Molecular identification of enteropathogenic Escherichia coli (EPEC) associated with infant diarrhea in Londrina, Parana, Brazil
Braz. J. Microbiol.
; 31(4)2000.
Article
em En
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| ID: vti-443525
Biblioteca responsável:
BR68.1
ABSTRACT
In this work, the prevalence of enteropathogenic Escherichia coli (EPEC) in children in Londrina-PR, Brazil, was evaluated by means of digoxigenin-labelled DNA probes which identify the plasmid responsible for EPEC adherence factor (EAF), and virulence genes for EPEC as bundle-forming pilus (bfp) and E. coli attaching-effacing factor (eae). In addition, the isolated strains were serotyped and tested for adherence to HEp-2 cells. From 102 children with diarrhoea, 19 strains hybridized with at least one probe, and eleven of them were identified as typical EPEC because they hybridized with the three probes used, showed a localized adherence (LA) pattern, and presented no genes for enterotoxins (ST and LT) or invasion as detected by PCR. Six of the typical EPEC strains belonged to the classical serotype O119H6 (43%); in four strains O antigens could not be determined using antisera against O1 to O173, they were all ONTH7 (29%); one strain belonged to O111H6. Three strains were classified as atypical EPEC O26H-, O111H9 and O119HNT. Strains O26H- and O111H9 hybridized with the eae probe only and showed localized adherence like (LAL) pattern; strain O119HNT hybridized with the bfp and eae probes, and showed a localized adherence/diffuse adherence (LA/DA) pattern after 6 h. A DA pattern was observed in two strains isolated from children with diarrhoea (ONTH11 and O142H34), which hybridized with the eae probe. From 46 controls, five strains hybridized with one or two probes, but none hybridized with all probes or presented the LA pattern. Three strains with the DA pattern hybridized with the eae probe. No EPEC strain belonging to classical EPEC serotypes was isolated from faeces of control children.
RESUMO
A prevalência de Escherichia coli enteropatogênica (EPEC) em crianças em Londrina-PR, Brazil, foi avaliada através de sondas de DNA marcadas com digoxigenina, as quais identificam o plasmidio EAF (EPEC adherence factor) e os genes de virulência para EPEC, bfp (bundle-forming pilus) e eae (E. coli attaching and effacing). As amostras de E. coli foram também sorotipadas e testadas para a aderência às células HEp-2. Das 102 crianças com diarréia, 19 colonias de E. coli hibridizaram com pelo menos uma sonda, e destas, 11 foram identificadas como EPEC típica pois hibridizaram com as 3 sondas testadas. Todas as EPEC típicas apresentaram o padrão de aderência localizada e não apresentaram os genes para enterotoxinas (ST e LT) e invasão por PCR. Seis EPEC típica (43%) pertenceram ao sorotipo clássico O119H6, uma ao sorotipo O111H6 e em quatro amostras (29%) o antígeno O não foi determinado com os soros contra O1-O173 (ONTH7). Três amostras foram classificadas como EPEC atípicas O26H-, O111H9 e O119HNT. E. coli O26H- e O111H9 hibridizaram somente com eae e mostraram padrão de aderência localizada "like" (LAL); O119HNT hibridizou com as sondas bfp e eae, e mostrou padrão de aderência localizada/difusa (LA/DA) após 6 h. O padrão DA foi observado em duas amostras (ONTH11 e O142H34) isoladas de crianças com diarréia, as quais hibridizaram com eae. Dos 46 controles, cinco colônias hibridizaram com pelo menos uma sonda, mas nenhuma hibridizou com as 3 sondas testadas ou apresentou LA. Três amostras com padrão DA hibridizaram com sonda eae. Nenhuma EPEC com sorotipo clássico foi encontrada nas fezes de crianças controle.
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País/Região como assunto:
America do sul
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Brasil
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Revista:
Braz. J. Microbiol.
Ano de publicação:
2000
Tipo de documento:
Article