RESUMO
INTRODUCTION: Inborn errors of metabolism (IEM) represent an important public health problem due to current diagnosis and treatment limitations, poor life quality of affected patients, and consequent untimely child death. In contrast to classical methods, tandem mass spectrometry (MS/MS) has allowed simultaneous evaluation of multiple metabolites associated with IEM offering higher sensitivity, low false positive rates and high throughput. AIMS: Determine concentration levels for amino acids and acylcarnitines in blood of newborns from Colombia, to establish reference values for further use in diagnosis of IEM. METHODS: Implementation of a method to determine amino acids, acylcarnitines and succinylacetone in newborn dried blood spots using MS/MS, and its application in a cross-sectional study conducted in 891 healthy neonates from Cali and Quibdo cities is described. RESULTS: fifty-seven analytes that allow the diagnosis of more than 40 different pathologies were tested. The method showed to be linear, precise and accurate. Healthy neonates 1-18 days of age were included, 523 from Cali and 368 from Quibdo; 52% male and 48% female. Age-related differences on the concentration levels of amino acids and acylcarnitines were observed whereas no significant differences by gender were found. CONCLUSION: The study has contributed to reveal the usual concentration levels of amino acids, acylcarnitines and succinylacetone that could be used as reference for the establishment of a newborn metabolic screening program in Colombia.
INTRODUCCIÓN: Los Errores Innatos del metabolismo (EIM) representan un importante problema de salud pública debido a limitaciones en el tratamiento y diagnóstico oportuno, la pobre calidad de vida de los pacientes afectados, así como la muerte infantil prematura. Comparada con los métodos clásicos, la espectrometría de masas en tándem (MS/MS) ha permitido la evaluación simultánea de múltiples metabolitos asociados con EIM, con una alta sensibilidad, baja proporción de falsos positivos y alto rendimiento. OBJETIVOS: Determinar los niveles de concentración de aminoácidos y acilcarnitinas en sangre de recién nacidos de Colombia, para establecer los valores normales para usarlos como referencia en el diagnóstico de EIM. MÉTODOS: Aquí, se describe la implementación de un método para determinar aminoácidos, acilcarnitinas y succinilacetona en gotas de sangre seca de recién nacidos usando MS/MS, y su aplicación en un estudio de corte transversal realizado en 891 neonatos sanos de las ciudades de Cali y Quibdó. RESULTADOS: Se evaluaron 57 analitos que permiten el diagnóstico de más de 40 patologías diferentes. El método mostró ser lineal, preciso y exacto. Se incluyeron neonatos sanos de 1-18 días de edad, 523 de Cali y 368 de Quibdó, 52% hombres y 48% mujeres. Se observaron diferencias en los niveles de concentración de aminoácidos y acilcarnitinas relacionadas con la edad, mientras que no se encontraron diferencias significativas por sexo. CONCLUSIÓN: El estudio ha contribuido a revelar los niveles usuales de concentración de aminoácidos, acilcarnitinas y succinilacetona que pueden ser usados como referencia para el establecimiento del programa de tamizaje neonatal metabólico en Colombia.
Assuntos
Aminoácidos/sangue , Carnitina/análogos & derivados , Heptanoatos/sangue , Erros Inatos do Metabolismo/diagnóstico , Espectrometria de Massas em Tandem/métodos , Biomarcadores/sangue , Carnitina/sangue , Colômbia , Estudos Transversais , Reações Falso-Positivas , Humanos , Recém-Nascido , Erros Inatos do Metabolismo/sangue , Valores de Referência , Sensibilidade e EspecificidadeRESUMO
Abstract Introduction: Inborn errors of metabolism (IEM) represent an important public health problem due to current diagnosis and treatment limitations, poor life quality of affected patients, and consequent untimely child death. In contrast to classical methods, tandem mass spectrometry (MS/MS) has allowed simultaneous evaluation of multiple metabolites associated with IEM offering higher sensitivity, low false positive rates and high throughput. Aims: Determine concentration levels for amino acids and acylcarnitines in blood of newborns from Colombia, to establish reference values for further use in diagnosis of IEM. Methods: Implementation of a method to determine amino acids, acylcarnitines and succinylacetone in newborn dried blood spots using MS/MS, and its application in a cross-sectional study conducted in 891 healthy neonates from Cali and Quibdo cities is described. Results: fifty-seven analytes that allow the diagnosis of more than 40 different pathologies were tested. The method showed to be linear, precise and accurate. Healthy neonates 1-18 days of age were included, 523 from Cali and 368 from Quibdo; 52% male and 48% female. Age-related differences on the concentration levels of amino acids and acylcarnitines were observed whereas no significant differences by gender were found. Conclusion: The study has contributed to reveal the usual concentration levels of amino acids, acylcarnitines and succinylacetone that could be used as reference for the establishment of a newborn metabolic screening program in Colombia.
Resumen Introducción: Los Errores Innatos del metabolismo (EIM) representan un importante problema de salud pública debido a limitaciones en el tratamiento y diagnóstico oportuno, la pobre calidad de vida de los pacientes afectados, así como la muerte infantil prematura. Comparada con los métodos clásicos, la espectrometría de masas en tándem (MS/MS) ha permitido la evaluación simultánea de múltiples metabolitos asociados con EIM, con una alta sensibilidad, baja proporción de falsos positivos y alto rendimiento. Objetivos: Determinar los niveles de concentración de aminoácidos y acilcarnitinas en sangre de recién nacidos de Colombia, para establecer los valores normales para usarlos como referencia en el diagnóstico de EIM. Métodos: Aquí, se describe la implementación de un método para determinar aminoácidos, acilcarnitinas y succinilacetona en gotas de sangre seca de recién nacidos usando MS/MS, y su aplicación en un estudio de corte transversal realizado en 891 neonatos sanos de las ciudades de Cali y Quibdó. Resultados: Se evaluaron 57 analitos que permiten el diagnóstico de más de 40 patologías diferentes. El método mostró ser lineal, preciso y exacto. Se incluyeron neonatos sanos de 1-18 días de edad, 523 de Cali y 368 de Quibdó, 52% hombres y 48% mujeres. Se observaron diferencias en los niveles de concentración de aminoácidos y acilcarnitinas relacionadas con la edad, mientras que no se encontraron diferencias significativas por sexo. Conclusión: El estudio ha contribuido a revelar los niveles usuales de concentración de aminoácidos, acilcarnitinas y succinilacetona que pueden ser usados como referencia para el establecimiento del programa de tamizaje neonatal metabólico en Colombia.
Assuntos
Humanos , Recém-Nascido , Carnitina/análogos & derivados , Espectrometria de Massas em Tandem/métodos , Aminoácidos/sangue , Heptanoatos/sangue , Erros Inatos do Metabolismo/diagnóstico , Valores de Referência , Biomarcadores/sangue , Carnitina/sangue , Estudos Transversais , Sensibilidade e Especificidade , Colômbia , Reações Falso-Positivas , Erros Inatos do Metabolismo/sangueRESUMO
Hepatorenal tyrosinemia is a treatable metabolic disease characterized by progressive liver failure, renal damage and pronounced coagulopathy. Its clinical diagnosis is difficult because of its low prevalence and heterogeneous symptoms. In developed countries, expanded newborn screening, based on succinylacetone quantification by tandem mass spectrometry, has been very valuable in the early detection of hepatorenal tyrosinemia, providing the opportunity for rapid treatment of affected patients. In developing countries without systematic expanded newborn screening, however, diagnosis and treatment of this disease remain major challenges, as genetic diseases in these countries are not a health priority and there are few referral centers for infants with inherited errors of metabolism. This chapter describes the diagnosis, follow-up and outcome of 20 Mexican patients with hepatorenal tyrosinemia. This chapter also constitutes a call to action to pediatricians, gastroenterologists, geneticists and other health professionals, and to academic organizations, health authorities and patient advocacy groups, to promote early patient detection and treatment, reducing the unacceptably high mortality rate (75%) in Mexican infants with this potentially deadly but eminently treatable condition.
Assuntos
Tirosinemias/diagnóstico , Tirosinemias/tratamento farmacológico , Heptanoatos/metabolismo , Humanos , Recém-Nascido , México , Triagem Neonatal/métodos , Espectrometria de Massas em Tandem/métodos , Tirosinemias/metabolismoRESUMO
El Consejo Federal de Medicina de Brasil (CFM) -órgano normativo y fiscalizador del ejercicio ético de la medicina- prohibió, en 2008, la participación de médicos brasileños en investigaciones que utilizaran placebo para enfermedades con tratamiento eficaz y efectivo, en contraposición a la Declaración de Helsinki, que permite su uso en condiciones metodológicamente justificadas. Con el objetivo de verificar si la normativa ética del CFM modificó el uso de placebo en ensayos clínicos de fase III en Brasil, se analizaron varias características de sus registros en el ClinicalTrials.gov, en los períodos de 2003 a 2007 y de 2009 a 2013. Se concluye que: a) la normativa promulgada por el CFM en 2008 fue ineficaz y prevaleció la posición adoptada por la Declaración de Helsinki; b) el patrocinio de ensayos con placebo por parte de la industria farmacéutica multinacional fue significativo; c) predominaron las investigaciones de fármacos para enfermedades crónicas, y fueron poco significativas para las enfermedades postergadas, de importancia para Brasil.(AU)
In 2008, Brazils Federal Council of Medicine [Conselho Federal de Medicina] (CFM) - regulatory and supervisory agency on the ethical practice of medicine - banned the participation of Brazilian doctors in studies using placebos for diseases with efficient and effective treatment. This position differs with the Helsinki Declaration, which allows the use of placebos in methodologically justified conditions. To ascertain whether the CMFs ethical regulation modified the use of placebos in phase III clinical trials in Brazil, characteristics of the records in ClinicalTrials.gov were researched in the periods from 2003 to 2007 and from 2009 to 2013. The conclusions reached were: a) the regulations issued by the CFM in 2008 were ineffective and the position adopted by the Helsinki Declaration prevails; b) there was significant sponsorship by the multinational pharmaceutical industry of trials with placebos; c) the research was predominantly on new drugs for chronic diseases, with little study done of the neglected diseases which are of great importance to Brazil.(AU)
Assuntos
Animais , Ratos , Apoptose/genética , Regulação Enzimológica da Expressão Gênica/genética , Heme/deficiência , Degeneração Neural/genética , Neurônios/metabolismo , Porfirias/complicações , Apoptose/efeitos dos fármacos , Caspases/efeitos dos fármacos , Caspases/metabolismo , Sobrevivência Celular/efeitos dos fármacos , Sobrevivência Celular/genética , Colágeno Tipo XI/efeitos dos fármacos , Colágeno Tipo XI/metabolismo , Proteína de Ligação ao Elemento de Resposta ao AMP Cíclico/efeitos dos fármacos , Proteína de Ligação ao Elemento de Resposta ao AMP Cíclico/genética , Proteína de Ligação ao Elemento de Resposta ao AMP Cíclico/metabolismo , Regulação para Baixo/efeitos dos fármacos , Regulação para Baixo/fisiologia , Inibidores Enzimáticos , Regulação Enzimológica da Expressão Gênica/efeitos dos fármacos , Heme/biossíntese , Heptanoatos , Sistema de Sinalização das MAP Quinases/efeitos dos fármacos , Sistema de Sinalização das MAP Quinases/fisiologia , Proteínas de Membrana/efeitos dos fármacos , Proteínas de Membrana/genética , Proteínas de Membrana/metabolismo , Degeneração Neural/metabolismo , Degeneração Neural/fisiopatologia , Proteínas do Tecido Nervoso/efeitos dos fármacos , Proteínas do Tecido Nervoso/genética , Proteínas do Tecido Nervoso/metabolismo , Moléculas de Adesão de Célula Nervosa/efeitos dos fármacos , Moléculas de Adesão de Célula Nervosa/genética , Moléculas de Adesão de Célula Nervosa/metabolismo , Neurônios/efeitos dos fármacos , Neurônios/patologia , Células PC12 , Poli(ADP-Ribose) Polimerases , Porfirias/metabolismo , Porfirias/fisiopatologia , RNA Mensageiro/efeitos dos fármacos , RNA Mensageiro/metabolismo , Proteínas de Ligação a RNA/efeitos dos fármacos , Proteínas de Ligação a RNA/genética , Proteínas de Ligação a RNA/metabolismo , Proteínas do Complexo SMN , Regulação para Cima/efeitos dos fármacos , Regulação para Cima/fisiologia , Proteínas de Transporte Vesicular/efeitos dos fármacos , Proteínas de Transporte Vesicular/genética , Proteínas de Transporte Vesicular/metabolismoRESUMO
El Consejo Federal de Medicina de Brasil (CFM) -órgano normativo y fiscalizador del ejercicio ético de la medicina- prohibió, en 2008, la participación de médicos brasileños en investigaciones que utilizaran placebo para enfermedades con tratamiento eficaz y efectivo, en contraposición a la Declaración de Helsinki, que permite su uso en condiciones metodológicamente justificadas. Con el objetivo de verificar si la normativa ética del CFM modificó el uso de placebo en ensayos clínicos de fase III en Brasil, se analizaron varias características de sus registros en el ClinicalTrials.gov, en los períodos de 2003 a 2007 y de 2009 a 2013. Se concluye que: a) la normativa promulgada por el CFM en 2008 fue ineficaz y prevaleció la posición adoptada por la Declaración de Helsinki; b) el patrocinio de ensayos con placebo por parte de la industria farmacéutica multinacional fue significativo; c) predominaron las investigaciones de fármacos para enfermedades crónicas, y fueron poco significativas para las enfermedades postergadas, de importancia para Brasil.
In 2008, Brazil's Federal Council of Medicine [Conselho Federal de Medicina] (CFM) - regulatory and supervisory agency on the ethical practice of medicine - banned the participation of Brazilian doctors in studies using placebos for diseases with efficient and effective treatment. This position differs with the Helsinki Declaration, which allows the use of placebos in methodologically justified conditions. To ascertain whether the CMF's ethical regulation modified the use of placebos in phase III clinical trials in Brazil, characteristics of the records in ClinicalTrials.gov were researched in the periods from 2003 to 2007 and from 2009 to 2013. The conclusions reached were: a) the regulations issued by the CFM in 2008 were ineffective and the position adopted by the Helsinki Declaration prevails; b) there was significant sponsorship by the multinational pharmaceutical industry of trials with placebos; c) the research was predominantly on new drugs for chronic diseases, with little study done of the neglected diseases which are of great importance to Brazil.
Assuntos
Animais , Ratos , Apoptose/genética , Regulação Enzimológica da Expressão Gênica/genética , Heme/deficiência , Degeneração Neural/genética , Neurônios/metabolismo , Porfirias/complicações , Apoptose/efeitos dos fármacos , Caspases/efeitos dos fármacos , Caspases/metabolismo , Sobrevivência Celular/efeitos dos fármacos , Sobrevivência Celular/genética , Colágeno Tipo XI/efeitos dos fármacos , Colágeno Tipo XI/metabolismo , Proteína de Ligação ao Elemento de Resposta ao AMP Cíclico/efeitos dos fármacos , Proteína de Ligação ao Elemento de Resposta ao AMP Cíclico/genética , Proteína de Ligação ao Elemento de Resposta ao AMP Cíclico/metabolismo , Regulação para Baixo/efeitos dos fármacos , Regulação para Baixo/fisiologia , Inibidores Enzimáticos , Regulação Enzimológica da Expressão Gênica/efeitos dos fármacos , Heme/biossíntese , Heptanoatos , Sistema de Sinalização das MAP Quinases/efeitos dos fármacos , Sistema de Sinalização das MAP Quinases/fisiologia , Proteínas de Membrana/efeitos dos fármacos , Proteínas de Membrana/genética , Proteínas de Membrana/metabolismo , Degeneração Neural/metabolismo , Degeneração Neural/fisiopatologia , Proteínas do Tecido Nervoso/efeitos dos fármacos , Proteínas do Tecido Nervoso/genética , Proteínas do Tecido Nervoso/metabolismo , Moléculas de Adesão de Célula Nervosa/efeitos dos fármacos , Moléculas de Adesão de Célula Nervosa/genética , Moléculas de Adesão de Célula Nervosa/metabolismo , Neurônios/efeitos dos fármacos , Neurônios/patologia , Poli(ADP-Ribose) Polimerases , Porfirias/metabolismo , Porfirias/fisiopatologia , RNA Mensageiro/efeitos dos fármacos , RNA Mensageiro/metabolismo , Proteínas de Ligação a RNA/efeitos dos fármacos , Proteínas de Ligação a RNA/genética , Proteínas de Ligação a RNA/metabolismo , Proteínas do Complexo SMN , Regulação para Cima/efeitos dos fármacos , Regulação para Cima/fisiologia , Proteínas de Transporte Vesicular/efeitos dos fármacos , Proteínas de Transporte Vesicular/genética , Proteínas de Transporte Vesicular/metabolismoRESUMO
INTRODUCTION: Hepatorenal tyrosinemia (HT1) is a treatable, inherited, metabolic disease characterized by progressive liver failure with pronounced coagulopathy. The aim of this study is to describe the clinical, biochemical, and histopathological findings in a group of Mexican HT1 patients and their outcome. MATERIAL AND METHODS: Medical records of HT1 patients diagnosed between 1995 and 2011 were analyzed. The diagnosis of HT1 was confirmed by detection of succinylacetone in urine or blood. RESULTS: Sixteen nonrelated HT1 cases were analyzed. Mean age at clinical onset was 9 months, and the mean age at diagnosis was 16.3 months. Main clinical findings were hepatomegaly, splenomegaly, cirrhosis, liver failure, tubulopathy, nephromegaly, Fanconi syndrome, seizures and failure to thrive. Histopathological findings were cirrhosis, fibrosis and steatosis. The HT1 group had a mortality rate of 78%. Patients who received supportive care or nutritional treatment had a 3-year survival rate of 10%. For those who underwent liver transplantation, the 6-year survival rate was 60%. In most cases pharmacological treatment with nitisinone and special dietary products were not available. The leading causes of death were fulminant liver failure, metastatic hepatocellular carcinoma, and porphyria-like neurologic crisis. Newborn screening programs in combination with the availability of orphan drugs, proper monitoring, genetic counseling, and clinical practice guidelines are needed to enable physicians to identify the disease, delay its progression, and improve patients' quality of life. CONCLUSION: The devastating natural history of HT1 is still observed in Mexican patients because they are not diagnosed and treated during the early stages of the disease.
Assuntos
Heptanoatos/metabolismo , Fígado/patologia , Tirosinemias/diagnóstico , Tirosinemias/terapia , Cicloexanonas/uso terapêutico , Feminino , Humanos , Lactente , Recém-Nascido , Transplante de Fígado , Masculino , Programas de Rastreamento/métodos , México/epidemiologia , Nitrobenzoatos/uso terapêutico , Terapia Nutricional , Estudos Retrospectivos , Taxa de Sobrevida , Tirosinemias/epidemiologiaRESUMO
The enantioselectivity (E) of native lipases from Aspergillus niger, Aspergillus terreus, Fusarium oxysporum, Mucor javanicus, Penicillium solitum and Rhizopus javanicus in the resolution of (R,S)-ibuprofen and (R,S)-ketoprofenenantiomers by esterification reaction with 1-propanol in isooctane was compared with known commercial Candida rugosa (Sigma) and Candida antarctica (Novozym®435) lipases. In the resolution of (R,S)-ibuprofen, C. rugosa lipase showed good selectivity (E = 12) while Novozym®435 (E = 6.7) and A. niger (E = 4.8) lipases had intermediate selectivities. Other enzymes were much less selective (E around 2.3 and 1.5), under tested conditions. After preliminary optimization of reaction conditions (water content, enzyme concentration and presence of additives) the enantioselectivity of native A. niger lipase could be enhanced substantially (E = 15). All tested lipases showed low selectivity in the resolution of (R,S)-ketoprofen because poor ester yields and low enantiomeric excess of the acid remaining were achieved.
A enantioseletividade (E) das lipases nativas de Aspergillus niger, Aspergillus terreus, Fusarium oxysporum, Mucor javanicus, Penicillium solitum e Rhizopus javanicus na resolução dos enantiômeros do (R,S)-ibuprofeno e (R,S)-cetoprofeno na reação de esterificação com 1-propanol em isoctano foi comparada com as lipases comerciais de Candida rugosa (Sigma) e Candida antarctica (Novozym®435). A lipase de C. rugosa mostrou boa enantioseletividade (E = 12) comparada com as da Novozym®435 (E = 6.7), de A. niger (E=4.8) e com as outras lipases que foram muito menos seletivas (E por volta de 2.3 e 1.5) na resolução do (R,S)-ibuprofeno, dentro das condições testadas. Após uma otimização preliminar das condições da reação (conteúdo de água, concentração da enzima e presença de aditivos) a enantioseletividade da lipase de A. niger pôde ser substancialmente aumentada (E = 15). Todas as lipases testadas mostraram baixa seletividade na resolução de (R,S)-cetoprofeno, resultando baixos rendimentos de éster e de excesso enantiomérico do ácido não esterificado.
Assuntos
Ensaios Enzimáticos Clínicos , Fungos , Heptanoatos , Técnicas In Vitro , Lipase , MétodosRESUMO
Estudio preclínico realizado en la Universidad Médica de Cienfuegos, Cuba, entre junio y diciembre de 2003, con el objetivo de validar desde el punto de vista histológico un posible modelo de hiperplasia prostática. Se utilizaron 15 ratas Sprague Dawley machos de 21 días de edad. El grupo I no se castró ni recibió, tratamiento con testosterona, mientras que los grupos II y III se orquiectomizaron y se les administró testosterona (25 mg/ml) a 3mg/kg subcutánea por veintiún días y enantato de testosterona (100 mg/ml) a 14 mg/kg en dosis única, respectivamente. La observación de los cortes histológicos se realizó en diez campos de 40X. La administración de enantato de testosterona causó una disminución del número de acinos e incrementó el número de capas epiteliales celulares, las aproximaciones interglandulares, las glándulas dilatadas y la presencia de pseudopapilas; el estroma se hizo más laxo y escaso. Los cambios histológicos hiperplásicos en estos animales fueron superiores cuantitativa y cualitativamente a los producidos por la administración de testosterona durante veintiún días.
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Animais , Ratos , Modelos Animais de Doenças , Heptanoatos/metabolismo , Hiperplasia Prostática/induzido quimicamente , Testosterona/metabolismo , Heptanoatos/administração & dosagem , Ratos Sprague-Dawley , Testosterona/administração & dosagemRESUMO
Hereditary tyrosinemia type I (HT1) is an inborn metabolic error characterized by hepatorenal dysfunction. Affected patients excrete large quantities of succinylacetone (SA), a tyrosine catabolite believed to be involved in the pathogenesis of HT1. A growing body of evidence relates the oxidative stress observed in metabolic disorders to free radicals generated from accumulated metabolites. In this context, oxidation of SA by peroxynitrite or cytochrome c yielding reactive intermediates and products was investigated here. Both peroxynitrite and cytochrome c were able to initiate oxygen consumption by SA, which was followed by polarimetric and chemiluminescence measurements. The light emission arises from triplet carbonyls formed by the thermolysis of dioxetane intermediates, as indicated by energy transfer experiments. EPR spin-trapping studies with 2-methyl-2-nitrosopropane revealed the intermediacy of two different carbon-centered radicals, one of them originating from cleavage of the triplet carbonyl product. The pH profiles obtained by oxygen consumption, chemiluminescence, and stopped-flow spectrophotometry point to the peroxynitrite anion as the initiator of SA aerobic oxidation. Overstoichiometric formation of organic acids based on added peroxynitrite confirms the occurrence of an oxygen-dependent chain reaction, here proposed to be initiated by one electron abstraction from the enolic form of SA. The results obtained may help shed light on the role of both SA and oxidative stress in the pathogenesis of HT1.
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Heptanoatos/química , Oxigênio/química , Ácido Peroxinitroso/química , Tirosinemias/metabolismo , Citocromos/farmacologia , Eletroforese Capilar , Radicais Livres , Hemoglobinas/farmacologia , Humanos , Peróxido de Hidrogênio/farmacologia , Concentração de Íons de Hidrogênio , Medições Luminescentes , Oxirredução , Estresse Oxidativo , Oxigênio/metabolismo , Consumo de Oxigênio/efeitos dos fármacos , Fosfatos/farmacologia , Análise EspectralRESUMO
Se estudió el efecto de una sobredosis de enantato de testosterona y de benzoato de estradiol en ratas machos prepúberes, sobre el comportamiento de la glucemia y la insulinemia in vivo, durante una prueba de tolerancia a la glucosa. Adicionalmente se exploró, in vitro, la capacidad de secreción de insulina estimulada por glucosa de los islotes de Langerhans de estas ratas hiperandrogenizadas e hiperestrogenizadas. Se encontró que la hiperandrogenización se acompañaba de un deterioro de la sensibilidad a la insulina, con hiperinsulinemia, que no se corresponde con un aumento de la capacidad de secreción de insulina de los islotes de Langerhans. Sin embargo, se comprobó que la hiperestrogenización no indujo cambios en los perfiles de glucemia, ni de insulinemia, ni en la capacidad de secreción de insulina de los islotes de Langerhans de este grupo de ratas hiperestrogenizadas(AU)
The effect of an overdose of testosterone heptanoate and estradiol in male prepubescent rats on the behavior of glycemia and insulinemia was studied in vivo during a glucose tolerance test. The capacity of insulin secretion stimulated by glucose from the islets of Langerhans of these rats that were administered a high dose of androgens and estrogens was explored in vitro. It was found that the high level of circulating androgens was accompanied by a deterioration of sensitivity to insulin with hyperinsulinemia that does not correspond to an increase of the insulin secreting capacity of the islets of Langerhans. However, it was demonstrated that the high level of circulating estrogens did not produce changes either in the glycemia and insulinemia profiles or in the insulin secreting capacity of the islets of Langerhans in this group of rats that received an elevated dose of estrogens(AU)
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Animais , Masculino , Ratos , Ratos Endogâmicos , Ilhotas Pancreáticas , Estradiol , Heptanoatos , Teste de Tolerância a Glucose/métodos , HiperinsulinismoRESUMO
We have previously shown that the pathway of porphyrin synthesis operates in the blood feeding triatomine bug Rhodnius prolixus but not in the cattle tick Boophilus microplus. In the present paper we studied the correlation between heme synthesis and egg development in Rhodnius. There is a sharp increase heme biosynthetic capability in the fat body (160%) and in the ovaries (360%) in response to a blood meal, as evaluated from the activity of the enzyme delta-aminolevulinate dehydratase (EC 4.2.1.24). The in vivo inhibition of ALA-D by succinyl acetone results in a dose dependent decrease of oviposition. Oviposition is recovered when porphobilinogen, the product of the impaired reaction, is added to the succinyl acetone enriched blood. Taken together, these results show that heme biosynthesis is a fundamental event to vitellogenic females. The demand for heme in this metabolic juncture cannot be supplied by the heme eventually absorbed during blood digestion and associated with Rhodnius heme binding protein (RHBP), which is then incorporated into growing oocytes. Inhibition of heme biosynthesis results in lower levels of RHBP in the hemolymph, suggesting that the synthesis of this protein is controlled by heme availability.
Assuntos
Sangue , Ingestão de Alimentos/fisiologia , Heme/biossíntese , Oogênese/fisiologia , Rhodnius/metabolismo , Animais , Proteínas de Transporte/metabolismo , Feminino , Proteínas Ligantes de Grupo Heme , Hemeproteínas/metabolismo , Hemolinfa/metabolismo , Heptanoatos/farmacologia , Sintase do Porfobilinogênio/antagonistas & inibidoresRESUMO
Atenolol é um antagonista B1-adrenoceptor, usado no tratamento de várias doenças cardiovasculares tais como hipertensão, angina pectoris, entre outras. Estudos têm mostrado que a atividade farmacológica principal reside no S-enantiômero a que a disposição cinética também é estereosseletiva, sendo portanto, necessário analisar os enantiômeros individualmente em fluidos biológicos. Neste estudo, foram desenvolvidos dois métodos cromatográficos para análise dos enantiômeros do atenolol em fluidos biológicos, empregando a extração líquido líquido e a extração em fase sólida para preparação das amostras. Também foi desenvolvido um método para análise enantiosseletiva de atenolol em formulações. Primeiramente foram avaliadas nove colunas quirais para serem utilizadas na análise cromatográfica: duas colunas baseadas em proteínas, a Chiral AGP e a Ultron ESOVM, duas colunas baseadas em derivados de amilose, a Chiralpak AS e a Chiralpak AD a cinco colunas baseadas em derivados de celulose, a Chiralcel OD-H, a Chiralcel OB-H, a Chiralcel OJ, a Chiralcel OD-R e a Chiralcel OJ-R. A coluna que apresentou melhor resolução dos enantiômeros do atenolol foi a Chiralcel OD-H, empregando como fase móvel hexano:etanol (85:15) adicionado de 0,1% de dietilamina. Esta coluna foi utilizada durante o desenvolvimento dos métodos para a análise enantiosseletiva do atenolol, em plasma, urina a formulações. Na extração líquido-líquido, o atenolol foi extraído do plasma a urina em meio alcalino, empregando como solvente extrator 5 mL de clorofórmio:iso-propanol (8:2). Na extração em fase sólida foi empregada a coluna Ce e o solvente de eluição do atenolol foi o metanol. Ambas as extrações foram eficientes na recuperação do atenolol a na eliminação dos interferentes endógenos. Na avaliação da precisão foram obtidos valores de coeficiente de variação inferiores a 10% a não houve diferença estatisticamente significante entre as medianas dos ) resultados obtidos em cinco dias...
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Atenolol , HeptanoatosRESUMO
Accumulation of 5-aminolevulinic acid (ALA) is an event characteristic of porphyrias that may contribute to their pathological manifestations. To investigate effects of ALA independent of porphyrin accumulation we treated rats with the methyl ester of succinylacetone, an inhibitor of 5-aminolevulinic acid dehydratase that accumulates in the porphyric-like syndrome hereditary tyrosinemia. Acute 2-day treatment of fasted rats with succinylacetone methyl ester (SAME) promoted a 27% increase in plasma ALA. This increase in plasma ALA was accompanied by augmentation of the level of total nonheme iron in liver (37%) and brain (20%). Mobilization of iron was also indicated by 49% increase in plasma iron and a 77% increase in plasma transferrin saturation. Liver responded with a mild (12%) increase in ferritin. Under these acute conditions, some indications of oxidative stress were evident: a 15% increase in liver reactive protein carbonyls, and a 42% increase in brain subcellular membrane TBARS. Brain also showed a 44% increase in CuZnSOD activity, consistent with observations in treatment with ALA. Overall, the data indicate that SAME promotes ALA-driven changes in iron metabolism that could lead to increased production of free radicals. The findings support other evidence that accumulation of ALA in porphyrias and hereditary tyrosinemia may induce iron-dependent biological damage that contributes to neuropathy and hepatoma.
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Encéfalo/metabolismo , Inibidores Enzimáticos/farmacologia , Heptanoatos/farmacologia , Ferro/metabolismo , Fígado/metabolismo , Sintase do Porfobilinogênio/antagonistas & inibidores , Ácido Aminolevulínico/sangue , Animais , Encéfalo/efeitos dos fármacos , Ferritinas/metabolismo , Ferro/sangue , Fígado/efeitos dos fármacos , Masculino , Metilação , Ratos , Ratos Wistar , Superóxido Dismutase/metabolismo , Substâncias Reativas com Ácido Tiobarbitúrico/metabolismo , Transferrina/metabolismoRESUMO
OBJETIVO: Avaliar as possíveis alteraçöes no metabolismo lipoprotéico em adolescentes usuárias de contraceptivo injetável mensal após 12 ciclos de tratamento. PACIENTES E MÉTODOS: Foram avaliados os níveis séricos de lipoproteínas, em 30 adolescentes usuárias da associaçäo Acetofenido de Dihidroxiprogesterona 150mg e Enantato de Estradiol 10mg, por um período de 12 ciclos. Como grupo controle foram estudadas 31 adolescentes com as mesmas características, usuárias de dispositivo intra-uterino modelo T Cu200. foram tomadas amostras sangüíneas antes do início do tratamento em ambos os grupos e aos 60, 180 e 360 dias após iniciado o uso da medicaçäo ou do dispositivo intra-uterino e nestas ocasiöes dosadas as fraçöes HDL-C, LDL-C e calculada a relaçäo LDL/HDL. Os grupos estudados eram homogêneos em suas características físicas e também nos parâmetros lipoprotéicos pré-tratamento. RESULTADOS: Após 12 ciclos näo foram encontradas diferenças significativas nos parâmetros estudados, em ambos os grupos. As alteraçöes encontradas ao final do estudo foram semelhantes em ambos os grupos e devidas às características próprias do grupo estudado. CONCLUSÄo: Podemos concluir que o contraceptivo hormonal injetável mensal composto de 150mg de Acetofenido de Dihidroxiprogesterona e 10mg de Enantato de Estradiol se comporta como um contraceptivo näo hormonal no que concerne ao metabolismo de lipoproteínas, näo provocando alteraçöes significativas neste metabolismo.
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Humanos , Feminino , Adolescente , Anticoncepcionais Femininos/administração & dosagem , Anticoncepcionais Femininos/farmacologia , Injeções Intramusculares , Dispositivos Intrauterinos , Lipoproteínas HDL/metabolismo , Lipoproteínas LDL/metabolismo , Medicina do Adolescente , Acetofenida de Algestona/administração & dosagem , Colesterol/metabolismo , Anticoncepcionais Femininos/efeitos adversos , Heptanoatos/administração & dosagemRESUMO
Se estudió la farmacocinética de una dosis de 200 mg de enantato de noretisterona por vía intramuscular en 11 pacientes, las muestras sanguíneas fueron extraídas durante 15 días y luego semanalmente durante 2 meses. Los níveles de noretisterona en plasma se determinaron por cromatografía líquida de alta presión (HPLC). A partir de las observaciones se determinó el modelo farmacocinético adecuado, este resultó ser el biocompartimental abierto con absorción de primer orden. Obtuvimos los parámetros farmacocinéticos en las diferentes fases y se correlacionaron entre sí. El tiempo de vida media de absorción se correlacionó positivamente con el tiempo de vida media de distribución, con el tiempo en que se alcanza la concentración máxima, y con índice de masa corporal. El volumen de distribución se correlacionó positivamente con el tiempo de vida media de eliminación y con el aclaramiento plasmático
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Adolescente , Adulto , Humanos , Feminino , Heptanoatos/farmacocinética , Noretindrona/farmacocinéticaRESUMO
Succinylacetone (SA) proved to be a potent inhibitor of in vitro lymphoproliferative responses. This compound (3.0 mM) reduced the incorporation of 3HTdr by > 90% in mononuclear cell cultures stimulated with PHA, anti-CD3, IL-2 or phorbol dibutyrate-Ca2+ ionomycin. Furthermore, SA caused profound reduction in isotope uptake even if added to 3-day PHA-stimulated cultures as late as 6 h prior to harvest. Cells exposed to SA prior to mitogenic challenge and washed were not impaired in their proliferative activities. The addition of hematin to SA-containing cultures did not reverse the proliferative block. Phenotypic studies of stimulated cells suggested that SA does not preferentially affect one functional group of lymphocytes. However, it appeared that SA may act selectively to inhibit expression of transferrin receptors (CD71), a T-cell activation antigen. These data suggest that SA acts as a noncytotoxic immune inhibitor; this activity may be mediated, in part, by blocking cell activation and subsequent progress through the mitotic cycle.
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Heptanoatos/farmacologia , Ativação Linfocitária/efeitos dos fármacos , Linfócitos/efeitos dos fármacos , Animais , Divisão Celular/efeitos dos fármacos , Células Cultivadas , Humanos , Imunofenotipagem , Linfócitos/imunologia , Mitógenos/farmacologia , Ratos , Receptores da Transferrina/efeitos dos fármacos , Receptores da Transferrina/metabolismoRESUMO
Se realizó un estudio retrospectivo, comparativo, abierto en 58 mujeres voluntarias del Centro de Planificación Familiar, PROFAMILIA, de Santafé de Bogotá, Colombia. La potencia hormonal del anticonceptivo inyectable mensual constituido por Dihidrixiprogesterona Acetofénido (DHPA), 150 mg y Estradiol Enantato (EEn), 10 mg, fue comparada con la de otros anticonceptivos de uso habitual (píldoras de Etinilestradiol (EE), 0.050 mg y Levonorgestrel (LNG), 0.250 mg; EE, 0.030 mg, LNG, 0.150 mg y métodos no hormonales), mediante la determinación de triglicéridos, HDL/DL colesterol, cobre, ceruloplastia, cortisol total y libre, CBG, testosterona total y libre y SHBG en el suero de usuarias crónicas. Las usuarias de métodos no hormonales fueron el grupo de control. En los exámenes de laboratorio, los niveles de triglicéridos fueron más altos y los de testosterona total y libre más bajos en las mujeres que emplean DHPA 150 mg + EEn 10 mg y en las que utilizan píldoras. Tales modificaciones fueron levemente menores en el grupo que emplea el inyectable. Los efectos de DHPA 150 mg + EEn 10 mg sobre cobre, ceruloplasmina, CBG, cortisol libre y total y SHBG fueron escasos o nulos, en comparación con el grupo no hormonal. En cambio las píldoras, inclusive las microdosificadas, mostraron modificaciones de todas esas variables, altamente significativas frente al inyectable (p 0.01) y a los métodos no hormonales (p 0.01), sin que haya diferencias entre éstos últimos. Los resultados sugieren que la potencia hormonal de DHPA 150 mg + EEn 10 mg no es mayor que la de las microdosis orales habituales. Por otro lado, no ofrecen indicios de que ésta fórmula esté sobredosificada no produzca acumulación de efectos en el organismo. Estos hallazgos deben ser tenidos en cuenta al considerar la seguridad del inyectable a largo plazo
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Humanos , Feminino , Adulto , Acetofenida de Algestona/administração & dosagem , Acetofenida de Algestona/análogos & derivados , Acetofenida de Algestona/química , Acetofenida de Algestona/uso terapêutico , Estradiol , HeptanoatosAssuntos
Humanos , Feminino , Anticoncepcionais Orais Hormonais , Heptanoatos/administração & dosagem , Injeções , Acetato de Medroxiprogesterona/administração & dosagem , Anticoncepcionais Orais Hormonais/administração & dosagem , Anticoncepcionais Orais Hormonais/efeitos adversos , Anticoncepcionais Orais Hormonais/metabolismo , Anticoncepcionais Orais Hormonais/farmacologia , Heptanoatos/efeitos adversos , Heptanoatos/farmacologia , Acetato de Medroxiprogesterona/efeitos adversos , Acetato de Medroxiprogesterona/metabolismo , Acetato de Medroxiprogesterona/farmacologia , Resultado do TratamentoRESUMO
O efeito metabólico do contraceptivo mensal injetável contendo acetofenido de dihidroxiprogesterona (DHPA) 150 mg + enantato de estradiol (Een) 10 mg foi comparado ao de outros métodos anticoncepcionais comumente utilizados (pílulas contendo: etinilestradiol (EEn) 0,050 mg + levonogestrel (LNG) 0,250 mg, EE 0,030 + LNG 0,150 mg; e EE 0,030/0,040/0,030mmg + LNG 0,050/0,075/0,0125 mg; enantato de noretisterona (NEE) 200 mg via i.m.; e métodos nao-hormonais. Foram determinados os triglicerídeos séricos, colesterol HDL/LDL, cobre, ceruloplasmina, cortisol total e livre, CBG e testosterona total e livre e SHBG de usu rios crônicas. Este estudo contou com a participaçäo do total de 237 mulheres. As usuárias de métodos nao-hormonais utilizadas como controle apresentaram níveis mais altos de triglicerídeos. Os níveis de testosterona total e livre foram mais baixos em mulheres que utilizavam DHPA 150 mg + Een 10 mg e nas que tomavam pílulas anticoncepcionais (p<0,05 - 0,01). Tais alteraçöes foram levemente menores no grupo que utilizou o injetável. Os efeitos do DHPA 150 mg + EEn 10 mg sobre o colesterol HDL/LDL, cobre, ceruloplasmina, CBG, cortisol total e livre e SHBG foram raros ou inexistentes. Entretanto, com as pílulas anticoncepcionais (mesmo as de formulaçäo de baixa dosagem) ocorreram alteraçöes em todas essas vari eis, que foram altamente significativas na comparaçäo com o método injetável (p< 0,01) e com os métodos nao-hormonais (p<0,01); näo houve diferenças entre estes dois últimos métodos. Os resultados sugerem que o efeito metabólico da injeçäo mensal i.m. de DHPA 150 mg + Een 10 mg näo é superior aos dos anticoncepcionais orais comumente utilizados. Estes resultados também nao sugerem que a dose contida nesse injetável seja excessiva. Nao há qualquer evidência de que ele produza efeito cumulativo no organismo. Esses achados devem ser levados em consideraçäo com relaçäo à segurança do uso a longo prazo desse injetável.