RESUMO
Introducción: La enfermedad granulomatosa crónica es una inmunodeficiencia primaria congénita del sistema inmune innato, originada por defectos en el complejo enzimático nicotinamida adenina dinucleótido fosfato oxidasa presente en células fagocíticas. Estos defectos funcionales causan incapacidad para producir especies reactivas del oxígeno en los fagocitos, que afectan la eliminación de algunos microorganismos patógenos dentro del fagolisosoma. El diagnóstico de esta enfermedad se realiza actualmente mediante la prueba de 1,2,3-dihidrorodamina asistida por citometría de flujo multiparamétrica, o la tinción de fagocitos con nitroazul de tetrazolio asistida por microscopio óptico. Objetivos: Describir los aspectos fisiopatológicos y moleculares de la enfermedad granulomatosa crónica; y discutir aspectos relacionados con las pruebas de diagnóstico antes mencionadas. Métodos: Se realizó una investigación bibliográfica-documental a partir de artículos científicos publicados desde 1933 hasta 2018, para ello fueron consultadas las bases de datos SciELO, PubMed y Springer. Desarrollo: Se exponen las características fisiopatológicas de la enfermedad granulomatosa crónica, así como la relación entre las mutaciones genéticas más abundantes en la población afectada y la gravedad de las manifestaciones clínicas que presentan los pacientes. Además, se analizan críticamente los beneficios y las deficiencias de dos técnicas que se utilizan actualmente para diagnosticar la enfermedad. Conclusiones: La enfermedad granulomatosa crónica puede generar consecuencias inmunológicas e inflamatorias graves, que se hallan en consonancia con las características genéticas expresadas en el complejo enzimático dañado. El diagnóstico de la enfermedad resulta más confiable, exhaustivo y específico, mediante la citometría de flujo y su prueba de 1,2,3-dihidrorodamina(AU)
Introduction: Chronic granulomatous disease is a congenital primary immunodeficiency of the innate immune system, caused by defects in the nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase enzyme complex present in phagocytic cells. These functional defects cause inability to produce reactive oxygen species in phagocytes, affecting the elimination of some pathogenic microorganisms within the phagolysosome. The diagnosis of this disease is currently made by means of the 1,2,3-dihydrorodamine test assisted by multiparametric flow cytometry, or the staining of phagocytes with nitro-blue tetrazolium assisted by light microscopy. Objectives: To characterize molecular and pathophysiologically the chronic granulomatous disease; and to discuss aspects related to the aforementioned diagnostic tests. Methods: In this work, a bibliographic-documentary research was carried out from scientific articles published from 1933 to 2018, for which the SciELO, PubMed and Springer databases were consulted. Development: The pathophysiological characteristics of chronic granulomatous disease are exposed, as well as the relationship between the most abundant genetic mutations in the affected population, and the severity of the clinical manifestations presented by the patients. In addition, the benefits and deficiencies of two techniques currently used to diagnose the disease are critically analyzed. Conclusions: Chronic granulomatous disease can generate severe immunological and inflammatory consequences, which are in line with the genetic characteristics expressed in the damaged enzyme complex. The diagnosis of the disease is more reliable, exhaustive and specific, using flow cytometry and its 1,2,3-dihydrorodamine test(AU)
Assuntos
Humanos , Espécies Reativas de Oxigênio , Testes Diagnósticos de Rotina , Nitroazul de Tetrazólio/uso terapêutico , Técnicas e Procedimentos Diagnósticos , Citometria de Fluxo/métodos , Doença Granulomatosa Crônica/fisiopatologia , Doença Granulomatosa Crônica/genéticaRESUMO
O uso de probióticos a base de leveduras melhora o ganho de peso e o sistema imunológico de bovinos frente a grandes desafios imunológicos, no entanto permanece a dúvida se seu uso também apresentaria efeito em desafios mais tênues. Desta maneira, o presente trabalho verificou se o uso de probiótico a base de Enterococcus faecium e Saccaromyces cerevisiae via oral interfere na imunidade inata e no peso de bezerros sadios, em fase de crescimento, alimentados principalmente com silagem de milho. Para tanto, 12 bezerros da raça Jersey (120 kg ±50 kg e 4-7 meses de idade), foram alocados nos grupos controle (n=6) ou tratamento (n=6), de acordo com a oferta de probiótico (2g/dia, via oral) durante 45 dias. Nos dias 0, 15, 30 e 45, os animais foram submetidos a pesagens, exames clínicos, e colheita de sangue para realização de hemograma e mensuração do metabolismo oxidativo neutrofílico. Observou-se que, o probiótico promoveu pequeno e pontual incremento na função neutrofilica sanguínea (P=0,10, D15), incremento nos valores de hematócrito e hemoglobina (P=0,03 e 0,05, D45), além de maior ganho de peso nas fases iniciais da administração do suplemento (P=0,05), permitindo concluir que o suplemento é benéfico para animais em fase de adaptação de trocas de dieta e de manejo, mesmo quando estes desafios são tênues.(AU)
The use of yeast probiotics improves body weight gain and the immune system of cattle submitted to husbandry challenges, however the question remains whether the probiotics could have an effect on more tenuous challenges. In this way, the present study verified if the use of probiotic (Enterococcus faecium and Saccharomyces cerevisiae) provided orally, interferes with the innate immunity and body weight of calves fed mainly with corn silage. Twelve Jersey calves (120 kg ± 50 kg and 4-7 months of age) were allocated to the control (n = 6) or treatment (n = 6) group according to the probiotic supply (2 g / day, orally) for 45 days. On days 0, 15, 30 and 45, the animals were weighted, and submitted to clinical examinations, and blood collection for hemogram and measurement of neutrophil oxidative metabolism. It was observed that the probiotic promoted a slight and punctual increase in blood neutrophilic function (P = 0.10, D15), increased hematocrit and hemoglobin values P = 0.03 and 0.05, D45) and increased the body weight gain in the initial phases of supplementation (P = 0.08), allowing to conclude that the probiotic is beneficial for animals in the adaptation phase of diet changes and management, even when these challenges are mild.(AU)
El uso de probióticos de levadura mejora el aumento de peso corporal y el sistema inmunológico del ganado sometido a los desafíos de la cría, sin embargo, la pregunta sigue siendo si los probióticos podrían tener un efecto en desafíos más tenues. De esta manera, el presente estudio verificó si el uso de probióticos (Enterococcus faecium y Saccharomyces cerevisiae) proporcionado por vía oral interfiere con la inmunidad innata y el peso corporal de los terneros alimentados principalmente con ensilaje de maíz. Doce terneros de Jersey (120 kg ± 50 kg y 4-7 meses de edad) se asignaron al grupo control (n = 6) o tratamiento (n = 6) según el suministro de probióticos (2 g / día, por vía oral) para 45 dias. En los días 0, 15, 30 y 45, los animales se pesaron y se sometieron a exámenes clínicos y se recogieron muestras de sangre para el hemograma y la medición del metabolismo oxidativo de los neutrófilos. Se observó que el probiótico promovió un aumento leve y puntual de la función neutrofílica en sangre (P = 0,10, D15), aumento de los valores de hematocrito y hemoglobina (P = 0,03 y 0,05, D45) y aumento de la ganancia de peso corporal en las fases iniciales de la suplementación. (P = 0.08), lo que permite concluir que el probiótico es beneficioso para los animales en la fase de adaptación de los cambios y el manejo de la dieta, incluso cuando estos desafíos son leves.(AU)
Assuntos
Animais , Bovinos , Enterococcus faecium , Saccharomyces cerevisiae , Aumento de Peso , Probióticos/administração & dosagem , Neutrófilos , Sistema Imunitário , Espécies Reativas de Oxigênio , Nitroazul de Tetrazólio , SilagemRESUMO
O uso de probióticos a base de leveduras melhora o ganho de peso e o sistema imunológico de bovinos frente a grandes desafios imunológicos, no entanto permanece a dúvida se seu uso também apresentaria efeito em desafios mais tênues. Desta maneira, o presente trabalho verificou se o uso de probiótico a base de Enterococcus faecium e Saccaromyces cerevisiae via oral interfere na imunidade inata e no peso de bezerros sadios, em fase de crescimento, alimentados principalmente com silagem de milho. Para tanto, 12 bezerros da raça Jersey (120 kg ±50 kg e 4-7 meses de idade), foram alocados nos grupos controle (n=6) ou tratamento (n=6), de acordo com a oferta de probiótico (2g/dia, via oral) durante 45 dias. Nos dias 0, 15, 30 e 45, os animais foram submetidos a pesagens, exames clínicos, e colheita de sangue para realização de hemograma e mensuração do metabolismo oxidativo neutrofílico. Observou-se que, o probiótico promoveu pequeno e pontual incremento na função neutrofilica sanguínea (P=0,10, D15), incremento nos valores de hematócrito e hemoglobina (P=0,03 e 0,05, D45), além de maior ganho de peso nas fases iniciais da administração do suplemento (P=0,05), permitindo concluir que o suplemento é benéfico para animais em fase de adaptação de trocas de dieta e de manejo, mesmo quando estes desafios são tênues.
The use of yeast probiotics improves body weight gain and the immune system of cattle submitted to husbandry challenges, however the question remains whether the probiotics could have an effect on more tenuous challenges. In this way, the present study verified if the use of probiotic (Enterococcus faecium and Saccharomyces cerevisiae) provided orally, interferes with the innate immunity and body weight of calves fed mainly with corn silage. Twelve Jersey calves (120 kg ± 50 kg and 4-7 months of age) were allocated to the control (n = 6) or treatment (n = 6) group according to the probiotic supply (2 g / day, orally) for 45 days. On days 0, 15, 30 and 45, the animals were weighted, and submitted to clinical examinations, and blood collection for hemogram and measurement of neutrophil oxidative metabolism. It was observed that the probiotic promoted a slight and punctual increase in blood neutrophilic function (P = 0.10, D15), increased hematocrit and hemoglobin values P = 0.03 and 0.05, D45) and increased the body weight gain in the initial phases of supplementation (P = 0.08), allowing to conclude that the probiotic is beneficial for animals in the adaptation phase of diet changes and management, even when these challenges are mild.
El uso de probióticos de levadura mejora el aumento de peso corporal y el sistema inmunológico del ganado sometido a los desafíos de la cría, sin embargo, la pregunta sigue siendo si los probióticos podrían tener un efecto en desafíos más tenues. De esta manera, el presente estudio verificó si el uso de probióticos (Enterococcus faecium y Saccharomyces cerevisiae) proporcionado por vía oral interfiere con la inmunidad innata y el peso corporal de los terneros alimentados principalmente con ensilaje de maíz. Doce terneros de Jersey (120 kg ± 50 kg y 4-7 meses de edad) se asignaron al grupo control (n = 6) o tratamiento (n = 6) según el suministro de probióticos (2 g / día, por vía oral) para 45 dias. En los días 0, 15, 30 y 45, los animales se pesaron y se sometieron a exámenes clínicos y se recogieron muestras de sangre para el hemograma y la medición del metabolismo oxidativo de los neutrófilos. Se observó que el probiótico promovió un aumento leve y puntual de la función neutrofílica en sangre (P = 0,10, D15), aumento de los valores de hematocrito y hemoglobina (P = 0,03 y 0,05, D45) y aumento de la ganancia de peso corporal en las fases iniciales de la suplementación. (P = 0.08), lo que permite concluir que el probiótico es beneficioso para los animales en la fase de adaptación de los cambios y el manejo de la dieta, incluso cuando estos desafíos son leves.
Assuntos
Animais , Bovinos , Aumento de Peso , Enterococcus faecium , Neutrófilos , Probióticos/administração & dosagem , Saccharomyces cerevisiae , Sistema Imunitário , Espécies Reativas de Oxigênio , Nitroazul de Tetrazólio , SilagemRESUMO
DNA staining in gels has historically been carried out using silver staining and fluorescent dyes like ethidium bromide and SYBR Green I (SGI). Using fluorescent dyes allows recovery of the analyte, but requires instruments such as a transilluminator or fluorimeter to visualize the DNA. Here we described a new and simple method that allows DNA visualization to the naked eye by generating a colored precipitate. It works by soaking the acrylamide or agarose DNA gel in SGI and nitro blue tetrazolium (NBT) solution that, when exposed to sunlight, produces a purple insoluble formazan precipitate that remains in the gel after exposure to light. A calibration curve made with a DNA standard established a detection limit of approximately 180 pg/band at 500 bp. Selectivity of this assay was determined using different biomolecules, demonstrating a high selectivity for DNA. Integrity and functionality of the DNA recovered from gels was determined by enzymatic cutting with a restriction enzyme and by transforming competent cells after the different staining methods, respectively. Our method showed the best performance among the dyes employed. Based on its specificity, low cost and its adequacy for field work, this new methodology has enormous potential benefits to research and industry.
Assuntos
DNA Bacteriano/química , Eletroforese em Gel de Poliacrilamida/métodos , Escherichia coli/química , Nitroazul de Tetrazólio/química , Plasmídeos/química , Coloração e Rotulagem/métodos , Benzotiazóis , Diaminas , Compostos Orgânicos/química , QuinolinasRESUMO
O teste de redução do tetrazólio nitroazul (NBT) é um dos métodos mais utilizados para a avaliação do metabolismo oxidativo dos neutrófilos. Porém, o custo por amostra e o tempo de utilização do corante são desvantagens do método. O objetivo deste trabalho foi comparar duas metodologias para realização do teste do NBT a fim de maximizar a sua utilização e diminuir o custo por amostra processada. Foram utilizadas 10 cabras, adultas clinicamente sadias e colhidas amostras de sangue por meio de venipunção jugular em tubos de 10mL sendo retirada uma alíquota de 500µL em tubo "eppendorff" contendo 2µL de heparina. Através desta alíquota foram realizadas três metodologias para o teste do NBT: A) técnica original Park & Good (1970); B) redução de 50% do volume do corante; C) redução de 50% e armazenamento do corante a -20°C por 180 dias. Foram confeccionados e corados esfregaços sanguíneos (May Grünwald-Giemsa) das amostras com as metodologias propostas e realizada contagem de 100 neutrófilos em microscopia óptica para determinar o percentual de neutrófilos reativos ao NBT. A análise estatística pelo método de Análise de Medidas Repetida (ANOVA) demonstrou diferenças significativas (P<0,05) entre os dois métodos e o original (A=14,4±4,6; B=1,9±1,4; C=1,1±0,9), porém apresentou alta correlação pelo teste de Spearman entre os métodos (rs=0,82 (AxB), rs=0,75 (BxC) e rs=0,93 (AxC)). Conclui-se que o teste de Redução do Tetrazólio Nitroazul (NBT) segundo a metodologia descrita por Park & Good (1970) e a redução do corante em 50% do seu volume e a sua redução associada ao congelamento por 180 dias a -20ºC podem ser realizadas em caprinos, porém os valores devem ser comparados com as respectivas metodologias utilizadas.(AU)
The nitroblue tetrazolium reduction test (NBT) is one of the most used methods to evaluate the oxidative metabolism of neutrophils. However, the cost for each sample and dye's life-time are disadvantages of the method. This paper aim was to compare two NBT test methodologies in order to maximize its use and decrease the cost for each sample. It was made using 10 adult and healthy goats and blood samples were taken through venipuncion in jugular vein, using 10mL tubes, and then a 500µL sample was taken in eppendoff tubes with 2µL of heparin. Using this sample were made three methodologies for the NBT test: A) Park & Good (1970) original technique; B) dye reduction in 50% of the volume; C) 50% reduction and dye storage at -20°C for 180 days. It was made and dyed the blood smear (May Grünwald-Giemsa) from the samples, using the proposed methodologies and then made the counting of 100 neutrophils in optic microscopy, to determinate the percentage of NBT reactive neutrophils. The statistic analysis by the method of Repeated Measuring Analysis (ANOVA) evinced significant differences (P<0,05) between the two methods and the original (A=14.4±4.6; B=1.9±1.4; C=1.1±0.9), however it showed high correlation by the Spearman test between the methods (rs=0,82 (AxB), rs=0,75 (BxC) e rs=0.93 (AxC)). It was concluded that the original Park & Good (1970) method and two methodologies for dye reduction in 50% and it's reduction associated with NBT dye freezing for 180 days can be used in caprines, but the values should be compared with their respective methodologies.(AU)
Assuntos
Animais , Ruminantes , Estresse Oxidativo , Neutrófilos/metabolismo , Nitroazul de Tetrazólio/análise , Análise de VariânciaRESUMO
O presente estudo teve como objetivo a avaliação do leucograma e do metabolismo oxidativo de neutrófilos em fêmeas caprinas da raça Saanen, nos períodos de gestação, parto e pós-parto. Amostras de sangue foram colhidas de 20 fêmeas nulíparas da raça Saanen, clinicamente sadias por venipunção jugular aos 49 (M1), 42 (M2), 35 (M3), 28 (M4), 21 (M5), 14 (M6), sete (M7), três (M8) dias antes do parto, no dia do parto (M9), três (M10) e sete (M11) dias após o parto, para a realização do leucograma e dosagens séricas de cortisol, estradiol e progesterona. A partir de 28 dias (M4) antes do parto até sete dias do pós-parto (M11) foram colhidas amostras de sangue para a avaliação do metabolismo oxidativo de neutrófilos por meio do teste de redução do tetrazólio nitroazul (NBT). Os resultados demonstraram que no dia do parto houve aumento nas concentrações séricas de cortisol e estradiol, e diminuição da progesterona, leucocitose por neutrofilia e desvio à esquerda leve, diminuição dos linfócitos, aumento da relação neutrófilo:linfócito, eosinopenia, monocitose e basofilia. No sétimo dia do pós-parto houve leucocitose por neutrofilia e aumento da relação neutrófilo:linfócito. Não houve nos períodos de gestação, parto e pós-parto alterações significativas no metabolismo oxidativo dos neutrófilos. Conclui-se que o parto determina elevação da concentração sérica de cortisol e estradiol, e diminuição da progesterona determinando quadro de leucocitose por neutrofilia e desvio à esquerda leve, com diminuição dos linfócitos, aumento da relação neutróflo:linfócito, eosinopenia, monocitose e basofilia. Ao sétimo dia do pós-parto há leucocitose por neutrofilia, aumento da relação neutrófilo:linfócito e do fibrinogênio. A gestação, o parto e o período do pós-parto não alteram o metabolismo oxidativo de neutrófilos avaliado por meio do teste de redução do NBT.
The purpose of this study was to evaluate the leukocyte count and the oxidative metabolism of neutrophil in Saanen goats during periods of pregnancy, parturition and postpartum. Were used 20 Saanen goats, clinically healthy and serologically negative for caprine arthritis encephalitis virus (CAEV). Blood samples were collected by jugular venipuncture 49 (M1), 42 (M2), 35 (M3), 28 (M4), 21 (M5), 14 (M6), seven (M7), three (M8) days before the parturition, on the day of birth (M9), three (M10) and seven (M11) days postpartum, for the leukocyte count, and serum for cortisol, estradiol and progesterone determination. From 28 days (M4) before parturition until seven days postpartum (M11) blood samples were collected for evaluation of oxidative metabolism of neutrophils by the nitroblue tetrazolium reduction test (NBT). The results showed that at parturition day there were an increase in cortisol and estradiol levels and a decrease in progesterone serum, neutrophilic leukocytosis and left shift slight, decrease of lymphocytes, increase in the neutrophil: lymphocyte, eosinopenia, monocytosis and basophilia. There was a neutrophilic leukocytosis and an increase in the neutrophil: lymphocyte on the seventh day postpartum. There were not significant alterations in oxidative metabolism of neutrophils during pregnancy, parturition and postpartum. It was concluded that parturition causes an elevation in cortisol and estradiol levels and a decrease in progesterone serum determining a neutrophilic leukocytosis and left shift slight, with a reduction of lymphocytes, increase in the neutrophil:lymphocyte, eosinopenia, monocytosis and basophilia. Neutrophilic leukocytosis, increase in the neutrophil: lymphocyte and fibrinogen are detected on the seventh day postpartum. Pregnancy, parturition and the postpartum do not change the oxidative metabolism of neutrophils evaluated by NBT reduction test.
Assuntos
Animais , Feminino , Cabras/imunologia , Contagem de Leucócitos/veterinária , Metabolismo Energético/imunologia , Neutrófilos/imunologia , Parto/imunologia , Período Pós-Parto/imunologia , Prenhez/imunologia , Nitroazul de TetrazólioRESUMO
O presente estudo teve como objetivo a avaliação do leucograma e do metabolismo oxidativo de neutrófilos em fêmeas caprinas da raça Saanen, nos períodos de gestação, parto e pós-parto. Amostras de sangue foram colhidas de 20 fêmeas nulíparas da raça Saanen, clinicamente sadias por venipunção jugular aos 49 (M1), 42 (M2), 35 (M3), 28 (M4), 21 (M5), 14 (M6), sete (M7), três (M8) dias antes do parto, no dia do parto (M9), três (M10) e sete (M11) dias após o parto, para a realização do leucograma e dosagens séricas de cortisol, estradiol e progesterona. A partir de 28 dias (M4) antes do parto até sete dias do pós-parto (M11) foram colhidas amostras de sangue para a avaliação do metabolismo oxidativo de neutrófilos por meio do teste de redução do tetrazólio nitroazul (NBT). Os resultados demonstraram que no dia do parto houve aumento nas concentrações séricas de cortisol e estradiol, e diminuição da progesterona, leucocitose por neutrofilia e desvio à esquerda leve, diminuição dos linfócitos, aumento da relação neutrófilo:linfócito, eosinopenia, monocitose e basofilia. No sétimo dia do pós-parto houve leucocitose por neutrofilia e aumento da relação neutrófilo:linfócito. Não houve nos períodos de gestação, parto e pós-parto alterações significativas no metabolismo oxidativo dos neutrófilos. Conclui-se que o parto determina elevação da concentração sérica de cortisol e estradiol, e diminuição da progesterona determinando quadro de leucocitose por neutrofilia e desvio à esquerda leve, com diminuição dos linfócitos, aumento da relação neutróflo:linfócito, eosinopenia, monocitose e basofilia. Ao sétimo dia do pós-parto há leucocitose por neutrofilia, aumento da relação neutrófilo:linfócito e do fibrinogênio. A gestação, o parto e o período do pós-parto não alteram o metabolismo oxidativo de neutrófilos avaliado por meio do teste de redução do NBT.(AU)
The purpose of this study was to evaluate the leukocyte count and the oxidative metabolism of neutrophil in Saanen goats during periods of pregnancy, parturition and postpartum. Were used 20 Saanen goats, clinically healthy and serologically negative for caprine arthritis encephalitis virus (CAEV). Blood samples were collected by jugular venipuncture 49 (M1), 42 (M2), 35 (M3), 28 (M4), 21 (M5), 14 (M6), seven (M7), three (M8) days before the parturition, on the day of birth (M9), three (M10) and seven (M11) days postpartum, for the leukocyte count, and serum for cortisol, estradiol and progesterone determination. From 28 days (M4) before parturition until seven days postpartum (M11) blood samples were collected for evaluation of oxidative metabolism of neutrophils by the nitroblue tetrazolium reduction test (NBT). The results showed that at parturition day there were an increase in cortisol and estradiol levels and a decrease in progesterone serum, neutrophilic leukocytosis and left shift slight, decrease of lymphocytes, increase in the neutrophil: lymphocyte, eosinopenia, monocytosis and basophilia. There was a neutrophilic leukocytosis and an increase in the neutrophil: lymphocyte on the seventh day postpartum. There were not significant alterations in oxidative metabolism of neutrophils during pregnancy, parturition and postpartum. It was concluded that parturition causes an elevation in cortisol and estradiol levels and a decrease in progesterone serum determining a neutrophilic leukocytosis and left shift slight, with a reduction of lymphocytes, increase in the neutrophil:lymphocyte, eosinopenia, monocytosis and basophilia. Neutrophilic leukocytosis, increase in the neutrophil: lymphocyte and fibrinogen are detected on the seventh day postpartum. Pregnancy, parturition and the postpartum do not change the oxidative metabolism of neutrophils evaluated by NBT reduction test.(AU)
Assuntos
Animais , Feminino , Cabras/imunologia , Prenhez/imunologia , Parto/imunologia , Período Pós-Parto/imunologia , Contagem de Leucócitos/veterinária , Neutrófilos/imunologia , Metabolismo Energético/imunologia , Nitroazul de TetrazólioRESUMO
BACKGROUND: The phagocytic function in pulmonary tuberculosis (PTB) and Type 2 diabetes (T2D) has been explored mainly in macrophages but not in polymorphonuclears (PMN). The purpose of this study was to determine the functional status of PMN leukocytes in patients with pulmonary tuberculosis (PTB), Type 2 diabetes (T2D), and in patients with both diseases. METHODS: An observational, prospective, and comparative study was carried out. 30 ambulatory patients with T2D, 10 with PTB undergoing treatment and 10 patients with PTB and T2D, and 44 healthy subjects were studied. PMN leukocytes were separated, the capacity of these cells to produce hydrogen peroxide and to reduce nitroblue tetrazolium (NBT) in response to stimulus with the phorbolic ester of myristic acid (PMA) was measured; and the capacity of PMN leukocytes to adhere to surfaces was determined. RESULTS: Concerning the test for adherence, on comparing healthy subjects with patients with T2D+PTB, we observed a clear decrease in cellular adherence in the group of patients with both diseases; it was statistically significant (p = 0.007).With regard to phagocytic function, we observed that in NBT reduction as well as in hydrogen peroxide production, statistically significant differences were not obtained on comparing healthy subjects with any of the three groups of patients. CONCLUSIONS: We observed a clear decrease in cellular adherence when both diseases co-exist. These results could indicate the need for the co-existence of T2D and TB to cause deterioration in the cells' adherence activity. The microtechniques employed permit the evaluation in a practical manner of certain phagocytic-activity expressions.
Assuntos
Adesão Celular/fisiologia , Diabetes Mellitus Tipo 2/imunologia , Granulócitos/imunologia , Fagocitose , Tuberculose Pulmonar/imunologia , Adulto , Idoso , Idoso de 80 Anos ou mais , Diabetes Mellitus Tipo 2/complicações , Feminino , Granulócitos/metabolismo , Humanos , Peróxido de Hidrogênio/metabolismo , Masculino , Pessoa de Meia-Idade , Nitroazul de Tetrazólio/metabolismo , Estudos Prospectivos , Acetato de Tetradecanoilforbol/metabolismo , Tuberculose Pulmonar/complicaçõesRESUMO
Objetivou-se estimar o valor clínico do teste de redução do tetrazólio nitroazul (NBT) no diagnóstico dos processos inflamatórios de cães, comparando-o com o leucograma e a concentração plasmática de fibrinogênio. Para tal, determinou-se a porcentagem de neutrófilos redutores de NBT, a concentração plasmática de fibrinogênio e o leucograma de 242 cães, incluindo animais sadios e com quadro inflamatório, portadores ou não de hepatopatias, azotemia ou hipogamaglobulinemias. O uso do teste de redução do NBT permitiu confirmar 30,43% dos processos inflamatórios em cães. O uso associado do teste de redução do NBT com a determinação do fibrinogênio plasmático e leucograma possibilitou uma maior eficiência diagnóstica, identificando-se 84,35% dos processos inflamatórios. Não foi verificado um efeito significativo da hipogamaglobulinemia e da hepatopatia sobre a capacidade do neutrófilo reduzir o NBT em cães com doenças inflamatórias, porém os resultados obtidos sugerem que a azotemia possa afetar a capacidade do neutrófilo em reduzir o NBT. Conclui-se que o teste de redução de NBT é pouco sensível para o diagnóstico dos processos inflamatórios em cães, porém útil nos casos em que o fibrinogênio e o leucograma não são capazes de detectar a inflamação.(AU)
The purpose of the present study is to determine the clinical value of nitroblue tetrazolium reduction test (NBT) to diagnose inflammatory processes in dogs, and compare to white blood cell count (WBC) and concentration of plasma fibrinogen. To this end, we determined the percentage of NBT reducing neutrophils, concentration of plasma fibrinogen and WBC of 242 dogs, including both healthy dogs and animals with inflammation processes, with or without liver disease, azotemia or hypogammaglobulinemias. The NBT reduction test confirmed 30.43% of inflammatory diseases in dogs. The combined use of NBT reduction test, plasma fibrinogen and WBC was more efficient and identified 84.35% of inflammatory processes. Hypogammaglobulinemia and liver disease did not alter the ability of neutrophils to reduce NBT in dogs with inflammatory diseases, but results suggest that azotemia may affect the ability of neutrophils to reduce NBT. It can be concluded that NBT reduction test has low sensitivity for the diagnosis of inflammatory diseases in dogs, but it is useful in cases where the fibrinogen and WBC are not able to detect inflammation.(AU)
Assuntos
Animais , Cães , Nitroazul de Tetrazólio/administração & dosagem , Nitroazul de Tetrazólio/análise , Nitroazul de TetrazólioRESUMO
Objetivou-se estimar o valor clínico do teste de redução do tetrazólio nitroazul (NBT) no diagnóstico dos processos inflamatórios de cães, comparando-o com o leucograma e a concentração plasmática de fibrinogênio. Para tal, determinou-se a porcentagem de neutrófilos redutores de NBT, a concentração plasmática de fibrinogênio e o leucograma de 242 cães, incluindo animais sadios e com quadro inflamatório, portadores ou não de hepatopatias, azotemia ou hipogamaglobulinemias. O uso do teste de redução do NBT permitiu confirmar 30,43% dos processos inflamatórios em cães. O uso associado do teste de redução do NBT com a determinação do fibrinogênio plasmático e leucograma possibilitou uma maior eficiência diagnóstica, identificando-se 84,35% dos processos inflamatórios. Não foi verificado um efeito significativo da hipogamaglobulinemia e da hepatopatia sobre a capacidade do neutrófilo reduzir o NBT em cães com doenças inflamatórias, porém os resultados obtidos sugerem que a azotemia possa afetar a capacidade do neutrófilo em reduzir o NBT. Conclui-se que o teste de redução de NBT é pouco sensível para o diagnóstico dos processos inflamatórios em cães, porém útil nos casos em que o fibrinogênio e o leucograma não são capazes de detectar a inflamação.
The purpose of the present study is to determine the clinical value of nitroblue tetrazolium reduction test (NBT) to diagnose inflammatory processes in dogs, and compare to white blood cell count (WBC) and concentration of plasma fibrinogen. To this end, we determined the percentage of NBT reducing neutrophils, concentration of plasma fibrinogen and WBC of 242 dogs, including both healthy dogs and animals with inflammation processes, with or without liver disease, azotemia or hypogammaglobulinemias. The NBT reduction test confirmed 30.43% of inflammatory diseases in dogs. The combined use of NBT reduction test, plasma fibrinogen and WBC was more efficient and identified 84.35% of inflammatory processes. Hypogammaglobulinemia and liver disease did not alter the ability of neutrophils to reduce NBT in dogs with inflammatory diseases, but results suggest that azotemia may affect the ability of neutrophils to reduce NBT. It can be concluded that NBT reduction test has low sensitivity for the diagnosis of inflammatory diseases in dogs, but it is useful in cases where the fibrinogen and WBC are not able to detect inflammation.
Assuntos
Animais , Cães , Nitroazul de Tetrazólio , Nitroazul de Tetrazólio/administração & dosagem , Nitroazul de Tetrazólio/análiseRESUMO
Chronic granulomatous disease (CGD) is a primary immunodeficiency, it has a defect in phagocytosis and its estimated incidence is 1 in 250,000 live births. Recurrent infections and granulomas are the most common clinical manifestations. CGD is caused by a functional defect in one of the subunits of the NADPH oxidase, the patients have mutations in NADPH genes. There are two patterns of transmission described in CGD, X-linked and autosomal recessive. The diagnosis of CGD is made by direct measurement of superoxide production, ferricytochrome c reduction, chemiluminescence, reduction of nitroblue tetrazolium or 1, 2, 3 dihydrorhodamine oxidation. After the diagnosis of CGD is important to identify the pattern of transmission in each case in order to provide genetic counseling to the patient's family, as well as inform Xlinked CGD carriers that have a major risk to develop autoimmune diseases. The 1, 2, 3, DHR help to identify the pattern of transmission and carriers of CGD Xlinked, it is considered as a screening method because of its easiness, sensitive and inexpensive cost.
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Doença Granulomatosa Crônica , NADPH Oxidases , Heterozigoto , Humanos , Nitroazul de Tetrazólio , SuperóxidosRESUMO
Larrea divaricata Cav. (jarilla) is a plant with well-documented applications in folk medicine in Argentina. In this study, we aimed to evaluate functional parameters of peritoneal macrophages isolated from mice injected with three fractions (F1, F2 and F3) of L. divaricata. The response of macrophages against Candida albicans was evaluated. Cell viability was assessed using 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) test, apoptosis was evaluated using Giemsa, acridine orange/ethidium bromide and ladder assay, oxidative burst was assayed using nitroblue tetrazolium test and nitrite production using Griess assay. Cell stimulation and their ability to kill C. albicans in vitro were measured. The number and cell viability were similar to controls. However, we found that F1 induces pre-activation of macrophages, and this pre-activation is enhanced by C. albicans. The effects exerted by F1 make it more important than F2 and F3 for the treatment of disseminated candidiasis in patients with immunodeficiency diseases such as AIDS and chronic granulomatous disease, among others.
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Candida albicans/imunologia , Fatores Imunológicos/farmacologia , Larrea/química , Macrófagos Peritoneais/efeitos dos fármacos , Macrófagos Peritoneais/imunologia , Extratos Vegetais/farmacologia , Animais , Apoptose , Sobrevivência Celular , Células Cultivadas , Fragmentação do DNA , Etídio/metabolismo , Feminino , Fatores Imunológicos/isolamento & purificação , Masculino , Camundongos , Nitritos/metabolismo , Nitroazul de Tetrazólio/metabolismo , Extratos Vegetais/isolamento & purificação , Explosão Respiratória , Coloração e Rotulagem/métodos , Sais de Tetrazólio/metabolismo , Tiazóis/metabolismoRESUMO
INTRODUCTION: In plants, the ROS (reactive oxygen species) level is tightly regulated because their accumulation produces irreversible damage leading to cell death. However, ROS accumulation plays a key role in plant signaling under biotic or abiotic stress. Although various methods were reported to evaluate ROS accumulation, they are restricted to model plants or provide only qualitative information. OBJECTIVE: Develop a simple method to quantify superoxide radicals produced in plant tissues, based on the selective extraction of the formazan produced after nitroblue tetrazolium (NBT) reduction in histochemical staining. METHODOLOGY: Plant leaves were stained with a standard NBT method and the formazan precipitated in tissues was selectively extracted using chloroform. The organic phase was dried and formazan residue dissolved in dimethylsulfoxide-potassium hydroxide and quantified by spectrophotometry. The method was tested in strawberry plant leaves under different stressing conditions. RESULTS: Formazan extracted from leaves subjected to stress conditions showed similar absorption spectra to those obtained from standard solutions using pure formazan. Calibration curves showed a linear relationship between absorbance and formazan amounts, within the range 0.5-8 µg. Outcomes suggested that formazan was retained in the solid residue of leaf tissues. This protocol allowed us to quantify superoxide radicals produced under different stress conditions. CONCLUSIONS: Chloroform allowed a selective formazan extraction and removal of potential endogenous, exogenous or procedural artefacts that may interfere with the quantitative determination. This protocol can be used to quantify the superoxide produced in plant tissues using any traditional qualitative NBT histochemical staining method.
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Formazans/análise , Fragaria/metabolismo , Nitroazul de Tetrazólio , Superóxidos/análise , Calibragem , Colletotrichum/patogenicidade , Formazans/química , Formazans/isolamento & purificação , Fragaria/efeitos dos fármacos , Fragaria/microbiologia , Histocitoquímica , Indicadores e Reagentes , Paraquat/farmacologia , Folhas de Planta/efeitos dos fármacos , Folhas de Planta/metabolismo , Folhas de Planta/microbiologia , Solubilidade , Espectrofotometria/métodos , Coloração e Rotulagem/métodos , Estresse Fisiológico , Superóxidos/metabolismoRESUMO
Objetivou-se comparar a capacidade dos neutrófilos reduzirem NBT em amostras sangüíneas colhidas com heparina e EDTA. Para tal, sangue total de 30 eqüinos SRD sadios, adultos e de ambos os sexo foram divididas em dois tubos, um contendo heparina sódica (10U/mL) e o outro EDTA potássico (1,8mg/mL). Imediatamente após a colheita realizaram-se os testes de redução espontânea e estimulada do NBT. Em ambas as provas de redução do NBT, amostras colhidas com heparina apresentaram maior destruição celular, formação de precipitado e de agregados celulares do que as tratadas com EDTA. A média de redução espontânea do NBT em amostras com EDTA (5,93%) não diferiu das obtidas com heparina (4,2%). Na prova estimulada, a média de neutrófilos redutores de NBT em amostras com EDTA (10,43%) foi menor (p<0,05) do que as obtidas com heparina (36,1%). Conclui-se que o EDTA pode ser utilizado com vantagens em relação à heparina na prova de redução espontânea do NBT, entretanto, efeito quelante deste anticoagulante compromete a produção de superóxido em neutrófilos estimulados com extrato bacteriano.
The aim of the present study was to compare the neutrophils ability to reduce NBT in blood samples collected with heparin and EDTA. For this purpose, blood samples from 30 horses were collected of non-defined mix breed, healthy, adults and from both sexes animals, the samples were divided into two tubes, one containing sodium heparin (10U/mL) and other potassium EDTA (1.8 mg/mL). Immediately after the blood collection, the tests of spontaneous and stimulated reduction of NBT were conducted. In both reducing NBT tests, heparinized samples had higher cell destruction, precipitate and cellular aggregates in comparison with those treated with EDTA. The average of spontaneous NBT reduction in samples with EDTA (5.93%) did not differ from those obtained with heparin (4.2%). In stimulated test, the NBT reduction average of neutrophils in samples with EDTA (10.43%) was lower (p <0.05) than those obtained with heparin (36.1%). It is concluded that EDTA can be used with advantages over heparin in the spontaneous NBT reduction test, however, the anticoagulant chelating effect compromises neutrophils superoxide production when stimulated with bacterial extract.
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Animais , Ácido Edético/administração & dosagem , Cavalos , Neutrófilos/metabolismo , Nitroazul de Tetrazólio/análise , Heparina , AnticoagulantesRESUMO
Innate immune responses are useful to determine the health status of fish and to evaluate the effect of immunomodulatory substances in fish farming. Leukocytes respiratory burst was measured in pacu (Piaractus mesopotamicus) using chemiluminescence assay and nitroblue tetrazolium (NBT) reduction assay. The nitroblue tetrazolium reduction seemed more adequate than chemiluminescence assay for leukocytes oxidative burst determination, since it was difficult to isolate the blood leucocytes for chemiluminescence assay. Plasma and serum lysozyme were measured using a turbidimetric assay. The heating of serum and plasma samples (56 masculineC for 30 minutes) for complement system inactivation darkened the plasma samples and interfered in the results. The lysozyme activity in serum was higher than in plasma, suggesting that serum samples are more appropriate for the analysis. This study established protocols that can be useful tools in the study of immune mechanisms of the tropical fish pacu.
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Peixes/fisiologia , Leucócitos/fisiologia , Muramidase/metabolismo , Explosão Respiratória/fisiologia , Animais , Peixes/metabolismo , Medições Luminescentes , Muramidase/sangue , Nitroazul de Tetrazólio/metabolismoRESUMO
Innate immune responses are useful to determine the health status of fish and to evaluate the effect of immunomodulatory substances in fish farming. Leukocytes respiratory burst was measured in pacu (Piaractus mesopotamicus) using chemiluminescence assay and nitroblue tetrazolium (NBT) reduction assay. The nitroblue tetrazolium reduction seemed more adequate than chemiluminescence assay for leukocytes oxidative burst determination, since it was difficult to isolate the blood leucocytes for chemiluminescence assay. Plasma and serum lysozyme were measured using a turbidimetric assay. The heating of serum and plasma samples (56 ºC for 30 minutes) for complement system inactivation darkened the plasma samples and interfered in the results. The lysozyme activity in serum was higher than in plasma, suggesting that serum samples are more appropriate for the analysis. This study established protocols that can be useful tools in the study of immune mechanisms of the tropical fish pacu.
Respostas imunológicas inatas são úteis para determinar o estado de saúde de peixes e avaliar o efeito de substâncias imunomoduladoras no cultivo destes animais. A atividade respiratória de leucócitos foi medida em pacu (Piaractus mesopotamicus) através de ensaio de quimioluminescência e ensaio de redução do nitroblue tetrazolium (NBT). O ensaio de redução do nitroblue tetrazolium pareceu mais adequado que o ensaio de quimioluminescência para determinação da atividade respiratória de leucócitos, uma vez que foi difícil isolar com êxito os leucócitos do sangue para o ensaio de quimioluminescência. Lisozima sérica e plasmática foram medidas por meio de ensaio turbidimétrico. Com o objetivo de inativar as proteínas do sistema complemento, as amostras de soro e plasma foram aquecidas (56 ºC por 30 minutos). Porém, este procedimento provocou a turvação das amostras de plasma e interferiu nos resultados. A atividade de lisozima no soro foi maior que no plasma, sugerindo que amostras de soro são mais apropriadas para esta análise. Este estudo estabeleceu protocolos que podem ser utilizados como ferramentas no estudo de mecanismos imunológicos do peixe tropical pacu.
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Animais , Peixes/fisiologia , Leucócitos/fisiologia , Muramidase/metabolismo , Explosão Respiratória/fisiologia , Peixes/metabolismo , Medições Luminescentes , Muramidase/sangue , Nitroazul de Tetrazólio/metabolismoRESUMO
Endocytic activity of phagocytic cells from armadillos infected with viruses, parasites or bacteria is unknown. This report shows that eosinophils from armadillos infected with microfilaria act against these helmintic parasites but have deficiencies in their oxygen-dependent bacteriocidal mechanisms and also in endocytic capacity against yeast.
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Tatus/imunologia , Tatus/parasitologia , Eosinófilos/enzimologia , Eosinófilos/imunologia , Microfilárias/imunologia , NADPH Oxidases/sangue , Animais , Tatus/sangue , Endocitose , Eosinófilos/parasitologia , Feminino , Filariose/sangue , Filariose/imunologia , Filariose/veterinária , Citometria de Fluxo , Granulócitos/imunologia , Granulócitos/parasitologia , Masculino , Microfilárias/patogenicidade , Monócitos/imunologia , Monócitos/parasitologia , Nitroazul de TetrazólioRESUMO
In the present study, the effects of trans-MUFA, elaidic acid (EA; 18 : 1-9t) and vaccenic acid (VA; 18 : 1-11t) on rat neutrophil functions were compared with those of cis-monounsaturated oleic acid (OA) (18 : 1-9c) and saturated stearic acid (SA; 18 : 0) (10-150 microm). Trans-fatty acids enhanced neutrophil phagocytic capacity, superoxide (O2-) and hydrogen peroxide production, and candidacidal activity. The same effects were observed for OA. Cells treated with trans-MUFA showed reduced production of NO, whereas those treated with OA showed an increase in production. Treatment with SA did not provoke significant effect on the parameters investigated. The increase in O2- production induced by MUFA was not observed when diphenyleneiodonium, an NADPH oxidase inhibitor, was added to the medium. This finding suggests that MUFA stimulate neutrophil NADPH oxidase activity. The addition of 3-[1-[3-(dimethylamino)propyl]-1H-indol-3-yl]-4-(1H-indol-3-yl)-1H-pyrrole-2,5-dione, a protein kinase C (PKC) inhibitor, and wortmannin, a phosphatidylinositol-3 kinase (PI3K) inhibitor, did not affect O2- production induced by MUFA. Therefore, the mechanisms by which MUFA stimulate NADPH oxidase are not dependent on PKC and do not seem to involve PI3K. Experiments using Zn2+, an inhibitor of NADPH oxidase H+ channel, indicated that MUFA activate the NADPH oxidase complex in rat neutrophil due to opening of H+ channel.
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Gorduras Insaturadas na Dieta/farmacologia , Ácidos Graxos Monoinsaturados/farmacologia , Neutrófilos/efeitos dos fármacos , Animais , Candida albicans , Células Cultivadas , Relação Dose-Resposta a Droga , Peróxido de Hidrogênio/metabolismo , Indicadores e Reagentes , Masculino , Neutrófilos/imunologia , Nitroazul de Tetrazólio , Ácido Oleico/farmacologia , Ácidos Oleicos/farmacologia , Fagocitose/efeitos dos fármacos , Ratos , Ratos Wistar , Superóxidos/metabolismoRESUMO
To study some defence mechanisms of beef calves kept on range conditions, 90 healthy calves, 45 Nelore and 45 Limousin, were bled at 24 to 36 hours of life, 15, 30, 60, 90 and, 120 days. Leukogram and neutrophil oxidative burst through the non-stimulated and the stimulated NBT tests were determined. The parasitemia with Anaplasma marginale, Babesia bigemina and B. bovis was investigated. Repeated measure ANOVA was used to analyse the age effect on leukocyte counts. Variation of positive neutrophil throughout the age was analysed through Krushkal-Wallis test. Comparisons among breeds were done using the Mann-Whithney test. The white blood cell count increased with age in both breeds, with a decrease in neutrophil and an increase in lymphocyte counts. The neutrophil lymphocyte ratio had been inverted before 15 days of life. The neutrophil oxidative burst was less effective in the newborn calves increasing with age. Limousin calves' neutrophils had higher capacity to reduce NBT in advanced ages. The observed differences between taurine and Zebu calves had no effects on calves' health and could be atributed to Anaplasma marginale natural and asynptomatic infection.
Com o objetivo de investigar alguns mecanismos de defesa em bezerros de raças de corte criadas a campo, foram utilizados 90 animais recém-nascidos aparentemente sadios, 45 da raça Nelore e 45 da raça Limousin. Amostras de sangue foram colhidas de cada bezerro entre 24 e 36 horas de vida e aos 15, 30, 60, 90 e 120 dias. Determinaram-se o leucograma e o metabolismo oxidativo dos neutrófilos por meio do teste da redução do tetrazólio de nitroazul (NBT), provas não estimulada (NBT-NE) e estimulada (NBT-E). Investigou-se a taxa de parasitemia determinada por Anaplasma marginale, Babesia bigemina e B. bovis. Utilizou-se a análise de variância de medidas repetidas para estudar o comportamento das variáveis hematológicas com o avançar da idade. O teste de Krushkal-Wallis foi empregado para caracterizar a variação da porcentagem de neutrófilos reativos relacionada à idade. Comparações entre as raças foram realizadas em cada idade por meio do teste de Mann-Whithney. A contagem total de leucócitos aumentou com a idade nas duas raças estudadas. Observou-se diminuição do número de neutrófilos e aumento do de linfócitos, ocorrendo sua inversão antes dos 15 dias de idade. A capacidade oxidativa dos neutrófilos foi menor nos bezerros recém-nascidos e aumentou com o avançar da idade. Os neutrófilos dos bezerros Limousin apresentaram maior capacidade de redução do NBT do que os dos bezerros Nelore, notadamente após o segundo mês de vida. Essa diferença não provocou reflexos sobre a saúde dos animais e pode ser resultado da infecção natural e assintomática com o Anaplasma marginale.
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Animais , Análise de Variância , Anaplasma marginale , Bovinos , Mecanismos de Defesa , Nitroazul de Tetrazólio , Neutrófilos/metabolismoRESUMO
To study some defence mechanisms of beef calves kept on range conditions, 90 healthy calves, 45 Nelore and 45 Limousin, were bled at 24 to 36 hours of life, 15, 30, 60, 90 and, 120 days. Leukogram and neutrophil oxidative burst through the non-stimulated and the stimulated NBT tests were determined. The parasitemia with Anaplasma marginale, Babesia bigemina and B. bovis was investigated. Repeated measure ANOVA was used to analyse the age effect on leukocyte counts. Variation of positive neutrophil throughout the age was analysed through Krushkal-Wallis test. Comparisons among breeds were done using the Mann-Whithney test. The white blood cell count increased with age in both breeds, with a decrease in neutrophil and an increase in lymphocyte counts. The neutrophil lymphocyte ratio had been inverted before 15 days of life. The neutrophil oxidative burst was less effective in the newborn calves increasing with age. Limousin calves' neutrophils had higher capacity to reduce NBT in advanced ages. The observed differences between taurine and Zebu calves had no effects on calves' health and could be atributed to Anaplasma marginale natural and asynptomatic infection.(AU)
Com o objetivo de investigar alguns mecanismos de defesa em bezerros de raças de corte criadas a campo, foram utilizados 90 animais recém-nascidos aparentemente sadios, 45 da raça Nelore e 45 da raça Limousin. Amostras de sangue foram colhidas de cada bezerro entre 24 e 36 horas de vida e aos 15, 30, 60, 90 e 120 dias. Determinaram-se o leucograma e o metabolismo oxidativo dos neutrófilos por meio do teste da redução do tetrazólio de nitroazul (NBT), provas não estimulada (NBT-NE) e estimulada (NBT-E). Investigou-se a taxa de parasitemia determinada por Anaplasma marginale, Babesia bigemina e B. bovis. Utilizou-se a análise de variância de medidas repetidas para estudar o comportamento das variáveis hematológicas com o avançar da idade. O teste de Krushkal-Wallis foi empregado para caracterizar a variação da porcentagem de neutrófilos reativos relacionada à idade. Comparações entre as raças foram realizadas em cada idade por meio do teste de Mann-Whithney. A contagem total de leucócitos aumentou com a idade nas duas raças estudadas. Observou-se diminuição do número de neutrófilos e aumento do de linfócitos, ocorrendo sua inversão antes dos 15 dias de idade. A capacidade oxidativa dos neutrófilos foi menor nos bezerros recém-nascidos e aumentou com o avançar da idade. Os neutrófilos dos bezerros Limousin apresentaram maior capacidade de redução do NBT do que os dos bezerros Nelore, notadamente após o segundo mês de vida. Essa diferença não provocou reflexos sobre a saúde dos animais e pode ser resultado da infecção natural e assintomática com o Anaplasma marginale.(AU)