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Proteinase 3, the Wegener autoantigen, is externalized during neutrophil apoptosis: evidence for a functional association with phospholipid scramblase 1 and interference with macrophage phagocytosis.
Kantari, Chahrazade; Pederzoli-Ribeil, Magali; Amir-Moazami, Omid; Gausson-Dorey, Valérie; Moura, Ivan Cruz; Lecomte, Marie-Christine; Benhamou, Marc; Witko-Sarsat, Véronique.
Afiliación
  • Kantari C; Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale, U845, Paris, France
Blood ; 110(12): 4086-95, 2007 Dec 01.
Article en En | MEDLINE | ID: mdl-17712045
Proteinase 3 (PR3), a serine proteinase contained in neutrophil azurophilic granules, is considered a risk factor for vasculitides and rheumatoid arthritis when expressed on the outer leaflet of neutrophil plasma membrane and is the preferred target of antineutrophil cytoplasm autoantibodies (ANCA) in Wegener granulomatosis. ANCA binding to PR3 expressed at the surface of neutrophils activates them. Evidence is provided that neutrophil apoptosis induced significantly more membrane PR3 expression without degranulation (but no enhanced membrane CD35, CD66b, CD63, myeloperoxidase, or elastase expression). This observation was confirmed on cytoplasts, a model of granule-free neutrophils. We hypothesized that PR3 could interact with proteins involved in membrane flip-flop (eg, phospholipid scramblase 1 [PLSCR1]). PR3-PLSCR1 interaction in neutrophils was demonstrated by confocal microscopy and coimmunoprecipitation. In the RBL-2H3 rat mast-cell line stably transfected with PR3 or its inactive mutant (PR3S203A), PR3 externalization depended on PLSCR1, as shown by less PR3 externalization in the presence of rPLSCR1 siRNA, but independently of its serine-proteinase activity. Finally, apoptosis-externalized PR3 decreased the human macrophage-phagocytosis rate of apoptotic PR3 transfectants. Therefore, in addition to ANCA binding in vasculitis, the proinflammatory role of membrane PR3 expression may involve interference with macrophage clearance of apoptotic neutrophils.
Asunto(s)
Apoptosis; Macrófagos/enzimología; Mieloblastina/metabolismo; Neutrófilos/enzimología; Fagocitosis; Proteínas de Transferencia de Fosfolípidos/metabolismo; Animales; Anticuerpos Anticitoplasma de Neutrófilos/inmunología; Anticuerpos Anticitoplasma de Neutrófilos/metabolismo; Antígenos CD/genética; Antígenos CD/inmunología; Antígenos CD/metabolismo; Apoptosis/genética; Apoptosis/inmunología; Artritis Reumatoide/enzimología; Artritis Reumatoide/genética; Artritis Reumatoide/inmunología; Línea Celular; Membrana Celular/enzimología; Membrana Celular/genética; Membrana Celular/inmunología; Regulación Enzimológica de la Expresión Génica/inmunología; Granulomatosis con Poliangitis/enzimología; Granulomatosis con Poliangitis/genética; Granulomatosis con Poliangitis/inmunología; Humanos; Macrófagos/inmunología; Mastocitos/enzimología; Mastocitos/inmunología; Mutación/inmunología; Mieloblastina/genética; Mieloblastina/inmunología; Activación Neutrófila/genética; Activación Neutrófila/inmunología; Neutrófilos/inmunología; Neutrófilos/metabolismo; Elastasa Pancreática/genética; Elastasa Pancreática/inmunología; Elastasa Pancreática/metabolismo; Peroxidasa/genética; Peroxidasa/inmunología; Peroxidasa/metabolismo; Fagocitosis/genética; Fagocitosis/inmunología; Proteínas de Transferencia de Fosfolípidos/genética; Proteínas de Transferencia de Fosfolípidos/inmunología; Transporte de Proteínas/genética; Transporte de Proteínas/inmunología; ARN Interferente Pequeño/genética; ARN Interferente Pequeño/inmunología; Ratas; Factores de Riesgo; Vesículas Secretoras/enzimología; Vesículas Secretoras/genética; Vesículas Secretoras/inmunología; Vasculitis/enzimología
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Colección: 01-internacional Base de datos: MEDLINE Asunto principal: Fagocitosis / Apoptosis / Proteínas de Transferencia de Fosfolípidos / Mieloblastina / Macrófagos / Neutrófilos Tipo de estudio: Etiology_studies / Prognostic_studies / Risk_factors_studies Idioma: En Revista: Blood Año: 2007 Tipo del documento: Article País de afiliación: Francia Pais de publicación: Estados Unidos
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Colección: 01-internacional Base de datos: MEDLINE Asunto principal: Fagocitosis / Apoptosis / Proteínas de Transferencia de Fosfolípidos / Mieloblastina / Macrófagos / Neutrófilos Tipo de estudio: Etiology_studies / Prognostic_studies / Risk_factors_studies Idioma: En Revista: Blood Año: 2007 Tipo del documento: Article País de afiliación: Francia Pais de publicación: Estados Unidos