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Accessing the Human Pluripotent Stem Cell Translatome by Polysome Profiling.
Gomes-Júnior, Rubens; Shigunov, Patrícia; Dallagiovanna, Bruno; Pereira, Isabela Tiemy.
Afiliação
  • Gomes-Júnior R; Instituto Carlos Chagas-FIOCRUZ-PR, Paraná, Brazil.
  • Shigunov P; Instituto Carlos Chagas-FIOCRUZ-PR, Paraná, Brazil.
  • Dallagiovanna B; Instituto Carlos Chagas-FIOCRUZ-PR, Paraná, Brazil.
  • Pereira IT; Instituto Carlos Chagas-FIOCRUZ-PR, Paraná, Brazil.
Methods Mol Biol ; 2520: 309-319, 2022.
Article em En | MEDLINE | ID: mdl-34611819
Polysome profiling is a technique that uses sucrose density gradient ultracentrifugation to separate complexes of mRNAs associated with one or more ribosomes. Here we describe polysome profiling analysis in human pluripotent stem cells (hPSCs) using a continuous ultraviolet spectrophotometer and a gradient fractionator. We provide protocols for processing sucrose gradient fractions for isolation of RNA for RT-qPCR or large-scale sequencing analysis, used to establish the translational status of specific mRNAs and identify the role of noncoding RNA in translation.
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Texto completo: 1 Coleções: 01-internacional Base de dados: MEDLINE Assunto principal: Biossíntese de Proteínas / Células-Tronco Pluripotentes Limite: Humans Idioma: En Revista: Methods Mol Biol Assunto da revista: BIOLOGIA MOLECULAR Ano de publicação: 2022 Tipo de documento: Article País de afiliação: Brasil País de publicação: Estados Unidos
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