RESUMO
The fungal APSES protein family of transcription factors is characterized by a conserved DNA-binding motif facilitating regulation of gene expression in fungal development and other biological processes. However, their functions in the thermally dimorphic fungal pathogen Histoplasma capsulatum are unexplored. Histoplasma capsulatum switches between avirulent hyphae in the environment and virulent yeasts in mammalian hosts. We identified five APSES domain-containing proteins in H. capsulatum homologous to Swi6, Mbp1, Stu1 and Xbp1 proteins and one protein found in related Ascomycetes (APSES-family protein 1; Afp1). Through transcriptional analyses and RNA interference-based functional tests we explored their roles in fungal biology and virulence. Mbp1 serves an essential role and Swi6 contributes to full yeast cell growth. Stu1 is primarily expressed in mycelia and is necessary for aerial hyphae development and conidiation. Xbp1 is the only factor enriched specifically in yeast cells. The APSES proteins do not regulate conversion of conidia into yeast and hyphal morphologies. The APSES-family transcription factors are not individually required for H. capsulatum infection of cultured macrophages or murine infection, nor do any contribute significantly to resistance to cellular stresses including cell wall perturbation, osmotic stress, oxidative stress or antifungal treatment. Further studies of the downstream genes regulated by the individual APSES factors will be helpful in revealing their functional roles in H. capsulatum biology.
Assuntos
Regulação Fúngica da Expressão Gênica , Histoplasma/citologia , Histoplasma/crescimento & desenvolvimento , Hifas/citologia , Hifas/crescimento & desenvolvimento , Fatores de Transcrição/metabolismo , Transcrição Gênica , Animais , Adesão Celular , Linhagem Celular , Perfilação da Expressão Gênica , Histoplasma/genética , Histoplasma/patogenicidade , Histoplasmose/microbiologia , Histoplasmose/patologia , Pulmão/patologia , Macrófagos/microbiologia , Camundongos Endogâmicos C57BL , Interferência de RNA , Virulência , Fatores de Virulência/metabolismoRESUMO
Melanization of Histoplasma capsulatum remains poorly described, particularly in regards to the forms of melanin produced. In the present study, 30 clinical and environmental H. capsulatum strains were grown in culture media with or without L-tyrosine under conditions that produced either mycelial or yeast forms. Mycelial cultures were not melanized under the studied conditions. However, all strains cultivated under yeast conditions produced a brownish to black soluble pigment compatible with pyomelanin when grew in presence of L-tyrosine. Sulcotrione inhibited pigment production in yeast cultures, strengthening the hyphothesis that H. capsulatum yeast forms produce pyomelanin. Since pyomelanin is produced by the fungal parasitic form, this pigment may be involved in H. capsulatum virulence.
Assuntos
Histoplasma/efeitos dos fármacos , Histoplasma/metabolismo , Tirosina/farmacologia , Animais , Meios de Cultura/química , Cicloexanonas/farmacologia , Regulação Fúngica da Expressão Gênica/efeitos dos fármacos , Histoplasma/citologia , Humanos , Concentração de Íons de Hidrogênio , Melaninas/genética , Melaninas/metabolismo , Mesilatos/farmacologia , Pigmentos Biológicos/genética , Pigmentos Biológicos/metabolismo , VirulênciaRESUMO
BACKGROUND: Studies carried out during the 1990's demonstrated the presence of fungal glycoinositol phosphorylceramides (GIPCs) with unique structures, some of them showed reactivity with sera of patients with histoplasmosis, paracoccidioidomycosis or aspergillosis. It was also observed that fungal GIPCs were able to inhibit T lymphocyte proliferation "in vitro", and studies regarding the importance of these molecules to fungal survival showed that many species of fungi are vulnerable to inhibitors of sphingolipid biosynthesis. RESULTS: In this paper, we describe a detailed characterization of an IgG2a monoclonal antibody (mAb), termed MEST-3, directed to the Paracoccidioides brasiliensis glycolipid antigen Pb-2 (Manpalpha1-->3Manpalpha1-->2IPC). mAb MEST-3 also recognizes GIPCs bearing the same structure in other fungi. Studies performed on fungal cultures clearly showed the strong inhibitory activity of MEST-3 on differentiation and colony formation of Paracoccidioides brasiliensis, Histoplasma capsulatum and Sporothrix schenckii. Similar inhibitory results were observed when these fungi where incubated with a different mAb, which recognizes GIPCs bearing terminal residues of beta-D-galactofuranose linked to mannose (mAb MEST-1). On the other hand, mAb MEST-2 specifically directed to fungal glucosylceramide (GlcCer) was able to promote only a weak inhibition on fungal differentiation and colony formation. CONCLUSIONS: These results strongly suggest that mAbs directed to specific glycosphingolipids are able to interfere on fungal growth and differentiation. Thus, studies on surface distribution of GIPCs in yeast and mycelium forms of fungi may yield valuable information regarding the relevance of glycosphingolipids in processes of fungal growth, morphological transition and infectivity.
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Anticorpos Antifúngicos/farmacologia , Anticorpos Monoclonais/farmacologia , Fungos/efeitos dos fármacos , Glicoesfingolipídeos/imunologia , Anticorpos Antifúngicos/química , Anticorpos Antifúngicos/metabolismo , Anticorpos Monoclonais/química , Anticorpos Monoclonais/metabolismo , Antígenos de Fungos/imunologia , Proliferação de Células/efeitos dos fármacos , Técnica Indireta de Fluorescência para Anticorpo , Fungos/citologia , Fungos/fisiologia , Glicoesfingolipídeos/metabolismo , Histoplasma/citologia , Histoplasma/efeitos dos fármacos , Histoplasma/fisiologia , Imunoglobulina G/química , Imunoglobulina G/metabolismo , Imunoglobulina G/farmacologia , Fenômenos Microbiológicos/efeitos dos fármacos , Micélio/citologia , Micélio/efeitos dos fármacos , Micélio/crescimento & desenvolvimento , Paracoccidioides/citologia , Paracoccidioides/efeitos dos fármacos , Paracoccidioides/fisiologia , Sporothrix/citologia , Sporothrix/efeitos dos fármacos , Sporothrix/fisiologiaRESUMO
For the first time in Argentina, we describe a strain of Histoplasma capsulatum var. capsulatum with an aberrant morphology that was isolated from a single patient with AIDS. Mycelial phase cultures on agar Sabouraud at 25-28 degrees C showed white, glabrous, umbilicated and centrally radiated colonies. Unusual microscopic findings were the absence of typical conidia, the presence of terminal/intercalary chlamydoconidia with a diameter of 4 pm and of thickened hyphae. Fungal identification was confirmed by the detection of bands H and M species specific antigens in mycelial culture supernatants and reversion to the typical yeast phase on agar brain-heart-cysteine at 37 degrees C. The genomic DNA profile obtained by RAPD-PCR with primers 1281-1283 coincided with the predominant profile of H. capsulatum among isolates from Argentine patients.
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Infecções Oportunistas Relacionadas com a AIDS/microbiologia , Histoplasma/isolamento & purificação , Histoplasmose/microbiologia , Argentina , DNA Fúngico/análise , Histoplasma/citologia , Humanos , Técnica de Amplificação ao Acaso de DNA PolimórficoRESUMO
La histoplasmosis es una micosis endémica en todos los continentes excepto en la Antártida, causado por el hongo dimórfico Histoplasma capsulatum, var. capsulatum. La infección pulmonar primaria generalmente es asintomática, o una enfermedad febril, autolimitada. Se han reconocido tres categorías diferentes: pulmonar aguda, pulmonar crónica y diseminada progresiva, con ataque al sistema fagocítrico. Las pruebas serológicas, los cultivos del hongo y la histopatología son útiles para establecer el diagnóstico. Los tejidos deben ser teñidos con plata para visualizar las levaduras. El sistema del hemocultivo de lisiscentrifugación, puede detectar al H. capsulatum de una a dos semanas. Existe un procedimiento para la detección del antígeno, muy útil para el seguimiento de la terapia, incluyendo a los pacientes infectados por el virus de la inmunodeficiencia humana (VIH). La terapia antifúngica no está indicada en la mayoría de los enfermos, aunque algunos tienen una enfermedad prolongada (> 3 semanas). El diagnóstico temprano y un tratamiento oportuno con enfotericina B o itraconazol, puede acelerar la resolución de la enfermedad. El flunconazol es una elección razonable en la terapia supresiva crónica
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Humanos , Anfotericina B/uso terapêutico , Técnicas de Laboratório Clínico , Histoplasma/citologia , Histoplasma/patogenicidade , Histoplasmose/diagnóstico , Histoplasmose/epidemiologia , Histoplasmose/etiologia , Histoplasmose/história , Histoplasmose/fisiopatologia , Histoplasmose/transmissãoRESUMO
A pesar de que la proliferación de Histoplasma capsulatum dentro de los macrófagos está restringida por el desarrollo de la inmunidad mediada por células, y de que no existe una aparente falla en la capacidad fungicida de los macrófagos, bajo ciertas circunstancias, el H. capsulatum puede desenvolverse en este medio intracelular, el cual provee las condiciones nutricionales para el crecimiento del hongo y además, la posibilidad de acceso a otros órganos por las vías linfáticas y hemáticas. Pese a sucrecimiento intracelular, el medio interno dentro de los fagocitos es complejo y frecuentemente hostil al microorganismo. Los patógenos intracelulares deben superar una serie de obstáculos con el fin de prevenir su posible destrucción. En el presente artículo se revisan las estrategias de H. capsulatum para escapar a las agresiones del hospedero, desde el momento en que el parásito se encuentra sobre la superficie de la células hospedera hasta su sobrevivencia dentro de ésta. Además, se destacan los avences contemporáneos de los mecanismo de escape, utilizados por H. capsulatum, para facilitar su sobrevivencia en el medio ambiente intracelular
Assuntos
Cobaias , Animais , Sobrevivência Celular/imunologia , Sobrevivência Celular/fisiologia , Histoplasma/citologia , Histoplasma/crescimento & desenvolvimento , Histoplasma/patogenicidade , Imunidade Celular/fisiologia , Técnicas In Vitro , Lisossomos/parasitologia , Neutrófilos/parasitologia , Fagócitos/parasitologia , Fagocitose/fisiologia , Interações Hospedeiro-Parasita/imunologiaRESUMO
Se describen los casos clínicos de cuatro pacientes con SIDA en quienes se hizo el diagnóstico de histoplasmosis al encontrar H. capsulatum en frote de sangre periférica. Todos los pacientes tuvieron evolución ffulminante de la infección y fallecieron durante los primeros cuatro días de hospitalización. En todos los casos de corroboró en cultivo la presencia de micelio y macroconidias "ornamentadas" característico de Histoplasma. Presentaron alteraciones hematológicas que son frecuentes en otras entidades asociadas a SIDA y, además, elevación importante de la enzima deshidrogenasa láctica sérica de más de diez veces el valor normal (menos de 221 Ul/mL): la cifra menor de DHL encontrada en estos pacientes fue de 2137 Ul/mL y la mayor de 4839 Ul/mL. Esta presentación que semeja septicemia y el hallazgo se sangre periférica de histoplasma, representan el 11.7 por ciento de los 34 pacientes con SIDA e histoplasmosis atendidos en el hospital de infectología del Centro Médico "La Raza".
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Humanos , Masculino , Adulto , Pessoa de Meia-Idade , Histoplasma/citologia , Histoplasmose/complicações , Síndrome da Imunodeficiência Adquirida/imunologia , Histoplasma/imunologia , Histoplasmose/sangue , Infecções Oportunistas/complicações , Infecções Oportunistas/imunologia , Síndrome da Imunodeficiência Adquirida/mortalidadeRESUMO
La histoplasmosis, por ser una parositosis intracelular preferencial del sistema fagocítico mononuclear, constituye un modelo útil para el estudio del proceso fagocítico.. En este trabajo se revisan los resultados de la interacción fagocito/Histoplasma capsulatum, agente etiológico de la histoplasmosis, tanto en seres humanos como en animales. Además, se plantean las bases actuales del conocimiento de la fagocitosis de Histoplasma y se sugieren posibles investigaciones futuras sobre el comportamiento de la fagocitosis de este hongo