RESUMO
Methylmercury (MeHg) and Ethylmercury (EtHg) are toxic to the central nervous system. Human exposure to MeHg and EtHg results mainly from the consumption of contaminated fish and thimerosal-containing vaccines, respectively. The mechanisms underlying the toxicity of MeHg and EtHg are still elusive. Here, we compared the toxic effects of MeHg and EtHg in Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae) emphasizing the involvement of oxidative stress and the identification of molecular targets from antioxidant pathways. Wild type and mutant strains with deleted genes for antioxidant defenses, namely: γ-glutamylcysteine synthetase, glutathione peroxidase, catalase, superoxide dismutase, mitochondrial peroxiredoxin, cytoplasmic thioredoxin, and redox transcription factor Yap1 were used to identify potential pathways and proteins from cell redox system targeted by MeHg and EtHg. MeHg and EtHg inhibited cell growth, decreased membrane integrity, and increased the granularity and production of reactive species (RS) in wild type yeast. The mutants were predominantly less tolerant of mercurial than wild type yeast. But, as the wild strain, mutants exhibited higher tolerance to MeHg than EtHg. Our results indicate the involvement of oxidative stress in the cytotoxicity of MeHg and EtHg and reinforce S. cerevisiae as a suitable model to explore the mechanisms of action of electrophilic toxicants.
Assuntos
Antioxidantes/farmacologia , Compostos de Etilmercúrio/farmacologia , Compostos de Metilmercúrio/farmacologia , Estresse Oxidativo/efeitos dos fármacos , Saccharomyces cerevisiae/efeitos dos fármacos , Oxirredução/efeitos dos fármacos , Saccharomyces cerevisiae/metabolismoRESUMO
El espectro de absorción de una solución con mertiolato y ácido desoxirribonucleico transformante de Haemophilus influenzae, fue igual al que se obtuvo al sumar sus dos espectros independientes. Después de dializar el mertiolato, el DNA mostró su espectro de absorción típico y su actividad transformantes fue igual al DNA testigo dializado que no había estado en presencia del mertiolato. Se describe un método nuevo para aislar el DNA transformante de H. influenzae que requirió: 1) lisis bacteriana con mertiolato, 2) despretinización con cloroformo: octanol, 3) preciptación del DNA con etanol frío, 4) eliminación del RNA por hidrólisis con ribonucleasa pancreática; 5) diálise y 6) conservación a - 70-C. el DNA transformante obtenido y purificado, después de la lisis con mertiolato de H. influenzae, tuvo un espectro de absorción típico con una lambda max entre 255 y 260 nm y una lambda min entre 230 y 235 nm. Los valores de E (P) a 260 y 230 nm fueron típicos de DNA nativo. La igualdad en la concentración de DNA determinada por el método espectrofotométrico o por su contenido en desorribosa, indicó la ausencia de cantidades significativas de RNA. La relación de absorbancia de 260 sobre 230 nm tuvo un valor alrededor de 2.2, sugiriendo que no había una concentración apreciable de proteínas. El DNA mostró una actividad transformante específica típica del ácido desoxirribonucleico transformante de H. influenzae