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Approach toward an efficient inoculum preparation stage for suspension BHK-21 cell culture.
Fernández Núñez, Eutimio Gustavo; Leme, Jaci; de Almeida Parizotto, Letícia; de Rezende, Alexandre Gonçalves; da Costa, Bruno Labate Vale; Boldorini, Vera Lucia Lopes; Jorge, Soraia Attie Calil; Astray, Renato Mancini; Pereira, Carlos Augusto; Caricati, Celso Pereira; Tonso, Aldo.
Afiliação
  • Fernández Núñez EG; Laboratório de Células Animais, Departamento de Engenharia Química, Escola Politécnica, Universidade de São Paulo, Av. Prof. Luciano Gualberto, trav. 3, 380, Butantã, São Paulo, SP, 05508-900, Brazil. eutimiocu@yahoo.com.
  • Leme J; Departamento de Ciências Biológicas, Universidade Estadual "Júlio de Mesquita Filho", Campus-Assis, Avenida Dom Antonio 2100, Bairro Parque Universitário, 19806-900, Assis, SP, Brazil. eutimiocu@yahoo.com.
  • de Almeida Parizotto L; Laboratório Especial de Pesquisa e Desenvolvimento em Imunológicos Veterinários, Instituto Butantan, Av. Vital Brasil, 1500, Butantã, 05503-900, São Paulo, SP, Brazil.
  • de Rezende AG; Laboratório de Células Animais, Departamento de Engenharia Química, Escola Politécnica, Universidade de São Paulo, Av. Prof. Luciano Gualberto, trav. 3, 380, Butantã, São Paulo, SP, 05508-900, Brazil.
  • da Costa BLV; Laboratório de Imunologia Viral, Instituto Butantan, Av. Vital Brasil, 1500, Butantã, São Paulo, SP, 05503-900, Brazil.
  • Boldorini VLL; Laboratório de Biotecnologia Industrial, Núcleo de Bionanomanufatura, Instituto de Pesquisas Tecnológicas do Estado de São Paulo, Av. Prof. Almeida Prado 532 Cid. Universitária - Butantã, São Paulo, SP, 05508-901, Brazil.
  • Jorge SAC; Laboratório de Imunologia Viral, Instituto Butantan, Av. Vital Brasil, 1500, Butantã, São Paulo, SP, 05503-900, Brazil.
  • Astray RM; Laboratório de Imunologia Viral, Instituto Butantan, Av. Vital Brasil, 1500, Butantã, São Paulo, SP, 05503-900, Brazil.
  • Pereira CA; Laboratório de Imunologia Viral, Instituto Butantan, Av. Vital Brasil, 1500, Butantã, São Paulo, SP, 05503-900, Brazil.
  • Caricati CP; Laboratório de Células Animais, Departamento de Engenharia Química, Escola Politécnica, Universidade de São Paulo, Av. Prof. Luciano Gualberto, trav. 3, 380, Butantã, São Paulo, SP, 05508-900, Brazil.
  • Tonso A; Laboratório de Imunologia Viral, Instituto Butantan, Av. Vital Brasil, 1500, Butantã, São Paulo, SP, 05503-900, Brazil.
Cytotechnology ; 68(1): 95-104, 2016 Jan.
Article em En | MEDLINE | ID: mdl-24942228
Mammalian cells are the most frequently used hosts for biopharmaceutical proteins manufacturing. Inoculum quality is a key element for establishing an efficient bioconversion process. The main objective in inoculation expansion process is to generate large volume of viable cells in the shortest time. The aim of this paper was to optimize the inoculum preparation stage of baby hamster kidney (BHK)-21 cells for suspension cultures in benchtop bioreactors, by means of a combination of static and agitated culture systems. Critical parameters for static (liquid column height: 5, 10, 15 mm) and agitated (working volume: 35, 50, 65 mL, inoculum volume percentage: 10, 30 % and agitation speed: 25, 60 rpm) cultures were study in T-flask and spinner flask, respectively. The optimal liquid column height was 5 mm for static culture. The maximum viable cell concentration in spinner flask cultures was reached with 50 mL working volume and the inoculum volume percentage was not significant in the range under study (10-30 %) at 25 rpm agitation. Agitation speed at 60 rpm did not change the main kinetic parameters with respect to those observed for 25 rpm. These results allowed for a schedule to produce more than 4 × 10(9) BHK-21 cells from 4 × 10(6) cells in 13 day with 1,051 mL culture medium.
Palavras-chave

Texto completo: 1 Coleções: 01-internacional Base de dados: MEDLINE Idioma: En Revista: Cytotechnology Assunto da revista: BIOTECNOLOGIA / GENETICA Ano de publicação: 2016 Tipo de documento: Article País de afiliação: Brasil País de publicação: Estados Unidos

Texto completo: 1 Coleções: 01-internacional Base de dados: MEDLINE Idioma: En Revista: Cytotechnology Assunto da revista: BIOTECNOLOGIA / GENETICA Ano de publicação: 2016 Tipo de documento: Article País de afiliação: Brasil País de publicação: Estados Unidos