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Production and characterization of monoclonal antibodies anti fragment Fc of bovine IgG
Penha, Tânia Regina; Krüger, Ernesto Renato; Thomaz-Soccol, Vanete; Agottani, Jorge Victor Bacila; Itano, Flávio Hiroshi; Troiano, Ludmilla Della Coletta; Brodzinski, Josiane.
Afiliação
  • Penha, Tânia Regina; Instituto de Tecnologia do Paraná. Curitiba. BR
  • Krüger, Ernesto Renato; Centro de Diagnóstico Marcos Enrietti. Curitiba. BR
  • Thomaz-Soccol, Vanete; Universidade Federal do Paraná. Curitiba. BR
  • Agottani, Jorge Victor Bacila; Instituto de Tecnologia do Paraná. Curitiba. BR
  • Itano, Flávio Hiroshi; Instituto de Tecnologia do Paraná. Curitiba. BR
  • Troiano, Ludmilla Della Coletta; Instituto de Tecnologia do Paraná. Curitiba. BR
  • Brodzinski, Josiane; Instituto de Tecnologia do Paraná. Curitiba. BR
Braz. arch. biol. technol ; Braz. arch. biol. technol;53(1): 105-114, Jan.-Feb. 2010. ilus
Article em En | LILACS | ID: lil-543214
Biblioteca responsável: BR1.1
ABSTRACT
The aim of this work was to produce and characterize monoclonal antibodies anti bovine immunoglobulin G (IgG). Out of seven hybridomas, two were chosen based on the ELISA'S absorbance values and were labeled B4F11 and B3H12. These monoclonals were analyzed through Western Blot for IgG fragments obtained by proteolysis with papain, separated by electrophoresis in polyacrylamide gel electrophoresis with â-mercaptoetanol as reducing agent. This revealed that, possibly, the B4F11 was directed to a conformational antigen, and that B3H12 reacted in a specific fashion with Fc (Bovine IgG crystallizable fragment). This antibody could be used in the development of reagents to immunoassays relevant for research and diagnosis.
RESUMO
No Brasil, anticorpos anti-espécie específica usados em métodos de diagnóstico geralmente são importados, aumentando o custo das análises. Visando produzir insumos para métodos diagnóstico por enzimaimunoensaio, o presente trabalho teve como objetivo produzir e caracterizar anticorpos monoclonais anti imunoglobulina G (IgG) bovina. De sete hibridomas obtidos e que apresentaram valores relevantes de absorbância em teste imunoenzimático (ELISA indireta), dois clones com melhor performance foram selecionados e designados B4F11 e B3H12. Estes anticorpos monoclonais foram analisados em Western Blot para reatividade com fragmentos de IgG bovina, obtidos por proteólise com papaína e separados por eletroforese em gel de poliacrilamida, com presença do agente redutor beta-mercaptoetanol. A eletroforese mostrou que o anticorpo B4F11, foi direcionado para um antígeno conformacional, e que o monoclonal B3H12 reagiu especificamente com a porção Fc da IgG bovina (fragmento cristalizável). Este anticorpo será utilizado no desenvolvimento de reagentes para imunoensaios de interesse à pesquisa e diagnósticos.
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Texto completo: 1 Coleções: 01-internacional Base de dados: LILACS Idioma: En Revista: Braz. arch. biol. technol Assunto da revista: BIOLOGIA Ano de publicação: 2010 Tipo de documento: Article País de afiliação: Brasil País de publicação: Brasil
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