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More productive in vitro culture of Cryptosporidium parvum for better study of the intra- and extracellular phases
Perez Cordón, G; Marin, C; Romero, D; Rosales, C; Sánchez Moreno, M; Rosales, M. J.
Afiliação
  • Perez Cordón, G; Universidad de Granada. Instituto de Biotecnología. Facultad de Ciencias. Departamento de Parasitologia. ES
  • Marin, C; Universidad de Granada. Instituto de Biotecnología. Facultad de Ciencias. Departamento de Parasitologia. ES
  • Romero, D; Universidad de Granada. Instituto de Biotecnología. Facultad de Ciencias. Departamento de Parasitologia. ES
  • Rosales, C; Universidad de Granada. Instituto de Biotecnología. Facultad de Ciencias. Departamento de Parasitologia. ES
  • Sánchez Moreno, M; Universidad de Granada. Instituto de Biotecnología. Facultad de Ciencias. Departamento de Parasitologia. ES
  • Rosales, M. J; Universidad de Granada. Instituto de Biotecnología. Facultad de Ciencias. Departamento de Parasitologia. ES
Mem. Inst. Oswaldo Cruz ; 102(5): 567-571, Aug. 2007. ilus, tab
Article em En | LILACS | ID: lil-458623
Biblioteca responsável: BR1.1
ABSTRACT
The great difficulties in treating people and animals suffering from cryptosporidiosis have prompted the development of in vitro experimental models. Due to the models of in vitro culture, new extracellular stages of Cryptosporidium have been demonstrated. The development of these extracellular phases depends on the technique of in vitro culture and on the species and genotype of Cryptosporidium used. Here, we undertake the molecular characterization by polymerase chain reaction-restriction fragment lenght polymorphism of different Cryptosporidium isolates from calves, concluding that all are C. parvum of cattle genotype, although differing in the nucleotide at positions 472 and 498. Using these parasites, modified the in vitro culture technique for HCT-8 cells achieving greater multiplication of parasites. The HCT-8 cell cultures, for which the culture had not been renewed in seven days, were infected with C. parvum sporozoites in RPMI-1640 medium with 10 percent IFBS, CaCl2 and MgCl2 1 mM at pH 7.2. Percentages of cell parasitism were increased with respect to control cultures (71 percent at 48 h vs 14.5 percent), even after two weeks (47 percent vs 1.9 percent). Also, the percentage of extracellular stages augmented (25.3 percent vs 1.1 percent at 96 h). This new model of in vitro culture of C. parvum will enable easier study of the developmental phases of C. parvum in performing new chemotherapeutic assays.
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Texto completo: 1 Coleções: 01-internacional Base de dados: LILACS Assunto principal: Cryptosporidium / Estágios do Ciclo de Vida Tipo de estudo: Prognostic_studies Limite: Animals Idioma: En Revista: Mem. Inst. Oswaldo Cruz Assunto da revista: MEDICINA TROPICAL / PARASITOLOGIA Ano de publicação: 2007 Tipo de documento: Article País de afiliação: Espanha País de publicação: Brasil
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