RESUMO
A genome of a virus preliminarily named avian gyrovirus 2 (AGV2), a close relative to chicken anemia virus, was recently discovered in a chicken in the state of Rio Grande do Sul, Southern Brazil. To study the occurrence of AGV2 in Rio Grande do Sul and the neighboring state Santa Catarina, a number of adult chickens (n=108 and n=48, respectively) were tested for the presence of AGV2 DNA. An AGV2-specific PCR was developed, optimized and used to analyze DNA extracted from clinical samples. AGV2 DNA was detected in 98/108 (90.7%) of samples collected in the state of Rio Grande do Sul and 29/48 (60.4%) of the samples collected in the state of Santa Catarina. In order to check whether AGV2 DNA would be detected in samples from a geographically distant region, DNA from brain samples of 21 diseased chickens from the Netherlands were tested independently, by the same method. In such specimens, 9/21 (42.9%) brain tissue samples were found to contain AVG2 DNA. Sequence analysis of some of the PCR products demonstrated that the amplified AGV2 sequences could vary up to 15.8% and could preliminarily be divided in three groups. This indicated the occurrence of variants of AGV2, which may reflect differences in geographical origin and/or in biological properties. The data presented here provides evidence that AGV2 seems fairly distributed in chickens in Southern Brazil and that AGV2 also circulates in the Netherlands. Besides, circulating viruses display genetic variants whose significance should be further examined, particularly to determine whether AGV2 would play any role in chicken diseases.
Assuntos
Galinhas/virologia , Gyrovirus/isolamento & purificação , Animais , Brasil , Infecções por Circoviridae/veterinária , Infecções por Circoviridae/virologia , DNA Viral/análise , DNA Viral/química , Variação Genética , Gyrovirus/classificação , Gyrovirus/genética , Países Baixos , Reação em Cadeia da Polimerase , Doenças das Aves Domésticas/virologiaRESUMO
Bovine herpesvirus type 1 (BoHV-1) has distinct subtypes according to genomic characterization. Immune responses induced by BoHV-1 subtype 1 (BoHV-1.1) are not distinguishable from those induced by BoHV-1 subtype 2 (BoHV-1.2) through conventional serological methods. In the present report, an enzyme linked immunosorbent assay is described that allows discrimination between immune responses in cattle immunized with either subtype, based on a monoclonal antibody that recognizes specifically the amino-terminal region of glycoprotein C (gC) on BoHV-1.1 strains, thus not reacting with BoHV-1.2a. The test displayed a sensitivity of 92%, specificity of 90% and a good correlation with serum neutralization tests on samples from BoHV-1.1-immunized calves (kappa = 0.799). The test may be useful to provide new insights into the roles played by each of these two subtypes in the epidemiology of BoHV-1 infections.
Assuntos
Ensaio de Imunoadsorção Enzimática/métodos , Herpes Simples/imunologia , Infecções por Herpesviridae/imunologia , Herpesvirus Bovino 1/imunologia , Herpesvirus Bovino 2/imunologia , Rinotraqueíte Infecciosa Bovina/imunologia , Proteínas Virais/imunologia , Animais , Anticorpos Monoclonais , Anticorpos Antivirais , Especificidade de Anticorpos , Bovinos , Imunização , Sensibilidade e EspecificidadeRESUMO
O presente estudo teve como objetivo a caracterização das propriedades de crescimento in vitro de uma amostra brasileira de herpesvírus bovino tipo 1.2a que apresenta uma deleção no gene que codifica a glicoproteína E (BHV-1.2a gE-). Os tamanhos de placa, cinética de penetração e cinética de multiplicação do vírus BHV-1.2a gE- foram estudados e comparados com o vírus parental, bem como com um vírus BHV-1.1 gE- recombinante, o qual é derivado de uma amostra européia de BHV-1.1. Em termos de cinética de penetração, não foram observadas diferenças significativas quando comparados os vírus gE- com os parentais. A determinação da cinética de multiplicação não demonstrou diferenças significativas entre os quatro vírus estudados. Foi entretanto observado que 11 horas pós infecção os dois vírus gE- foram excretados das células em títulos significativamente maiores do que os vírus parentais. Não foram observadas diferenças significativas quando comparados os diâmetros de placas formadas pelos dois vírus parentais. Da mesma forma, os diâmetros de placas dos vírus gE- foram semelhantes nos três tipos celulares estudados. Entretanto, a comparação dos diâmetros de placas entre os vírus gE- e os parentais mostrou uma redução significativa das placas dos vírus gE- em todos os tipos celulares. Esta característica indica que a falta da gE teve o mesmo efeito em ambos os subtipos de BHV-1, representado por uma disseminação viral célula-célula reduzida.
RESUMO
This paper describes the construction and characterization of a Brazilian strain of bovine herpesvirus type 1.2a (BoHV-1.2a) with a deletion of the glycoprotein E (gE) gene. The deletion was introduced by co-transfection of a deletion fragment containing the 5 and 3 gE flanking regions and genomic DNA of wild type BoHV-1 into bovine cells. Isolation of gE deletion mutant was performed by immunoperoxidase staining with an anti-gE monoclonal antibody. Viral clones were plaque purified and further examined by restriction endonuclesase digestion and Southern blot hybridization. This gE deletion mutant will be evaluated as a vaccinal virus, in order to determine its potential use for a differential vaccine