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Multiplex Sequential Immunoprecipitation of Insulin Secretory Granule Proteins from Radiolabeled Pancreatic Islets.
Guest, Paul C.
Afiliação
  • Guest PC; Laboratory of Neuroproteomics, Department of Biochemistry and Tissue Biology, Institute of Biology, University of Campinas (UNICAMP), Rua Monteiro Lobato 255 F/01, Cidade Universitária Zeferino Vaz, 13083-862, Campinas, Brazil.
Methods Mol Biol ; 1546: 177-185, 2017.
Article em En | MEDLINE | ID: mdl-27896767
Pulse radiolabeling of cells with radioactive amino acids is a common method for tracking the biosynthesis of proteins. Specific proteins can then be immunoprecipitated and analyzed by electrophoresis and imaging techniques. This chapter presents a protocol for the biosynthetic labeling of pancreatic islets with 35S-methionine, followed by multiplex sequential immunoprecipitation of insulin and three other secretory granule accessory proteins. This provided a means of distinguishing those pancreatic islet proteins with different biosynthetic rates in response to the media glucose concentrations.
Assuntos
Palavras-chave

Texto completo: 1 Coleções: 01-internacional Base de dados: MEDLINE Assunto principal: Ilhotas Pancreáticas / Vesículas Secretórias / Imunoprecipitação / Insulina / Marcação por Isótopo Limite: Animals Idioma: En Revista: Methods Mol Biol Assunto da revista: BIOLOGIA MOLECULAR Ano de publicação: 2017 Tipo de documento: Article País de afiliação: Brasil País de publicação: Estados Unidos

Texto completo: 1 Coleções: 01-internacional Base de dados: MEDLINE Assunto principal: Ilhotas Pancreáticas / Vesículas Secretórias / Imunoprecipitação / Insulina / Marcação por Isótopo Limite: Animals Idioma: En Revista: Methods Mol Biol Assunto da revista: BIOLOGIA MOLECULAR Ano de publicação: 2017 Tipo de documento: Article País de afiliação: Brasil País de publicação: Estados Unidos