RESUMO
Parasitism by gastrointestinal nematodes is a challenge for small ruminant farming worldwide. It causes productive and economic losses, especially due to parasite resistance to conventional anthelmintics. Natural compounds with antiparasitic activity are a potential alternative for controlling these parasites especially when considering the widespread occurrence of anthelmintic resistance. Our objective was to evaluate the activity of anacardic acid, geraniol, cinnamaldehyde and citronellal on Haemonchus contortus isolates with different levels of anthelmintic resistance profiles. These compounds were tested using egg hatch assays (EHAs), larval development tests (LDTs) as well as LDTs on mini-fecal cultures, on the Haemonchus contortus isolates Kokstad (KOK-resistant to all anthelmintics), Inbred-Strain-Edinburgh (ISE-susceptible to all anthelmintics) and Echevarria (ECH-susceptible to all anthelmintics). Effective concentrations to inhibit 50% (EC50) and 95% (EC95) of egg hatching and larval development were calculated. Results for EHA and LDT for all tested compounds, considering EC50 and EC95 values, showed low variation among the studied isolates with most RF values below 2x. All studied compounds showed efficacy against egg hatching and larval development of H. contortus isolates regardless of anthelmintic resistance profiles. The compounds with the smallest EC50 and EC95 values were cinnamaldehyde and anacardic acid making them promising candidates for future in vivo studies.(AU)
A infecção por nematoides gastrintestinais é um dos principais desafios na produção de pequenos ruminantes e ocasiona perdas produtivas, principalmente, devido à resistência anti-helmíntica. Bioativos com atividade anti-helmíntica são potencial alternativa para o controle desses parasitos em especial, considerando-se a ampla incidência de resistência anti-helmíntica nos rebanhos. O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade biológica do ácido anacárdico, geraniol, cinamaldeído e citronelal em isolados de Haemonchus contortus com diferentes perfis de resistência anti-helmíntica. Foram realizados testes de eclosão de ovos (TEO), testes de desenvolvimento larvar (TDL) e TDLs em minicoproculturas, utilizando-se o isolado Kokstad (resistente a todos os anti-helmínticos), o isolado Inbred-Strain-Edinburgh (suscetível) e o isolado Echevarria (suscetível). Foram calculadas as concentrações efetivas para inibir 50% (CE50) e 95% (CE95) da eclodibilidade dos ovos e do desenvolvimento larvar. Resultados de TEO e TDL apresentaram baixa variação entre os diferentes isolados para um mesmo composto testado com fatores de resistência geralmente abaixo de 2x. Todos os compostos estudados mostraram eficácia contra a eclosão de ovos e desenvolvimento larvar de isolados de H. contortus independente do perfil de resistência anti-helmíntica dos mesmos. Os compostos que apresentaram atividade nas menores concentrações foram cinamaldeído e ácido anacárdico, sendo estes os componentes mais promissores para futuros estudos in vivo.(AU)
Assuntos
Haemonchus/isolamento & purificação , Anti-Helmínticos/química , Monoterpenos/efeitos adversos , Ácidos Anacárdicos/efeitos adversosRESUMO
The aim of this study was to describe the epidemiological, clinical, and pathological findings of two outbreaks of gastrointestinal nematode infections in beef cattle kept under an inadequate sanitary protocol. An outbreak of trichostrongylosis occurred in Amambai, Mato Grosso do Sul (MS), from May to July 2016. The herd consisted of 3,000 Nellore cows, and of these, fifteen died after showing emaciation and diarrhea and remaining in recumbency. At necropsy, the abomasum showed edema in the folds, white, raised areas, multifocal to coalescent, and small ulcers. Histopathology showed larvae compatible with trichostrongylid nematodes were present inside the abomasum glands. Trichostrongylus axei was identify in the abomasum. The hemonchosis outbreak began in October 2018, in a breeding and finishing property in Santa Rita do Pardo, MS. Of 4,000 cattle aged 8 to 18 months, 673 became ill and 117 died. Clinical signs were emaciation, weakness, dehydration, submandibular edema, and soft stools. At necropsy, large numbers of nematodes were found in the abomasum; they were morphologically classified as Haemonchus placei. Both outbreaks were caused by failures in the parasite control protocol. However, in Outbreak I, frost and immune stress caused by lack of food may have contributed to the deaths. In Outbreak I, the main failure in the devermination protocol was the use of anthelmintics without carrying out an efficacy test. In Outbreak II, there was no parasite control protocol in the rearing and finishing property, and in the breeding property, there was resistance to the anthelmintic used (ivermectin). The two outbreaks highlight the importance of gastrointestinal nematode control protocols in cattle and demonstrate that infections by T. axei and H. placei can be lethal for this species.
O objetivo deste trabalho foi descrever os achados epidemiológicos, clínicos e patológicos de dois surtos de verminose em bovinos de corte mantidos sob protocolo sanitário inadequado. Um surto de tricostrongilose ocorreu em Amambai, Mato Grosso do Sul (MS), de maio a julho de 2016. O rebanho de cria era composto por 3.000 vacas Nelore, das quais, quinze vacas adultas morreram após apresentarem emagrecimento, diarreia e permanecerem em decúbito. Na necropsia, o abomaso apresentava edema das pregas, áreas brancacentas, elevadas, multifocais a coalescentes e pequenas úlceras. Na histopatologia, larvas compatíveis com nematódeos tricostrongilídeos estavam presentes no interior das glândulas do abomaso. A recuperação de helmintos do abomaso demonstrou que Trichostrongylus axei foi o principal agente etiológico. O surto de hemoncose iniciou-se em outubro de 2018, em uma propriedade de recria e terminação em Santa Rita do Pardo, MS. Do total de 4 mil bovinos com 8 a 18 meses, 673 adoeceram e 117 morreram. Os sinais clínicos foram emagrecimento, fraqueza, desidratação, edema submandibular e fezes pastosas. Na necropsia, havia grande quantidade de nematódeos no abomaso, que foram classificados morfologicamente como Haemonchus placei. Ambos os surtos foram causados por falhas no protocolo de controle parasitário, porém, no Surto I, geadas e estresse imunológico causado pela falta de alimento podem ter contribuído para as mortes. No Surto I, a principal falha no protocolo de desverminação foi o uso de anti-helmínticos sem a realização de teste de eficácia. No Surto II, não havia protocolo de controle parasitário na propriedade de recria e terminação, e na propriedade de cria, havia resistência ao anti-helmíntico utilizado (ivermectina). Os dois surtos ressaltam a importância dos protocolos de controle de nematódeos gastrintestinais em bovinos e demonstram que infecções por T. axei e H. placei podem ser letais para esta espécie.
Assuntos
Doenças dos Bovinos/parasitologia , Trato Gastrointestinal/parasitologia , Infecções por Nematoides/diagnóstico , Infecções por Nematoides/mortalidade , Infecções por Nematoides/patologia , Infecções por Nematoides/veterinária , Infecções por Nematoides/epidemiologia , Trichostrongylus/isolamento & purificação , Haemonchus/isolamento & purificação , Infecções por Nematoides/prevenção & controleRESUMO
Trichostrongylid em ovelhas foi estudado no Distrito Zhob, Balochistan. Foram coletados 120 tratos gastrointestinais (GIT) de ovelhas do matadouro do distrito. Estas amostras foram processadas para isolamento e identificação de nematódeos tricostrônquicos no Laboratório do Hospital Veterinário do Distrito Zhob. A taxa de prevalência geral foi de 39,1% em machos e 60,8% em fêmeas (p=0,001). A taxa de prevalência em duas raças viz Balochi e Rakhshani foi de 58,3% e 41,6%, respectivamente (p=0,01). A prevalência da espécie observada com Trichostrongylus foi 19,1%, Haemonchus foi 20,8%, Cooperia foi 29,1% e Nematodirus foi 30,8% (p=0,087). Quanto a quantidade de espécies infestadas pelas ovelhas, um único tipo de parasita estava em 32,5% de animais, dois tipos de espécies parasitárias em 36,3% dos animais e três tipos de espécies parasitárias em 30,8% dos animais (p=0,366).(AU)
Assuntos
Animais , Tricostrongilose/veterinária , Tricostrongilose/epidemiologia , Trichostrongylus/isolamento & purificação , Ovinos/parasitologia , Nematodirus/isolamento & purificação , Haemonchus/isolamento & purificação , Paquistão , Trato Gastrointestinal/parasitologiaRESUMO
The aim of this experiment was to determine the yield of Haemonchus contortus third-stage larvae (L3) in faecal cultures in different conditions, including incubation time (7 or 14 days), the addition of inert additives (polystyrene pellets, vermiculite or no additive) and physical condition of the incubated faeces (ground or whole pellets). Twelve groups of 10 cultures each were arranged and incubated at 24 °C to evaluate the interaction of the above-mentioned conditions. Significantly, more L3 (p=0.0019 to p=0.0200) were recovered from cultures incubated for 7 days than for 14 days, except for the groups containing whole pellets with no additives (p=0.53) or with vermiculite (p=0.41). Larval yields from 7-day incubated cultures did not differ between groups (p=0.47), but for the whole pellets with vermiculite group, which yielded significantly less L3 (p<0.0001) than the rest of the cultures. Incubation for 14 days showed that cultures containing whole pellets with no additives yielded significantly more L3 (p<0.05) than the rest. Culturing faeces with H. contortus seems not to require inert additives or extra manipulation to obtain good L3 yields.
Assuntos
Fezes/parasitologia , Hemoncose/veterinária , Haemonchus/isolamento & purificação , Doenças dos Ovinos/parasitologia , Animais , Meios de Cultura , Hemoncose/parasitologia , Haemonchus/crescimento & desenvolvimento , Larva/crescimento & desenvolvimento , Ovinos , Fatores de TempoRESUMO
The present study provides the first evaluation of the endoparasite profile in dairy cattle from the microregion of São João del-Rei, Minas Gerais, Brazil, including seasonal variations in parasitic infections. Fecal samples were collected directly from rectum of 123 dairy cows and 160 calves on 15 farms. These were kept in insulated boxes and sent for immediate analysis. Using eggs per gram of feces (EPG) we found the following prevalences: Strongyloidea 43.5%, Moniezia sp. 7.6% and both Strongyloides sp. and Trichuris spp. 2.2%, in dairy cows. In calves, the prevalence was Strongyloidea 50.9%, Moniezia sp. 5.6% and Strongyloides sp. 1.9%. The third-stage larvae recovered from coprocultures from cows and calves consisted mainly of Cooperia spp., Haemonchus spp. and Ostertagia spp. EPG counts were significantly higher in calves. Regarding seasonality, the EPG counts and prevalence of Moniezia sp. tended to be higher in the dry period, whereas those of Strongyloidea were higher in the rainy season. Evidence suggests that parasite control and prophylaxis were inadequately managed on the farms studied here. The present parasitological profile correlates with those found by other similar studies, indicating that the main problem is still the inadequate management of parasite control and prophylaxis by farmers.(AU)
O presente estudo representa a primeira avaliação do perfil de endoparasitos em bovinos leiteiros da microrregião de São João del-Rei, Minas Gerais, Brasil, e das variações sazonais das infecções parasitárias. Foram avaliadas amostras fecais de 123 vacas e 160 bezerros de 15 propriedades rurais, coletadas diretamente do reto, mantidas em caixas térmicas isoladas e analisadas imediatamente. A contagem de ovos por grama de fezes (OPG) revelou prevalências de 43,5% de Strongyloidea, 7,6% de Moniezia sp. e 2,2% de Strongyloides sp. e Trichuris spp. em vacas leiteiras. As prevalências de OPG em bezerros foram 50,9% de Strongyloidea, 5,6% de Moniezia sp. e 1,9% de Strongyloides sp. As larvas do terceiro estádio recuperadas de coproculturas de vacas e bezerros foram principalmente de Cooperia spp., Haemonchus spp. e Ostertagia spp. OPG dos parasitos foram significativamente maiores em bezerros. Em relação à sazonalidade, OPG e a prevalência de Moniezia sp. tenderam a ser maiores durante a estação seca, enquanto OPG de Strongyloidea foram maiores na estação chuvosa. Com base nos resultados, é possível concluir que o manejo antiparasitário nas propriedades estudadas não é realizado de maneira plenamente satisfatória. O presente perfil parasitológico se assemelha a outros encontrados em estudos semelhantes, indicando que o maior problema ainda é o manejo antiparasitário inadequado realizado nas propriedades de bovinos leiteiros.(AU)
Assuntos
Animais , Feminino , Bovinos , Doenças Parasitárias em Animais/parasitologia , Strongyloidea/isolamento & purificação , Strongyloides/isolamento & purificação , Trichuris/isolamento & purificação , Haemonchus/isolamento & purificação , Anti-Helmínticos/uso terapêutico , Brasil/epidemiologia , Estação Seca , Estação ChuvosaAssuntos
Animais , Feminino , Camundongos , Ratos , Doenças dos Ovinos/parasitologia , Monoterpenos/farmacologia , Trato Gastrointestinal/parasitologia , Nanocápsulas/administração & dosagem , Anti-Helmínticos/farmacologia , Infecções por Nematoides/veterinária , Contagem de Ovos de Parasitas , Doenças dos Ovinos/tratamento farmacológico , Benzimidazóis/farmacologia , Resistência a Medicamentos/efeitos dos fármacos , Ovinos/parasitologia , Levamisol/farmacologia , Ratos Wistar/sangue , Testes de Toxicidade , Testes de Sensibilidade Parasitária , Monoterpenos/toxicidade , Monoterpenos/uso terapêutico , Nanocápsulas/toxicidade , Nanocápsulas/uso terapêutico , Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real , Hemoncose/tratamento farmacológico , Haemonchus/isolamento & purificação , Haemonchus/efeitos dos fármacos , Helmintíase Animal/tratamento farmacológico , Anti-Helmínticos/toxicidade , Anti-Helmínticos/uso terapêutico , Camundongos , Infecções por Nematoides/tratamento farmacológicoRESUMO
Acacia farnesiana pods are rich in secondary metabolites and their biological activities have been recorded as antibacterial, antioxidant and anthelmintic. Previously, an in vitro bioguided study showed the important ovicidal and larvicidal effects of an organic fraction (EtOAc-F) from a hydroalcoholic extract of A. farnesiana pods against Haemonchus contortus. The present study aimed to assess the in vivo anthelmintic effect of EtOAc-F from A. farnesiana pods on the H. contortus faecal egg elimination in female lambs and on the infective larvae (L3) population reduction in coprocultures. The EtOAc-F was obtained from a hydroalcoholic extract from A. farnesiana pods through chromatographic procedures; additionally, some secondary compounds were identified using high-performance liquid chromatography (HPLC). Twenty-one 'Katahdin' crossbred female lambs ranging from three to four months of age, with body weights 21.9 ± 0.39 kg were used. Animals were orally infected with H. contortus (L3) by a single dose of 350 L3/kg BW. Three experimental groups (n = 7) were assigned as follows: 1) Control (untreated), 2) Albendazole, as a positive control (at 7.5 mg/kg BW, unique dose) and 3) EtOAc-F (at 100 mg/kg BW, once every third day, with three applications in total). Individual faecal samples were collected once a week for 5 weeks (at days 38, 45, 52, 59 and 66) post-treatment, to measure the faecal egg counts (FEC) and to obtain the H. contortus (L3) population from faecal cultures. The highest FEC reduction caused by EtOAc-F was 67.7%; meanwhile, albendazole showed a total FEC reduction after the second week post-treatment (day 45). On the other hand, the fraction caused an important reduction in the larval population in coprocultures (54.3-68.5%). The phytochemical analysis revealed the presence of galloyl derivatives and flavonoids as major compounds. The A. farnesiana pods could serve as a natural anthelmintic for the control of H. contortus, and perhaps for controlling other parasites of veterinary importance.
Assuntos
Acacia/química , Anti-Helmínticos/uso terapêutico , Hemoncose/veterinária , Extratos Vegetais/uso terapêutico , Doenças dos Ovinos/tratamento farmacológico , Animais , Anti-Helmínticos/isolamento & purificação , Anti-Helmínticos/farmacologia , Fezes/parasitologia , Feminino , Flavonoides/química , Ácido Gálico/química , Hemoncose/tratamento farmacológico , Hemoncose/parasitologia , Haemonchus/efeitos dos fármacos , Haemonchus/isolamento & purificação , Hematócrito/veterinária , Contagem de Ovos de Parasitas/veterinária , Extratos Vegetais/isolamento & purificação , Extratos Vegetais/farmacologia , Distribuição Aleatória , Ovinos , Doenças dos Ovinos/parasitologiaRESUMO
Standard diagnostic methods currently in use for the identification of helminth infections in ruminants are based on the morphological analysis of immature and adult stages of parasites. This paper describes a method for the semiquantitative identification of nematodes, mainly Trichostrongyloidea, at species-level resolution. The method is based on amplification and fragment analysis followed by minisequencing of the ITS-2 region (internal transcribed spacer 2) of the ribosomal DNA of parasite eggs or larvae. This method allows for the identification of seven genera (Chabertia, Cooperia, Haemonchus, Oesophagostomum, Ostertagia, Teladorsagia, and Trichostrongylus) and 12 species (Chabertia ovina, Cooperia curticei, Cooperia punctata, Cooperia oncophora/Cooperia surnabada, Haemonchus contortus, Haemonchus placei, Haemonchus longistipes, Oesophagostomum asperum, Oesophagostomum radiatum, Ostertagia ostertagi, Trichostrongylus axei, and Trichostrongylus colubriformis) of infectious nematodes of domestic ruminants. The concordance between the morphological and molecular analyses in the detection of genera ranged from 0.84 to 0.99, suggesting the proposed detection method is specific, semiquantitative, less laborious, and highly cost-efficient.
Assuntos
Infecções por Nematoides/veterinária , Ruminantes/parasitologia , Trichostrongyloidea/isolamento & purificação , Animais , Bovinos , Doenças dos Bovinos/parasitologia , DNA de Helmintos , DNA Ribossômico , Cabras , Haemonchus/genética , Haemonchus/isolamento & purificação , Infecções por Nematoides/parasitologia , Técnicas de Amplificação de Ácido Nucleico/veterinária , Oesophagostomum/genética , Oesophagostomum/isolamento & purificação , Ostertagia/genética , Ostertagia/isolamento & purificação , Ovinos , Strongyloidea/genética , Trichostrongyloidea/genética , Trichostrongylus/genéticaRESUMO
Abstract This study aimed to evaluate the anthelmintic and ultrastructural effects of Calotropis procera latex on Haemonchus contortus. C. procera latex was twice centrifuged at 10,000×g and dialyzed to obtain a fraction rich in proteins, named LP (latex protein), and at 3,000 rpm to obtain a fraction rich in secondary metabolites, named LNP (latex non-protein). Specimens of H. contortus exposed to LNP, LP and PBS in the Adult Worm Motility Test (AWMT) were submitted to scanning (SEM) and transmission (TEM) electron microscopy to verify changes in their ultrastructure. Phytochemical tests in the LNP indicated the presence of phenols, steroids, alkaloids and cardenolides. High-Performance Liquid Chromatography (HPLC) characterized the presence of the compounds gallic acid and quercetin in the LNP. The protein content in the LP was 43.1 ± 1.1 mg/mL and 7.7 ± 0.3 mg/mL in LNP. In AWMT, LNP and LP inhibited the motility of 100% of the nematodes, with LNP being more effective than LP and ivermectin more effective than both (p <0.05). Cuticle changes were observed by SEM and TEM in nematodes treated with LP and LNP. Calotropis procera latex has anthelmintic effects against H. contortus, causing damage to its cuticle and other alterations in its ultrastructure.
Resumo Este estudo objetivou avaliar os efeitos anti-helmínticos e ultraestruturais do látex de Calotropis procera sobre Haemonchus contortus. Látex de C. procera foi centrifugado duas vezes à a 10.000xg e dialisado para obter uma fração rica em proteínas, denominada proteínas do látex (LP). E centrifugado e centrifugado a 3.000 rpm, para obter uma fração rica em metabólitos secundários, denominada LNP (látex não proteico). Espécimes de H. contortus expostos à LNP, LP e PBS no Teste de Motilidade dos Nematoides Adultos (TMNA) foram submetidos a microscopia eletrônica de varredura (MEV) e de transmissão (MET), para verificar alterações em sua ultraestrutura. Testes fitoquímicos em LNP indicaram a presença de fenóis, esteroides, alcaloides e cardenolídeos. A presença dos compostos ácido gálico e quercetina em LNP foi caracterizada por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE). O conteúdo de proteínas em LP foi de 43,1 ± 1,1 mg/mL e de 7,7 ± 0,3 mg/mL em LNP. No TMNA, LNP e LP inibiram a motilidade de 100% dos nematoides, sendo LNP mais eficaz que LP, e a ivermectina mais eficaz que ambos (p <0,05). Alterações na cutícula de nematoides tratados com LP e LNP foram observadas por MEV e MET. O látex de C. procera apresenta efeito anti-helmíntico sobre H. contortus, causando danos à sua cutícula e outras alterações em sua ultraestrutura.
Assuntos
Animais , Calotropis/química , Haemonchus/efeitos dos fármacos , Haemonchus/ultraestrutura , Látex/química , Anti-Helmínticos/farmacologia , Fenóis/química , Fitosteróis/química , Saponinas/química , Doenças dos Ovinos/parasitologia , Taninos/química , Triterpenos/química , Técnicas In Vitro , Brasil , Resistência a Medicamentos , Ovinos/parasitologia , Microscopia Eletrônica de Varredura , Cardenolídeos/química , Cromatografia Líquida de Alta Pressão , Alcaloides/química , Hemoncose/veterinária , Haemonchus/isolamento & purificação , Haemonchus/fisiologia , Látex/isolamento & purificação , Antocianinas/químicaRESUMO
Abstract The objective of this study was to evaluate the efficacy of carvacryl acetate (CVA) and nanoencapsulated CVA (nCVA) on gastrointestinal nematodes of sheep. The CVA was nanoencapsulated with chitosan/gum arabic and the efficacy of nanoencapsulation (EE), yield, zeta potential, nanoparticle morphology and release kinetics at pH 3 and 8 were analyzed. Acute and subchronic toxicity were evaluated in rodents and reduction of egg counts in the faeces (FECRT) of sheep. The sheep were divided into four groups (n = 10): G1, 250 mg/kg CVA; G2, 250 mg/kg nCVA; G3, polymer matrix and G4: 2.5 mg/kg monepantel. EE and nCVA yield were 65% and 57%, respectively. The morphology of the nanoparticles was spherical, size (810.6±286.7 nm), zeta potential in pH 3.2 (+18.3 mV) and the 50% release of CVA at pHs 3 and 8 occurred at 200 and 10 h, respectively. nCVA showed LD50 of 2,609 mg/kg. CVA, nCVA and monepantel reduced the number of eggs per gram of faeces (epg) by 57.7%, 51.1% and 97.7%, respectively. The epg of sheep treated with CVA and nCVA did not differ from the negative control (P>0.05). Nanoencapsulation reduced the toxicity of CVA; however, nCVA and CVA presented similar results in the FECRT.
Resumo O objetivo deste trabalho foi avaliar a eficácia do acetato de carvacrila (ACV) e do ACV nanoencapsulado (nACV) sobre nematóides gastrintestinais de ovinos. O ACV foi nanoencapsulado com quitosana/goma arábica e foi analisada a eficácia de nanoencapsulamento (EE), o rendimento, potencial zeta, morfologia das nanopartículas e cinética de liberação em pH 3 e 8. Foram avaliadas as toxicidades aguda e subcrônica em roedores e a redução da contagem de ovos nas fezes (RCOF) de ovinos. Os ovinos foram divididos em quatro grupos (n = 10): G1, 250 mg/kg ACV; G2, 250 mg/kg de nACV; G3, matriz polimérica e G4: 2,5 mg/kg de monepantel. A EE e o rendimento de nACV foram de 65% e 57%, respectivamente. A morfologia das nanopartículas foi esférica, tamanho (810,6±286,7 nm), potencial zeta no pH 3,2 (+18,3 mV) e a liberação de 50% de CVA nos pHs 3 e 8 ocorreu às 200 e 10 h, respectivamente. nACV apresentou DL50 de 2.609 mg/kg. ACV, nACV e o monepantel reduziram a contagem de ovos por grama de fezes (opg) em 57,7%, 51,1% e 97,7%, respectivamente. A contagem de opg de ovelhas tratadas com ACV e nCVA não diferiu do controle negativo (P>0,05). O nanoencapsulamento reduziu a toxicidade do AVC; no entanto, nACV e ACV apresentaram resultados semelhantes na RCOF.
Assuntos
Animais , Feminino , Camundongos , Ratos , Doenças dos Ovinos/parasitologia , Monoterpenos/farmacologia , Trato Gastrointestinal/parasitologia , Nanocápsulas/administração & dosagem , Anti-Helmínticos/farmacologia , Infecções por Nematoides/veterinária , Contagem de Ovos de Parasitas , Doenças dos Ovinos/tratamento farmacológico , Benzimidazóis/farmacologia , Resistência a Medicamentos/efeitos dos fármacos , Ovinos/parasitologia , Levamisol/farmacologia , Ratos Wistar/sangue , Testes de Toxicidade , Testes de Sensibilidade Parasitária , Monoterpenos/toxicidade , Monoterpenos/uso terapêutico , Nanocápsulas/toxicidade , Nanocápsulas/uso terapêutico , Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real , Hemoncose/tratamento farmacológico , Haemonchus/isolamento & purificação , Haemonchus/efeitos dos fármacos , Helmintíase Animal/tratamento farmacológico , Anti-Helmínticos/toxicidade , Anti-Helmínticos/uso terapêutico , Camundongos , Infecções por Nematoides/tratamento farmacológicoRESUMO
This study aimed to evaluate the anthelmintic activity of Eucalyptus citriodora essential oil and citronellal on sheep gastrointestinal nematodes. Essential oil composition was determined by gas chromatography mass spectrometry. The substances were evaluated in vitro using adult worm motility test (AWMT) and transmission electron microscopy (TEM). The acute toxicity test in mice and the fecal egg count reduction test (FECRT) in sheep were performed. Citronellal was confirmed as the essential oil major constituent (63.9%). According to the AWMT, 2 mg/mL of essential oil and citronellal completely inhibited Haemonchus contortus motility at 6 h post exposure. H. contortus exposed to essential oil and citronellal exhibited internal ultrastructural modifications. The lethal dose 50 values in mice were 5,000 and 2,609 mg/kg for essential oil and citronellal, respectively. E. citriodora essential oil reduced sheep epg at 14 days post treatment by 69.5% (P<0.05). No significant differences were observed in epg between the citronellal and negative control groups (P>0.05). The interaction between citronellal and other constituents in the essential oil may be relevant for its in vivo anthelmintic activity. Thus, E. citriodora essential oil and citronellal pharmacokinetic studies may help elucidate the anthelmintic activity of these compounds.
Assuntos
Anti-Helmínticos/farmacologia , Eucalyptus/química , Hemoncose/veterinária , Haemonchus/efeitos dos fármacos , Óleos Voláteis/farmacologia , Doenças dos Ovinos/parasitologia , Ovinos/parasitologia , Animais , Feminino , Cromatografia Gasosa-Espectrometria de Massas , Hemoncose/parasitologia , Haemonchus/isolamento & purificação , Haemonchus/ultraestrutura , Camundongos , Microscopia Eletrônica de Transmissão , Óleos Voláteis/isolamento & purificação , Contagem de Ovos de Parasitas , Testes de Sensibilidade ParasitáriaRESUMO
Abstract This study aimed to evaluate the anthelmintic activity of Eucalyptus citriodora essential oil and citronellal on sheep gastrointestinal nematodes. Essential oil composition was determined by gas chromatography mass spectrometry. The substances were evaluated in vitro using adult worm motility test (AWMT) and transmission electron microscopy (TEM). The acute toxicity test in mice and the fecal egg count reduction test (FECRT) in sheep were performed. Citronellal was confirmed as the essential oil major constituent (63.9%). According to the AWMT, 2 mg/mL of essential oil and citronellal completely inhibited Haemonchus contortus motility at 6 h post exposure. H. contortus exposed to essential oil and citronellal exhibited internal ultrastructural modifications. The lethal dose 50 values in mice were 5,000 and 2,609 mg/kg for essential oil and citronellal, respectively. E. citriodora essential oil reduced sheep epg at 14 days post treatment by 69.5% (P<0.05). No significant differences were observed in epg between the citronellal and negative control groups (P>0.05). The interaction between citronellal and other constituents in the essential oil may be relevant for its in vivo anthelmintic activity. Thus, E. citriodora essential oil and citronellal pharmacokinetic studies may help elucidate the anthelmintic activity of these compounds.
Resumo Este trabalho objetivou avaliar a atividade anti-helmíntica do óleo essencial de Eucalyptus citriodora e citronelal sobre nematoides gastrintestinais de ovinos. A composição do óleo essencial foi determinada por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas. As substâncias foram avaliadas in vitro utilizando-se teste de motilidade de vermes adultos (AWMT) e microscopia eletrônica de transmissão (TEM). Teste de toxicidade aguda em camundongos e teste de redução da contagem de ovos fecais (FECRT) em ovinos foram realizados. Citronelal foi confirmado como componente majoritário do óleo essencial (63,9%). No AWMT, 2 mg/mL de óleo essencial e citronelal inibiram completamente a motilidade de H. contortus 6 h pós-exposição. H. contortus expostos ao óleo essencial e citronelal exibiram modificações ultraestruturais internas. Os valores da dose letal 50 em camundongos foram 5.000 e 2.609 mg/kg para óleo essencial e citronelal, respectivamente. Óleo essencial de E. citriodora reduziu opg de ovinos 14 dias pós-tratamento em 69,5% (P<0,05). Não houve diferença significativa de opg entre grupo controle negativo e citronelal (P>0,05). A interação entre citronelal e outros constituintes do óleo essencial pode ser relevante na atividade anti-helmíntica in vivo. Portanto, avaliação farmacocinética do óleo essencial de E. citriodora e citronelal pode auxiliar a elucidar a atividade anti-helmíntica desses compostos.
Assuntos
Animais , Feminino , Camundongos , Doenças dos Ovinos/parasitologia , Óleos Voláteis/farmacologia , Ovinos/parasitologia , Eucalyptus/química , Hemoncose/veterinária , Haemonchus/efeitos dos fármacos , Anti-Helmínticos/farmacologia , Contagem de Ovos de Parasitas , Óleos Voláteis/isolamento & purificação , Testes de Sensibilidade Parasitária , Microscopia Eletrônica de Transmissão , Hemoncose/parasitologia , Haemonchus/isolamento & purificação , Haemonchus/ultraestrutura , Cromatografia Gasosa-Espectrometria de MassasRESUMO
Nematophagous fungi from the feces of water buffalo and soil from southeastern Mexico were isolated, and their in vitro predatory activity against Haemonchus contortus infective larvae (L3) (HcL3) was assessed. The fungi were isolated by sprinkling soil or feces on water agar plates. Six series of 10 Petri dishes containing a 7-day-old culture of each fungus and a series without fungi as the control were prepared. Five hundred HcL3 were added to each plate. The plates were incubated at room temperature. The average of recovered HcL3 was considered to estimate the larval reduction rate. Four nematophagous fungi isolates corresponding to Arthrobotrys oligospora, var microspora (strains 4-276, 269 and 50-80) and one identified as A. oligospora,var. oligospora (isolates 48-80) were obtained from water buffalo feces. From the soil, five isolates were isolated; three corresponded to A. musiformis (Bajío, Yumca and Macuspana isolates), and two isolates were identified as A. oligospora (Comalcalco and Jalapa de Méndez isolates). The predatory activity of isolates from water buffalo feces ranged between 85.9 and 100%. Meanwhile, the fungi from the soil ranged between 55.5 and 100% (p≤0.05). The nematophagous fungi obtained could have important implications in the control of parasites of importance in the livestock industry.
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Búfalos/parasitologia , Fezes/parasitologia , Haemonchus/fisiologia , Solo/parasitologia , Animais , Feminino , Haemonchus/classificação , Haemonchus/isolamento & purificação , Masculino , MéxicoRESUMO
Abstract Nematophagous fungi from the feces of water buffalo and soil from southeastern Mexico were isolated, and their in vitro predatory activity against Haemonchus contortus infective larvae (L3) (HcL3) was assessed. The fungi were isolated by sprinkling soil or feces on water agar plates. Six series of 10 Petri dishes containing a 7-day-old culture of each fungus and a series without fungi as the control were prepared. Five hundred HcL3 were added to each plate. The plates were incubated at room temperature. The average of recovered HcL3 was considered to estimate the larval reduction rate. Four nematophagous fungi isolates corresponding to Arthrobotrys oligospora, var microspora (strains 4-276, 269 and 50-80) and one identified as A. oligospora,var. oligospora (isolates 48-80) were obtained from water buffalo feces. From the soil, five isolates were isolated; three corresponded to A. musiformis (Bajío, Yumca and Macuspana isolates), and two isolates were identified as A. oligospora (Comalcalco and Jalapa de Méndez isolates). The predatory activity of isolates from water buffalo feces ranged between 85.9 and 100%. Meanwhile, the fungi from the soil ranged between 55.5 and 100% (p≤0.05). The nematophagous fungi obtained could have important implications in the control of parasites of importance in the livestock industry.
Resumo Fungos nematófagos das fezes de búfalo de água e do solo no sudeste do México foram isolados, e a atividade predatória in vitro contra larvas infectantes de Haemonchus contortus (L3) (HcL3) foi avaliada.Os fungos foram isolados por aspersão de solo e de fezes em placas de agar água. Foram preparadas seis séries de 10 placas de Petri contendo uma cultura de 7 dias de idade de cada fungo e uma série sem fungos como controle. Quinhentos HcL3 foram adicionadas a cada placa. As placas foram incubadas à temperatura ambiente. O número médio de HcL3 recuperadas foi considerado para estimar a taxa de redução larval. Quatro isolados de fungos nematófagos corresponderam a Arthrobotrys oligospora, var microspora (estirpes 4-276, 269 e 50-80) e um isolado identificado como A. oligospora, var. oligospora (isolados 48-80 de fezes de búfalo de água. Do solo, dos cinco isolados três corresponderam a A. musiformis (Bajío, Yumca e Macuspana isolados), e dois isolados foram identificados como A. oligospora (isolados de Comalcalco e Jalapa de Méndez). A atividade predatória de isolados de fezes de búfalo de água variou entre 85,9 e 100%. Enquanto isso, os fungos do solo variaram entre 55,5 e 100% (p≤0,05). Os fungos nematófagos obtidos podem ter importantes implicações nesse controle de parasitos de importância na indústria pecuária.
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Animais , Masculino , Feminino , Solo/parasitologia , Búfalos/parasitologia , Fezes/parasitologia , Haemonchus/fisiologia , Haemonchus/isolamento & purificação , Haemonchus/classificação , MéxicoRESUMO
Benzimidazole (BZ) resistance of Haemonchus contortus has been associated with single nucleotide polymorphisms (SNPs) in codons 200 (F200Y) and 167 (F167Y) and, to a lesser extent, in codon E198A, of the ß-tubulin isotype 1 gene. The present study was undertaken to survey the status of BZ resistance in naturally infected goats in smallholder farms in southern Mozambique by real-time PCR (qPCR) using TaqMan® assays. H. contortus-infective larvae (L3; n = 432) from 12 populations were individually genotyped for F200Y and F167Y SNPs to detect BZ resistance. For the F200Y SNP, the results revealed an overall mean percentages of 18.8% homozygous resistant (RR), 47.8% homozygous susceptible (SS) and 33.4% heterozygous (RS) H. contortus. For the F167Y SNP, the overall mean percentages were 1.6% RR, 94.9% SS and 3.5% RS. The percentage of resistant alleles (%R) for the F200Y and F167Y SNPs was 35.7 and 3.4%, respectively. Genotype combinations of the two mutations indicate resistant percentages ranging from 0.0 to 52.9%. From the four herds with high RR individuals, three farms dewormed the animals monthly, while the fourth farm dewormed the animals every 3 months. In farms where animals were dewormed every 6 months, low percentages of RR individuals were found, whereas no RR individuals were discovered in herds where animals were dewormed annually. These results suggest that the F200Y SNP is more significant in BZ resistance development of the surveyed population compared with the F167Y SNP.
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Anti-Helmínticos/farmacologia , Benzimidazóis/farmacologia , Resistência a Medicamentos , Doenças das Cabras/parasitologia , Hemoncose/veterinária , Haemonchus/efeitos dos fármacos , Haemonchus/genética , Polimorfismo de Nucleotídeo Único , Alelos , Animais , Genótipo , Cabras , Hemoncose/parasitologia , Haemonchus/classificação , Haemonchus/isolamento & purificação , MoçambiqueRESUMO
The aim of this work was to study the epidemiology and the harmful effect of gastrointestinal nematodes (GINs) on beef cattle in the piedmont forest and grassland region of northwestern Argentina, between March 2015 and March 2016. Sixty weaned female calves were divided into three groups: STG-calves treated systematically with 200 mcg/kg moxidectin every 40-50 days; LTG-calves treated as usually locally implemented, with 200 mcg/kg ivermectin on May 4 and August 5; and UTG-calves not receiving treatment. Moreover, a group of 20 untreated first-calving cows was monitored. Eggs per gram of faeces (epg) and faeces cultures were performed. Live weight gain (LWG) was recorded. Differences among groups were compared using analysis of variance and Tukey test. At the start of the experiment, mean epg was from moderate to high (595 ± 480); therefore, this group was treated in May. Mean UTG epg peaked (907 ± 754) in mid-winter, decreasing toward spring. LTG epg only decreased partially after treatment, showing 54.2% of ivermectin efficacy. Epg values of STG were always negligible values (95.8% of moxidectin efficacy). The dominant nematode genus was Cooperia (81.9%), followed by Haemonchus (15.5%). The effect of treatments was evident from middle autumn, with STG showing a significantly (p < 0.002) higher LWG than the other groups. Toward the end of the trial, LWG of STG and LTG increased by 27.2 and 8.2%, respectively, to those of UTG. This preliminary study showed a winter epg peak and a negative effect of GINs on LWG, even in moderately infected calves.
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Antinematódeos/uso terapêutico , Doenças dos Bovinos/epidemiologia , Ivermectina/uso terapêutico , Macrolídeos/uso terapêutico , Infecções por Rhabditida/veterinária , Animais , Antinematódeos/farmacologia , Argentina/epidemiologia , Bovinos , Doenças dos Bovinos/parasitologia , Doenças dos Bovinos/prevenção & controle , Avaliação Pré-Clínica de Medicamentos , Fezes , Feminino , Gastroenteropatias/parasitologia , Gastroenteropatias/prevenção & controle , Gastroenteropatias/veterinária , Trato Gastrointestinal/parasitologia , Haemonchus/isolamento & purificação , Ivermectina/farmacologia , Macrolídeos/farmacologia , Nematoides , Óvulo , Contagem de Ovos de Parasitas/estatística & dados numéricos , Contagem de Ovos de Parasitas/veterinária , Infecções por Rhabditida/prevenção & controle , Aumento de Peso/efeitos dos fármacosRESUMO
The objective of this study was to determine the prevalence of gastrointestinal nematode (GIN) infection in goat flocks on semi-arid rangelands of northeastern Mexico (25° N, 350-400 mm annual precipitation). The study included 668 pluriparous goats from 18 herds in five municipalities of Coahuila and Nuevo Leon, Mexico. Five genetic groups were considered (predominance of Boer, Nubian, Alpine, Saanen, and Toggenburg). Fecal samples were taken from the rectum of each animal to determine the number of eggs per gram (EPG) of GIN. The prevalence of flocks with GIN infections was 88.9%. Similar results were observed for the number of goats infected in the flocks. The Alpine breed presented the highest prevalence and highest EPG loads of GIN, whereas Boer and Nubian were the genetic groups with the lowest (P < 0.05) EPG. There was a negative effect of GIN infection on the live weight of goats (P < 0.05). The GIN genera found were Trichostrongylus spp. and Haemonchus spp. It was concluded that in the goat flocks of the semi-arid zones of Mexico was found a high prevalence of infections with gastrointestinal nematodes. The municipality and the breed of the animals were factors that showed influence on this prevalence and the level of infection of the goats.
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Gastroenteropatias/veterinária , Doenças das Cabras/epidemiologia , Tricostrongilose/veterinária , Trichostrongylus/isolamento & purificação , Animais , Doenças Transmissíveis , Fezes , Feminino , Gastroenteropatias/epidemiologia , Doenças das Cabras/genética , Cabras , Haemonchus/isolamento & purificação , México/epidemiologia , Infecções por Nematoides , Óvulo , Contagem de Ovos de Parasitas/veterinária , Prevalência , Tricostrongilose/epidemiologiaRESUMO
Haemonchus contortus and Haemonchus placei are among the major parasites of small ruminants and cattle. Although infection with these nematodes is host-specific, with H. placei predominating in cattle and H. contortus in sheep, cross-infections are observed in areas where both parasites are sympatric, and hybrid offspring can occur. Therefore, a fast and precise method is required for differentiating the parasites. Identification based on spicule morphometry is the most common technique for differentiating Haemonchus species. However, because these measurements overlap between species, morphological analysis is insufficient for differentiating between helminth species. In this work, we present a reliable, conventional polymerase chain reaction (PCR)-based method that uses two species-specific primer pairs to differentiate between H. contortus and H. placei specimens and their hybrids. Each primer pair produces one single and distinct amplification band for each species, which enables the detection of hybrid specimens. These primer pairs were validated by testing eight different populations of H. contortus, H. placei and hybrids.
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Primers do DNA/genética , Hemoncose/veterinária , Haemonchus/isolamento & purificação , Reação em Cadeia da Polimerase/métodos , Animais , DNA de Helmintos/genética , Hemoncose/parasitologia , Haemonchus/classificação , Haemonchus/genética , Ruminantes/parasitologia , Especificidade da EspécieRESUMO
Worm infections are a major cause of economic losses in sheep farming, and their control depends essentially on anthelmintic drugs. After decades without the discovery of new drug types, a new class of anthelmintics, called aminoacetonitrile derivatives, represented by monepantel, was released on the market. In order to evaluate a report of low efficacy of monepantel on a sheep farm in the municipality of Taiúva, state of São Paulo, Brazil, fecal egg count reduction and critical tests were performed on a Haemonchus contortus strain collected from this farm. To this end, ten animals were experimentally infected with 5000 H. contortus third-stage larvae, and these animals were divided into two groups, control and treated, according to the treatment with monepantel. The parameters evaluated were reduction in fecal egg counts on post-treatment days (PTD) 0, 2, 4, 7 and 14, and the therapeutic efficacy at the end of this period. Egg count reduction was observed starting on PTD 2, with a maximum reduction of 32.89% recorded on PTD 14. The critical test revealed 24.65% efficacy, indicating resistance to the active ingredient monepantel. The ineffectiveness of monepantel may be associated with the excessive use of the anthelmintic, which the farmer administered at intervals of less than one month, without technical guidance or a defined criterion. Given that the anthelmintic was used on this farm for less than one year, according to the farmer, it can be inferred that H. contortus develops resistance to monepantel in a few generations if the product is used incorrectly.(AU)
Verminoses são uma das principais causas de prejuízo econômico na ovinocultura, cujo controle depende essencialmente de fármacos anti-helmínticos. Depois de décadas sem o surgimento de novos grupos químicos de fármacos, uma nova classe de anti-helmínticos, os derivados da aminoacetonitrila, representados pelo monepantel, foram lançados no mercado. Com o objetivo de avaliar um relato de baixa eficácia do monepantel em uma propriedade produtora de ovinos do município de Taiúva, estado de São Paulo, foi realizado um teste de redução de contagem de ovos e um teste crítico em uma linhagem de Haemonchus contortus obtida da propriedade. Dez animais foram infectados experimentalmente com 5000 larvas de terceiro estágio do isolado de Haemonchus contortus, e estes animais foram divididos em dois grupos, controle e tratados, em dependência do tratamento com monepantel. Foram avaliados a redução de ovos nas fezes nos dias 0, 2, 4, 7 e 14 pós-tratamento e a eficácia terapêutica ao final do período. A redução da contagem de ovos foi observada a partir do 2o dia pós-tratamento (DPT), com redução máxima, de 32,89%, registrada no 14º DPT. O teste crítico revelou eficácia de apenas 24,65%, evidenciando resistência ao princípio ativo. A ineficácia do monepantel pode estar associada a utilização do vermífugo de forma massiva, uma vez que o produtor administrava o produto em intervalos inferiores a um mês, sem orientação técnica ou critério definido. Dado que o anti-helmíntico foi usado na propriedade por período inferior a um ano, de acordo com o produtor, pode-se sugerir que Haemonchus contortus desenvolva resistência ao monepantel em poucas gerações caso o produto seja utilizado incorretamente.(AU)
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Animais , Ovinos/parasitologia , Haemonchus/isolamento & purificação , Contagem de Ovos de Parasitas/veterináriaRESUMO
Worm infections are a major cause of economic losses in sheep farming, and their control depends essentially on anthelmintic drugs. After decades without the discovery of new drug types, a new class of anthelmintics, called aminoacetonitrile derivatives, represented by monepantel, was released on the market. In order to evaluate a report of low efficacy of monepantel on a sheep farm in the municipality of Taiúva, state of São Paulo, Brazil, fecal egg count reduction and critical tests were performed on a Haemonchus contortus strain collected from this farm. To this end, ten animals were experimentally infected with 5000 H. contortus third-stage larvae, and these animals were divided into two groups, control and treated, according to the treatment with monepantel. The parameters evaluated were reduction in fecal egg counts on post-treatment days (PTD) 0, 2, 4, 7 and 14, and the therapeutic efficacy at the end of this period. Egg count reduction was observed starting on PTD 2, with a maximum reduction of 32.89% recorded on PTD 14. The critical test revealed 24.65% efficacy, indicating resistance to the active ingredient monepantel. The ineffectiveness of monepantel may be associated with the excessive use of the anthelmintic, which the farmer administered at intervals of less than one month, without technical guidance or a defined criterion. Given that the anthelmintic was used on this farm for less than one year, according to the farmer, it can be inferred that H. contortus develops resistance to monepantel in a few generations if the product is used incorrectly.
Verminoses são uma das principais causas de prejuízo econômico na ovinocultura, cujo controle depende essencialmente de fármacos anti-helmínticos. Depois de décadas sem o surgimento de novos grupos químicos de fármacos, uma nova classe de anti-helmínticos, os derivados da aminoacetonitrila, representados pelo monepantel, foram lançados no mercado. Com o objetivo de avaliar um relato de baixa eficácia do monepantel em uma propriedade produtora de ovinos do município de Taiúva, estado de São Paulo, foi realizado um teste de redução de contagem de ovos e um teste crítico em uma linhagem de Haemonchus contortus obtida da propriedade. Dez animais foram infectados experimentalmente com 5000 larvas de terceiro estágio do isolado de Haemonchus contortus, e estes animais foram divididos em dois grupos, controle e tratados, em dependência do tratamento com monepantel. Foram avaliados a redução de ovos nas fezes nos dias 0, 2, 4, 7 e 14 pós-tratamento e a eficácia terapêutica ao final do período. A redução da contagem de ovos foi observada a partir do 2o dia pós-tratamento (DPT), com redução máxima, de 32,89%, registrada no 14º DPT. O teste crítico revelou eficácia de apenas 24,65%, evidenciando resistência ao princípio ativo. A ineficácia do monepantel pode estar associada a utilização do vermífugo de forma massiva, uma vez que o produtor administrava o produto em intervalos inferiores a um mês, sem orientação técnica ou critério definido. Dado que o anti-helmíntico foi usado na propriedade por período inferior a um ano, de acordo com o produtor, pode-se sugerir que Haemonchus contortus desenvolva resistência ao monepantel em poucas gerações caso o produto seja utilizado incorretamente.