Your browser doesn't support javascript.
loading
DNA extraction methods and multiple sampling to improve molecular diagnosis of Sarcocystis spp. in cattle hearts.
Bräunig, Patrícia; Portella, Luiza Pires; Cezar, Alfredo Skrebsky; Libardoni, Felipe; Sangioni, Luis Antonio; Vogel, Fernanda Silveira Flores; Gonçalves, Paulo Bayard Dias.
Afiliação
  • Bräunig P; Laboratório de Doenças Parasitárias (Ladopar), Departamento de Medicina Veterinária Preventiva, Universidade Federal de Santa Maria (UFSM), Av. Roraima 1000, prédio 44, sala 5139, 97105-900, Santa Maria, RS, Brazil. pbraunig@gmail.com.
  • Portella LP; Laboratório de Doenças Parasitárias (Ladopar), Departamento de Medicina Veterinária Preventiva, Universidade Federal de Santa Maria (UFSM), Av. Roraima 1000, prédio 44, sala 5139, 97105-900, Santa Maria, RS, Brazil.
  • Cezar AS; Programa de Pós-Graduação em Economia e Desenvolvimento, UFSM, Rua Mal. Floriano Peixoto 1750, 97015-372, Santa Maria, RS, Brazil.
  • Libardoni F; Laboratório de Microbiologia, Departamento de Estudos Agrários, Universidade Regional do Noroeste do Estado do Rio Grande do Sul (UNIJUÍ), Rua do Comércio 3000, 98700-000, Ijuí, RS, Brazil.
  • Sangioni LA; Laboratório de Doenças Parasitárias (Ladopar), Departamento de Medicina Veterinária Preventiva, Universidade Federal de Santa Maria (UFSM), Av. Roraima 1000, prédio 44, sala 5139, 97105-900, Santa Maria, RS, Brazil.
  • Vogel FS; Laboratório de Doenças Parasitárias (Ladopar), Departamento de Medicina Veterinária Preventiva, Universidade Federal de Santa Maria (UFSM), Av. Roraima 1000, prédio 44, sala 5139, 97105-900, Santa Maria, RS, Brazil.
  • Gonçalves PB; Laboratório de Biotecnologia e Reprodução Animal (BioRep), Departamento de Clínica de Grandes Animais, UFSM, Av. Roraima 1000, Hospital Veterinário, 97105-900, Santa Maria, RS, Brazil.
Parasitol Res ; 115(10): 3913-21, 2016 Oct.
Article em En | MEDLINE | ID: mdl-27277233
Molecular detection of Sarcocystis spp. in tissue samples can be useful for experimental and diagnostic purposes. However, the parasite spreads unevenly through tissues, forming tissue cysts, and the cystic wall is an obstacle in DNA extraction protocols. Therefore, adequate sampling and effective disruption of the cysts are essential to improve the accuracy of DNA detection by PCR. The aims of this study were to evaluate the suitability of four protocols for DNA extraction from cysts of Sarcocystis spp. present in bovine myocardium samples or after their harvest in phosphate-buffered saline (PBS) solution as well as determine the effects of single or multiple sampling on the accuracy of molecular diagnosis of sarcocystosis in cattle hearts. Cysts and myocardium samples from nine bovine hearts were randomly distributed to four DNA extraction protocols: kit, kit with modification, DNAzol, and cetyl-trimethyl ammonium bromide (CTAB). Samples were submitted to DNA extraction and PCR as replicates of each heart (simplicate, duplicate, and triplicate), and the probability of a true positive diagnostic was calculated. Among the protocols tested, the kit with modification was determined to be the most suitable for DNA extraction from cysts in PBS solution (92.6 % of DNA detection by PCR); DNAzol resulted in higher DNA detection frequency from bovine myocardium samples (48.1 %). Multiple sampling improved the molecular diagnosis of Sarcocystis spp. infection in cattle hearts, increasing at 22.2 % the rate of true positive diagnostic.
Assuntos
Palavras-chave
Texto completo
Adicionar na Minha BVS
Imprimir
XML
PubMed Links
Buscar no Google

Texto completo: 1 Coleções: 01-internacional Base de dados: MEDLINE Assunto principal: Manejo de Espécimes / Doenças dos Bovinos / DNA de Protozoário / Sarcocystis / Sarcocistose Tipo de estudo: Diagnostic_studies / Guideline Limite: Animals Idioma: En Revista: Parasitol Res Assunto da revista: PARASITOLOGIA Ano de publicação: 2016 Tipo de documento: Article País de afiliação: Brasil País de publicação: Alemanha
Texto completo
Adicionar na Minha BVS
Imprimir
XML
PubMed Links
Buscar no Google

Texto completo: 1 Coleções: 01-internacional Base de dados: MEDLINE Assunto principal: Manejo de Espécimes / Doenças dos Bovinos / DNA de Protozoário / Sarcocystis / Sarcocistose Tipo de estudo: Diagnostic_studies / Guideline Limite: Animals Idioma: En Revista: Parasitol Res Assunto da revista: PARASITOLOGIA Ano de publicação: 2016 Tipo de documento: Article País de afiliação: Brasil País de publicação: Alemanha