RESUMO
BACKGROUND: Leptin has been measured in human in saliva samples. However, the low leptin concentration found in this biological fluid makes necessary the use of high sensitive methods. To the authors' knowledge, leptin has not been measured in porcine saliva. This study aimed to develop and validate a time-resolved immunofluorometric assay (TR-IFMA) for salivary leptin measurements in pigs, using a species-specific antibody, and to evaluate how salivary leptin changes with body weight, food ingestion, and in experimental models of stress and inflammation. Polyclonal antibodies were produced in rabbits immunized with recombinant porcine leptin and used to develop a sandwich TR-IFMA. RESULTS: The method had intra-assay and inter-assay coefficients of variation lower than 10 and 16 %, respectively. The assay was accurate and the low limit of detection allowed detection of leptin in all analyzed samples. Salivary leptin concentration was positively correlated to body weight (r = 0.58, P = 0.01) and increased after food ingestion (P < 0.001) and after 24 h of applying a model of experimental inflammation by turpentine injection (P < 0.05). However, it did not significantly change after a model of acute stress consisting of a nose snare restraining. CONCLUSION: These results indicate that the developed assay can measure leptin in porcine saliva in a reliable way and that leptin in saliva is influenced by body weight, food ingestion and inflammation.
Assuntos
Fluorimunoensaio/veterinária , Leptina/análise , Saliva/química , Suínos , Animais , Western Blotting/veterinária , Fluorimunoensaio/métodos , Sensibilidade e EspecificidadeRESUMO
Realizaram-se testes de imunofluorescência indireta (IFI) para Ehrliquiose Monocítica Eqüina (EME) em soros de 27 eqüinos, provenientes de duas propriedades do estado do Rio de Janeiro (regiões Metropolitana e Serrana) onde ocorreram manifestações clínicas sugestivas de EME. Coletaram-se duas amostras de sangue de cada animal. Os intervalos entre as coletas variaram entre 30 e 180 dias. Vinte e um animais (77,8 por cento) foram reagentes à IFI com título 1:50, nos testes realizados nas duas amostras coletadas. Os demais (22,2 por cento) - animais 1 a 6 - foram reagentes à IFI, com títulos sorológicos de 1:100, 1:200, 1:400, 1:400, 1:400 e 1:800 na primeira coleta e 1:200, 1:800, 1:200, 1:400, 1:800 e 1:800 na segunda coleta, respectivamente. Três animais (1, 4 e 5) apresentaram manifestações subclínicas. Um animal (2) recuperou-se após o tratamento. Dois animais (3 e 6) evoluíram para óbito. Títulos sorológicos maiores que 1:320 são conclusivos para o diagnóstico específico. Este é o primeiro relato de EME no estado do Rio de Janeiro, Brasil(AU)
Assuntos
Animais , Ehrlichiose/veterinária , Ehrlichiose/virologia , Cavalos , Doenças dos Cavalos , Neorickettsia risticii , Fluorimunoensaio/veterináriaRESUMO
Realizaram-se testes de imunofluorescência indireta (IFI) para Ehrliquiose Monocítica Eqüina (EME) em soros de 27 eqüinos, provenientes de duas propriedades do estado do Rio de Janeiro (regiões Metropolitana e Serrana) onde ocorreram manifestações clínicas sugestivas de EME. Coletaram-se duas amostras de sangue de cada animal. Os intervalos entre as coletas variaram entre 30 e 180 dias. Vinte e um animais (77,8 por cento) foram reagentes à IFI com título 1:50, nos testes realizados nas duas amostras coletadas. Os demais (22,2 por cento) - animais 1 a 6 - foram reagentes à IFI, com títulos sorológicos de 1:100, 1:200, 1:400, 1:400, 1:400 e 1:800 na primeira coleta e 1:200, 1:800, 1:200, 1:400, 1:800 e 1:800 na segunda coleta, respectivamente. Três animais (1, 4 e 5) apresentaram manifestações subclínicas. Um animal (2) recuperou-se após o tratamento. Dois animais (3 e 6) evoluíram para óbito. Títulos sorológicos maiores que 1:320 são conclusivos para o diagnóstico específico. Este é o primeiro relato de EME no estado do Rio de Janeiro, Brasil
Assuntos
Animais , Ehrlichiose/veterinária , Ehrlichiose/virologia , Cavalos , Fluorimunoensaio/veterinária , Doenças dos Cavalos , Neorickettsia risticiiRESUMO
When significant mortality of the bathyal spatangoid echinoid Paleopneustes cristatus occurred under laboratory conditions, we investigated the cause and course of the disease by culturing and identifying internal pathogens, then experimentally infecting healthy urchins with isolates of the suspected disease organism. The pathogen was determined to be the gram-negative halophilic bacterium Vibrio alginolyticus. This species was also recovered from frozen post-challenge specimens of P. cristatus and from moribund individuals of Archaeopneustes hystrix, another spatangoid reared under similar in vitro conditions. This is the first experimental study of bacterial disease in any deep-sea invertebrate.