RESUMO
In order to provide additional data on the prevalence and genetic diversity of Dientamoeba fragilis in human populations, we conducted a study in children from low-income communities in Sao Paulo State, Brazil. Fecal samples from daycare center attendees up to 6 years old (n=156) and staff members (n=18) were submitted to PCR and sequencing of D. fragilis as well as to microscopic examination for the presence of other intestinal parasites. All children assessed were asymptomatic and 10.3% (16/156) were positive for D. fragilis. No worker was found to be positive. An association between Dientamoeba and coinfection with other intestinal parasites was observed. Concerning the genetic diversity, 14 and only two isolates were genotype 1 and genotype 2, respectively. Our findings outline interesting aspects: (1) asymptomatic children as carriers of Dientamoeba in communities in which environmental conditions ensure parasite transmission and, (2) association between Dientamoeba infection in young children and coinfection with other enteric parasites, reinforcing its transmission via the fecal-oral route.
Assuntos
Dientamebíase , Enteropatias Parasitárias , Brasil/epidemiologia , Criança , Pré-Escolar , Dientamoeba/genética , Dientamebíase/diagnóstico , Dientamebíase/epidemiologia , Fezes , Humanos , PrevalênciaRESUMO
Se realizó un estudio de purificación del DNA de los trofozoitos de Dientamoeba fragilis a partir de muestras fecales humanas congeladas, no fijadas en formol, y con elevadas concentraciones de inhibidores de la DNA polimerasa. Para tal fin, se utilizaron columnas ("spin-columns") disponibles en el comercio. Esta metodología se comparó con una técnica tradicional de purificación con fenol/cloroformo. Ambos métodos fueron seguidos de la amplificación del DNA de D. fragilis por una "nested" PCR y posterior electroforesis en un gel de agarosa de los amplicones obtenidos. La extracción del DNA a partir de trofozoitos de D. fragilis - mediante el procedimiento de las columnas - produjo DNA de elevada calidad, libre de impurezas e inhibidores de la polimerasa. Por el contrario, con la técnica de fenol/cloroformo se observó la inhibición de la enzima, cuando se analizaron los productos de amplificación. Además, se confirmó que el agregado de SAF (solución de acetato de sodio - ácido acético - formol) a las muestras fecales afecta la integridad del DNA y como consecuencia impide su posterior amplificación.