Expression, purification, and circular dichroism analysis of human CDK9.

Leopoldino, Andreia Machado; Canduri, Fernanda; Cabral, Hamilton; Junqueira, Magno; de Marqui, Alessandra Bernadete Trovó; Apponi, Luciano H; da Fonseca, Isabel Osório; Domont, Gilberto Barbosa; Santos, Diógenes S; Valentini, Sandro; Bonilla-Rodriguez, Gustavo Orlando; Fossey, Marcelo Andrés; de Azevedo, Walter Filgueira; Tajara, Eloiza Helena

Leopoldino, Andreia Machado; Canduri, Fernanda; Cabral, Hamilton; Junqueira, Magno; de Marqui, Alessandra Bernadete Trovó; Apponi, Luciano H; da Fonseca, Isabel Osório; Domont, Gilberto Barbosa; Santos, Diógenes S; Valentini, Sandro; Bonilla-Rodriguez, Gustavo Orlando; Fossey, Marcelo Andrés; de Azevedo, Walter Filgueira; Tajara, Eloiza Helena.

Afiliación

Leopoldino AM; Faculdade de Medicina de São José do Rio Preto, SP, Brazil.

Protein Expr Purif ; 47(2): 614-20, 2006 Jun.

Article en En | MEDLINE | ID: mdl-16580843

RESUMEN

The human cyclin-dependent kinase 9 (CDK9) protein was expressed in E. coli BL21 using the pET23a vector at 30 degrees C. Several milligrams of protein were purified from soluble fraction using ionic exchange and ATP-affinity chromatography. The structural quality of recombinant CDK9 and the estimation of its secondary structure were obtained by circular dichroism. Structural models of CDK9 presented 26% of helices in agreement with the spectra by circular dichroism analysis. This is the first report on human CDK9 expression in Escherichia coli and structure analysis and provides the first step for the development of CDK9 inhibitors.

Asunto(s)

Quinasa 9 Dependiente de la Ciclina/biosíntesis; Quinasa 9 Dependiente de la Ciclina/aislamiento & purificación; Escherichia coli; Proteínas Recombinantes/biosíntesis; Proteínas Recombinantes/aislamiento & purificación; Dicroismo Circular; Quinasa 9 Dependiente de la Ciclina/antagonistas & inhibidores; Quinasa 9 Dependiente de la Ciclina/química; Quinasa 9 Dependiente de la Ciclina/genética; Inhibidores Enzimáticos/química; Escherichia coli/genética; Expresión Génica; Humanos; Modelos Moleculares; Estructura Secundaria de Proteína; Estructura Terciaria de Proteína

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Colección: 01-internacional Base de datos: MEDLINE Asunto principal: Proteínas Recombinantes / Quinasa 9 Dependiente de la Ciclina / Escherichia coli Límite: Humans Idioma: En Revista: Protein Expr Purif Asunto de la revista: BIOLOGIA MOLECULAR Año: 2006 Tipo del documento: Article País de afiliación: Brasil Pais de publicación: Estados Unidos

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