RESUMEN
Abstract Although infections with NonTuberculous Mycobacteria have become less common in AIDS patients, they are important opportunistic infections after surgical procedures, likely because they are ubiquitous and not efficiently killed by many commonly used disinfectants. In Venezuela there have recently been many non-tuberculous mycobacteria soft tissue infections after minor surgical procedures, some apparently related to the use of a commercial disinfectant based on a Quaternary Ammonium Compound. We studied the activity of this and other quaternary ammonium compounds on different non-tuberculous mycobacteria by transforming the mycobacteria with a dnaA-gfp fusion and then monitoring fluorescence to gauge the capacity of different quaternary ammonium compounds to inhibit bacterial growth. The minimum inhibitory concentration varied for the different quaternary ammonium compounds, but M. chelonae and M. abscessus were consistently more resistant than M. smegmatis, and M. terrae more resistant than M. bovis BCG.
Asunto(s)
Expresión Génica , Proteínas Fluorescentes Verdes , Desinfectantes/farmacología , Compuestos de Amonio Cuaternario/farmacología , Antibacterianos/farmacología , Micobacterias no Tuberculosas/efectos de los fármacos , Plásmidos/genética , Proteínas Recombinantes de Fusión/genética , Pruebas de Sensibilidad Microbiana , Proteínas Fluorescentes Verdes/genética , Relación Dosis-Respuesta a Droga , Micobacterias no Tuberculosas/clasificación , Micobacterias no Tuberculosas/genéticaRESUMEN
Although infections with NonTuberculous Mycobacteria have become less common in AIDS patients, they are important opportunistic infections after surgical procedures, likely because they are ubiquitous and not efficiently killed by many commonly used disinfectants. In Venezuela there have recently been many non-tuberculous mycobacteria soft tissue infections after minor surgical procedures, some apparently related to the use of a commercial disinfectant based on a Quaternary Ammonium Compound. We studied the activity of this and other quaternary ammonium compounds on different non-tuberculous mycobacteria by transforming the mycobacteria with a dnaA-gfp fusion and then monitoring fluorescence to gauge the capacity of different quaternary ammonium compounds to inhibit bacterial growth. The minimum inhibitory concentration varied for the different quaternary ammonium compounds, but M. chelonae and M. abscessus were consistently more resistant than M. smegmatis, and M. terrae more resistant than M. bovis BCG.
Asunto(s)
Antibacterianos/farmacología , Desinfectantes/farmacología , Expresión Génica , Proteínas Fluorescentes Verdes , Micobacterias no Tuberculosas/efectos de los fármacos , Compuestos de Amonio Cuaternario/farmacología , Relación Dosis-Respuesta a Droga , Proteínas Fluorescentes Verdes/genética , Pruebas de Sensibilidad Microbiana , Micobacterias no Tuberculosas/clasificación , Micobacterias no Tuberculosas/genética , Plásmidos/genética , Proteínas Recombinantes de Fusión/genéticaRESUMEN
El objetivo de este trabajo fue evaluar la resistencia a isoniacida (INH), rifampicina (RIF), estreptomicina (STR) y etambutol (EMB) de 59 cepas de Mycobacterium tuberculosis, aisladas en el período agosto 2005-diciembre 2006, en el estado Sucre, Venezuela, empleando el método de proporciones de Canetti y de nitrato reductasa. Se encontró 6,3% de resistencia primaria y 14,3% de adquirida. Una cepa fue considerada MDR, al presentar resistencia a RIF e INH. Se comparó la prueba de nitrato reductasa con el método de las proporciones, encontrándose 100% de concordancia entre los resultados de los dos métodos para INH, RIF y EMB, y 95,65% para STR. Además, la prueba nitrato reductasa produjo resultados en 10 a 14 días, comparado con 42 días para el método de proporciones, por lo que la primera se postula como una alternativa muy valiosa para acortar el tiempo de respuesta en la valoración de la susceptibilidad de M. tuberculosis. La secuencia del gen rpoB en la cepa resistente a RIF demostró la presencia de una mutación no descrita anteriormente en la región hipervariable de 81 pares de bases, donde se ha reportado el mayor número de mutaciones de cepas resistentes a RIF. Esta mutación produjo un cambio en el codón 456 de TCG > CAG. Al comparar nuestros resultados con los hallados en el último estudio de prevalencia de resistencia realizado en el estado, se demuestra una disminución en la circulación de cepas resistentes en la zona de estudio.
The objective of this study was to evaluate the resistance to isoniazid (INH), rifampicin (RIF), streptomycin (STR) and ethambutol (EMB), with the Canettis proportions method (PM) and the nitrate reductase assay (NRA) of 59 clinical strains of Mycobacterium tuberculosis, isolated in the period of august 2005 to december 2006, in Sucre state, Venezuela. Primary and acquired drug resistance was 6.3% and 14.3%, respectively. Only one strain was found to be multidrug resistant (MDR). The overall agreement between the NRA and PM was 100% for INH, RIF and EMB, and 96% for STR. The time to obtain results was 10 to 14 days for the NRA, compared to 42 days for the PM. The NRA was easy to perform and therefore represents a useful tool for rapid and accurate determination of drug-resistant M. tuberculosis. The sequence of the rpoB gene of the RIF resistant strain demonstrated a never described mutation (change in the codon 456; TCG > CAG) in the hypervariable region of 81 base pairs where most of the mutations of the RIF resistant strains have been reported. Comparison of our results with those of the last resistance prevalence study carried out in the years 1998-1999, shows a decrease in the studied area.
Asunto(s)
Humanos , Antituberculosos/farmacología , Farmacorresistencia Microbiana , Pruebas de Sensibilidad Microbiana/métodos , Mycobacterium tuberculosis/efectos de los fármacos , Tuberculosis/microbiología , Secuencia de Bases , Proteínas Bacterianas/análisis , Proteínas Bacterianas/genética , Farmacorresistencia Bacteriana Múltiple/genética , Etambutol/farmacología , Isoniazida/farmacología , Datos de Secuencia Molecular , Mutación Missense , Morbilidad/tendencias , Mycobacterium tuberculosis/enzimología , Mycobacterium tuberculosis/genética , Nitrato-Reductasa/análisis , Mutación Puntual , Prevalencia , Rifampin/farmacología , Alineación de Secuencia , Homología de Secuencia de Ácido Nucleico , Esputo/microbiología , Estreptomicina/farmacología , Tuberculosis Resistente a Múltiples Medicamentos/epidemiología , Tuberculosis Resistente a Múltiples Medicamentos/microbiología , Tuberculosis/epidemiología , Venezuela/epidemiologíaRESUMEN
The objective of this study was to evaluate the resistance to isoniazid (INH), rifampicin (RIF), streptomycin (STR) and ethambutol (EMB), with the Canetti's proportions method (PM) and the nitrate reductase assay (NRA) of 59 clinical strains of Mycobacterium tuberculosis, isolated in the period of august 2005 to december 2006, in Sucre state, Venezuela. Primary and acquired drug resistance was 6.3% and 14.3%, respectively. Only one strain was found to be multidrug resistant (MDR). The overall agreement between the NRA and PM was 100% for INH, RIF and EMB, and 96% for STR. The time to obtain results was 10 to 14 days for the NRA, compared to 42 days for the PM. The NRA was easy to perform and therefore represents a useful tool for rapid and accurate determination of drug-resistant M. tuberculosis. The sequence of the rpoB gene of the RIF resistant strain demonstrated a never described mutation (change in the codon 456; TCG > CAG) in the hypervariable region of 81 base pairs where most of the mutations of the RIF resistant strains have been reported. Comparison of our results with those of the last resistance prevalence study carried out in the years 1998-1999, shows a decrease in the studied area.
Asunto(s)
Antituberculosos/farmacología , Farmacorresistencia Microbiana , Pruebas de Sensibilidad Microbiana/métodos , Mycobacterium tuberculosis/efectos de los fármacos , Tuberculosis/microbiología , Proteínas Bacterianas/análisis , Proteínas Bacterianas/genética , Secuencia de Bases , ARN Polimerasas Dirigidas por ADN , Farmacorresistencia Bacteriana Múltiple/genética , Etambutol/farmacología , Humanos , Isoniazida/farmacología , Datos de Secuencia Molecular , Morbilidad/tendencias , Mutación Missense , Mycobacterium tuberculosis/enzimología , Mycobacterium tuberculosis/genética , Nitrato-Reductasa/análisis , Mutación Puntual , Prevalencia , Rifampin/farmacología , Alineación de Secuencia , Homología de Secuencia de Ácido Nucleico , Esputo/microbiología , Estreptomicina/farmacología , Tuberculosis/epidemiología , Tuberculosis Resistente a Múltiples Medicamentos/epidemiología , Tuberculosis Resistente a Múltiples Medicamentos/microbiología , Venezuela/epidemiologíaRESUMEN
BACKGROUND: Mycobacterium haemophilum was first recovered from subcutaneous lesions of a patient with Hodgkin's disease. Because of its special growth requirements (it grows at 30-32 degrees C and requires iron-supplemented medium), the organism cannot be isolated using routine culture techniques for other mycobacteria. Only a few developed countries have reported infection with this mycobacterium. We report the first two cases diagnosed in Venezuela. METHODS: The diagnosis of the first case was established using polymerase chain reaction (PCR)-restriction endonuclease analysis of the gene encoding the 65-kDa heat shock protein (hsp65) for the direct identification of M. haemophilum in a clinical specimen in which bacilli were observed on acid-fast smear, but growth was not detected by standard culture procedures. RESULTS: After recognizing this bacterium as a possible cause of infection in our setting, clinical samples of cutaneous lesions were routinely cultured on blood agar at 30 degrees C for at least 6 weeks, which resulted in the diagnosis of the second case. CONCLUSIONS: Dermatologists should consider this bacterium in immunocompromised patients with cutaneous ulcerating lesions. Material from the lesions can be screened for mycobacteria using an acid-fast stain and, if acid-fast bacilli are seen, PCR analysis of mycobacterial hsp65 can be an effective tool for early diagnosis. Appropriate culture methods are required for bacteriologic confirmation of infection with M. haemophilum.
Asunto(s)
Enzimas de Restricción del ADN , Infecciones por Mycobacterium/diagnóstico , Mycobacterium haemophilum/aislamiento & purificación , Úlcera Cutánea/diagnóstico , Antibacterianos/uso terapéutico , Antituberculosos/uso terapéutico , Quimioterapia Combinada , Femenino , Estudios de Seguimiento , Humanos , Lactante , Persona de Mediana Edad , Infecciones por Mycobacterium/tratamiento farmacológico , Reacción en Cadena de la Polimerasa/métodos , Mapeo Restrictivo/métodos , Medición de Riesgo , Índice de Severidad de la Enfermedad , Úlcera Cutánea/tratamiento farmacológico , Úlcera Cutánea/microbiología , Resultado del TratamientoRESUMEN
Yersinia enterocolítica es un cocobacilo gram negativo de la familia de las enterobacterias cuyo reservorio natural es una gran variedad de animales, principalmente el cerdo. La transmisión a los humanos se realiza comúnmente a través de la vía fecal-oral por la ingestión de comida, agua y leche, o ambas, contaminadas. Y. enterocolítica es un patógeno invasivo entérico que tiene como manifestación más frecuente la diarrea aguda con deposiciones sanguinolentas y con la presencia de leucocitos -demostrada en exámenes de laboratorio-, fiebre y dolor abdominal que cursa sin complicaciones y es mucho más frecuente en lactantes y niños pequeños. Si bien el hallazgo de Y. enterocolítica como causa de diarrea en niños es común en otros países como EEUU, Canadá y Europa, resulta extremadamente infrecuente en Cuba. Se presenta a una paciente con enterocolitis hemorrágica en la que se aísla este microorganismo(AU)
Asunto(s)
Niño , Enterocolitis , Yersinia enterocolitica/aislamiento & purificación , Diarrea/tratamiento farmacológico , Ácido Nalidíxico/uso terapéuticoRESUMEN
Little attention has been paid to pneumococcal carriage and disease in Amerindians from Latin America. The Warao people, an indigenous population from Venezuela, live in the delta of the Orinoco River in geographically isolated communities with difficult access to medical care. To obtain insight into pneumococcal carriage and the theoretical coverage of pneumococcal vaccines in this population, we investigated pneumococcal colonization, serotype, and genotype distribution among Warao children in 9 distinct, geographically isolated communities in the Delta Amacuro area in the northeast of Venezuela. From April 2004 through January 2005, a total of 161 Streptococcus pneumoniae isolates were recovered from single nasopharyngeal swab samples obtained from 356 children aged 0-72 months. The overall pneumococcal carriage rate was 49%, ranging from 13% to 76%, depending on the community investigated and the age of the children (50% among children aged <2 years and 25% among children aged >2 years). The most frequent serotypes were 23F (19.5% of isolates), 6A (19.5%), 15B (10.4%), 6B (9.1%), and 19F (7.2%). The theoretical coverage of the 7-valent pneumococcal conjugate vaccine, including the cross-reactive nonvaccine serotype 6A, was 65%. A total of 26% of the isolates were resistant to first-line antibiotics, with 70% of these strains being covered by the 7-valent pneumococcal conjugate vaccine. Restriction fragment end labelling analysis revealed 65 different genotypes, with 125 (80%) of the isolates belonging to 27 different genetic clusters, suggesting a high degree of horizontal spread of pneumococcal strains in and between the villages. The high colonization rates and high (registered) acute respiratory tract infection morbidity and mortality in this part of Venezuela suggest that Warao children are at increased risk for pneumococcal disease and, therefore, benefit from vaccination.
Asunto(s)
Antibacterianos/farmacología , Portador Sano/epidemiología , Portador Sano/microbiología , Farmacorresistencia Bacteriana Múltiple , Infecciones Neumocócicas/epidemiología , Infecciones Neumocócicas/microbiología , Streptococcus pneumoniae/aislamiento & purificación , Distribución por Edad , Niño , Preescolar , Humanos , Indígenas Sudamericanos , Lactante , Epidemiología Molecular , Streptococcus pneumoniae/clasificación , Streptococcus pneumoniae/efectos de los fármacos , Venezuela/epidemiologíaRESUMEN
INTRODUCTION: Disinfectants available in Venezuela, registered as tuberculocidal, and used in clinical and laboratory settings were tested for their mycobactericidal activity. METHODS: The European Standard Quantitative Suspension test prEN14348 was used in simulated clean and dirty conditions. The disinfectants tested included Gerdex and K-ller (both containing the quaternary ammonium compound dimethyl benzyl lauryl ammonium bromide in concentrations of 10% and 0.16% respectively), Microplus-Action (5% polymethylene urea), Cidex (2% glutaraldehyde) and Cidex OPA (0.55% ortho-phthalaldehyde). The mycobactericidal activity was evaluated with M. smegmatis ATCC 19420 and in clinical isolates of M. fortuitum, M. chelonae and M. abscessus. The tuberculocidal activity was assessed with M. tuberculosis H37Rv. RESULTS: Cidex and Cidex OPA were effective against all the test organisms, showing a > 5-log 10 reduction in CFU after 5 minutes of exposure under both clean and dirty conditions. Gerdex and K-ller only achieved a 2-log reduction in M. tuberculosis, M. abscessus and M. chelonae CFU, even after 60 minutes of exposure. Micro Plus Action showed a 4-log reduction in M. tuberculosis viability but less than a 1-log reduction in M. abscessus and M. chelonae CFUs after 60 minutes of incubation. CONCLUSION: The tuberculocidal activity claimed by the manufacturers of several disinfectants sold in Venezuela, Gerdex, K-ller and Microplus-Action is inaccurate when tested by European norms. The use of these products for disinfecting material used in critical and semi-critical patients could result in iatrogenic infections.
Asunto(s)
Antituberculosos/farmacología , Desinfectantes/farmacología , Mycobacterium tuberculosis/efectos de los fármacos , Micobacterias no Tuberculosas/efectos de los fármacos , Desinfectantes/normas , Etiquetado de Medicamentos , Pruebas de Sensibilidad Microbiana , Mycobacterium chelonae/efectos de los fármacos , Mycobacterium fortuitum/efectos de los fármacos , Mycobacterium smegmatis/efectos de los fármacos , VenezuelaRESUMEN
Introducción. Se evaluó la actividad micobactericida de desinfectantes disponibles en el mercado venezolano, registrados como tuberculicidas y que son utilizados en la clínica y el laboratorio para la desinfección de materiales críticos y semicríticos. Materiales y métodos. Se utilizó la Prueba de Suspensión Cuantitativa de la Comunidad Europea prEN 14348 bajo circunstancias limpias y sucias, y se evaluó la actividad de Gerdex® y K-ller® (bromuro de lauril dimetil bencil amonio, en concentraciones de 10 y 0,16%, respectivamente), Microplus-Action® (5% polimetilen diurea), Cidex® (2% glutaraldehído) y Cidex® OPA (0,55% orthophthaldialdehído). La actividad micobactericida se evaluó con las cepas de referencia Mycobacterium smegmatis ATCC 19420, y con cepas de M. fortuitum, M. chelonae y M. abscessus aisladas de muestras clínicas. La actividad tuberculocida se evaluó con M. tuberculosis H37Rv. Resultados. Cidex y Cidex OPA fueron efectivos frente a todas las micobacterias evaluadas bajo condiciones limpias y sucias con un > 5-Log10 de reducción de viabilidad después de 5 min de exposición. Gerdex y K-ller lograron solamente un 2-Log10 de reducción con M. tuberculosis, M. abscessus y M. chelonae, aun después de 60 min de exposición. El Microplus-Action mostró un 4-Log10 de reducción de viabilidad con M. tuberculosis, pero menos de 1-Log10 de reducción con M. abscessus y M. chelonae después 60 min de exposición. Conclusiones. La actividad tuberculicida y micobactericida de varios desinfectantes disponibles en Venezuela, Gerdex®, K-ller® y Microplus-Action®, que indican sus fabricantes resulta inadecuada cuando es evaluada según las normas europeas. El uso de estos compuestos para la desinfección de materiales críticos y semicríticos podría dar como resultado infecciones iatrogénicas (AU)
Introduction. Disinfectants available in Venezuela, registered as tuberculocidal, and used in clinical and laboratory settings were tested for their mycobactericidal activity. Methods. The European Standard Quantitative Suspension test prEN14348 was used in simulated clean and dirty conditions. The disinfectants tested included Gerdex® and K-ller® (both containing the quaternary ammonium compound dimethyl benzyl lauryl ammonium bromide in concentrations of 10% and 0.16% respectively), Microplus-Action® (5% polymethylene urea), Cidexì (2% glutaraldehyde) and Cidex® OPA (0.55% ortho-phthalaldehyde). The mycobactericidal activity was evaluated with M. smegmatis ATCC 19420 and in clinical isolates of M. fortuitum, M. chelonae and M. abscessus. The tuberculocidal activity was assessed with M. tuberculosis H37Rv. Results. Cidex and Cidex OPA were effective against all the test organisms, showing a > 5-log 10 reduction in CFU after 5 minutes of exposure under both clean and dirty conditions. Gerdex and K-ller only achieved a 2-log reduction in M. tuberculosis, M. abscessus and M. chelonae CFU, even after 60 minutes of exposure. Micro Plus Action showed a 4-log reduction in M. tuberculosis viability but less than a 1-log reduction in M. abscessus and M. chelonae CFUs after 60 minutes of incubation. Conclusion. The tuberculocidal activity claimed by the manufacturers of several disinfectants sold in Venezuela, Gerdex®, K-ller® and Microplus-Action® is inaccurate when tested by European norms. The use of these products for disinfecting material used in critical and semi-critical patients could result in iatrogenic infections (AU)
Asunto(s)
Humanos , Antituberculosos/farmacología , Desinfectantes/farmacología , Micobacterias no Tuberculosas , Mycobacterium tuberculosis , Desinfectantes/normas , Mycobacterium chelonae , Mycobacterium fortuitum , Mycobacterium smegmatis , Venezuela , Pruebas de Sensibilidad MicrobianaRESUMEN
Anualmente 1.9 millones de niños menores de 5 años mueren por una infección Respiratoria Aguda (IRA) y según la OMS el Streptococcus pnumoniae es responsable de mas de 1 millón en países en desarrollo. Determinar la frecuencia de portadores de S. Pneumoniae, los serotipos de las cepas aisladas, la presencia de dichos serotipos en la vacuna conjugada 7- valente (Prevener, Wyeth) y la morbilidad por IRA en la población infantil Warao menor de 5 años en tres comunidades del Estado Delta Amacuro: san Francisco de Guayo, Nabasanuka y Santa Catalina. Estudio de campo, epidemiológico, transversal y comparativo entre mayo de 2004- enero 2005 que incluyó estudio microbiológico de 110 muestras de hisopado nasofaríngeo y evaluación clínica de 259 niños. 42,7% de los niños estaba colonizado por S. Pneumoniae. Se aislaron 47 cepas, porcentaje de portadores: Nabasanuka 55% Guayo 37,7%, Santa Catalina 29,4%. Serotipos aislados incluidos en la vacuna conjugada 7-valente (19F, 6B y 23F) con 19,15%, 12,8%, 18,6%. Al comparar las proporciones de IRA versus estado de portador de S. Pneumoniae por comunidad no hubo una relación estadísticamente significativa. La población infantil Warao presenta una alta colonización por S.pneumoniae 42,7%. Los serotipos encontrados implican teóricamente una cobertura de 70,23% de la vacuna conjugada 7-valente. Los niños Warao podrían beneficiarse con un programa de vacunación. El mayor porcentaje de IRA y de portadores correspondió a la Comunidad de Nabasanuka.
Asunto(s)
Humanos , Niño , Infecciones Neumocócicas , Enfermedades Respiratorias , Streptococcus pneumoniae , Pediatría , Vacunas , VenezuelaRESUMEN
Introducción: La diarrea disentérica se reconoce como una causa importante de ingresos en hospitales pediátricos de nuestro país. Objetivos: Describir el comportamiento de los pacientes menores de tres años, ingresados por diarrea disentérica en el Hospital Pediátrico Provincial Docente "José Luis Miranda" durante el año 2001, y determinar las principales variables epidemiológicas, las manifestaciones clínicas, complicaciones, así como identificar los agentes causales y la terapéutica específica empleada. Métodos: Se incluyeron 317 pacientes que presentaron deposiciones diarreicas mucosanguinolentas, a los que se les aplicó un formulario y se tomaron muestras de heces para aislamiento microbiológico, que fueron sembradas en los diferentes medios indicados. Resultados: Predominó el grupo menor de un año (83,9 por ciento), especialmente los menores de seis meses, a los que se les suprimió precozmente la lactancia materna (93,7 por ciento), sin que se encontraran diferencias significativas respecto al sexo. Las manifestaciones clínicas más observadas al ingreso fueron: la fiebre (89,9 por ciento), la diarrea sanguinolenta (71,3 por ciento) y los vómitos (28,7 por ciento). Los microorganismos que fueron aislados con mayor frecuencia fueron: Campylobacter (43,5 por ciento), Shigella (37,3 por ciento) y Escherichia coli enterohemorrágica (14,7 por ciento). Las complicaciones que más se presentaron fueron los desequilibrios hidroelectrolítico y ácido básico (18 por ciento), así como la enfermedad diarreica persistente (10,7 por ciento); el ácido nalidíxico fue el antimicrobiano más empleado (65,4 por ciento), y en otro grupo, debido a las complicaciones sépticas sobreañadidas o por el estado clínico deteriorado, fue necesario utilizar cefalosporinas de tercera generación, principalmente la cefotaxima y el ceftriaxone, aminoglucósidos o ambos, en especial la amikacina. Conclusiones: Existió un predominio de los niños menores de seis meses, a los cuales se les suprimió precozmente la lactancia materna, gran parte de los cuales presentaron una evolución aguda, con un curso autolimitado y un reducido número de complicaciones(AU)
Asunto(s)
Diarrea Infantil/epidemiología , Disentería/epidemiologíaRESUMEN
Se determinó la actividad in vitro de G-1 frente a 49 cepas de bacterias enteropatógenas: Aeromonas, E Coli, E. Coli K88, E. Coli K99, Salmonella typhi, salmonella B, Salmonella C, Shigella B, Shigella C, Shigella C, Shigella D, Shigella sp obtenidas de aislamientos clínicos de procedencia humana y animal. Además se evaluaron ocho réplicas de la E. Coli ATCC 25922 como control de calidad. La mínima concentración inhibitoria (MCI) se determinó por el método de microdilución en placa en caldo de Mueller Hinton a 37 grados centígrados, de acuerdo a los criterios de las normas National Commitee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS, 1995). El cien por ciento de las cepas evaluadas fueron sensibles al producto de ensayo con una MCI comprendida en el rango de 2 a 3 ug/ml. Los resultados sugieren que el G-1 es un compuesto con actividad in vitro frente a bacterias enteropatógenas pudiendo ser de uso potencial, uso terapéutico frente a las enfermedades causadas por estos gérmenes(AU)