RESUMO
A sensitive and automated method is described for determination of rifampicin in plasma samples for therapeutic drug monitoring by in-tube solid-phase microextraction coupled with liquid chromatography (in-tube SPME/LC). Important factors in the optimization of in-tube SPME are discussed, such as coating type, sample pH, sample draw/eject volume, number of draw/eject cycles, and draw/eject flow rate. Analyte pre-concentrated in the polyethylene glycol phase was directly transferred to the liquid chromatographic column by percolation of the mobile phase, without carryover. The method was linear over the 0.1-100 µg/mL range, with a linear coefficient value (r(2)) of 0.998. The inter-assay precision presented coefficient of variation ≤ 1.7%. The effectiveness and practicability of the proposed method are proven by analysis of plasma samples from ageing patients undergoing therapy with rifampicin.
Assuntos
Cromatografia Líquida/métodos , Rifampina/sangue , Rifampina/isolamento & purificação , Microextração em Fase Sólida/métodos , Automação , HumanosRESUMO
Objetivo. Determinar las manifestaciones asociadas con la infección por M. tuberculosis resistente y la susceptibilidad antimicrobiana de aislados de pacientes mexicanos. Diseño. Vigilancia epidemiológica. Sitio. Centro de tercer nivel. Pacientes. Casos de tuberculosis confirmada. Mediciones. Resistencia primaria: cuando no hubo antecedente de tratamiento, y secundaria cuando lo hubo. Se emplearon las siguientes concentraciones críticas (µg/mL): son isoniacida 0.2 y 1; rifampicina 1 y 5; etambutol 5 y 10; estreptomicina 2 y 10; etionamida 5; kanamicina 6; y ácido paraaminosalicílio (PAS) 2 y 10. Resultados. Se incluyeron 84 pacientes con edad promedio de 44.7 años (6-80 años); 54 hombres (64 por ciento) y 30 mujeres (36 por ciento). La mayoría (35/62) del Distrito Federal y del Estado de México. Sólo en 34 pacientes se obtuvo información clínica: 26 presentaron fiebre y pérdida de peso, y ocho síntomas respiratorios. Se encontraron 59 pacientes (70 por ciento) con M. tuberculosis sensible y 25 resistente (30 por ciento). En 17 (68 por ciento) hubo resistencia a dos drogas y 16 (64 por ciento) de ellos a isoniacida y rifampicina. La tasa de resistencia global fue: isoniacida 24 por ciento, rifampicina 19 por ciento, estreptomicina 12 por ciento, etambutol 10 por ciento, PAS 9 por ciento, etianamida 7 por ciento y kanamicina 6 por ciento. En 47 pacientes sin tratamiento previo, ocho tuvieron infección por organismos resistentes (17 por ciento), y la tasa de resistencia primaria fue: isoniacida 9 por ciento, rifampicina 6 por ciento, estreptomicina 2 por ciento, etambutol 2 por ciento, PAS 6 por ciento y multirresistencia 6 por ciento. De 37 pacientes con tratamiento previo, 17 (46 por ciento) tuvieron un organismo resistente, y la tasa de resistencia secundaria fue: isoniacida 44 por ciento, rifampicina 35 por ciento, estreptomicina 24 por ciento, etambutol 19 por ciento, PAS 12 por ciento y multirresistencia 35 por ciento. Incluimos cuatro médicos con M. tuberculosis mono o multirresistente y siete pacientes con SIDA, uno de ellos con multirresistencia y otro con resistenia a isoniacida. Conclusión. Los resultados muestran tasas elevadas de resistencia a isoniacida y rifampicina, y de multirresistencia en M. tuberculosis aislado de pacientes mexicanos
Assuntos
Adulto , Pessoa de Meia-Idade , Humanos , Masculino , Feminino , Meios de Cultura , Resistência Microbiana a Medicamentos , Isoniazida/isolamento & purificação , Mycobacterium tuberculosis/efeitos dos fármacos , Mycobacterium tuberculosis/isolamento & purificação , Rifampina/isolamento & purificação , Estreptomicina/isolamento & purificação , Tuberculose Resistente a Múltiplos Medicamentos , Tuberculose/tratamento farmacológico , Tuberculose/microbiologiaRESUMO
Two methods for the assay of rifampicin in serum are described. The first is a conventional plate diffusion method, measuring concentrations down to 0,02 ug/ml, and the second a chemical extraction followed by measurement of the inhibition of uptake of 14C-uridine by Staphylococcus aureus, which estimetes in the range of 0,02 to 0,001 ug/ml. The methods were ussed to measure serum concentrations in man following doses of about 1050 mg and 75 mg rifampicin.