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SARS-CoV-2 RNA extraction using magnetic beads for rapid large-scale testing by RT-qPCR and RT-LAMP
Preprint
en En
| PREPRINT-MEDRXIV
| ID: ppmedrxiv-20147561
Artículo de revista
Un artículo publicado en revista científica está disponible y probablemente es basado en este preprint, por medio del reconocimiento de similitud realizado por una máquina. La confirmación humana aún está pendiente.
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ABSTRACT
Rapid large-scale testing is essential for controlling the ongoing pandemic of severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2). The standard diagnostic pipeline for testing SARS-CoV-2 presence in patients with an ongoing infection is predominantly based on pharyngeal swabs, from which the viral RNA is extracted using commercial kits followed by reverse transcription and quantitative PCR detection. As a result of the large demand for testing, commercial RNA extraction kits may be limited and alternative, non-commercial protocols are needed. Here, we provide a magnetic bead RNA extraction protocol that is predominantly based on in-house made reagents and is performed in 96-well plates supporting large-scale testing. Magnetic bead RNA extraction was benchmarked against the commercial QIAcube extraction platform. Comparable viral RNA detection sensitivity and specificity were obtained by fluorescent and colorimetric RT-LAMP using N primers, as well as RT-qPCR using E gene primers showing that the here presented RNA extraction protocol can be combined with a variety of detection methods at high throughput. Importantly, the presented diagnostic workflow can be quickly set up in a laboratory without access to an automated pipetting robot.
cc_no
Texto completo:
1
Colección:
09-preprints
Base de datos:
PREPRINT-MEDRXIV
Tipo de estudio:
Diagnostic_studies
Idioma:
En
Año:
2020
Tipo del documento:
Preprint