocíticos intradérmicos que serviram de controle das reações. Resultados: A idade média ao diagnóstico foi de 53 anos com predomínio de mulheres (53%). A pesquisa de metástases em linfonodo sentinela resultou negativa em sessenta e quatro casos (76%), sendo, portanto, positiva em vinte casos (24%). Das variáveis histopatológicas, a espessura do tumor (Breslow ­ p=0,001), o nível de Clark (p=0,010) e a invasão perineural (p=0,011) mostraram associação estatisticamente significativa com as micrometástases no linfonodo sentinela. Das variáveis moleculares somente a ausência de expressão de ciclina D1 apresentou associação estatisticamente significativa com as micrometástases no linfonodo sentinela (p=0,001). As demais variáveis não apresentaram associação estatisticamente significativa com metástases no linfonodo sentinela. Após a avaliação logística múltipla, a espessura do tumor (Breslow ­ OR=0,011; IC95%:1,7-63,7), invasão neural (OR=0,013; IC95%:1,9-318,9) e negatividade para ciclina D1 (OR=0,010; IC95%: 1,5-22,8) mostraram-se associadas à presença de metástase no linfonodo sentinela de modo estatisticamente significativo. Conclusões: A espessura do tumor (Breslow) continua sendo o fator prognóstico de maior impacto no desenvolvimento de metástases em linfonodo sentinela. A variável histológica invasão perineural, embora presente em um número reduzido de casos, apresentou-se estatisticamente significativa quando correlacionada à metástase em linfonodo sentinela. É provável que a ausência de ciclina D1 possa ser considerada como fator prognóstico para o desenvolvimento de metástases nodais de melanoma cutâneo, pois se verificou correlação entre a ausência de expressão de ciclina D1 e presença de metástase em linfonodo sentinela tanto na análise univariada quanto na análise multivariada. A expressão de CDK4 parece não ter importância como fator preditivo de metástases nodais de melanoma cutâneo. A expressão da proteína p16 não demonstrou correlação com a profundidade da infiltração dérmica, bem como com o desenvolvimento de metástase em linfonodo. Observaram-se correlação positiva entre a expressão de &*945;v&*946;3 e MMP-2. Porém ambas as proteínas não mostraram correlação estatisticamente significativa com desenvolvimento de metástases linfonodais. Todos os nevos melanocíticos estudados (intradérmicos) expressaram positividade para proteína p16, sendo negativa a expressão de p21 em todos eles. Esta observação sugere que nestas lesões melanocíticas benignas o controle do ciclo celular é realizado pela via p16/pRb. O presente estudo, através da análise de cortes histológicos convencionais e de TMA, analisou os parâmetros histopatológicos e expressão de proteínas por estudo imunoistoquímico correlacionando-os com sucesso.

Introduction: Melanoma incidence is increasing worldwide. The mechanisms that regulate the biological behavior and metastatic capacity of melanoma are not completely understood. Cell cicle proteins and adhesion molecules have been pointed as participants in this process, but few studies have compared patients with and without micrometastatic disease from melanoma in sentinel lymphnodes (SLN). It has been established that SLN is one of the most accurate methods for prognosis of melanoma and other diseases, such as breast cancer, and is a worse outcome predictor. However, very few studies have compared the expression of cell cycle proteins to establish a link with micrometastatic melanoma. Objective: to study the expression of cell cycle proteins (Cyclin D1, CDK4, p16ink4, p21WAF1), cell adhesion protein (αvß3 integrin) and proteolythic enzimes through activation of metalloproteinase-2 (MMP-02) e metalloproteinase-9 (MMP-09) in specimens of primary cutaneous lesions of melanoma that did and did not metastasize to SLN, using immunohistochemistry. Patients e methods: this is a retrospective study of 84 patients diagnosed as primary cutaneous melanoma in the Department of Anatomic Pathology of the Centro de Tratamento e Pesquisa Hospital do Câncer A C Camargo, in which SLN had been evaluated between 1998 and 2002. A standard immunohistochemistry staining was performed for the markers mentioned above and in conventional glass-slide sections, for thick melanomas (17 specimens) and in tissue micro array (TMA) glass slides, for the remaining specimens. The TMA paraffin block was built with 134 samples of melanoma with cores of 1 mm in diameter. This corresponded to 67 patient melanomas in duplicate. Twelve melanocytic nevi were included as a control. Results: A mean age of 53 years with a slight women predominance (53%) was found. No metastatic disease was found in 64 (76%) cases whereas in 20 (24%) cases a positive result was obtained. Histopathological variables, Breslow's tumor thickness (p=0,011), Clark's level (p=0,010) and perineural invasion (p=0,011) were statistically associated to SLN micrometastases. The only molecular variable with statistical significance to correlate with SLN micrometastases was the absence of cyclin D1 expression (p=0,001). All other variables had no relationship with SLN micrometastases. When logistic multiple regression was applied Breslow's thickness (OR=0,011; IC95%:1,7-63,7), perineural invasion (OR=0,013; IC95%:1,9-318,9) and negativity for cyclin D1 (OR=0,010; IC95%: 1,5-22,8) had a significant association with metastatic disease in the SLN. Conclusions: Breslow's thickness of melanoma, is still the major prognostic factor to predict metastatic behaviour in SLN. Perineural invasion, although present in a reduced number of cases, had statistical significance as a histological variable to predict SLN metastases. It is likely that the absence of cyclin D1 is a prognostic factor for the development of SLN metastases because both univariate and multivariate analysis pointed out a relationship between cyclin D1 absence and SLN metastases. Expression of CDK4 does not seem to be important as a predictor for nodal metastic disease. No relationship between the expression of p16 and depth of the tumor, as well as nodal metastases was found. A correlation between αvß3 integrin expression and MMP-2 has been found. However, none of these proteins had correlated with the development of nodal metastases. All intradermal melanocytic nevi expressed p16, whereas p21 was negative. This observation may suggest that in these benign melanocytic lesions, cell cycle control is obtained through the p16/pRb pathway. In this study, conventional sections and TMA's allowed a successfull correlation between histopathological variables and immunohistochemical expression of proteins.

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INTRODUÇÃO: A interação entre leucócitos e plaquetas é fundamental para o início e a progressão da reestenose e da aterosclerose. Recentemente foi evidenciado em estudos in vitro que a integrina Mac-1 dos leucócitos se liga à glicoproteína Ibalfa (GP Ibalfa) das plaquetas e que esta interação possui uma função central na firme adesão e transmigração de leucócitos em locais de deposição de plaquetas. Entretanto, não há estudos in vivo que avaliam a importância da interação entre a integrina Mac-1 dos leucócitos e a GP Ibalfa das plaquetas (alfaMbeta2-GP Ibalfa) em modelo experimental de lesão vascular. MÉTODO: Um peptídeo denominado M2 ou anticorpo anti-M2 foi desenvolvido para bloquear a interação da integrina Mac-1 dos leucócitos com a GP Ibalfa das plaquetas, visando, deste modo, inibir a adesão de leucócitos na superfície do vaso coberta por plaquetas, a proliferação celular e a hiperplasia neointimal. Este peptídeo foi injetado e comparado com anticorpo-controle em camundongos C57B1/6J submetidos à lesão vascular da artéria femoral com corda-guia. Um dia (controle: n= 6; anti-M2: n= 6), 5 dias (controle: n= 9; anti-M2: n= 9) ou 28 dias (controle: n= 9; anti-M2: n= 9) após a lesão vascular, as artérias femorais foram retiradas para a realização de morfometria e imunohistoquímica. RESULTADOS: O bloqueio da interação alfaMbeta2-GP Ibalfa promoveu redução estatisticamente significativa de 75% do número de leucócitos na camada média no primeiro dia após a lesão vascular...

INTRODUCTION: The interaction between leukocytes and platelets is fundamental for the beginning and the progression of restenosis and atherosclerosis. Recent in vitro studies have shown that the leukocyte integrin Mac-1 binds to the platelet glycoprotein (GP) Ibalfa, and this interaction plays a central role in the leukocyte firm adhesion and transmigration at sites of platelet deposition. However, there is no in vivo study evaluating the importance of the integrin Mac-1 and GP Ibalfa (alfaMbeta2-GP Ibalfa) interaction in experimental models of vascular injury. METHODS: A peptide termed M2 or anti-M2 antibody was developed to block the leukocyte Mac-1 and platelet GP Ibalfa interaction, aiming to inhibit the adhesion of leukocytes to the platelet-coated surface of vessels as well as the cellular proliferation and the neointimal hyperplasia. The peptide was injected and compared with a control-antibody in C57B1/6J mice subjected to wire-induced femoral artery injury. One day (control: n= 6; anti-M2: n= 6), 5 days (control: n= 9; anti-M2: n= 9) or 28 days (control: n= 9; anti-M2: n= 9) after vascular injury, the femoral arteries were harvested for morphometry and immunohistochemistry. RESULTS: The alfaMbeta2-GP Ibalfa interaction blockade promoted a statistically significant 75% reduction in leukocytes in the medial layer on the first day after vascular injury (control: 7.9 ± 5.0% out of the total cells in the medial layer versus anti-M2: 2.0 ± 1.6%; p=0.021), as well as determined a statistically significant 42% decrease 5 days later (control: 42.3 ± 12.9% out of the total cells in the neointima versus anti-M2: 24.6 ± 10.8%; p=0.047), and a 58% decrease in leukocyte accumulation in the developing neointima 28 days later (control: 7.9 ± 3.0% versus anti-M2: 3.3 ± 1.3%; p=0.012). The cellular proliferation in the vessel medial layer 5 days after vascular injury presented a statistically significant 64% reduction by the alfaMbeta2-GP Ibalfa interaction blockade...

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O objetivo do presente trabalho foi estudar a expressão imunoistoquímica das proteínas de adesão celular CD44v6, CD44/H-CAM, E-caderina e Pan-caderina e avaliar sua correlação com variáveis clínicas e anatomopatológicas selecionadas, visando identificar fatores prognósticos relacionados à sobrevida livre de doença (SLD) e sobrevida global (SG) em pacientes portadores de condrossarcoma. A preparação das lâminas foi feita pela técnica de "tissue microarray". A expressão imunoistoquímica foi considerada positiva para reações com &*8805;10% de células tumorais marcadas. Noventa pacientes admitidos no Departamento de Cirurgia Pélvica do Centro de Tratamento e Pesquisa do Hospital do Câncer da Fundação Antônio Prudente de São Paulo entre 1953 e 2000 foram elegíveis para o estudo. O cálculo dos estimadores atuariais de sobrevida foi feito pela técnica de Kaplan-Meier e as curvas de sobrevida comparadas pelos testes de Log Rank. As associações entre as variáveis foram feitas por testes de qui-quadrado e teste exato de Fisher. A análise multivariada foi feita pela técnica de regressão logística com modelo de risco proporcional de Cox e a validade estatística estabelecida para valores de p<0,05. Ao final da atualização de dados, 43 pacientes (47,8%) encontravam-se vivos sem evidência de doença; 8 (8,9%) vivos com doença em atividade; 29 (32,2%) faleceram de câncer; e para 10 (11,1%) não foi possível informação atual da condição clínica. Verificou-se expressão de CD44v6 em 52,4% das amostras e de Pan-caderina em 80,7%. Observou-se ausência de expressão de CD44/H-CAM e E-caderina em 100% das amostras. A expressão de CD44v6 se correlacionou com o grau histológico, sendo verificada maior expressão nas amostras de condrossarcoma de graus moderado e alto. Os fatores adversos para sobrevida livre de doença na análise univariada foram: idade acima de 30 anos (p=0,0213), margem microscópica comprometida (p=0,0001) e grau histológico moderado ou alto (p=0,0034). No modelo multivariado, os mesmos fatores foram considerados variáveis independentes relacionadas a maior risco de recidiva: alto grau de malignidade (RR=2,28; IC95%, 1,1 ­ 5,4) e moderado (RR=2,55; IC95%, 1,1-6,2); margem comprometida (RR=3,08; IC95%, 1,5­6,4); idade acima de 37 anos (faixa etária em duas categorias em função do pequeno número de eventos; RR=2,35; IC95%, 1,1­4,9). Para a sobrevida global, as variáveis estudadas não influenciaram o risco de óbito, pois os fatores estudados não atingiram níveis de significância para os valores de p<0,05. As proteínas de adesão celular estudadas não foram consideradas variáveis de valor prognóstico para sobrevida livre de doença e sobrevida global em portadores de condrossarcoma

The main purpose of this study was the immunohistochemestry proteins of cellular adhesion molecules, CD44/HCAM, CD44v6, E-caderin and pan-caderin to evaluate its correlation with selected clinicai and anatomopathological variables aiming to identify prognostic value, related to disease free survival and overall survival in chondrosarcoma. The preparation of the blades was made by the technique of tissue microarray. The immunohistochemestry expression was considered positive for reactions ~ 10°/o of tu moral cels. This study included 90 patients registred in the pelvic surgery department in Centro de Tratamento e Pesquisa, from Cancer hospital, São Paulo, between 1953 and 2000. Survival curves, 5-year and 10-year survival rates were calculed using the Kaplan-Meier method. Survival curves were compared using the log-rank test. Cox proportional hazards model was used for multifatorial analysis. Tables and proportions were analyzed using the x2 test and Fisher exact test. Statistical significance was defined as a p value less than 0,05. At the end of the study, Forty-three patients (47,8°/o) were live without disease evidence; eight (8,9°/o) live tumor activity and twenty-nine died of their disease. The expression of CD44v6 was found in 52,4°/o and 80,7°/o for pan-caderin. The CD44/H-CAM and E-caderin were not expressed in ali patients. The expression of CD44v6 was correlationated with histologic grade, mainly in moderate and high grades. Negative prognostic factors for disease free survival in univariate analysis were: age> 37 years (p=0,0213), positive microscopic margin (p=0,0001) and high and moderate histological grade (p=0,0034). The same variables were important for multivariate analisys and were independent concerning recurrence: high grade (RR= 2,28; IC 95o/o, 1 ,5-6,4);moderate grade(RR=2,55; IC95°/o, 1, 1-6,2) ; positive microscopic margin(RR=3,08; IC95°/o, 1 ,5-6,4); age above 37 year (2 categories by the small number of events; RR= 2,35; IC 95°/o, 1, 1-4,9). For overall survival the variables were not significance to death, because the p value for the factors were less than 0,05. Adhesion proteins studied were not considered variables to prognostic in disease free survival and overall survival in chondrosarcoma .

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