RESUMO

A genetically structured mathematical model was developed and used to evaluate the influence of molecular parameters involved in the expression of a harmful recombinant protein (SPA::EcoRI). The system consists of the controlled expression of the endonuclease EcoRI cloned in the plasmid pMTC48. The control is exerted by the lambda CI repressor expressed from the plasmid pRK248cIts. The deleterious effect of the activity of the enzyme EcoRI on the host DNA is prevented by the action of the EcoRI methylase that is expressed constitutively from a third plasmid, pEcoR4. The model includes molecular mechanisms involved in the regulation of the expression of these genes and is used to determine cultural conditions that maximize the production of the recombinant protein.

Assuntos

Proteínas de Ligação a DNA , Escherichia coli/genética , Regulação Bacteriana da Expressão Gênica/genética , Modelos Genéticos , Plasmídeos/genética , Proteína Estafilocócica A/biossíntese , Simulação por Computador , Dano ao DNA , Desoxirribonuclease EcoRI/biossíntese , Desoxirribonuclease EcoRI/genética , Escherichia coli/classificação , Escherichia coli/metabolismo , Engenharia Genética/métodos , Cinética , Modelos Biológicos , Modelos Químicos , Biossíntese de Proteínas , Proteínas Recombinantes de Fusão/biossíntese , Proteínas Recombinantes de Fusão/genética , Proteínas Repressoras/genética , Proteínas Repressoras/metabolismo , Reprodutibilidade dos Testes , Sensibilidade e Especificidade , Especificidade da Espécie , Proteína Estafilocócica A/genética , Staphylococcus/genética , Transcrição Gênica , Proteínas Virais , Proteínas Virais Reguladoras e Acessórias