RESUMEN
Most cases of BCR-ABL1-negative myeloproliferative neoplasms (MPNs), essential thrombocythemia, polycythemia vera and primary myelofibrosis are associated with JAK2 (V617F) mutations. The outcomes of these cases are critically influenced by the transition from JAK2 (V617F) heterozygosity to homozygosity. Therefore, a technique providing an unbiased assessment of the critical allele burden, 50% JAK2 (V617F), is highly desirable. In this study, we present an approach to assess the JAK2 (V617F) burden from genomic DNA (gDNA) and complementary DNA (cDNA) using one-plus-one template references for allele-specific quantitative-real-time-PCR (qPCR). Plasmidic gDNA and cDNA constructs encompassing one PCR template for JAK2 (V617F) spaced from one template for JAK2(Wild Type) were constructed by multiple fusion PCR amplifications. Repeated assessments of the 50% JAK2(V617F) burden within the dynamic range of serial dilutions of gDNA and cDNA constructs resulted in 52.53 ± 4.2% and 51.46 ± 4.21%, respectively. The mutation-positive cutoff was estimated to be 3.65% (mean +2 standard deviation) using 20 samples from a healthy population. This qPCR approach was compared with the qualitative ARMS-PCR technique and with two standard methods based on qPCR, and highly significant correlations were obtained in all cases. qPCR assays were performed on paired gDNA/cDNA samples from 20 MPN patients, and the JAK2 (V617F) expression showed a significant correlation with the allele burden. Our data demonstrate that the qPCR method using one-plus-one template references provides an improved assessment of the clinically relevant transition of JAK2 (V617F) from heterozygosity to homozygosity.
Asunto(s)
Janus Quinasa 2/genética , Leucemia Mieloide Crónica Atípica BCR-ABL Negativa/diagnóstico , Leucemia Mieloide Crónica Atípica BCR-ABL Negativa/fisiopatología , Mutación Missense/genética , Trastornos Mieloproliferativos/genética , Trastornos Mieloproliferativos/fisiopatología , Cartilla de ADN/genética , Frecuencia de los Genes , Humanos , Pérdida de Heterocigocidad , Reacción en Cadena en Tiempo Real de la Polimerasa/métodosRESUMEN
BCR-ABL fusion gene is implicated in the pathogenesis of chronic myeloid leukemia (CML), encoding the oncoprotein p210(BCR-ABL) with anti-apoptotic activity. The inability to undergo apoptosis is an important mechanism of drug resistance and neoplastic evolution in CML. The gene transcript expression of mitochondrial apoptotic related genes BAX and BCL-XL was evaluated by quantitative Real Time PCR (qPCR) in vitro in K562 cells and in vivo in peripheral blood of 66 CML patients in different stages of the disease: 13 cases at diagnosis, 34 in chronic phase (CP), 10 in accelerated phase (AP) and 9 in blast crisis (BC). Our results in K562 cells showed that all treatments with different tyrosine kinase inhibitors (TKIs) induced a decreased expression of the antiapoptotic oncogene BCL-XL, whereas the proapoptotic gene BAX remains constant with minor modifications. A significantly lower BAX/BCL-XL expression ratio (mean±SEM) than a group of healthy individuals (4.8±0.59) were observed in CML patients at diagnosis (1.28 ± 0.16), in AP (1.14±0.20), in BC (1.16±0.30) and in 18% of cases of patients in CP (2.71±0.40). Most CP cases (82%) showed a significantly increased ratio (10.03±1.30), indicating that the treatment with TKIs efficiently inhibited the expression of BCL-XL by blocking BCR-ABL oncoprotein. The BAX/BCL-XL ratio showed a significant inverse correlation (Spearman P<0.0001) with BCR-ABL/ABL relative expression indicating that low BAX/BCL-XL was associated with disease progression. Accordingly, the follow up of a cohort of eight cases during 6months from diagnosis showed that while the BAX/BCL-XL ratio rapidly increased after treatment in seven cases with good evolution, it decreased in the single case that showed rapid evolution and short survival. Our data suggest that BAX/BCL-XL expression ratio may be a sensitive monitor of disease progression and an early predictor of TKI therapy responsiveness in CML patients.
Asunto(s)
Crisis Blástica/metabolismo , Progresión de la Enfermedad , Regulación Leucémica de la Expresión Génica , Leucemia Mielógena Crónica BCR-ABL Positiva/metabolismo , Proteína X Asociada a bcl-2/biosíntesis , Proteína bcl-X/biosíntesis , Adulto , Anciano , Crisis Blástica/mortalidad , Crisis Blástica/terapia , Supervivencia sin Enfermedad , Femenino , Estudios de Seguimiento , Humanos , Células K562 , Leucemia Mielógena Crónica BCR-ABL Positiva/mortalidad , Leucemia Mielógena Crónica BCR-ABL Positiva/terapia , Masculino , Persona de Mediana Edad , Inhibidores de Proteínas Quinasas/farmacología , Reacción en Cadena de la Polimerasa de Transcriptasa Inversa/métodos , Tasa de SupervivenciaRESUMEN
Chemotherapy aims to limit proliferation and induce apoptotic cell death in tumor cells. Owing to blockade of signaling pathways involved in cell survival and proliferation, nuclear factor kappaB (NF-kappaB) inhibitors can induce apoptosis in a number of hematological malignancies. The efficacy of conventional chemotherapeutic drugs, such as vincristine (VCR) and doxorubicine (DOX), may be enhanced with combined therapy based on NF-kappaB modulation. In this study, we evaluated the effect of caffeic acid phenylethyl ester (CAPE) and MG-132, two nonspecific NF-kappaB inhibitors, and conventional chemotherapeutics drugs DOX and VCR on cell proliferation and apoptosis induction on a lymphoblastoid B-cell line, PL104, established and characterized in our laboratory. CAPE and MG-132 treatment showed a strong antiproliferative effect accompanied by clear cell cycle deregulation and apoptosis induction. Doxorubicine and VCR showed antiproliferative effects similar to those of CAPE and MG-132, although the latter drugs showed an apoptotic rate two-fold higher than DOX and VCR. None of the four compounds showed cytotoxic effect on peripheral mononuclear cells from healthy volunteers. CAPE- and MG-132-treated bone marrow cells from patients with myeloid and lymphoid leukemias showed 69% (P < .001) and 25% decrease (P < .01) in cell proliferation and 42% and 34% (P < .01) apoptosis induction, respectively. Overall, our results indicate that CAPE and MG-132 had a strong and selective apoptotic effect on tumor cells that may be useful in future treatment of hematological neoplasias.
RESUMEN
Imatinib mesylate has proven to be the most effective treatment in chronic myeloid leukemia. Nevertheless, imatinib resistance has raised concern and prompted interest in additional strategies to achieve disease eradication. Resistance to imatinib is mainly associated with three mechanisms: acquired mutations in the kinase domain of BCR-ABL protein, genetic amplification, and transcript overexpression of BCR-ABL rearrangement. Therefore an accurate assessment of resistance mechanism is particularly important to improve strategies to overcome resistance. In order to determine overexpression of BCR-ABL, we propose a method that correlates quantitative real time PCR and fluorescence in situ hybridization data from the same peripheral blood sample. The ratio between both methodologies permits to calculate the expression index (EI) for each patient. EI estimates the rate of BCR-ABL transcription per rearrangement. The median EI value, including all cases (n = 123), was 0.288; those cases (n = 13) included in percentile 90 showed an increment of EI above 1 Log (>2.88) with respect to the median value and were considered as cases with overexpression. We also evaluated the EIs using receiver operating characteristics curve; choosing an EI cutoff of 1.836 we obtained a sensitivity of 95% and a specificity of 61%. Using this EI cutoff value, more patients (n = 17) were included in the overexpression group. Patients within this group were resistant to imatinib and also showed a worse overall survival if compared with the remaining.
Asunto(s)
Antineoplásicos/uso terapéutico , Resistencia a Antineoplásicos , Proteínas de Fusión bcr-abl/genética , Reordenamiento Génico , Leucemia Mielógena Crónica BCR-ABL Positiva/genética , Piperazinas/uso terapéutico , Pirimidinas/uso terapéutico , Benzamidas , Cromosomas Humanos Par 22 , Cromosomas Humanos Par 9 , Femenino , Proteínas de Fusión bcr-abl/efectos de los fármacos , Amplificación de Genes , Regulación Neoplásica de la Expresión Génica/efectos de los fármacos , Humanos , Mesilato de Imatinib , Hibridación Fluorescente in Situ , Leucemia Mielógena Crónica BCR-ABL Positiva/tratamiento farmacológico , Masculino , Persona de Mediana Edad , Reacción en Cadena de la Polimerasa , Reacción en Cadena de la Polimerasa de Transcriptasa InversaRESUMEN
El tratamiento de la Leucemia Mieloide Crónica (LMC) con Imatinib puede fracasar por mutaciones en el dominio tirosina quinasa o amplificación del gen BCR/ABL. Otros mecanismos de refractariedad pueden deberse a los genes de resistencia múltiple a drogas (MDR). Objetivo: Investigar en la línea celular K562 (LMC resistente al Imatinib), la expresión del gen MDRl y los efectos de su inhibición con Ciclosporina A (CyA). Métodos: Se sintetizó ADNc por retrotranscripción del ARN total y se amplificaron por RT-PCR los genes BCR/ABL y MDRl con primers específicos. Se verificó la expresión de la glicoproteína P-gp (producto del gen MDRl) por inmunohistoquímica con 2 anticuerpos monoclonales (C494 y C2l9). Las células K562 fueron enfrentadas (24hs) con Imatinib (2uM), CyA (3ug/ml), Imatinib+Cy A. Se evaluaron apoptosis con naranja de acridina/bromuro de etidio (microscopía de fluorescencia) y función farmacorresistente de P-gp con Rhodamina-l23 (citometría de flujo). Resultados: La expresión del gen MDRl se confirmó tanto por RT-PCRcomo por inmunhistoquímica. La prueba funcional con Rhodamina-l23 indicó que la P-gp fue inhibida por CyA o hipotermia. El tratamiento con Imatinib+Cy A triplicó el porcentaje de apoptosis comparado con Imatinib solo. Conclusión: El gen MDRl jugaría un rol adicional en la resistencia al Imatinib. La Cy A u otros inhibido res de la P-gp, facilitaría la acción del Imatinib, induciendo mayor porcentaje de apoptosis en células BCR/ ABL positivas.
Asunto(s)
Genes MDRRESUMEN
La resistencia al tratamiento con Imatinib resulta de mecanismos dependientes del BCR/ABL tales como la sobreexpresión y la adquisición de mutaciones de punto en sitios críticos del dominio kinasa de ABL o de diferentes mecanismos independientes, como la evolución clonal. El propósito de este estudio fue identificar las mutaciones del dominio kinasa del gen ABL y la amplificación del reordenamiento genómico BCR/ABL en pacientes con LMC con falta o pérdida de respuesta hematológica y/o citogenética al tratamiento con Imatinib. Se incluyeron 71 pacientes, de los cuales 56 fueron evaluables. En trece pacientes (24 por ciento) se identificó algún mecanismo de resistencia: 10 (18 por ciento) presentaron mutaciones de punto en el dominio kinasa, 3 (5 por ciento) duplicación del cromosoma Ph' y sólo 1 (1 por ciento) mostró amplificación del BCR/ABL. La mutación T315I se observó en 1 caso. La mediana de edad fue significativamente menor [39 años (20-53)] en los pacientes en los que se encontraron mutaciones que en los casos sin ellas [51 años (24-75)] p=0.047. Se detectaron mutaciones en 1 de 29 (3 por ciento) pacientes en fase crónica, 8 de 20 (40 por ciento) pacientes en fase acelerada y en 1 de 8 (12 por ciento) pacientes en crisis blástica (p=0.001). La mediana de aparición de las mismas fue de 45 meses desde el diagnóstico de LMC (12-158) y 28.5 meses (1-56) desde el inicio de la terapia con Imatinib (p=0.591 y p=0.762 respectivamente). Las mutaciones en la región p-loop fueron las más frecuentes. El análisis univariado demostró que edad y fase de la enfermedad se asociaron significativamente con presencia de mutaciones. Las mutaciones en el dominio kinasa se reconocen como el principal mecanismo de resistencia al tratamiento con Imatinib y su detección puede determinar un cambio en la estrategia terapéutica.
Asunto(s)
Humanos , Masculino , Adulto , Femenino , Leucemia Mielógena Crónica BCR-ABL Positiva/genética , Piperazinas/farmacología , Pirimidinas/farmacología , Antineoplásicos , Genes abl , Leucemia Mielógena Crónica BCR-ABL Positiva/tratamiento farmacológico , Mutación Puntual , Piperazinas/uso terapéutico , Pirimidinas/uso terapéutico , Resistencia a Antineoplásicos/genéticaRESUMEN
Objetivo: Identificar mecanismos genéticos de resistencia en pacientes con LMC y falta o pérdida de la respuesta hematológica y/o citogenética al tratamiento con mesilato de Imatinib. Con esta finalidad, hemos realizado la búsqueda de mutaciones de punto en la región ABL del gen quimérico BCR/ABL y también evaluamos la presencia de la amplificación génica BCR/ABL en este grupo de pacientes. Pacientes: Se estudiaron 36 pacientes con LMC que presentaron respuesta citogenética nula (RCN) ó respuesta citogenética parcial (RCP) al tratamiento con Imatinib. Estos 36 pacientes se clasificaron como resistentes (29/36: 80.5 por ciento) ó refractarios al Imatinib (7/36: 19.5 por ciento). Adicionalmente, se estudiaron 10 pacientes con LMC sin exposición al Imatinib. Conclusiones: En este estudio hemos evaluado la presencia de mutaciones de punto en el dominio kinasa de BCR/ABL y la amplificación génica en un grupo de 36 pacientes con resistencia clínica y citogenética al tratamiento con Imatinib. La falta de respuesta al Imatinib puede ser causada por mecanismos dependientes o independientes del reordenamiento BCR/ABL. Identificamos mecanismos de resistencia dependientes de BCR/ABL en 34.4 por ciento (10/29) de los pacientes resistentes. La amplificación genómica BCR/ABL se detectó en 3.4 por ciento (1/29) y mutaciones en el dominio TK en el 31 por ciento (9/29) de los casos. Mecanismos independientes de BCR/ABL, como evolución clonal ó deleción del cromosoma derivado 9, se observó en 10.3 por ciento (3/29) de los casos resistentes. Un solo paciente refractario (1/7:14.3 por ciento) presentó doble cromosoma Ph.
Asunto(s)
Pacientes , Proteínas Tirosina Quinasas , BecasRESUMEN
We describe the cytogenetic, fluorescence in situ hybridization (FISH), and molecular findings in a patient who developed a typical chronic lymphocytic leukemia (CLL) 20 months after the diagnosis of a Philadelphia (Ph)-positive chronic myeloid leukemia. Unstimulated bone marrow culture showed a 46,XX,t(9;22)(q34;q11) karyotype, and interphase FISH detected the presence of a BCR/ABL fusion signal in 13% of cells. On stimulated bone marrow culture, a normal karyotype and a 13q14 deletion by interphase FISH with D13S319 probe in 14% of the cells were found. Molecular studies detected the chimeric BCR/ABL messengers by nested reverse-transcriptase polymerase chain reaction. The B-cellular clone was documented by the presence of a clonal heavy chain immunoglobulin rearrangement. The coexistence of these two hematologic malignancies leads to questions about their cell(s) of origin. We provide evidence that CLL arose in a Ph-negative clone. The implications of these findings are discussed.
Asunto(s)
Proteínas de Fusión bcr-abl/genética , Leucemia Linfocítica Crónica de Células B/genética , Leucemia Mielógena Crónica BCR-ABL Positiva/genética , Neoplasias Primarias Secundarias/genética , Translocación Genética/genética , Anciano , Anciano de 80 o más Años , Linfocitos B/patología , Linaje de la Célula , Aberraciones Cromosómicas , Cromosomas Humanos Par 22/genética , Cromosomas Humanos Par 9/genética , Femenino , Reordenamiento Génico , Humanos , Cadenas Pesadas de Inmunoglobulina , Hibridación Fluorescente in Situ , Cariotipificación , Leucemia Linfocítica Crónica de Células B/patología , Leucemia Mielógena Crónica BCR-ABL Positiva/patología , Neoplasias Primarias Secundarias/patología , Cromosoma Filadelfia , Células Tumorales CultivadasRESUMEN
We report a case of essential thrombocythemia (ET) in a 39-year-old woman who developed myelofibrosis at follow-up. The cytogenetic and fluorescence in situ hybridization analyses revealed a pathologic clone with the following previously unreported karyotype: 46,XX,ins(4;11)(q27;q24q21). We cannot conclude that the presence of this inverted insertion was associated with the overproduction of platelets, but documentation of more cases with chromosomal abnormalities and ET should lead to identifying different candidate genes involved in the neoplastic growth.
Asunto(s)
Inversión Cromosómica , Cromosomas Humanos Par 11 , Cromosomas Humanos Par 4 , Mielofibrosis Primaria/genética , Trombocitemia Esencial/genética , Adulto , Médula Ósea/patología , Progresión de la Enfermedad , Femenino , Reordenamiento Génico , Humanos , Hibridación Fluorescente in Situ , Mielofibrosis Primaria/patología , Trombocitemia Esencial/patologíaRESUMEN
Although the chronic phase of chronic myelocytic leukemia (CML) is characterized by the Philadelphia (Ph) chromosome creating a hybrid BCR/ABL gene, additional genetic changes involved in blast crisis are poorly understood. We report a 4-8-fold amplification by tandem duplication of the BCR/ABL fusion gene clustered on a masked Ph chromosome in a 61-year-old male patient with CML in myeloblastic crisis. Our finding suggests that the BCR/ABL amplification may play a role as a novel mechanism in the progression to an aggressive blast transformation in some cases of Ph-positive CML.
Asunto(s)
Proteínas de Fusión bcr-abl/genética , Amplificación de Genes , Leucemia Mielógena Crónica BCR-ABL Positiva/genética , Familia de Multigenes/genética , Cromosoma Filadelfia , Humanos , Hibridación Fluorescente in Situ , Leucemia Mielógena Crónica BCR-ABL Positiva/patología , Masculino , Persona de Mediana EdadRESUMEN
El pronóstico de la leucemia mieloide crónica (LMC) mejoró substancialmente con el tratamiento con Interferón alfa (IFNalfa) y los mejores resultados estarían relacionados a la respuesta genética (RG). Para evaluar tal presunción, se compararon los resultados terapéuticos obtenidos en 30 pacientes con LMC Ph+ en primera fase crónica, tratados con IFN alfa 5 MU/M²/d (Grupo 1) con los resultados obtenidos en 31 pacientes pertenecientes a un protocolo previo basado en IFN alfa 3 MU 3/v/sem., más 6-mercapto purina 150mg/d/v.o. y citarabina 150 mg/d/sc por cuatro días por mes (Grupo 2). El Grupo 1 tuvo mejores respuestas hematológicas completas (80 por ciento) y RG (76 por ciento) que el Grupo 2 (29 por ciento y 17 por ciento respectivamente) (p < 0.001). La duración de la fase crónica fue más larga en el Grupo 1, 43 meses contra 18 meses en el Grupo 2 (p < 0.001). Además, la probabilidad de sobrevida a 5 años (SV) fue mejor en el Grupo 1, 62 por ciento contra 15 por ciento en el Grupo 2 (p < 0.001). En nuestra experiencia, 5 MU/M²/d de IFN alfa prolongó la SV y la duración de la fase crónica, independientemente de la RG, sugiriendo que los beneficios del IFN alfa podrían relacionarse a otros mecanismos de acción, además de la supresión del cromosoma Ph.
Asunto(s)
Humanos , Masculino , Femenino , Adolescente , Adulto , Persona de Mediana Edad , Análisis Citogenético , Inducción de Remisión/métodos , Interferón-alfa , Leucemia Mielógena Crónica BCR-ABL Positiva/genética , Leucemia Mielógena Crónica BCR-ABL Positiva/tratamiento farmacológico , Cromosoma Filadelfia , Resultado del Tratamiento , Protocolos Clínicos , Interferón-alfa , Leucemia Mieloide de Fase Crónica , SobrevivientesRESUMEN
El pronóstico de la leucemia mieloide crónica (LMC) mejoró substancialmente con el tratamiento con Interferón alfa (IFNalfa) y los mejores resultados estarían relacionados a la respuesta genética (RG). Para evaluar tal presunción, se compararon los resultados terapéuticos obtenidos en 30 pacientes con LMC Ph+ en primera fase crónica, tratados con IFN alfa 5 MU/M²/d (Grupo 1) con los resultados obtenidos en 31 pacientes pertenecientes a un protocolo previo basado en IFN alfa 3 MU 3/v/sem., más 6-mercapto purina 150mg/d/v.o. y citarabina 150 mg/d/sc por cuatro días por mes (Grupo 2). El Grupo 1 tuvo mejores respuestas hematológicas completas (80 por ciento) y RG (76 por ciento) que el Grupo 2 (29 por ciento y 17 por ciento respectivamente) (p < 0.001). La duración de la fase crónica fue más larga en el Grupo 1, 43 meses contra 18 meses en el Grupo 2 (p < 0.001). Además, la probabilidad de sobrevida a 5 años (SV) fue mejor en el Grupo 1, 62 por ciento contra 15 por ciento en el Grupo 2 (p < 0.001). En nuestra experiencia, 5 MU/M²/d de IFN alfa prolongó la SV y la duración de la fase crónica, independientemente de la RG, sugiriendo que los beneficios del IFN alfa podrían relacionarse a otros mecanismos de acción, además de la supresión del cromosoma Ph. (AU)
Asunto(s)
Humanos , Masculino , Femenino , Adolescente , Adulto , Persona de Mediana Edad , Anciano , Estudio Comparativo , Interferón-alfa/uso terapéutico , Interferón-alfa/administración & dosificación , Leucemia Mielógena Crónica BCR-ABL Positiva/genética , Leucemia Mielógena Crónica BCR-ABL Positiva/tratamiento farmacológico , Cromosoma Filadelfia , Análisis Citogenético , Inducción de Remisión/métodos , Resultado del Tratamiento , Sobrevivientes , Interferón-alfa/efectos adversos , Interferón-alfa/toxicidad , Protocolos Clínicos , Leucemia Mieloide de Fase CrónicaRESUMEN
La línea celular K-562, portadora del rearreglo bcr/abl de tipo b3a2 es resistente a la apoptosis inducida por inhibidores de topoisomerasa II. Se trataron células de dicha línea con complejos de liposomas catiónicos (DMRIE-DOPE y Dcchol-DOPE) y oligonucleótidos antisense (ODNs AS) dirigidos contra el ARNm bcr/abl de tipo b3a2, y non sense (ODNs NS), en una razón 3:1 lípido/ADN, durante 72 horas, luego se incubaron durante 24 horas con idarubicina (IDA), 0.5 mug/ml, para inducir apoptosis. La misma se evaluó por observación morfológica al microscopio de fluorescencia. Las células tratadas con los conjugados DMRIE-DOPE y Dcchol/DOPE con el ODN AS específico mostraron un mayor porcentaje de apoptosis inducida por IDA (X + DS: 14.74 + 2.07 y 20.43 + 4.58, respectivamente) comparadas con los controles no tratados con ODNs (X + DS: 8.08 + 0.82); (p<0.005). Los datos indican que los ODNs-AS dirigidos contra el ARNm bcr-abl de tipo b3a2 vuelven a las células de la línea K-562 sensibles a la IDA a la concentración mencionada.
Asunto(s)
Humanos , Antibióticos Antineoplásicos/farmacología , Apoptosis/efectos de los fármacos , Idarrubicina/farmacología , Leucemia Mielógena Crónica BCR-ABL Positiva/metabolismo , Oligonucleótidos Antisentido/farmacología , Línea CelularRESUMEN
La línea celular K-562, portadora del rearreglo bcr/abl de tipo b3a2 es resistente a la apoptosis inducida por inhibidores de topoisomerasa II. Se trataron células de dicha línea con complejos de liposomas catiónicos (DMRIE-DOPE y Dcchol-DOPE) y oligonucleótidos antisense (ODNs AS) dirigidos contra el ARNm bcr/abl de tipo b3a2, y non sense (ODNs NS), en una razón 3:1 lípido/ADN, durante 72 horas, luego se incubaron durante 24 horas con idarubicina (IDA), 0.5 mug/ml, para inducir apoptosis. La misma se evaluó por observación morfológica al microscopio de fluorescencia. Las células tratadas con los conjugados DMRIE-DOPE y Dcchol/DOPE con el ODN AS específico mostraron un mayor porcentaje de apoptosis inducida por IDA (X + DS: 14.74 + 2.07 y 20.43 + 4.58, respectivamente) comparadas con los controles no tratados con ODNs (X + DS: 8.08 + 0.82); (p<0.005). Los datos indican que los ODNs-AS dirigidos contra el ARNm bcr-abl de tipo b3a2 vuelven a las células de la línea K-562 sensibles a la IDA a la concentración mencionada. (AU)
Asunto(s)
Humanos , Oligonucleótidos Antisentido/farmacología , Apoptosis/efectos de los fármacos , Idarrubicina/farmacología , Antibióticos Antineoplásicos/farmacología , Leucemia Mielógena Crónica BCR-ABL Positiva/metabolismo , Línea CelularRESUMEN
Objetivo: Identificar mecanismos genéticos de resistencia en pacientes con LMC y falta o pérdida de la respuesta hematológica y/o citogenética al tratamiento con mesilato de Imatinib. Con esta finalidad, hemos realizado la búsqueda de mutaciones de punto en la región ABL del gen quimérico BCR/ABL y también evaluamos la presencia de la amplificación génica BCR/ABL en este grupo de pacientes. Pacientes: Se estudiaron 36 pacientes con LMC que presentaron respuesta citogenética nula (RCN) ó respuesta citogenética parcial (RCP) al tratamiento con Imatinib. Estos 36 pacientes se clasificaron como resistentes (29/36: 80.5 por ciento) ó refractarios al Imatinib (7/36: 19.5 por ciento). Adicionalmente, se estudiaron 10 pacientes con LMC sin exposición al Imatinib. Conclusiones: En este estudio hemos evaluado la presencia de mutaciones de punto en el dominio kinasa de BCR/ABL y la amplificación génica en un grupo de 36 pacientes con resistencia clínica y citogenética al tratamiento con Imatinib. La falta de respuesta al Imatinib puede ser causada por mecanismos dependientes o independientes del reordenamiento BCR/ABL. Identificamos mecanismos de resistencia dependientes de BCR/ABL en 34.4 por ciento (10/29) de los pacientes resistentes. La amplificación genómica BCR/ABL se detectó en 3.4 por ciento (1/29) y mutaciones en el dominio TK en el 31 por ciento (9/29) de los casos. Mecanismos independientes de BCR/ABL, como evolución clonal ó deleción del cromosoma derivado 9, se observó en 10.3 por ciento (3/29) de los casos resistentes. Un solo paciente refractario (1/7:14.3 por ciento) presentó doble cromosoma Ph.
Asunto(s)
Pacientes , Proteínas Tirosina Quinasas , BecasRESUMEN
Objetivo: Identificar mecanismos genéticos de resistencia en pacientes con LMC y falta o pérdida de la respuesta hematológica y/o citogenética al tratamiento con mesilato de Imatinib. Con esta finalidad, hemos realizado la búsqueda de mutaciones de punto en la región ABL del gen quimérico BCR/ABL y también evaluamos la presencia de la amplificación génica BCR/ABL en este grupo de pacientes. Pacientes: Se estudiaron 36 pacientes con LMC que presentaron respuesta citogenética nula (RCN) ó respuesta citogenética parcial (RCP) al tratamiento con Imatinib. Estos 36 pacientes se clasificaron como resistentes (29/36: 80.5 por ciento) ó refractarios al Imatinib (7/36: 19.5 por ciento). Adicionalmente, se estudiaron 10 pacientes con LMC sin exposición al Imatinib. Conclusiones: En este estudio hemos evaluado la presencia de mutaciones de punto en el dominio kinasa de BCR/ABL y la amplificación génica en un grupo de 36 pacientes con resistencia clínica y citogenética al tratamiento con Imatinib. La falta de respuesta al Imatinib puede ser causada por mecanismos dependientes o independientes del reordenamiento BCR/ABL. Identificamos mecanismos de resistencia dependientes de BCR/ABL en 34.4 por ciento (10/29) de los pacientes resistentes. La amplificación genómica BCR/ABL se detectó en 3.4 por ciento (1/29) y mutaciones en el dominio TK en el 31 por ciento (9/29) de los casos. Mecanismos independientes de BCR/ABL, como evolución clonal ó deleción del cromosoma derivado 9, se observó en 10.3 por ciento (3/29) de los casos resistentes. Un solo paciente refractario (1/7:14.3 por ciento) presentó doble cromosoma Ph.