RESUMO

A biologia do Toxoplasma gondii demonstra que o gato é o hospedeiro completo, responsável pela disseminaçäo do parasito. Assim, dois gatos domésticos foram imunizados com cada uma das amostras, VPS (humano), LIV-IV e LIV-V (suíno), CPL (caprino) e CN (felino) de T. gondii. Foram utilizados taquizoítas vivos em inóculos endovenosos de 2x10 elevado a 6 (1§ inóculo) e 4x10 elevado a 7 (2§ inóculo - 35 dias após), exceto a amostra VPS, onde um gato morreu no 10§ dia com sinais clínicos agudos da doença, nas outras amostras, nenhum sinal clínico foi constatado durante os 6 meses de observaçäo. O nível de anticorpos na imunizaçäo foi acompanhado através da reaçäo de imunofluorescência indireta (IFI) com conjugado anti-IgG de felino. Os títulos de anticorpos obtidos no 20§ dia variaram de 1:1.024 a 1:4.096 e de 1:1.024 a 1:8.000 no 40§ dia. Somente a amostra VPS expressou títulos de 1:16.000 no 30§ dia da imunizaçäo. Títulos homólogos e heterólogos foram equivalentes sem nenhuma diferença entre as amostras. Quando soros imunes foram adsorvidos com taquisoítas vivos de cada amostra, a reduçäo nos títulos de anticorpos foi demonstrada em ambos homólogos e heterólogos. Esses resultados sugerem que, embora diferente em virulência para gatos, a superfície antigênica é comum entre as amostras do T. gondii, com base no nível de anticorpo demonstrado pela IFI. Esses resultados também demonstram que, aparentemente, näo há correlaçäo entre virulência e as características sorológicas das amostras estudadas no T. gondii. Entretanto, a importância do teste IFI em diagnóstico laboratorial é reforçada.

Assuntos

RESUMO

The biology of Toxoplasma gondii demonstrate that cats are the complete host responsable for the dissemination of this parasites. Two domestic cats were immunised with Toxoplasma gondii strains VPS (human), LIV-IV and LIV-V (porcine), CPL (caprine) and CN (feline). Live tachyzoites were utilized in intravenous inoculation of 2x10(7) (first inoculum) and 4x10(7) (second inoculum - 35 days later), except for strain VPS, where one cat died 10 days after the first inoculation and another showed symptoms of acute toxoplasmosis. In all other strains, no clinical signs were detected during 6 months of observation. The antibody response after immunization was monitored by indirect immunofluorescence (IF) test by the use of anti-cat IgG conjugate. The antibody titers obtained at the 20th day varied from 1:1,024 to 1:4,096 and from 1:1,024 to 1:8,000 at the 40th day. Only the VPS strain attained titers of 1:16,000 at the 30th day of immunization. Homologous and heterologos titers were equivalem without any difference among the strain. When the immune sera were adsorbed with live tachyzoites, a reduction in the antibody titers was demonstrated both in homologous and heterologous levels. These results suggest that although dijferences in virulence for cats are evident among the strains. The surface antigens are commom among the T. gondii strains on the basis of IF antibody level. The results also demonstrated that apparently there is no correlation between virulence and serological characteristics of the studied strains of Toxoplasma gondii. However the importance of the IF test in the laboratorial diagnosis of Toxoplasmosis is reinforced.

A biologia do Toxoplasma gondii demonstra que o gato é o hospedeiro completo, responsável pela disseminação do parasito. Assim, dois gatos domésticos foram imunizados com cada uma das amostras, VPS (humano), LIV-IV e LIV-V (suíno), CPL (caprino) e CN (felino) de T. gondii. Foram utilizados taquizoítas vivos em inóculos endovenosos de 2x10(6) (1° inóculo} e 4x10(7) (2° inóculo - 35 dias após), exceto a amostra VPS, onde 1 gato morreu no 10° dia com sinais clínicos agudos da doença, nas outras amostras, nenhum sinal clínico foi constatado durante os 6 meses de observação. O nível de anticorpos na imunização foi acompanhado através da reação de imunofluorescência indireta (IFI) com conjugado anti-IgG de felino. Os títulos de anticorpos obtidos no 20° dia variaram de 1:1.024 a 1:4.096 e de 1:1.024 a 1:8.000 no 40° dia. Somente a amostra VPS expressou títulos de 1:16.000 no 30° dia da imunização. Títulos homólogos e heterólogos foram equivalentes sem nenhuma diferença entre as amostras. Quando soros imunes foram adsorvidos com taquizoítas vivos de cada amostra, a redução nos títulos de anticorpos foi demonstrada em ambos homólogos e heterólogos. Esses resultados sugerem que, embora diferente em virulência para gatos, a superfície antigênica é comum entre as amostras do T. gondii, com base no nível de anticorpo demonstrado pela IFI. Esses resultados também demonstram que, aparentemente, não há correlação entre virulência e as características sorológicas das amostras estudadas no T. gondii. Entretanto, a importância do teste IFI em diagnóstico laboratorial é reforçada.

RESUMO

Eight Toxoplasma gondii strains were analyzed using ELISA and Western blot techniques, in order to demonstrate possible immunological differences. The analyzed strains were: LIV IV, LIV V and S 11 isolated from swine, RH and VPS from a human being, AS 28 from a wild mouse, HV III from a dog and CN from a cat. With the ELISA assay the eight strains showed similar reactivity with homologous and heterologous sera. The antigenic suspension, consisting of total cellular extract of tachyzoites, was effective in the indirect ELISA assay, with the positive sera reacting strongly and the negative not reacting with the antigens. The Western blot analysis showed that the T. gondii strains have similar antigenic profiles with a few variations. Three bands were observed in all strains: one of about 33 kDa (p33), another of 54 kDa (p54) and a third one of 66 kDa (p66). The HV III strain, isolated from a dog, did not show three antigens (50, 70 and 75 kDa) that were present in the others. However, this difference was not detected by the ELISA assay. Only two antigens (62 kDa of the CN and 67 kDa of the LIV IV) were strain-specific antigens.

Oito amostras de T. gondii - LIV IV, LIV V e S 11 isoladas de suínos, RH e VPS de seres humanos, AS 28 de camundongo, HV III de cão e CN de gato - foram analisadas com o objetivo de verificar a existência de possíveis diferenças na resposta imune quando inoculadas em coelhos. Através da técnica de ELISA, não foram constatadas diferenças entre as oito amostras estudadas. Todas as amostras reagiram de forma semelhante com soros homólogos e heterólogos. A suspensão antigênica, constituída de extrato celular total, mostrou-se eficiente no ELISA teste indireto, já que os soros positivos reagiram fortemente e os soros negativos não apresentaram reação contra os antígenos testados. A análise das amostras, pela técnica de Western blot, revelou que os isolados de T. gondii compartilham vários antígenos com algumas variações. Dentre as bandas reconhecidas no Western blot, três foram comuns a todas as amostras: a p33 (33-37 kDa), p54 (52-55 kDa) e a p66 (66 kDa). A amostra HV III, isolada recentemente de um cão, foi a que mais diferiu no perfil antigênico. Essa amostra não apresentou três antígenos (50, 70 e 75 kDa) presentes nas demais amostras. Apenas dois antígenos, um de 62 kDa da CN e outro de 67 kDa da LIV IV, foram amostra-específicos.

RESUMO

In order to evaluate the virulence and pathogenicity of tachyzoites, eight Toxoplasma gondii strains isolated from different animal species and humans - LIV IV, LIV V e S 11 isolated from swine, RH e VPS from humans, AS 28 from mice, HV III from dog and CN from cat - were inoculated in mice and rabbits. All the strains were strongly virulent for mice. Groups of mice inoculated, intraperitonially, with 10(4) tachyzoites died in an average of 6.0 to 7.8 days, after inoculation. The strains isolated more recently, LIV V and HV III (LD50 of 7 and 15 tachyzoites, respectively) were the most virulent. The RH strain showed the lowest virulence, with LD50 of 3160 tachyzoites. The LIV V strain also seems to be most virulent to rabbits.

Oito amostras de T. gondii - LIV IV, LIV V e S 11 isoladas de suínos, RH e VPS de seres humanos, AS 28 de camundongo, HV III de cão e CN de gato - foram inoculadas em camundongos suíços albinos e em coelhos com o objetivo de avaliar a virulência e a patogenicidade. As oito amostras apresentaram-se altamente virulentas para camundongos, matando todos os animais que receberam inóculo, via intraperitoneal, de 10(4) taquizoítas, entre 6,0 e 7,8 dias, em média, após a inoculação. As amostras isoladas mais recentemente, LIV V e HV III (DL50 de 7 e 15 taquizoítas, respectivamente) foram as mais virulentas. A amostra RH foi a que apresentou a menor virulência, com DL50 de 3.160 taquizoítas. A amostra LIV V também se mostrou mais virulenta para coelhos, porém, como foram inoculados apenas 2 animais, estudos posteriores devem ser realizados para confirmar este achado.

RESUMO

The biology of Toxoplasma gondii demonstrate that cats are the complete host responsable for the dissemination of this parasites. Two domestic cats were immunised with Toxoplasma gondii strains VPS (human), LIV-IV and LIV-V (porcine), CPL (caprine) and CN (feline). Live tachyzoites were utilized in intravenous inoculation of 2x10(7) (first inoculum) and 4x10(7) (second inoculum - 35 days later), except for strain VPS, where one cat died 10 days after the first inoculation and another showed symptoms of acute toxoplasmosis. In all other strains, no clinical signs were detected during 6 months of observation. The antibody response after immunization was monitored by indirect immunofluorescence (IF) test by the use of anti-cat IgG conjugate. The antibody titers obtained at the 20th day varied from 1:1,024 to 1:4,096 and from 1:1,024 to 1:8,000 at the 40th day. Only the VPS strain attained titers of 1:16,000 at the 30th day of immunization. Homologous and heterologos titers were equivalem without any difference among the strain. When the immune sera were adsorbed with live tachyzoites, a reduction in the antibody titers was demonstrated both in homologous and heterologous levels. These results suggest that although dijferences in virulence for cats are evident among the strains. The surface antigens are commom among the T. gondii strains on the basis of IF antibody level. The results also demonstrated that apparently there is no correlation between virulence and serological characteristics of the studied strains of Toxoplasma gondii. However the importance of the IF test in the laboratorial diagnosis of Toxoplasmosis is reinforced.

A biologia do Toxoplasma gondii demonstra que o gato é o hospedeiro completo, responsável pela disseminação do parasito. Assim, dois gatos domésticos foram imunizados com cada uma das amostras, VPS (humano), LIV-IV e LIV-V (suíno), CPL (caprino) e CN (felino) de T. gondii. Foram utilizados taquizoítas vivos em inóculos endovenosos de 2x10(6) (1° inóculo} e 4x10(7) (2° inóculo - 35 dias após), exceto a amostra VPS, onde 1 gato morreu no 10° dia com sinais clínicos agudos da doença, nas outras amostras, nenhum sinal clínico foi constatado durante os 6 meses de observação. O nível de anticorpos na imunização foi acompanhado através da reação de imunofluorescência indireta (IFI) com conjugado anti-IgG de felino. Os títulos de anticorpos obtidos no 20° dia variaram de 1:1.024 a 1:4.096 e de 1:1.024 a 1:8.000 no 40° dia. Somente a amostra VPS expressou títulos de 1:16.000 no 30° dia da imunização. Títulos homólogos e heterólogos foram equivalentes sem nenhuma diferença entre as amostras. Quando soros imunes foram adsorvidos com taquizoítas vivos de cada amostra, a redução nos títulos de anticorpos foi demonstrada em ambos homólogos e heterólogos. Esses resultados sugerem que, embora diferente em virulência para gatos, a superfície antigênica é comum entre as amostras do T. gondii, com base no nível de anticorpo demonstrado pela IFI. Esses resultados também demonstram que, aparentemente, não há correlação entre virulência e as características sorológicas das amostras estudadas no T. gondii. Entretanto, a importância do teste IFI em diagnóstico laboratorial é reforçada.

RESUMO

Were examined by the Indirect Immunofluorescence technique for T. gondii, 561 sera of equine killed in the King Meat slaughterhouse of Apucarana - PR. Equines were from States of: São Paulo (233 - 41,53%), Paraná (131 - 23,35%), Mato Grosso do Sul (120 - 21,39%) e Mato Grosso (77 - 13:73%). Considering titer 1:16 and higher as representative of previous contact with T. gondii. The result showed that 31,55% equine were positive for T. gondi, with serological titles raging from 1:16 to 1:4096. indicating high risk of human infection when the meat of these animals are eaten uncooked or rare because this meat is exported to The European Comunity for human consume.

Foram analisados, através da técnica de Imunofluorescência Indireta para Toxoplasma gondii, 561 soros de eqüinos abatidos no frigorífico King Meat de Apucarana - PR. Os eqüinos eram oriundos de São Paulo (233 - 41,53%), Paraná (131 - 23,35%), Mato Grosso do Sul (120 - 21,39%).© Mato Grosso (77 - 13;73%). Consideraram-se positivos, soros cujo título foram igual ou superior a 1:16. O resultado mostrou que 177 animais (31,55%) foram reagentes para o T gondii, com títulos de anticorpos entre 1:16 e 1:4096, indicando forte risco de infecção humana, quando a carne for ingerida crua ou mal cozida, uma vez que a carne destes animais é destinada ao consumo humano na Comunidade Européia.

RESUMO

Were examined by the Indirect Immunofluorescence technique for T. gondii, 561 sera of equine killed in the King Meat slaughterhouse of Apucarana - PR. Equines were from States of: São Paulo (233 - 41,53%), Paraná (131 - 23,35%), Mato Grosso do Sul (120 - 21,39%) e Mato Grosso (77 - 13:73%). Considering titer 1:16 and higher as representative of previous contact with T. gondii. The result showed that 31,55% equine were positive for T. gondi, with serological titles raging from 1:16 to 1:4096. indicating high risk of human infection when the meat of these animals are eaten uncooked or rare because this meat is exported to The European Comunity for human consume.  

Foram analisados, através da técnica de Imunofluorescência Indireta para Toxoplasma gondii, 561 soros de eqüinos abatidos no frigorífico King Meat de Apucarana - PR. Os eqüinos eram oriundos de São Paulo (233 - 41,53%), Paraná (131 - 23,35%), Mato Grosso do Sul (120 - 21,39%).© Mato Grosso (77 - 13;73%). Consideraram-se positivos, soros cujo título foram igual ou superior a 1:16. O resultado mostrou que 177 animais (31,55%) foram reagentes para o T gondii, com títulos de anticorpos entre 1:16 e 1:4096, indicando forte risco de infecção humana, quando a carne for ingerida crua ou mal cozida, uma vez que a carne destes animais é destinada ao consumo humano na Comunidade Européia.      

RESUMO

A finalidade do presente trabalho foi verificar a resistencia dos cistos de Toxoplasma gondii ao efeito do sal (cloreto de sódio) e dos condimentos (pimenta-do-reino e alho) em linguiças do tipo frescal, elaboradas com carne de suínos experimentalmente infectados. As linguiças estudadas foram tratadas com 1,25,2,00 e 2,50 porcentagem de sal com adiçao de condimentos, e mantidas sob refrigeraçao por períodos de 0,24 e 48 horas, após o que foram as mesmas digeridas artificialmente e o material resultante inoculado em camundongos. Após 42 dias, sacrificaram-se os camundongos sobrevivientes e seus soros foram examinados pela reação de imunofluorecencia indireta (RIFI) para a detecçao de anticorpos anti-T. gondii. Os exames revelaram que, em períodos inferiores a 24 horas, os tratamentos com sal nao eliminam o parasito e que somente após 48 horas a açao do sal, nas concentraçòes de 2,00 e 2,50 porcentagem, meostrou-se eficiente, inviabilizando o parasito. Os resultados deste experimento mostraram, também, que os condimentos nao interferem na viavilidade do T.gondii

Assuntos

RESUMO

With the purpose of studying the epidemiological aspects of natural Toxoplasmosis in swine, 1.131 serum samples were taken from 12 herds from the region of Londrina in the state of Paraná. The samples were submitted to the indirect fluorescence antybody test, resulting in 37,84% of serum-positive. The rate of serum-reagents in each category was: sows 46,2%; boars 45,9%; young sows 36,6%; pigs in the finishing period 31,6% and in the growing period 14,7% (title greater or equal 1:64). Besides these results, contents and suggestion to prevent this infection in a swine herds were discussed.

No intuito de estudar os aspectos epidemiológicos da toxoplasmose natural em suínos, 1.131 amostras de soro foram colhidas de 12 granjas da região de Londrina, PR. As amostras foram submetidas ao teste de Imunofluorescência Indireta, resultando em 37, 84% de soro-positivos. A taxa de soro-reagentes em cada categoria foi: matrizes 46,2%; reprodutores 45,9%; marras 36,6%; terminação 31,6% e recria 14,7% (título maior ou igual 1:64). Considerando estes resultados, são discutidas medidas para prevenir a infecção nas granjas suínas.

RESUMO

With the purpose of studying the epidemiological aspects of natural Toxoplasmosis in swine, 1.131 serum samples were taken from 12 herds from the region of Londrina in the state of Paraná. The samples were submitted to the indirect fluorescence antybody test, resulting in 37,84% of serum-positive. The rate of serum-reagents in each category was: sows 46,2%; boars 45,9%; young sows 36,6%; pigs in the finishing period 31,6% and in the growing period 14,7% (title greater or equal 1:64). Besides these results, contents and suggestion to prevent this infection in a swine herds were discussed.  

No intuito de estudar os aspectos epidemiológicos da toxoplasmose natural em suínos, 1.131 amostras de soro foram colhidas de 12 granjas da região de Londrina, PR. As amostras foram submetidas ao teste de Imunofluorescência Indireta, resultando em 37, 84% de soro-positivos. A taxa de soro-reagentes em cada categoria foi: matrizes 46,2%; reprodutores 45,9%; marras 36,6%; terminação 31,6% e recria 14,7% (título maior ou igual 1:64). Considerando estes resultados, são discutidas medidas para prevenir a infecção nas granjas suínas.