RESUMO
O proposito da implantacao do laboratorio de fracionamento de plasma humano para isolar varios componentes proteicos tais como albumina, imunoglobulina G endovenosa (IgG), Fator VIII e IX para uso interno do Hospital das Clinicas da Faculdade de Medicina da Universidade de Sao Paulo, foi solucionar parcialmente o grande problema da escassez destes produtos, alem de seus precos elevados. Iniciou-se com o isolamento da albumina, quanto a imunoglobulina G a mesma se encontra em adiantada fase experimental. A opcao pelo metodo de cromatografia em coluna foi devido a limitada area fisica disponivel e por ser este processo considerado uma tecnologia de ponta, e de provavel preferencia na aplicacao industrial no futuro. Os geis usados na cromatografia em coluna para essa finalidade foram: de troca ionica DEAE-Sepharose FF, CM-Sepharose FF, e de filtracao tipo Sephadex G-25 e Sephacryl S-200 HR. Para alcancar esse objetivo foi necessario introduzir certas modificacoes e adaptacoes inerentes a cada etapa de fracionamento, obtendo-se assim uma albumina de alta qualidade, comparavel as comercialmente conhecidas
Assuntos
Humanos , Albuminas/isolamento & purificação , Fracionamento Químico , Cromatografia , Laboratórios , Estabilidade de Medicamentos , Armazenamento de Medicamentos , Proteínas/sangue , Controle de Qualidade , Tecnologia FarmacêuticaRESUMO
In the present study we have documented the use of the reagent p-benzoquinone (PBQ) for the spectrophotometric determination of total protein in blood plasma. Since the products of reaction are stable for several hours at room temperature after the 20-min boiling step, the time at which absorbance is measured is not a critical factor. Common anticoagulants such as EDTYA, citrate, or heparin do not interfere with the PBQ method at concentrations used in clinical laboratories. The products of the reaction between PBQ and either plasma (specific absorbance 2.33 x 10-3 ñ 0.20 x 10-3 ug cm -2) or purified proteins (specific absorbance 2.61 x 10-3 ñ 0.31 x 10-3 ug cm-2) show an absorption band at 350 nm, which follows Beer's law, and therefore can be used for analytical purposes. The PBQ method has a lower limit of detection (4 ug/ml) than that of biuret method (45 yg/ml) for a final reaction mixture of 5.0 and 4.2 ml, respectively
Assuntos
Anticoagulantes , Benzoquinonas , Proteínas/sangue , Espectrofotometria , Citratos , Ácido Edético , HeparinaRESUMO
Extensöes de sangue periférico de aves (macho e fêmea), foram submetidas a um estudo topoquímico que permitiu as seguintes conclusöes: com o PAS, a presença de glicogênio nos trombócitos e alguns heterófilos; com o azul de bromofenol (proteína) positividade em todos os elementos celulares, com intensa reatividade da regiäo equatorial dos grânulos fusiformes de heterófilos; com o método da orto-toluidina-água oxigenada (mieloperoxidase), reatividade discutível nos polimorfonucleares e negativa nos demais tipos de células e com Sudan black (lipídios) uma positividade em alguns heterófilos, eosinófilos e monócitos
Assuntos
Animais , Células Sanguíneas/química , Galinhas , Histocitoquímica/métodos , Compostos Azo , Glicogênio/sangue , Lipídeos/sangue , Reação do Ácido Periódico de Schiff , Peroxidase/sangue , Proteínas/sangueRESUMO
En el presente trabajo describimos dos pacientes portadores de mieloma múltiple, de clase IgD (tipo Kappa y lambda), encontrados sobre 5 casos de mieloma múltiple, que hemos tenido oportunidad de estudiar en la provincia de Formosa (Argentina), entre los años 1985 y 1988. En todos los casos, además de los estudios hematológicos correspondientes, se utilizan métodos simples y relativamente poco costosos (Proteinograma, inmunoelectroforesis, electroinmunofijación), para arribar al diagnóstico. Los dos pacientes con MM IgD concurren a la consulta hematológica para investigación de anemia refractaria. Ninguno de ellos presentó hipercalcemia importante y sólo uno evidenció alteraciones óseas, al estudio radiológico. El tiempo de sobrevida desde el momento del diagnóstico fue de cuatro meses en ambos casos. Al igual que otros autores, concordamos en que la frecuencia del MM IgD, encontrada en la literatura, puede no ser la verdadera y que la misma se verá modificada por el mejoramiento de la metodología empleada.
Assuntos
Humanos , Pessoa de Meia-Idade , Masculino , Feminino , Imunoglobulina D , Mieloma Múltiplo/diagnóstico , Diagnóstico Diferencial , Eletroforese em Acetato de Celulose , Proteínas/sangueRESUMO
En el presente trabajo describimos dos pacientes portadores de mieloma múltiple, de clase IgD (tipo Kappa y lambda), encontrados sobre 5 casos de mieloma múltiple, que hemos tenido oportunidad de estudiar en la provincia de Formosa (Argentina), entre los años 1985 y 1988. En todos los casos, además de los estudios hematológicos correspondientes, se utilizan métodos simples y relativamente poco costosos (Proteinograma, inmunoelectroforesis, electroinmunofijación), para arribar al diagnóstico. Los dos pacientes con MM IgD concurren a la consulta hematológica para investigación de anemia refractaria. Ninguno de ellos presentó hipercalcemia importante y sólo uno evidenció alteraciones óseas, al estudio radiológico. El tiempo de sobrevida desde el momento del diagnóstico fue de cuatro meses en ambos casos. Al igual que otros autores, concordamos en que la frecuencia del MM IgD, encontrada en la literatura, puede no ser la verdadera y que la misma se verá modificada por el mejoramiento de la metodología empleada. (AU)
Assuntos
Humanos , Pessoa de Meia-Idade , Idoso , Masculino , Feminino , Mieloma Múltiplo/diagnóstico , Imunoglobulina D , Proteínas/sangue , Eletroforese em Acetato de Celulose , Diagnóstico DiferencialRESUMO
Se realizó un estudio de algunos indicadores nutricionales en pacientes gerontogeriátricos diabéticos y de otro grupo de individuos supuestamente normales, con el objetivo de evaluar la necesidad de sugerir modificaciones dietéticas. Se seleccionaron 26 pacientes diabéticos de ambos sexos, hospitalizados en salas de Medicina, y 30 pacientes, posiblemente sanos, como grupo control. El estudio nutricional llevado a cabo en estos pacientes gerontogeriátricos diabéticos es de gran valor, por lo que se considera que debe ampliarse a otros indicadores bioquímicos
Assuntos
Idoso , Humanos , Diabetes Mellitus , Estado Nutricional , Ácido Ascórbico/sangue , Colesterol/sangue , Glucose/sangue , Hemoglobinas/sangue , Proteínas/sangueRESUMO
Se sintetizaron anfolitos carrier (AC) mediante la reacción entre tetraetilenpoentamina (TEPA) y ácido acrílico (AA). El producto obtenido se utilizó en la separación de proteínas séricas mediante isoelectroenfoque (IEF) en geles de agarosa y de poliacrilamida (PAA). Se determinó el gradiente de pH obtenido y se analizó el comportamiento isotacoforético de las distintas fracciones del anfolito carrier, obtenidas luego de su IEF sobre gel de agarosa
Assuntos
Ratos , Animais , Humanos , Técnicas In Vitro , Ponto Isoelétrico , Proteínas/sangue , Trietilenofosforamida/síntese química , Misturas AnfolíticasRESUMO
Se describe un procedimiento para la síntesis de anfolitos aplicables a la formación de gradientes de pH para isoelectroenfoque. Se utiliza tetraetilenpentamina a la cual se le agrega N, N'-metilenbisacrilamida como reactivo de condensación, con las finalidades de incrementar la diversidad de componentes anfotéricos, y/o de aumentar el número de grupos amino en la molécula resultante del acoplamiento de tetraetilenpentamina de a pares. En una operación posterior se hacen reaccionar estos productos con un ácido alfa, ß-insaturado. El procedimiento utilizando ácido acrílico se describe en detalle. Se estudia la uniformidad del gradiente de pH cortando el gel de poliacrilamida en fracciones de 1 x 1 cm y efectuando la medición del pH en cada una de ellas por el método de elución. La capacidad de formar gradientes estables de pH del producto sintetizado se demuestra realizando isoelectroenfoques de lisados eritrocitarios en geles de poliacrilamida de 1 mm de espesor
Assuntos
Humanos , Técnicas In Vitro , Ponto Isoelétrico , Misturas Anfolíticas/síntese química , Proteínas/sangue , TrietilenofosforamidaRESUMO
Se sintetizaron anfolitos carrier (AC) mediante la reacción entre tetraetilenpoentamina (TEPA) y ácido acrílico (AA). El producto obtenido se utilizó en la separación de proteínas séricas mediante isoelectroenfoque (IEF) en geles de agarosa y de poliacrilamida (PAA). Se determinó el gradiente de pH obtenido y se analizó el comportamiento isotacoforético de las distintas fracciones del anfolito carrier, obtenidas luego de su IEF sobre gel de agarosa (AU)
Assuntos
Ratos , Animais , Humanos , Técnicas In Vitro , Trietilenofosforamida/síntese química , Proteínas/sangue , Ponto Isoelétrico , Misturas AnfolíticasRESUMO
Se describe un procedimiento para la síntesis de anfolitos aplicables a la formación de gradientes de pH para isoelectroenfoque. Se utiliza tetraetilenpentamina a la cual se le agrega N, N-metilenbisacrilamida como reactivo de condensación, con las finalidades de incrementar la diversidad de componentes anfotéricos, y/o de aumentar el número de grupos amino en la molécula resultante del acoplamiento de tetraetilenpentamina de a pares. En una operación posterior se hacen reaccionar estos productos con un ácido alfa, ß-insaturado. El procedimiento utilizando ácido acrílico se describe en detalle. Se estudia la uniformidad del gradiente de pH cortando el gel de poliacrilamida en fracciones de 1 x 1 cm y efectuando la medición del pH en cada una de ellas por el método de elución. La capacidad de formar gradientes estables de pH del producto sintetizado se demuestra realizando isoelectroenfoques de lisados eritrocitarios en geles de poliacrilamida de 1 mm de espesor (AU)
Assuntos
Humanos , Técnicas In Vitro , Ponto Isoelétrico , Proteínas/sangue , Misturas Anfolíticas/síntese química , TrietilenofosforamidaRESUMO
Se detallan todos los pasos a llevar a cabo para realizar isoelectroenfoque en geles de poliacrilamida de 1 mm de espesor adheridos a un celofán como soporte. El gel se adhiere firmemente al celofán durante todos las operaciones (corrida, tinción y desteñido) y el soporte lo protege de las roturas, razón por la cual es fácilmente manejable. Se discute la optimización de las condiciones de trabajo para anfolito no comercial. Se muestra la buena resolución obtenida con dicho anfolito de sueros humanos normales y patológicos
Assuntos
Humanos , Proteínas/sangue , Ponto Isoelétrico/métodos , Celofane , Misturas AnfolíticasRESUMO
Se detallan todos los pasos a llevar a cabo para realizar isoelectroenfoque en geles de poliacrilamida de 1 mm de espesor adheridos a un celofán como soporte. El gel se adhiere firmemente al celofán durante todos las operaciones (corrida, tinción y desteñido) y el soporte lo protege de las roturas, razón por la cual es fácilmente manejable. Se discute la optimización de las condiciones de trabajo para anfolito no comercial. Se muestra la buena resolución obtenida con dicho anfolito de sueros humanos normales y patológicos (AU)