AtNPR4 from Arabidopsis thaliana: expression, purification, crystallization and crystallographic analysis.

Yang, Qingzhan; Zhang, Mengze; Zheng, Jimin; Jia, Zongchao

Yang, Qingzhan; Zhang, Mengze; Zheng, Jimin; Jia, Zongchao.

Afiliación

Yang Q; College of Chemistry, Beijing Normal University, Beijing 100875, People's Republic of China.
Zhang M; College of Chemistry, Beijing Normal University, Beijing 100875, People's Republic of China.
Zheng J; College of Chemistry, Beijing Normal University, Beijing 100875, People's Republic of China.
Jia Z; Department of Biomedical and Molecular Sciences, Queen's University, Kingston, Ontario K7L 3N6, Canada.

Acta Crystallogr F Struct Biol Commun ; 75(Pt 1): 67-72, 2019 Jan 01.

Article en En | MEDLINE | ID: mdl-30605128

RESUMEN

Salicylic acid (SA) is an important phytohormone that is involved in the regulation of plant defence, growth and development. A large number of proteins have been shown to have the ability to interact with SA, and NPR4 has been demonstrated to be a receptor of SA that plays significant roles in the innate immune response of plants. In this study, Spodoptera frugiperda (Sf9) cells were used to express full-length AtNPR4 from Arabidopsis thaliana. To facilitate crystallization, T4 lysozyme (T4L) was added to the N-terminus of the AtNPR4 protein. The recombinant T4L-AtNPR4 protein was expressed, purified and crystallized using the sitting-drop and hanging-drop vapour-diffusion methods. The T4L-AtNPR4 crystals have symmetry consistent with space group C2, with unit-cell parameters a = 93.7, b = 85.8, c = 88.2âÅ, ß = 90° and one molecule per asymmetric unit. The best crystal diffracted to a resolution of 2.75âÅ. Structure determination is in progress.

Asunto(s)

Proteínas de Arabidopsis/química; Arabidopsis/química; Proteínas Recombinantes de Fusión/química; Secuencia de Aminoácidos; Animales; Arabidopsis/genética; Arabidopsis/inmunología; Proteínas de Arabidopsis/genética; Proteínas de Arabidopsis/inmunología; Bacteriófago T4/química; Bacteriófago T4/genética; Bacteriófago T4/metabolismo; Baculoviridae/genética; Baculoviridae/metabolismo; Clonación Molecular; Cristalización; Cristalografía por Rayos X; Expresión Génica; Vectores Genéticos/química; Vectores Genéticos/metabolismo; Muramidasa/química; Muramidasa/genética; Muramidasa/metabolismo; Inmunidad de la Planta/genética; Isoformas de Proteínas/química; Isoformas de Proteínas/genética; Isoformas de Proteínas/inmunología; Proteínas Recombinantes de Fusión/genética; Proteínas Recombinantes de Fusión/inmunología; Proteínas Recombinantes/química; Proteínas Recombinantes/genética; Proteínas Recombinantes/metabolismo; Ácido Salicílico/química; Ácido Salicílico/inmunología; Ácido Salicílico/metabolismo; Alineación de Secuencia; Homología de Secuencia de Aminoácido; Células Sf9; Spodoptera; Proteínas Virales/química; Proteínas Virales/genética; Proteínas Virales/metabolismo

Palabras clave

Arabidopsis thaliana; crystal diffraction; protein purification; regulatory mechanism; salicylic acid; systemic acquired resistance

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Texto completo: 1 Colección: 01-internacional Base de datos: MEDLINE Asunto principal: Proteínas Recombinantes de Fusión / Arabidopsis / Proteínas de Arabidopsis Idioma: En Revista: Acta Crystallogr F Struct Biol Commun Año: 2019 Tipo del documento: Article Pais de publicación: Estados Unidos

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