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Epitope mapping of recombinant Leishmania donovani virulence factor A2 (recLdVFA2) and canine leishmaniasis diagnosis using a derived synthetic bi-epitope.
Mendes, Thais Melo; Roma, Eric Henrique; Costal-Oliveira, Fernanda; Dhom-Lemos, Lucas de Carvalho; Toledo-Machado, Cristina Monerat; Bruna-Romero, Oscar; Bartholomeu, Daniella Castanheiras; Fujiwara, Ricardo Toshio; Chávez-Olórtegui, Carlos.
Afiliação
  • Mendes TM; Departamento de Bioquímica e Imunologia, Instituto de Ciências Biológicas, UFMG, Belo Horizonte-Minas Gerais, Brazil.
  • Roma EH; Departamento de Bioquímica e Imunologia, Instituto de Ciências Biológicas, UFMG, Belo Horizonte-Minas Gerais, Brazil.
  • Costal-Oliveira F; Departamento de Bioquímica e Imunologia, Instituto de Ciências Biológicas, UFMG, Belo Horizonte-Minas Gerais, Brazil.
  • Dhom-Lemos LC; Departamento de Parasitologia, Instituto de Ciências Biológicas, UFMG, Belo Horizonte-Minas Gerais, Brazil.
  • Toledo-Machado CM; Departamento de Parasitologia, Instituto de Ciências Biológicas, UFMG, Belo Horizonte-Minas Gerais, Brazil.
  • Bruna-Romero O; Departamento de Microbiologia, Imunologia e Parasitologia, CCB, UFSC, Florianópolis-Santa Catarian, Brazil.
  • Bartholomeu DC; Departamento de Parasitologia, Instituto de Ciências Biológicas, UFMG, Belo Horizonte-Minas Gerais, Brazil.
  • Fujiwara RT; Departamento de Parasitologia, Instituto de Ciências Biológicas, UFMG, Belo Horizonte-Minas Gerais, Brazil.
  • Chávez-Olórtegui C; Departamento de Bioquímica e Imunologia, Instituto de Ciências Biológicas, UFMG, Belo Horizonte-Minas Gerais, Brazil.
PLoS Negl Trop Dis ; 11(5): e0005562, 2017 May.
Article em En | MEDLINE | ID: mdl-28557986
BACKGROUND: Leishmaniasis is one of the most important zoonotic diseases spread in Latin America. Since many species are involved in dog infection with different clinical manifestations, the development of specific diagnostic tests is mandatory for more accurate disease control and vaccine strategies. METHODOLOGY/PRINCIPAL FINDINGS: Seventy-five 15-mer peptides covering the sequence of recombinant Leishmania donovani virulence factor A2 (recLdVFA2) protein were prepared by Spot synthesis. Membrane-bound peptides immunoreactivity with sera from dogs immunized with recLdVFA2 and with a specific anti-recLdVFA2 monoclonal antibody allowed mapping of continuous B-cell epitopes. Five epitopes corresponding to the N-terminal region of recLdVFA2 (MKIRSVRPLVVLLVC, RSVRPLVVLLVCVAA, RPLVVLLVCVAAVLA, VVLLVCVAAVLALSA and LVCVAAVLALSASAE, region 1-28) and one located within the repetitive units (PLSVGPQAVGLSVG, regions 67-81 and 122-135) were identified. A 34-mer recLdVFA2-derived bi-epitope containing the sequence MKIRSVRPLVVLLVC linked to PLSVGPQAVGLSVG by a Gly-Gly spacer was chemically synthesized in its soluble form. The synthetic bi-epitope was used as antigen to coat ELISA plates and assayed with dog sera for in vitro diagnosis of canine visceral leishmaniasis (CVL). The assay proved to be highly sensitive (98%) and specific (99%). CONCLUSIONS/SIGNIFICANCE: Our work suggests that synthetic peptide-based ELISA strategy may be useful for the development of a sensitive and highly specific serodiagnosis for CVL or other parasitic diseases.
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Texto completo: 1 Coleções: 01-internacional Base de dados: MEDLINE Assunto principal: Proteínas de Protozoários / Mapeamento de Epitopos / Epitopos de Linfócito B / Doenças do Cão / Leishmaniose Visceral / Antígenos de Protozoários Tipo de estudo: Diagnostic_studies / Prognostic_studies Limite: Animals Idioma: En Revista: PLoS Negl Trop Dis Assunto da revista: MEDICINA TROPICAL Ano de publicação: 2017 Tipo de documento: Article País de afiliação: Brasil País de publicação: Estados Unidos
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Texto completo: 1 Coleções: 01-internacional Base de dados: MEDLINE Assunto principal: Proteínas de Protozoários / Mapeamento de Epitopos / Epitopos de Linfócito B / Doenças do Cão / Leishmaniose Visceral / Antígenos de Protozoários Tipo de estudo: Diagnostic_studies / Prognostic_studies Limite: Animals Idioma: En Revista: PLoS Negl Trop Dis Assunto da revista: MEDICINA TROPICAL Ano de publicação: 2017 Tipo de documento: Article País de afiliação: Brasil País de publicação: Estados Unidos