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Ischemia-reperfusion model in rat spinal cord: cell viability and apoptosis signaling study.
de Lavor, Mário Sérgio Lima; Binda, Nancy Scardua; Fukushima, Fabíola Bono; Caldeira, Fátima Maria Caetano; da Silva, Juliana Figueira; Silva, Carla Maria Osório; de Oliveira, Karen Maciel; Martins, Bernardo de Caro; Torres, Bruno Benetti Junta; Rosado, Isabel Rodrigues; Gomez, Renato Santiago; Gomez, Marcus Vinícius; de Melo, Eliane Gonçalves.
Afiliação
  • de Lavor MS; Departamento de Clínica e Cirurgia Veterinárias, Escola de Veterinária, Universidade Federal de Minas Gerais Belo Horizonte, Minas Gerais, Brasil ; Departamento de Ciências Agrárias e Ambientais, Universidade Estadual de Santa Cruz Ilhéus, Bahia, Brasil.
  • Binda NS; INCT, Laboratório de Neurociências, Faculdade de Medicina, Universidade Federal de Minas Gerais Belo Horizonte, Minas Gerais.
  • Fukushima FB; Departamento de Clínica e Cirurgia Veterinárias, Escola de Veterinária, Universidade Federal de Minas Gerais Belo Horizonte, Minas Gerais, Brasil.
  • Caldeira FM; Departamento de Clínica e Cirurgia Veterinárias, Escola de Veterinária, Universidade Federal de Minas Gerais Belo Horizonte, Minas Gerais, Brasil.
  • da Silva JF; INCT, Laboratório de Neurociências, Faculdade de Medicina, Universidade Federal de Minas Gerais Belo Horizonte, Minas Gerais.
  • Silva CM; Departamento de Clínica e Cirurgia Veterinárias, Escola de Veterinária, Universidade Federal de Minas Gerais Belo Horizonte, Minas Gerais, Brasil.
  • de Oliveira KM; Departamento de Clínica e Cirurgia Veterinárias, Escola de Veterinária, Universidade Federal de Minas Gerais Belo Horizonte, Minas Gerais, Brasil.
  • Martins Bde C; Departamento de Clínica e Cirurgia Veterinárias, Escola de Veterinária, Universidade Federal de Minas Gerais Belo Horizonte, Minas Gerais, Brasil.
  • Torres BB; Departamento de Clínica e Cirurgia Veterinárias, Escola de Veterinária, Universidade Federal de Minas Gerais Belo Horizonte, Minas Gerais, Brasil.
  • Rosado IR; Departamento de Clínica e Cirurgia Veterinárias, Escola de Veterinária, Universidade Federal de Minas Gerais Belo Horizonte, Minas Gerais, Brasil.
  • Gomez RS; INCT, Laboratório de Neurociências, Faculdade de Medicina, Universidade Federal de Minas Gerais Belo Horizonte, Minas Gerais.
  • Gomez MV; INCT, Laboratório de Neurociências, Faculdade de Medicina, Universidade Federal de Minas Gerais Belo Horizonte, Minas Gerais.
  • de Melo EG; Departamento de Clínica e Cirurgia Veterinárias, Escola de Veterinária, Universidade Federal de Minas Gerais Belo Horizonte, Minas Gerais, Brasil.
Int J Clin Exp Pathol ; 8(9): 9941-9, 2015.
Article em En | MEDLINE | ID: mdl-26617703
This work aimed at determining the ideal ischemia time in an in vitro ischemia-reperfusion model of spinal cord injury. Rat spinal cord slices were prepared and then exposed or not to oxygen deprivation and low glucose (ODLG) for 30, 45, 60, 75 and 90 minutes. Cell viability was assessed by triphenyltetrazolium (TTC), lactate dehydrogenase (LDH) release, and fluorochrome dyes specific for cell dead (ethidium homodimer) using the apotome system. Glutamate release was enzymatically measured by a fluorescent method. Gene expression of apoptotic factors was assessed by real time RT-PCR. Whereas spinal cord slices exposed to ODLG exhibited mild increase in fluorescence for 30 minutes after the insult, the 45, 60, 75 and 90 minutes caused a 2-fold increase. ODLG exposure for 45, 60, 75 or 90 minutes, glutamate and LDH release were significantly elevated. nNOS mRNA expression was overexpressed for 45 minutes and moderately increased for 60 minutes in ODLG groups. Bax/bcl-xl ratio, caspase 9 and caspase 3 mRNA expressions were significantly increased for 45 minutes of ODLG, but not for 30, 60, 75 and 90 minutes. Results showed that cell viability reduction in the spinal cord was dependent on ischemic time, resulting in glutamate and LDH release. ODLG for 45 minutes was adequate for gene expression evaluation of proteins and proteases involved in apoptosis pathways.
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Texto completo: 1 Coleções: 01-internacional Base de dados: MEDLINE Assunto principal: Traumatismo por Reperfusão / Isquemia do Cordão Espinal / Modelos Animais de Doenças Tipo de estudo: Prognostic_studies Limite: Animals Idioma: En Revista: Int J Clin Exp Pathol Assunto da revista: PATOLOGIA Ano de publicação: 2015 Tipo de documento: Article País de afiliação: Brasil País de publicação: Estados Unidos
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