RESUMO

The aims of this study were to evaluate the contamination of lettuce (Lactuca sativa), produced in Londrina, Paraná (PR), with total coliform, coliform at 45 °C, E. coli, and Salmonella spp.; and to determine the E. coli contamination of irrigation water used at the farms studied. Four farms were evaluated, of which three produced lettuce using a conventional system and one using an organic system. An evaluation of the production practices of the farms was also carried out. A total of 111 samples were analyzed, 71 lettuce samples from the conventional system and 40 samples from the organic system. A total of eight irrigation water samples were collected for analysis. Coliform at 45 °C counts above the limit tolerated by Brazilian legislation were observed in 2.8% (2/71) of conventionally grown lettuce samples, and Salmonella spp. was isolated in 1.4% (1/71) of those samples. In the organic lettuce samples, 12.5% (5/40) had coliform at 45 °C counts above the limit tolerated and Salmonella spp. was not detected. Irrigation water samples from three farms were unsatisfactory, with counts higher than 102 MPN of E. coli per 100mL. The results of this study demonstrate that most conventionally grown lettuce samples show good sanitary conditions in production, and that lettuce contamination is not related to contamination found in irrigation water samples. The results also showed that the organic production practices required by Brazilian certification agencies should be applied to ensure that contamination of produced lettuce remains controlled.(AU)

Os objetivos deste estudo foram avaliar a contaminação por coliformes totais, coliformes a 45 °C, Escherichia coli e Salmonella spp. em alfaces crespas (Lactuca sativa) produzidas na região de Londrina, PR, e a contaminação por E. coli das amostras da água de irrigação empregadas nas propriedades estudadas. Quatro propriedades rurais foram avaliadas, das quais três produziam alfaces pelo sistema convencional e uma pelo sistema orgânico. Avaliação das práticas de produção dessas propriedades também foi realizada. Um total de 111 amostras foi coletado, sendo 71 amostras de produção convencional e 40 amostras de produção orgânica. Oito amostras de água de irrigação foram coletadas para análise. Contagens de coliformes a 45 °C acima do tolerado pela legislação brasileira foram observadas em 2,8 % (2/71) das alfaces convencionais analisadas, e Salmonella spp. foi isolada em 1,4 % (1/71) destas amostras. Quanto às amostras orgânicas, 12,5 % (5/40) apresentaram contagens de coliformes a 45 °C acima do limite preconizado e Salmonella spp. não foi isolada nessas amostras. As amostras de água de irrigação de três propriedades rurais apresentaram resultados insatisfatórios com contagens superiores a 102 MPN de E. coli por 100 mL. Os resultados obtidos neste estudo mostraram que a maioria das amostras de alfaces convencionais analisadas apresentou boas condições higiênicosanitárias e uma não relação com a contaminação encontrada nas amostras de água de irrigação. Os resultados também mostraram que as práticas de produção orgânica exigidas pelas certificadoras devem ser aplicadas para que a contaminação destes alimentos permaneça sob controle.(AU)

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The aims of this study were to evaluate the contamination of lettuce (Lactuca sativa), produced in Londrina, Paraná (PR), with total coliform, coliform at 45 °C, E. coli, and Salmonella spp.; and to determine the E. coli contamination of irrigation water used at the farms studied. Four farms were evaluated, of which three produced lettuce using a conventional system and one using an organic system. An evaluation of the production practices of the farms was also carried out. A total of 111 samples were analyzed, 71 lettuce samples from the conventional system and 40 samples from the organic system. A total of eight irrigation water samples were collected for analysis. Coliform at 45 °C counts above the limit tolerated by Brazilian legislation were observed in 2.8% (2/71) of conventionally grown lettuce samples, and Salmonella spp. was isolated in 1.4% (1/71) of those samples. In the organic lettuce samples, 12.5% (5/40) had coliform at 45 °C counts above the limit tolerated and Salmonella spp. was not detected. Irrigation water samples from three farms were unsatisfactory, with counts higher than 102 MPN of E. coli per 100mL. The results of this study demonstrate that most conventionally grown lettuce samples show good sanitary conditions in production, and that lettuce contamination is not related to contamination found in irrigation water samples. The results also showed that the organic production practices required by Brazilian certification agencies should be applied to ensure that contamination of produced lettuce remains controlled.

Os objetivos deste estudo foram avaliar a contaminação por coliformes totais, coliformes a 45 °C, Escherichia coli e Salmonella spp. em alfaces crespas (Lactuca sativa) produzidas na região de Londrina, PR, e a contaminação por E. coli das amostras da água de irrigação empregadas nas propriedades estudadas. Quatro propriedades rurais foram avaliadas, das quais três produziam alfaces pelo sistema convencional e uma pelo sistema orgânico. Avaliação das práticas de produção dessas propriedades também foi realizada. Um total de 111 amostras foi coletado, sendo 71 amostras de produção convencional e 40 amostras de produção orgânica. Oito amostras de água de irrigação foram coletadas para análise. Contagens de coliformes a 45 °C acima do tolerado pela legislação brasileira foram observadas em 2,8 % (2/71) das alfaces convencionais analisadas, e Salmonella spp. foi isolada em 1,4 % (1/71) destas amostras. Quanto às amostras orgânicas, 12,5 % (5/40) apresentaram contagens de coliformes a 45 °C acima do limite preconizado e Salmonella spp. não foi isolada nessas amostras. As amostras de água de irrigação de três propriedades rurais apresentaram resultados insatisfatórios com contagens superiores a 102 MPN de E. coli por 100 mL. Os resultados obtidos neste estudo mostraram que a maioria das amostras de alfaces convencionais analisadas apresentou boas condições higiênicosanitárias e uma não relação com a contaminação encontrada nas amostras de água de irrigação. Os resultados também mostraram que as práticas de produção orgânica exigidas pelas certificadoras devem ser aplicadas para que a contaminação destes alimentos permaneça sob controle.

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The aims of this study were to evaluate the contamination of lettuce (Lactuca sativa), produced in Londrina, Paraná (PR), with total coliform, coliform at 45 C, E. coli, and Salmonella spp.; and to determine the E. coli contamination of irrigation water used at the farms studied. Four farms were evaluated, of which three produced lettuce using a conventional system and one using an organic system. An evaluation of the production practices of the farms was also carried out. A total of 111 samples were analyzed, 71 lettuce samples from the conventional system and 40 samples from the organic system. A total of eight irrigation water samples were collected for analysis. Coliform at 45 C counts above the limit tolerated by Brazilian legislation were observed in 2.8% (2/71) of conventionally grown lettuce samples, and Salmonella spp. was isolated in 1.4% (1/71) of those samples. In the organic lettuce samples, 12.5% (5/40) had coliform at 45 C counts above the limit tolerated and Salmonella spp. was not detected. Irrigation water samples from three farms were unsatisfactory, with counts higher than 102MPN of E. coli per 100mL. The results of this study demonstrate that most conventionally grown lettuce samples show good sanitary conditions in production, and that lettuce contamination is not related to contamination found in irrigation water samples. The results also showed that t

Os objetivos deste estudo foram avaliar a contaminação por coliformes totais, coliformes a 45 C, Escherichia coli e Salmonella spp. em alfaces crespas (Lactuca sativa) produzidas na região de Londrina, PR, e a contaminação por E. coli das amostras da água de irrigação empregadas nas propriedades estudadas. Quatro propriedades rurais foram avaliadas, das quais três produziam alfaces pelo sistema convencional e uma pelo sistema orgânico. Avaliação das práticas de produção dessas propriedades também foi realizada. Um total de 111 amostras foi coletado, sendo 71 amostras de produção convencional e 40 amostras de produção orgânica. Oito amostras de água de irrigação foram coletadas para análise. Contagens de coliformes a 45 C acima do tolerado pela legislação brasileira foram observadas em 2,8 % (2/71) das alfaces convencionais analisadas, e Salmonella spp. foi isolada em 1,4 % (1/71) destas amostras. Quanto às amostras orgânicas, 12,5 % (5/40) apresentaram contagens de coliformes a 45 C acima do limite preconizado e Salmonella spp. não foi isolada nessas amostras. As amostras de água de irrigação de três propriedades rurais apresentaram resultados insatisfatórios com contagens superiores a 102MPN de E. coli por 100 mL. Os resultados obtidos neste estudo mostraram que a maioria das amostras de alfaces convencionais analisadas apresentou boas condições higiênico-sanitárias e uma n

RESUMO

O método direto de detecção e contagem de Campylobacter spp. em carne de frango é de fácil execução, porém os volumes de 100 μL e de 400 μL, preconizados em algumas metodologias, muitas vezes impossibilitam a contagem de colônias pela ocorrência de crescimento confluente ou de microbiota contaminante. O objetivo do presente estudo foi de avaliar os diferentes volumes de enxaguadura de carne de frango com a finalidade de minimizar a interferência da microbiota contaminante, sem comprometer a sensibilidade do método. Os volumes de enxaguadura de 5, 10,50, 100 e 400 μL foram testados utilizando-se os meios seletivo diferenciais ágar carvão cefoperazona desoxicolato modificado (mCCDA) e ágar Bolton modificado. A presença de Campylobacter spp. foi confirmada por métodos fenotípicos e por PCR. No entanto, a estratégia de utilização de volumes menores do que 100 μL de enxaguadura não melhoraram o isolamento e a contagem de colônias de Campylobacter, porque houve diminuição da sensibilidade do ensaio. A provável solução para minimizar a interferência da microbiota contaminante seria desenvolver novos meios seletivos ou incorporá-los aos antimicrobianos já existentes...

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RESUMO

The direct method for detecting and enumerating Campylobacter spp. in chicken meat is easy to perform, but the volumes of 100μL and 400μL, as recommended in some methodologies, are often unable to achieve the colonies counts due to the occurrence of confluent growth or microbial contaminants. This study aimed at evaluating the different volumes for rinsing chicken meats in order to minimize the interference of microbial contaminants, without compromising the sensitivity of direct methodology. Rinse volumes of 5, 10, 50, 100 and 400μL were tested using the modified charcoal cefoperazone deoxycholate agar (mCCDA) and modified Bolton agar. The presence of Campylobacter was confirmed by phenotypic methods and PCR assay. However, the strategy of using less than 100 µL of rinse volumes did not improve the isolation and enumeration of Campylobacter colonies, because it reduces the sensitivity of the assay. Thus, a possible solution to minimize the interference of microbial contaminants would be in developing new selective media or incorporate them into other existing antimicrobial drugs.(AU)

O método direto de detecção e contagem de Campylobacter spp. em carne de frango é de fácil execução, porém os volumes de 100 µL e de 400 µL, preconizados em algumas metodologias, muitas vezes impossibilitam a contagem de colônias pela ocorrência de crescimento confluente ou de microbiota contaminante. O objetivo do presente estudo foi de avaliar os diferentes volumes de enxaguadura de carne de frango com a finalidade de minimizar a interferência da microbiota contaminante, sem comprometer a sensibilidade do método. Os volumes de enxaguadura de 5, 10, 50, 100 e 400 µL foram testados utilizando-se os meios seletivo diferenciais ágar carvão cefoperazona desoxicolato modificado (mCCDA) e ágar Bolton modificado. A presença de Campylobacter spp. foi confirmada por métodos fenotípicos e por PCR. No entanto, a estratégia de utilização de volumes menores do que 100 µL de enxaguadura não melhoraram o isolamento e a contagem de colônias de Campylobacter, porque houve diminuição da sensibilidade do ensaio. A provável solução para minimizar a interferência da microbiota contaminante seria desenvolver novos meios seletivos ou incorporá-los aos antimicrobianos já existentes.(AU)

Assuntos

RESUMO

Salmonellosis is a common and widespread zoonotic disease of humans and a frequent cause of foodborne disease. Treatment of severe and systemic salmonellosis is usually done with fluoroquinolones. In this review resistance mechanisms of Salmonella to quinolones are discussed.  Single point mutations in the quinolone resistant determining region (QRDR) of the gyrA gene may be sufficient to generate high levels of resistance to non-fluorated quinolones and also may decrease the fluoroquinolones susceptibility. Other resistance mechanisms that should be considered are mutations in parC gene, the possibility of acquiring resistance through plasmidial transference and hyper-expression of efflux pumps. Fluoroquinolones resistance is still relatively uncommon in Salmonella compared to other species belonging to the Enterobacteriaceae family. However, the more careful use of fluoroquinolones in veterinary and human medicine is essential to decrease the selective pressure which can avoid the emergence and spread of resistant clones and consequently maintain the clinical efficacy of this group of antibiotics.

A salmonelose é uma zoonose de importância mundial e uma das mais freqûentes doenças de origem alimentar. As fluoroquinolonas são a principal opção para o tratamento de salmoneloses graves ou sistêmicas. Esta revisão de literatura teve como objetivo apresentar os principais mecanismos envolvidos na resistência de Salmonella spp a estes antimicrobianos. Mutações de ponto na Região Determinante de Resistência à Quinolona (QRDR) do gene gyrA podem gerar altos níveis de resistência a quinolonas não-fluoradas, além de reduzir a suscetibilidade as fluoroquinolonas. Outros mecanismos de resistência que também precisam ser considerados são as mutações no gene parC, a possibilidade do envolvimento de plasmídios de resistência e o sistema de efluxo ativo. A resistência às fluoroquinolonas ainda é incomum em Salmonella spp., quando comparada a outros gêneros da família Enterobacteriaceae. No entanto, o uso criterioso de fluoroquinolonas na medicina humana e veterinária é essencial para reduzir a pressão seletiva e evitar a emergência e disseminação de clones resistentes, mantendo o espectro de ação e a eficácia clínica desta classe terapêutica.

RESUMO

This study aimed to identify the risks of staphylococcal food poisoning due to the consumption of raw milk. Fifty-one farms in Londrina (PR) and 50 in Pelotas (RS) were analyzed, to determine the population of coagulase-positive staphylococci (UFC/ mL), as well as to verify the ability of producing Staphylococcal Enterotoxin A (SEA) by immunodifusion (OSP), the presence of the gene for the production of SEA (PCR) in the cultures, and the research of enterotoxin (SEA to SEE) in milk samples using ELISA commercial kit. Considering the 101 farms analyzed, 19 (18.8%) presented coagulase-positive staphylococci count above 105 UFC/mL. For the evaluation of the enterotoxigenic ability (SEA) by the OSP technique, six cultures coagulase-positive (5.5%) were positive to the test and identified as S. aureus. From the coagualse-negative sample, one (5.5%) was OSP positive. For the evaluation of the presence of the gene for EEA synthesis, 51 cultures of staphylococci were tested. From this total, 14 (27.45%) presented the gene, and from that, only 5 (9.81%) cultures were capable of expressing it in the technique of the OSP. The morphologic characteristic of the evaluated cultures that had enterotoxigenic capacity, from the 14 (33,3%) cultures that presented the gene for EEA production, 05 (11.9%) were characterized as typical cultures of S.aureus in Baird Parker agar. All the 12 milk samples studied for the presence of EEA to EEE in milk were negative. Thus, it can be concluded that there is extensive contamination of raw milk for staphylococci coagulase, however, most of the isolated strains were not enterotoxigenic or did not express such a characteristic. Only 9.81% of the tested colonies expressed the gene and effectively produced SEA. None of the samples had sufficient counts to produce detectable amounts of SEA. The milk samples did not present risk to cause staphylococcal food poisoning if consumed in natura until the collection moment.(AU)

Este trabalho teve como objetivo identificar os riscos de intoxicação estafilocócica pelo consumo de leite cru. Foram analisadas amostras de 51 propriedades em Londrina (PR) e 50 em Pelotas (RS), com o objetivo de determinar a população de estafilococos coagulase-positivos (UFC/mL) em leite, verificar a capacidade de produzir enterotoxina estafilocócica A (EEA) através do teste de imunodifusão (OSP), a presença do gene para produção EEA (PCR) nas culturas isoladas e a pesquisa de enterotoxina (EEA a EEE) nas amostras de leite através do kit comercial ELISA. Das 101 amostras, 19 (18,8%) apresentaram contagens de estafilococos coagulase positivos (ECP) acima de 105 UFC/mL. Quanto à capacidade enterotoxigênica das culturas isoladas (OSP), seis culturas produtoras de coagulase (5,5%) foram positivas no teste e identificadas como S. aureus. Das amostras coagulase negativas, 1 foi positiva no OSP (5,5%). Quanto à presença do gene para síntese de EEA, das 51 culturas de estafilococos testadas, 14 (27,45%) apresentaram o gene, sendo que, destas, somente 5 (9,81%) culturas foram capazes de expressá-lo na técnica do OSP. Quanto à característica morfológica das culturas avaliadas para a capacidade enterotoxigênica, 14 (33,3%) culturas que apresentaram o gene para produção de EEA foram caracterizadas como culturas típicas de S. aureus no ágar Baird Parker. Das amostras (12) utilizadas para pesquisa de EEA a EEE no leite, em nenhuma se detectou a presença de EE. Pode-se concluir que há extensa contaminação do leite cru por estafilococos coagulase-positivos, embora a maioria das colônias isoladas não fosse enterotoxigênica ou não expressasse esta característica. Somente 9,81% das colônias testadas expressaram o gene e efetivamente produziram EEA. Nenhuma das amostras apresentou enterotoxina detectável no leite. As amostras de leite testadas não apresentaram risco de causar intoxicação estafilocócica (EEA) se consumidas in natura até o momento da coleta.(AU)

Assuntos

RESUMO

No Paraná, são poucas as informações sobre a prevalência dos sorovares e fagotipos de Salmonella envolvidos em surtos. Este trabalho foi realizado com o objetivo de conhecer o perfil epidemiológico dos surtos de salmonelose notificados no Estado do Paraná entre janeiro de 1999 e dezembro de 2008. Neste período ocorreram 286 surtos nos quais 5.641 pessoas foram expostas, 2.027 (35,9%) manifestaram sintomas da doença e 881 (16,3%) foram hospitalizadas. Cinquenta e dois municípios do Paraná (13,0%) notificaram surtos de salmonelose. Alimentos à base de ovos, carnes e derivados e produtos classificados como alimentos variados foram, respectivamente, associados a 45,0; 34,8 e 20,2% dos surtos. O sorovar prevalente foi Enteritidis, encontrado em 87,8% das cepas isoladas de pacientes e em 80,6% das cepas provenientes dos alimentos envolvidos nos surtos. Salmonella Enteritidis PT4 foi o fagotipo predominante, porém foi observada maior prevalência de PT9 a partir de 2003. Do total de surtos analisados, 49,7% estiveram associados a reuniões familiares. Esse fato sugere que as ações da Vigilância Sanitária devem assumir um caráter educativo, tanto para trabalhadores de estabelecimentos comerciais quanto para manipuladores domésticos.

Epidemiological data of foodborne diseases in Brazil are scarce. In Paraná State, there is little information on the prevalence of Salmonella serovars and fagotypes involved in outbreaks. The aim of this study was to evaluate epidemiological data of salmonellosis outbreaks notified in Paraná State between January 1999 and December 2008. During the study period, 286 Salmonella outbreaks occurred and a total of 5,641 people were exposed, 2,027 (35.9%) became ill, and 881 (16.3%) were hospitalized. Fifty-two cities (13.0%) in Paraná notified Salmonella outbreaks. Eggs and egg products, meat and meat products and other foods were, respectively, associated with 45.0, 34.8 and 20.2% of the notified outbreaks. Serovar Enteritidis was prevalent and identified in 87.8% of the strains isolated from patients and in 80.6% of the strains isolated from food involved in outbreaks. Salmonella Enteritidis PT4 was the prevalent phagotype. However, a prevalence of PT9 occurred after 2003. Of the total number of outbreaks analyzed, 49.7% occurred in residences. This result indicates that educational actions of the State Food Safety and Inspection Service should be for both commercial and domestic food handlers.

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This study aimed to identify the risks of staphylococcal food poisoning due to the consumption of raw milk. Fifty-one farms in Londrina (PR) and 50 in Pelotas (RS) were analyzed, to determine the population of coagulase-positive staphylococci (UFC/ mL), as well as to verify the ability of producing Staphylococcal Enterotoxin A (SEA) by immunodifusion (OSP), the presence of the gene for the production of SEA (PCR) in the cultures, and the research of enterotoxin (SEA to SEE) in milk samples using ELISA commercial kit. Considering the 101 farms analyzed, 19 (18.8%) presented coagulase-positive staphylococci count above 105 UFC/mL. For the evaluation of the enterotoxigenic ability (SEA) by the OSP technique, six cultures coagulase-positive (5.5%) were positive to the test and identified as S. aureus. From the coagualse-negative sample, one (5.5%) was OSP positive. For the evaluation of the presence of the gene for EEA synthesis, 51 cultures of staphylococci were tested. From this total, 14 (27.45%) presented the gene, and from that, only 5 (9.81%) cultures were capable of expressing it in the technique of the OSP. The morphologic characteristic of the evaluated cultures that had enterotoxigenic capacity, from the 14 (33,3%) cultures that presented the gene for EEA production, 05 (11.9%) were characterized as typical cultures of S.aureus in Baird Parker agar. All the 12 milk samples studied for the presence of EEA to EEE in milk were negative. Thus, it can be concluded that there is extensive contamination of raw milk for staphylococci coagulase, however, most of the isolated strains were not enterotoxigenic or did not express such a characteristic. Only 9.81% of the tested colonies expressed the gene and effectively produced SEA. None of the samples had sufficient counts to produce detectable amounts of SEA. The milk samples did not present risk to cause staphylococcal food poisoning if consumed in natura until the collection moment.

Este trabalho teve como objetivo identificar os riscos de intoxicação estafilocócica pelo consumo de leite cru. Foram analisadas amostras de 51 propriedades em Londrina (PR) e 50 em Pelotas (RS), com o objetivo de determinar a população de estafilococos coagulase-positivos (UFC/mL) em leite, verificar a capacidade de produzir enterotoxina estafilocócica A (EEA) através do teste de imunodifusão (OSP), a presença do gene para produção EEA (PCR) nas culturas isoladas e a pesquisa de enterotoxina (EEA a EEE) nas amostras de leite através do kit comercial ELISA. Das 101 amostras, 19 (18,8%) apresentaram contagens de estafilococos coagulase positivos (ECP) acima de 105 UFC/mL. Quanto à capacidade enterotoxigênica das culturas isoladas (OSP), seis culturas produtoras de coagulase (5,5%) foram positivas no teste e identificadas como S. aureus. Das amostras coagulase negativas, 1 foi positiva no OSP (5,5%). Quanto à presença do gene para síntese de EEA, das 51 culturas de estafilococos testadas, 14 (27,45%) apresentaram o gene, sendo que, destas, somente 5 (9,81%) culturas foram capazes de expressá-lo na técnica do OSP. Quanto à característica morfológica das culturas avaliadas para a capacidade enterotoxigênica, 14 (33,3%) culturas que apresentaram o gene para produção de EEA foram caracterizadas como culturas típicas de S. aureus no ágar Baird Parker. Das amostras (12) utilizadas para pesquisa de EEA a EEE no leite, em nenhuma se detectou a presença de EE. Pode-se concluir que há extensa contaminação do leite cru por estafilococos coagulase-positivos, embora a maioria das colônias isoladas não fosse enterotoxigênica ou não expressasse esta característica. Somente 9,81% das colônias testadas expressaram o gene e efetivamente produziram EEA. Nenhuma das amostras apresentou enterotoxina detectável no leite. As amostras de leite testadas não apresentaram risco de causar intoxicação estafilocócica (EEA) se consumidas in natura até o momento da coleta.

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Salmonellosis is a common and widespread zoonotic disease of humans and a frequent cause of foodborne disease. Treatment of severe and systemic salmonellosis is usually done with fluoroquinolones. In this review resistance mechanisms of Salmonella to quinolones are discussed.  Single point mutations in the quinolone resistant determining region (QRDR) of the gyrA gene may be sufficient to generate high levels of resistance to non-fluorated quinolones and also may decrease the fluoroquinolones susceptibility. Other resistance mechanisms that should be considered are mutations in parC gene, the possibility of acquiring resistance through plasmidial transference and hyper-expression of efflux pumps. Fluoroquinolones resistance is still relatively uncommon in Salmonella compared to other species belonging to the Enterobacteriaceae family. However, the more careful use of fluoroquinolones in veterinary and human medicine is essential to decrease the selective pressure which can avoid the emergence and spread of resistant clones and consequently maintain the clinical efficacy of this group of antibiotics.

A salmonelose é uma zoonose de importância mundial e uma das mais freqüentes doenças de origem alimentar. As fluoroquinolonas são a principal opção para o tratamento de salmoneloses graves ou sistêmicas. Esta revisão de literatura teve como objetivo apresentar os principais mecanismos envolvidos na resistência de Salmonella spp a estes antimicrobianos. Mutações de ponto na Região Determinante de Resistência à Quinolona (QRDR) do gene gyrA podem gerar altos níveis de resistência a quinolonas não-fluoradas, além de reduzir a suscetibilidade as fluoroquinolonas. Outros mecanismos de resistência que também precisam ser considerados são as mutações no gene parC, a possibilidade do envolvimento de plasmídios de resistência e o sistema de efluxo ativo. A resistência às fluoroquinolonas ainda é incomum em Salmonella spp., quando comparada a outros gêneros da família Enterobacteriaceae. No entanto, o uso criterioso de fluoroquinolonas na medicina humana e veterinária é essencial para reduzir a pressão seletiva e evitar a emergência e disseminação de clones resistentes, mantendo o espectro de ação e a eficácia clínica desta classe terapêutica.

Assuntos

RESUMO

Os biofilmes são estruturas altamente organizadas, nas quais microrganismos crescem e sobrevivem a ambientes hostis. São definidos como complexos ecossistemas microbianos, embebidos em uma matriz de substâncias poliméricas extracelulares (EPS), aderidos a uma superfície. Se microrganismos não forem completamente removidos das superfícies de contato durante a desinfecção, biofilmes podem ser formados e se tornarem uma fonte constante de contaminação de alimentos. Os microrganismos aderidos são mais resistentes aos sanitizantes que as células livres. Porém, a eficácia de um sanitizante depende do tipo de microrganismo, da natureza do sanitizante e da superfície de adesão. A compreensão de como os biofilmes podem ser formados é importante para a manutenção da qualidade e segurança dos alimentos. O objetivo deste trabalho foi fazer uma revisão sobre a formação de biofilme e a sua resistência aos sanitizantes.(AU)

Biofilms are structures highly organized in which microorganisms grow and therefore can survive to hostile environments. They are defined as a complex community of microorganisms usually encased in anextracellular matrix of polymeric substances (EP5) attached to a surface. Biofilms can be formed and be constantsources of product contamination if poor cleaning and disinfection practices do not remove microorganisms from food processing surfaces. The cells embedded in biofilm are more resistant to sanitizers than free cells. However, the sanitizers' effectiveness depends 017 the type of microorganism, the type of sanitizer and the surface attachment. The understanding of biofilms formation is important for food quality and safety. The aim of this study was to reviewbiofilms formation and its resistance to sanitizers. (AU)

Assuntos

RESUMO

Os biofilmes são estruturas altamente organizadas, nas quais microrganismos crescem e sobrevivem a ambientes hostis. São definidos como complexos ecossistemas microbianos, embebidos em uma matriz de substâncias poliméricas extracelulares (EPS), aderidos a uma superfície. Se microrganismos não forem completamente removidos das superfícies de contato durante a desinfecção, biofilmes podem ser formados e se tornarem uma fonte constante de contaminação de alimentos. Os microrganismos aderidos são mais resistentes aos sanitizantes que as células livres. Porém, a eficácia de um sanitizante depende do tipo de microrganismo, da natureza do sanitizante e da superfície de adesão. A compreensão de como os biofilmes podem ser formados é importante para a manutenção da qualidade e segurança dos alimentos. O objetivo deste trabalho foi fazer uma revisão sobre a formação de biofilme e a sua resistência aos sanitizantes.

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O objetivo deste trabalho foi avaliar o padrão higiênico-sanitário de alimentos comercializados na Regiãode Londrina cadastrados no Ministério da Saúde, porém, dispensados de registro, conforme a RDC nº.23 da Agência Nacional de Vigilância Sanitária (ANVISA). Os alimentos foram escolhidos de acordo comas sugestões da Vigilância Sanitária de Londrina, PR, que levou em consideração o risco epidemiológico.Os padrões microbiológicos foram avaliados conforme a RDC nº. 12 da ANVISA. Contagens de E. colie S. aureus acima do permitido foram observadas respectivamente em 11 (18,3%) e 13 (21,6%) dos 60alimentos analisados. Os demais resultados microbiológicos estavam dentro do estabelecido pela RDCnº. 12. Ficou clara a necessidade de maior fiscalização do processamento e armazenagem de váriosalimentos analisados, em especial, sorvetes, massas recheadas, pães de queijo, lasanha, doces comcreme e salgados recheados. Esses resultados serão encaminhados às Vigilâncias Regional e Municipalalertando sobre a real potencialidade desses alimentos veicularem doenças e na intenção de abrir umadiscussão sobre a liberação ou não de registro desses alimentos junto ao Ministério da Saúde. Alémdisso, os resultados obtidos confirmam que a análise microbiológica do produto final é um instrumentoessencial de validação e verificação das Boas Práticas de Fabricação (BPF) e da Análise de Perigos ePontos Críticos de Controle (APPCC).

The aim of this study was to analyze the sanitary quality of foods commercialized in Londrina, Paraná that are exempt of Brazilian Health Ministry registration procedures, according to Resolution n°. 23 from the National Sanitary Administration Agency (ANVISA). The food categories analyzed were chosenaccording to ANVISA, Londrina, PR which took the epidemiological risk in account. Microbiologicalstandards were evaluated according to ANVISA Resolution n°. 12. Escherichia coli and coagulase positive Staphylococcus counts were above standards in 11 (18.3%) and 13 (21.6%) of food samples analyzed, respectively. The others microbiological results were in conformity to ANVISA Resolution n°.12. These results indicate inadequate sanitary conditions during food processing especially for ice-cream, stuffed pasta, "pães de queijo", lasanha, cream felled pastries, and "salgado recheado". The results could help the State and Local Sanitary Administration Agencies to evaluate the potentiality of these foods cause food-borne diseases and the adequacy of their liberation from Brazilian Health Ministry registration procedures. The results also show that microbiological analysis of the final product is a valuable validation and verification procedure for the GMP and HACCP system.

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RESUMO

An indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay (ic-ELISA) for ochratoxin A (OTA) detection in green, roasted and instant coffees was developed using anti-OTA monoclonal antibody. Immunological reagents prepared were OTA-BSA (4.76 mg/mL), anti-OTA.7 MAb (2x10³-fold dilution) and HRP-anti IgG (10³-fold dilution). The detection limit was 3.73 ng OTA/g and correlation coefficients (r) between this immunoassay and high performance liquid chromatography were 0.98 for green coffee, 0.98 for roasted and 0.86 for instant. OTA levels detected by ic-ELISA were higher than by HPLC, with ELISA/HPLC ratio of 0.66 - 1.46 (green coffee), 0.96 - 1.11 (roasted) and 0.93 - 1.82 (instant). ELISA recoveries for OTA added to coffee (5 - 70 ng/g) were 81.53 percent for green coffee, 46.73 percent for roasted and 64.35 percent for instant, while recoveries by HPLC were 80.54 percent, 45.91 percent and 55.15 percent, respectively. Matrices interferences were minimized by samples dilution before carrying out the ELISA assay. The results indicate that MAb-based ic-ELISA could be a simple, sensitive and specific screening tool for OTA detection, contributing to quality and safety of coffee products.

ELISA competitivo indireto (ic-ELISA) baseado em anticorpos monoclonais foi desenvolvido para a detecção de ocratoxina A (OTA) em café verde, torrado e instantâneo. Os reagentes imunológicos necessários à reação consistiram de OTA-BSA (4,76 mg/mL), anti-OTA.7 MAb (diluído 2x10³) e anti IgG-HRP (diluído 10³), apresentando limite de detecção de 3,73 ng OTA/g. Os coeficientes de correlação (r) entre o imunoensaio e cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) foram de 0,98 (café verde), 0,98 (torrado) e 0,86 (instantâneo). Ic-ELISA detectou valores superestimados de OTA em relação a CLAE, com valor ELISA/CLAE variando de 0,66 - 1,46 (café verde), 0,96 - 1,11 (torrado) e 0,93 - 1,82 (instantâneo). As recuperações médias de OTA adicionada em café (5 - 70 ng/g) foram de 81,53 por cento (café verde), 46,73 por cento (torrado) e 64,35 por cento (instantâneo) por ELISA, em relação a 80,54 por cento, 45,91 por cento e 55,15 por cento por CLAE, respectivamente. A interferência de matriz no imunoensaio foi minimizada pela diluição das amostras previamente à análise por ELISA. O ic-ELISA desenvolvido pode ser considerado uma técnica alternativa simples, sensível e específica para análise de OTA, contribuindo para a qualidade e segurança de produtos de café.

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A salmonelose é uma das doenças transmitidas por alimentos de maior prevalência, no Brasil e no mundo, apresentando um aumento acentuado e contínuo no número de casos relatados desde a década de 70. Os principais alimentos incriminados na veiculação de samonelose são os ovos e seus derivados, sendo que a manipulação desempenha um papel importante na disseminação da bactéria, por propiciar contaminação cruzada no ambientede preparo de alimentos. No Estado do Paraná, o ovo aparece como o alimento incriminado na maior parte dos surtos de salmonelose desde 1993. Além disso, o emprego de antibióticos na produção animal, com objetivos profiláticos, terapêuticos e ou de promoção de crescimento, tem contribuído para a emergência de cepas de Salmonella resistentes a estes fármacos, o que pode dificultar o tratamento de infecções extra-intestinais causadas pela bactéria. Desta forma, este trabalho teve por objetivo revisar a contaminação de ovos e derivados por Salmonella spp. e as implicações da resistência antimicrobiana desta bactéria para a saúde pública.

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Salada de batata com maionese caseira preparada com ovos crus é freqüentemente manipulada de maneira inadequada, podendo ser facilmente cntaminada com microrganismos. Esse alimento tem sido associado a casos e surtos de intoxicação estafilocócica e salmonelose em Londrina, Paraná. Porém, não existem dados sobre a contaminação, por Staphylococcus aureus e Salmonella spp., de maioneses de batata comercializadas em restaurantes dessa cidade. Baseado nestes fatos, o objetivo foi avaliar a presença nesse alimento de S. aureus enterotoxigênico e Salmonella spp. Foram coletadas 50 amostras de "maionese de batata" em restaurantes situados na cidade de Londrina, em sua maioria "self-service". As coletas foram orientadas pela Vigilância, levando-se em consideração o risco epidemiológico. As técnicas de preparo das amostras, contagem de Staphylococcus aureus e pesquisa de Salmonella spp. seguiram o preconizado pelo Food and Drug Administration (FDA) Bacteriological Analytical Manual. Embora não tenha sido isolada Salmonella spp. das amostras analisadas ressalta-se a importância desse alimento como veículo de transmissão dessa bactéria, já que vários autores indicaram esse alimento como o responsável por salmonelose humana.

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Avaliou-se a aplicaçäo da cromatografia de afinidade com íon Cu2 para minimizar a interferência de componentes alimentares na detecçäo de enterotoxinas estafilocócicas mediante imunoensaio, baseado em aglutinaçäo de látex 9RDPLA). Os ensaios preliminares com "chantilly" contaminado com 25 ng de enterotoxina estafilocócica A (EEA) indicaram que a cromatografia de afinidade com íon Cu2 eliminou interferentes que causavam reaçäo falso-positiva em RPLA. a eficiência do procedimento de limpeza foi testada em 15 extratos alimentares (de surtos e/ou com alta contagem estafilocócica), compreendendo vários tipos de alimentos comumente consumida no Brasil. Onze extratos alimentares apresentaram um pico único de eluiçäo com perfis semelhantes e as fraçöes testadas por RPLA demonstraram EEA (4 alimentos), EEB (1), EEA + EEB (3), EEA + EED (2) e EEA + EEB + EED (1). Os problemas de reaçöes inespecíficas com "kit" RPLA em 2 extratos de bolos recheados foram eliminados, indicando que a adoçäo desta operaçäo evitaria a reaçäo falso-positiva

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Staphylococcus aureus é um patógeno freqüentemente envolvido em surtos de intoxicaçäo alimentar. A detecçäo rápida e eficaz da toxina é fundamental para o diagnóstico e tratamento da doença. Com o objetivo de produzir enterotoxina estafilocócica A (EEA), destinada à produçäo de reagentes imunológicos, testaram-se 21 formulaçöes baseadas em hidrolisado de caseína (peptona, triptona e casitona) adicionadas de tiamina, niacina, Mg²+, K+ e/ou extrato de levedura. Os meios inoculados de S. aureus linhagem 722 foram incubados a 37ºC (220 rpm, 24 horas) e os sobrenadantes (10.000 g. 15 min a 4ºC) testados quanto à produçäo de EEA (RPLA, aglutinaçäo de látex) e exoproteínas totais (método de Bradford). A melhor produçäo de toxina (92,6 µg/mL de EEA) foi obtida no meio com triptona adicionada de tiamina e niacina, seguida de triptona adicionada de extrato de levedura e K+ (87 µg/mL). A combinaçäo tiamina + niacina + Mg²+ reduziu a produçäo de EEA, em relaçäo ao meio básico triptona ou peptona. O extrato de levedura com triptona aumentou a produçäo de EEA (59,6 µg/mL), porém em menor grau do que a combinaçäo niacina + tiamina (92,6 µg/mL). Considerando o seu menor custo em relaçäo à tiamina e à niacina, elegeu-se a triptona de caseína 3 por cento acrescida de 1 por cento de extrato de levedura para a produçäo de EEA, visando à purificaçäo. O trabalho atingiu o objetivo proposto e pode contribuir para incrementar a difusäo de método imunológico, com a possibilidade de atender ao controle de qualidade na condiçäo nacional.

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Staphylococcal intoxication, caused by enterotoxins produced by species of Staphylococcus, is a constant problem in the Public Health, in consequence of the frequency of cases and thermostability of the toxin. Considering that this microorganism is one of the most common agents isolated from human and animal flora, the review relates briefly about structure, physicochemical and biological properties of staphylococcal enterotoxins and factors involved with their production in foods.  

Intoxicação estafilocócica, causada por enterotoxinas produzidas por espécies de Staphylococcus, tem sido um problema constante em Saúde Pública, em vista da freqûência dos casos e da termoestabilidade das toxinas. Considerando que este microrganismo é um dos agentes mais frequentes na microbiota humana e animal, apresenta-se uma breve revisão sobre as características estruturais, propriedades físico-químicas e biológicas das enterotoxinas estafilocócicas, assim como fatores que afetam a sua produção em alimentos.  

RESUMO

Staphylococcal intoxication, caused by enterotoxins produced by species of Staphylococcus, is a constant problem in the Public Health, in consequence of the frequency of cases and thermostability of the toxin. Considering that this microorganism is one of the most common agents isolated from human and animal flora, the review relates briefly about structure, physicochemical and biological properties of staphylococcal enterotoxins and factors involved with their production in foods.

Intoxicação estafilocócica, causada por enterotoxinas produzidas por espécies de Staphylococcus, tem sido um problema constante em Saúde Pública, em vista da freqüência dos casos e da termoestabilidade das toxinas. Considerando que este microrganismo é um dos agentes mais frequentes na microbiota humana e animal, apresenta-se uma breve revisão sobre as características estruturais, propriedades físico-químicas e biológicas das enterotoxinas estafilocócicas, assim como fatores que afetam a sua produção em alimentos.