RESUMO
A atividade de glicosidases durante a degradação do polissacarídeo extracelular (EPS) produzido por Anabaena spiroides foi detectada e quantificada utilizando-se MUF-substratos (MUF-monossacarídeos). O consumo total do polissacarídeo efetuou-se em duas fases, uma primeira de alta atividade enzimática que rapidamente consumiu 41 per center do polissacarídeo e uma segunda, mais lenta, que consumiu o polissacarídeo restante (59 per center). A mudança de fase coincidiu com a sucessão de uma população de bactérias cocóides por outra de bacilos. A biomassa bacteriana, quantificada por contagens de células, aumentou com a degradação do EPS. As atividades registradas através dos substratos 4-MUF-a-D- e 4-MUF-b-D- glicosídeo foram mais altas quando comparadas aos demais substratos testados que foram: MUF-a-L-ramnopiranosídeo, MUF-b-D-galactosídeo, MUF-a-D-manopiranosídeo, MUF-b-D-fucosídeo, MUF-b-D-manopiranosídeo, MUF-a-L-arabinopiranosídeo, e MUF-b-L-fucosídeo. A fluorescência emitida a partir de cada um dos diferentes MUF-substratos foi, de modo geral, proporcional à concentração dos monossacarídeos correspondentes constituintes do polissacarídeo, um indício da susceptibilidade ao ataque enzimático microbiano do EPS produzido por A. spiroides.
Assuntos
Anabaena , Ensaios Enzimáticos Clínicos , Glicosídeo Hidrolases/análise , Polissacarídeo-Liases/análise , Degradação de Resíduos QuímicosRESUMO
The sequence of the disaccharide units of eight heparan sulfate proteoglycans of different origins is described. All heparan sulfates contain 5 variable regions made of oligosaccharide blocks of disaccharides, namely, GlcUA(1-4)GlcNAc, GlcUA(1-4)GlcNS, IdoUA (1-4) GlcNS,6S,IdoUA-GlcNAc,6S, and IdoUA,2S(1-4)GlcNS,6S, besides two constant regions made of an internal tetrasaccharide (IdoUA-GlcNAc-IdoUA-GlcNS) and monosaccharides (GlcNS, and GlcNS,6S) at the non-reducing terminal. The N-acetylated region of the heparan sulfates is linked to the serine of the protein core through a trisaccharide of Xyl-Gal-Gal. Heparan sulfates differ from one another in terms of the number of disaccharides that compose each block.
Assuntos
Heparitina Sulfato/química , Oligossacarídeos/química , Proteoglicanas/química , Acetilação , Animais , Sequência de Carboidratos , Bovinos , Fracionamento Químico , Dissacarídeos/química , Cães , Proteoglicanas de Heparan Sulfato , Dados de Sequência Molecular , Polissacarídeo-Liases/análise , Coelhos , Análise de SequênciaRESUMO
The sequence of the disacharide units of eight heparan sulfate proteoglycans of different origins is described. All heparan sulfates contain 5 variable regions made of oligosaccharide blocks of disaccharides, namely GlcUA(1-4) GlcNAc, GlcUA(1-4)GlcNS, IdoUA (104)GlcNS) and monosaccharides (GlcNS, and GlcNS,65) at the non-reducing terminal. The N-acetylated region of the heparan sulfates is linked to the serine of the protein core through a trisaccharide of Xyl-Gal-Gal. Heparan sulfates differ from one another in terms of the number of disaccharides that compose each block
Assuntos
Bovinos , Cães , Coelhos , Animais , Heparitina Sulfato/química , Oligossacarídeos/química , Proteoglicanas/química , Acetilação , Sequência de Carboidratos , Fracionamento Químico , Dissacarídeos/química , Dados de Sequência Molecular , Polissacarídeo-Liases/análise , Análise de SequênciaRESUMO
1. The disaccharide sequences of a heparan sulfate isolated from Anomantidae sp. was determined with the aid of heparitinase I, heparitinase II from Flavobacterium heparinum, mollusc beta-glucuronidase and alpha-N-acetylglucosaminidase besides nitrous acid degradation and chemical analyses. 2. Like the mammalian heparan sulfates the mollusc heparan sulfate is composed of different oligosaccharide blocks of N-acetylated disaccharides, N-sulfated disaccharides and N,6-sulfated disaccharides and has in its nonreducing end the monosaccharide glucosamine 2,6-disulfate. 3. The oligosaccharides produced by heparitinase I degradation contain at their reducing ends a N-acetylated, 6-sulfated disaccharide. 4. These and other results lead to the conclusion that the general structure of the heparan sulfate is maintained through evolution.