Introdução:

O estudo de proteínas envolvidas na adesão e ciclo celular de células de melanoma é importante para compreendermos o comportamento biológico e a capacidade em produzir metástases destes tumores que mantém sua incidência crescente em todo mundo. A pesquisa sistemática do primeiro linfonodo de drenagem (sentinela) representa o status linfonodal loco regional e sua positividade é indicativa de doença metastática, fazendo parte do sistema de estadiamento clínico do melanoma atual. O Hospital do Câncer A. C. Camargo de São Paulo realiza pesquisa de linfonodo sentinela em melanoma cutâneo desde 1997 sendo considerado referência no estadiamento e tratamento destes tumores. Procurar as razões que levariam melanomas com fatores histopatológicos semelhantes a desenvolverem metástases seria muito importante. Objetivo Estudar a expressão das proteínas controladoras do ciclo celular (Ciclina D1, CDK4, p16ink4, p21WAF1), da adesão celular (integrina &*61537;v&*61538;3) e enzimas proteolíticas através da ativação da metaloproteinase-2 (MMP-02) e metaloproteinase-9 (MMP-09) em lesões cutâneas de melanomas que evoluíram com e sem metástases em linfonodo sentinela, por estudo imunoistoquímico. Pacientes e

métodos:

estudo retrospectivo de 84 pacientes com diagnóstico de melanoma cutâneo primário realizado no Departamento de Anatomia Patológica do Centro de Tratamento e Pesquisa Hospital do Câncer A C Camargo, submetidos à pesquisa de linfonodo sentinela, no período de 1998 a 2002. O estudo imunoistoquímico para os marcadores acima mencionados, foi realizado em lâminas convencionais para os casos de melanomas com espessura de Breslow menor que 1mm (17 casos) e em lâminas de Tissue micro array (TMA) para os demais casos de melanoma. O bloco de TMA foi confeccionado com cilindros de 1mm de diâmetro de 134 amostras de tumores que correspondem a melanomas de 67 pacientes representados em duplicata. Foram incluídas amostras de 12 nevos melanocíticos intradérmicos que serviram de controle das reações.

Resultados:

A idade média ao diagnóstico foi de 53 anos com predomínio de mulheres (53%). A pesquisa de metástases em linfonodo sentinela resultou negativa em sessenta e quatro casos (76%), sendo, portanto, positiva em vinte casos (24%). Das variáveis histopatológicas, a espessura do tumor (Breslow ­ p=0,001), o nível de Clark (p=0,010) e a invasão perineural (p=0,011) mostraram associação estatisticamente significativa com as micrometástases no linfonodo sentinela. Das variáveis moleculares somente a ausência de expressão de ciclina D1 apresentou associação estatisticamente significativa com as micrometástases no linfonodo sentinela (p=0,001). As demais variáveis não apresentaram associação estatisticamente significativa com metástases no linfonodo sentinela. Após a avaliação logística múltipla, a espessura do tumor (Breslow ­ OR=0,011; IC95%1,7-63,7), invasão neural (OR=0,013; IC95%1,9-318,9) e negatividade para ciclina D1 (OR=0,010; IC95% 1,5-22,8) mostraram-se associadas à presença de metástase no linfonodo sentinela de modo estatisticamente significativo.

Conclusões:

A espessura do tumor (Breslow) continua sendo o fator prognóstico de maior impacto no desenvolvimento de metástases em linfonodo sentinela. A variável histológica invasão perineural, embora presente em um número reduzido de casos, apresentou-se estatisticamente significativa quando correlacionada à metástase em linfonodo sentinela. É provável que a ausência de ciclina D1 possa ser considerada como fator prognóstico para o desenvolvimento de metástases nodais de melanoma cutâneo, pois se verificou correlação entre a ausência de expressão de ciclina D1 e presença de metástase em linfonodo sentinela tanto na análise univariada quanto na análise multivariada. A expressão de CDK4 parece não ter importância como fator preditivo de metástases nodais de melanoma cutâneo. A expressão da proteína p16 não demonstrou correlação com a profundidade da infiltração dérmica, bem como com o desenvolvimento de metástase em linfonodo. Observaram-se correlação positiva entre a expressão de &*945;v&*946;3 e MMP-2. Porém ambas as proteínas não mostraram correlação estatisticamente significativa com desenvolvimento de metástases linfonodais. Todos os nevos melanocíticos estudados (intradérmicos) expressaram positividade para proteína p16, sendo negativa a expressão de p21 em todos eles. Esta observação sugere que nestas lesões melanocíticas benignas o controle do ciclo celular é realizado pela via p16/pRb. O presente estudo, através da análise de cortes histológicos convencionais e de TMA, analisou os parâmetros histopatológicos e expressão de proteínas por estudo imunoistoquímico correlacionando-os com sucesso.