RESUMO
INTRODUCTION: The production of the Montenegro antigen for skin test poses difficulties regarding quality control. Here, we propose that certain animal models reproducing a similar immune response to humans may be used in the quality control of Montenegro antigen production. METHODS: Fifteen Cavia porcellus (guinea pigs) were immunized with Leishmania amazonensis or Leishmania braziliensis , and, after 30 days, they were skin tested with standard Montenegro antigen. To validate C. porcellus as an animal model for skin tests, eighteen Mesocricetus auratus (hamsters) were infected with L. amazonensis or L. braziliensis , and, after 45 days, they were skin tested with standard Montenegro antigen. RESULTS: Cavia porcellus immunized with L. amazonensis or L. braziliensis , and hamsters infected with the same species presented induration reactions when skin tested with standard Montenegro antigen 48-72h after the test. CONCLUSIONS: The comparison between immunization methods and immune response from the two animal species validated C. porcellus as a good model for Montenegro skin test, and the model showed strong potential as an in vivo model in the quality control of the production of Montenegro antigen.
Assuntos
Antígenos de Protozoários/biossíntese , Cobaias/imunologia , Testes Intradérmicos/normas , Leishmania braziliensis/imunologia , Leishmaniose Cutânea/diagnóstico , Modelos Animais , Animais , Leishmania/imunologia , Masculino , Valor Preditivo dos Testes , Controle de Qualidade , Sensibilidade e EspecificidadeRESUMO
O teste intradérmico para o diagnóstico da tuberculose bovina utiliza derivados proteicos purificados (PPD) de Mycobacterium bovis que são capazes de induzir reações de hipersensibilidade em animais infectados. No entanto, apresenta baixa especificidade devido à ocorrência de reações cruzadas com outras micobactérias. Neste sentido, o objetivo desse trabalho foi produzir proteínas recombinantes (ESAT-6, PE13, PE5 e ESX-1) de Mycobacterium bovis e avaliá-las como antígenos em teste intradérmico utilizando Cavia porcellus como modelo, e verificar se as condições empregadas na purificação (nativa ou desnaturante) interferem no desempenho antigênico dessas proteínas. As proteínas foram testadas em Cavia porcellus previamente sensibilizados com cepa M. bovis AN5 inativada, individualmente (160 µg) ou combinadas na forma de um coquetel (40 µg cada). O coquetel de proteínas induziu reações de hipersensibilidade nos animais sensibilizados significativamente superiores (p=0,002) as observadas nos animais não sensibilizados, possibilitando diferenciação. No entanto, as proteínas isoladamente não foram capazes de promover essa diferenciação. As condições de solubilização e purificação influenciaram o desempenho antigênico da proteína ESAT-6, pois, quando produzida em condição desnaturante desencadeou reações inespecíficas nos animais não sensibilizados, enquanto que aquela produzida em condições nativas e aplicada em concentrações de 6, 12, 24 e 48µg induziu reações significativas apenas nos animais sensibilizados, confirmando o seu potencial como antígeno.
The intradermal skin test for diagnosis of bovine tuberculosis has been used the purified protein derivative (PPD) of Mycobacterium bovis, that is able to induce a hypersensitivity reaction in infected animals. However, shows low specificity due to the occurrence of cross reactions with other mycobacteria. Thus, the aim of this study was to produce recombinant proteins (ESAT-6, PE13, PE5 and ESX-1) of Mycobacterium bovis and assess them as antigens in skin test using guinea pigs (Cavia porcellus) as a model, and check if the conditions employed in the purification (native or denaturing condition) interfere in the antigenic performance of these proteins. The proteins were tested in guinea pigs previously sensitized with inactivated M. bovis strain AN5, individually (160 µg/µl), or as a mixed cocktail (40 µg each). The cocktail of proteins induced hypersensitivity reactions in sensitized animals significantly (p=0.002) higher than those observed in non-sensitized animals, allowing differentiation. On the other hand, the proteins individually were not able to promote this differentiation. The conditions of solubilization and purification influenced the antigenic performance of the protein ESAT-6, since, when produced in denaturing condition triggered nonspecific reaction in non-sensitized animals. Whereas when produced under native conditions and used at concentrations (6, 12, 24 and 48µg/µl) induced a significant response only in sensitized animals, confirming its potential as antigen.
Assuntos
Animais , Cobaias/imunologia , Mycobacterium bovis/isolamento & purificação , Proteínas Recombinantes , Proteínas de Bactérias/isolamento & purificação , Testes Intradérmicos , Tuberculose Bovina/diagnóstico , Modelos Animais , Testes Intradérmicos/veterináriaRESUMO
O teste intradérmico para o diagnóstico da tuberculose bovina utiliza derivados proteicos purificados (PPD) de Mycobacterium bovis que são capazes de induzir reações de hipersensibilidade em animais infectados. No entanto, apresenta baixa especificidade devido à ocorrência de reações cruzadas com outras micobactérias. Neste sentido, o objetivo desse trabalho foi produzir proteínas recombinantes (ESAT-6, PE13, PE5 e ESX-1) de Mycobacterium bovis e avaliá-las como antígenos em teste intradérmico utilizando Cavia porcellus como modelo, e verificar se as condições empregadas na purificação (nativa ou desnaturante) interferem no desempenho antigênico dessas proteínas. As proteínas foram testadas em Cavia porcellus previamente sensibilizados com cepa M. bovis AN5 inativada, individualmente (160 µg) ou combinadas na forma de um coquetel (40 µg cada). O coquetel de proteínas induziu reações de hipersensibilidade nos animais sensibilizados significativamente superiores (p=0,002) as observadas nos animais não sensibilizados, possibilitando diferenciação. No entanto, as proteínas isoladamente não foram capazes de promover essa diferenciação. As condições de solubilização e purificação influenciaram o desempenho antigênico da proteína ESAT-6, pois, quando produzida em condição desnaturante desencadeou reações inespecíficas nos animais não sensibilizados, enquanto que aquela produzida em condições nativas e aplicada em concentrações de 6, 12, 24 e 48µg induziu reações significativas apenas nos animais sensibilizados, confirmando o seu potencial como antígeno.(AU)
The intradermal skin test for diagnosis of bovine tuberculosis has been used the purified protein derivative (PPD) of Mycobacterium bovis, that is able to induce a hypersensitivity reaction in infected animals. However, shows low specificity due to the occurrence of cross reactions with other mycobacteria. Thus, the aim of this study was to produce recombinant proteins (ESAT-6, PE13, PE5 and ESX-1) of Mycobacterium bovis and assess them as antigens in skin test using guinea pigs (Cavia porcellus) as a model, and check if the conditions employed in the purification (native or denaturing condition) interfere in the antigenic performance of these proteins. The proteins were tested in guinea pigs previously sensitized with inactivated M. bovis strain AN5, individually (160 µg/µl), or as a mixed cocktail (40 µg each). The cocktail of proteins induced hypersensitivity reactions in sensitized animals significantly (p=0.002) higher than those observed in non-sensitized animals, allowing differentiation. On the other hand, the proteins individually were not able to promote this differentiation. The conditions of solubilization and purification influenced the antigenic performance of the protein ESAT-6, since, when produced in denaturing condition triggered nonspecific reaction in non-sensitized animals. Whereas when produced under native conditions and used at concentrations (6, 12, 24 and 48µg/µl) induced a significant response only in sensitized animals, confirming its potential as antigen.(AU)
Assuntos
Animais , Cobaias/imunologia , Testes Intradérmicos , Tuberculose Bovina/diagnóstico , Mycobacterium bovis/isolamento & purificação , Proteínas de Bactérias/isolamento & purificação , Proteínas Recombinantes , Modelos Animais , Testes Intradérmicos/veterináriaRESUMO
In this study, medetomidine hydrochloride, an alfa2 adrenergic receptor agonist, was administered to five adult guinea pigs (three males and two females) to verify the efficiency and safety of using doses calculated by using an allometric scale. A surgical procedure was performed to insert a polyethylene cannula that advanced 2.0 to 2.5 cm into the left carotid artery until the aorta. A minimum recovery period of two days was observed before any other manipulation or pharmacological test were performed. The cannulas were washed every two days with heparinized saline flow and remained patent for two to three weeks after insertion. After surgery, each animal was placed in an open box measuring 45x25x20cm, in a quiet room with soft lighting. The MS group received exactly the allometrically calculated dose, while the 2MS group received twice the allometric dose and the ½ MS group received half the allometric dose. Parameters were measured and analyzed at 0, 5, 10, 20, 40, 60, 90 and 120 minutes after injection. Body mass was 709.6±169g, 742±172.87g and 710±160.2g for groups 1, 2 and 3, respectively. Body temperature was 101.68±0.19ºF; respiratory rate was 85.2±4.54 strokes per minute; heart rate was 297.13±3.46 beats per minute; PaO2 at 81.7±9.43mmHg; PaCO2 at 34.49±1.59mmHg; pH was measured at 7.41±0.07; hematocrit at 38.4±1.31%; total protein was 4.33±0.29g/dL, glucose was measured at 97.13±3.75mg/dL; systolic blood pressure was 85.53±2.50mmHg; diastolic pressure at 7.,40±3.74mmHg; and mean blood pressure was 78.73±1.13mmHg. Straightening postural reaction was lost at 7.20±2.05, 12.80±3.56 and 8.67±3.06 minutes for groups 2MS, MS and ½ MS, respectively.(AU)
Neste estudo administrou-se cloridrato de medetomidina, um agonista de receptores adrenérgicos alfa2 , a cinco cobaios adultos (três machos e duas fêmeas) para verificar a eficiência e segurança do uso de doses calculadas por meio de extrapolação alométrica. Um procedimento cirúrgico foi realizado para inserir uma cânula de polietileno que avançou 2,0 a 2,5 cm no interior da artéria carótida esquerda, até a aorta. Um período mínimo de recuperação de dois dias foi respeitado antes de qualquer outra manipulação ou teste farmacológico. As cânulas eram lavadas a cada dois dias com fluxo de solução salina heparinizada e permaneceram patentes por duas a três semanas após sua inserção. Após a cirurgia, cada animal foi colocado em uma caixa aberta medindo 45x25x20cm, em uma sala silenciosa com iluminação suave. O grupo MS recebeu exatamente a dose alometricamente calculada, enquanto o grupo 2MS recebeu o dobro da dose alométrica, e o grupo ½ MS recebeu a metade da dose alométrica. Parâmetros foram mensurados e avaliados aos 0, 5, 10, 20, 40, 60, 90 e 120 minutos após a injeção. A massa corporal foi 709,6±169g, 742±172,87g e 710±160,2g para os grupos 1, 2 e 3 respectivamente, a temperatura corporal foi 101,68±0,19ºF, a frequência respiratória foi 85,2±4,54 movimentos por minuto, a frequência cardía ca foi 297,13±3,46 batimentos per minute, a PaO2 foi 81,7±9,43mmHg, a PaCO2 foi 34,49±1,59mmHg, o pH foi 7,41±0,07, o hematócrito foi 38,4±1,31%, a proteína total foi 4,33±0,29g/dL, a glucose foi 97,13±3,75mg/dL, a pressão sistólica foi 85,53±2,50mmHg, a pressão diastólica foi 71,40±3,74mmHg, e a pressão sanguínea média foi 78,73±1,13mmHg. (AU)
En esta investigación se ha administrado clorhidrato de medetomidina, un agonista de receptores adrenérgicos alfa2 , a cinco cobayos adultos (tres machos y dos hembras) para verificar la eficacia y seguridad del uso de dosis calculadas por extrapolación alométrica. Se realizó un procedimiento quirúrgico para introducir una cánula de polietileno penetrando 2,0 a 2,5 cm en la arteria carótida izquierda, hasta la aorta. Se ha respetado un período mínimo de recuperación de dos días antes de cualquier otra manipulación o teste farmacológico. Las cánulas eran lavadas a cada dos días con flujo de solución salina heparinizada, y permanecieron patentes por dos a tres semanas después de la inserción. Después de la cirugía, cada animal fue acomodado en una caja abierta con medida de 45x25x20cm, en una sala silenciosa con iluminación suave. El grupo MS recibió exactamente la dosis alométricamente calculada, mientras el grupo 2MS recibió el doble de la dosis alométrica, y el grupo ½ MS recibió la mitad de la dosis alométrica. Parámetros fueron mensurados y evaluados a los 0, 5, 10, 20, 40, 60, 90 y 120 minutos después de la inyección. El peso corporal fue 709,6±169g, 742±172,87g y 710±160,2g para los grupos 1, 2 y 3 respectivamente, la temperatura corporal fue 101,68±0,19ºF, la frecuencia respiratoria fue 85,2±4,54 movimientos por minuto, la frecuencia cardíaca fue 297,13±3,46 batimientos por minuto, la PaO2 fue 81,7±9,43mmHg, la PaCO2 fue 34,49±1,59mmHg, el pH fue 7,41±0,07, el hematocrito fue 38,4±1,31%, la proteína total fue 4,33±0,29g/dL, la glucosa fue 97,13±3,75mg/dL, la presión sistólica fue 85,53±2,50mmHg, la presión diastólica fue 71,40±3,74mmHg, y la presión sanguínea promedia fue 78,73±1,13mmHg. La reacción postural de enderezamiento fue perdida en 7.20±2,05, 12,80±3,56 y 8,67±3,06 minutos, para los grupos 2MS, MS y ½ MS, respectivamente.(AU)
Assuntos
Animais , Cobaias/anormalidades , Cobaias/imunologia , Medetomidina/efeitos adversos , Medetomidina/análise , Anestesia , AnestesiaRESUMO
In this study, medetomidine hydrochloride, an alfa2 adrenergic receptor agonist, was administered to five adult guinea pigs (three males and two females) to verify the efficiency and safety of using doses calculated by using an allometric scale. A surgical procedure was performed to insert a polyethylene cannula that advanced 2.0 to 2.5 cm into the left carotid artery until the aorta. A minimum recovery period of two days was observed before any other manipulation or pharmacological test were performed. The cannulas were washed every two days with heparinized saline flow and remained patent for two to three weeks after insertion. After surgery, each animal was placed in an open box measuring 45x25x20cm, in a quiet room with soft lighting. The MS group received exactly the allometrically calculated dose, while the 2MS group received twice the allometric dose and the ½ MS group received half the allometric dose. Parameters were measured and analyzed at 0, 5, 10, 20, 40, 60, 90 and 120 minutes after injection. Body mass was 709.6±169g, 742±172.87g and 710±160.2g for groups 1, 2 and 3, respectively. Body temperature was 101.68±0.19ºF; respiratory rate was 85.2±4.54 strokes per minute; heart rate was 297.13±3.46 beats per minute; PaO2 at 81.7±9.43mmHg; PaCO2 at 34.49±1.59mmHg; pH was measured at 7.41±0.07; hematocrit at 38.4±1.31%; total protein was 4.33±0.29g/dL, glucose was measured at 97.13±3.75mg/dL; systolic blood pressure was 85.53±2.50mmHg; diastolic pressure at 7.,40±3.74mmHg; and mean blood pressure was 78.73±1.13mmHg. Straightening postural reaction was lost at 7.20±2.05, 12.80±3.56 and 8.67±3.06 minutes for groups 2MS, MS and ½ MS, respectively...
Neste estudo administrou-se cloridrato de medetomidina, um agonista de receptores adrenérgicos alfa2 , a cinco cobaios adultos (três machos e duas fêmeas) para verificar a eficiência e segurança do uso de doses calculadas por meio de extrapolação alométrica. Um procedimento cirúrgico foi realizado para inserir uma cânula de polietileno que avançou 2,0 a 2,5 cm no interior da artéria carótida esquerda, até a aorta. Um período mínimo de recuperação de dois dias foi respeitado antes de qualquer outra manipulação ou teste farmacológico. As cânulas eram lavadas a cada dois dias com fluxo de solução salina heparinizada e permaneceram patentes por duas a três semanas após sua inserção. Após a cirurgia, cada animal foi colocado em uma caixa aberta medindo 45x25x20cm, em uma sala silenciosa com iluminação suave. O grupo MS recebeu exatamente a dose alometricamente calculada, enquanto o grupo 2MS recebeu o dobro da dose alométrica, e o grupo ½ MS recebeu a metade da dose alométrica. Parâmetros foram mensurados e avaliados aos 0, 5, 10, 20, 40, 60, 90 e 120 minutos após a injeção. A massa corporal foi 709,6±169g, 742±172,87g e 710±160,2g para os grupos 1, 2 e 3 respectivamente, a temperatura corporal foi 101,68±0,19ºF, a frequência respiratória foi 85,2±4,54 movimentos por minuto, a frequência cardía ca foi 297,13±3,46 batimentos per minute, a PaO2 foi 81,7±9,43mmHg, a PaCO2 foi 34,49±1,59mmHg, o pH foi 7,41±0,07, o hematócrito foi 38,4±1,31%, a proteína total foi 4,33±0,29g/dL, a glucose foi 97,13±3,75mg/dL, a pressão sistólica foi 85,53±2,50mmHg, a pressão diastólica foi 71,40±3,74mmHg, e a pressão sanguínea média foi 78,73±1,13mmHg...
En esta investigación se ha administrado clorhidrato de medetomidina, un agonista de receptores adrenérgicos alfa2 , a cinco cobayos adultos (tres machos y dos hembras) para verificar la eficacia y seguridad del uso de dosis calculadas por extrapolación alométrica. Se realizó un procedimiento quirúrgico para introducir una cánula de polietileno penetrando 2,0 a 2,5 cm en la arteria carótida izquierda, hasta la aorta. Se ha respetado un período mínimo de recuperación de dos días antes de cualquier otra manipulación o teste farmacológico. Las cánulas eran lavadas a cada dos días con flujo de solución salina heparinizada, y permanecieron patentes por dos a tres semanas después de la inserción. Después de la cirugía, cada animal fue acomodado en una caja abierta con medida de 45x25x20cm, en una sala silenciosa con iluminación suave. El grupo MS recibió exactamente la dosis alométricamente calculada, mientras el grupo 2MS recibió el doble de la dosis alométrica, y el grupo ½ MS recibió la mitad de la dosis alométrica. Parámetros fueron mensurados y evaluados a los 0, 5, 10, 20, 40, 60, 90 y 120 minutos después de la inyección. El peso corporal fue 709,6±169g, 742±172,87g y 710±160,2g para los grupos 1, 2 y 3 respectivamente, la temperatura corporal fue 101,68±0,19ºF, la frecuencia respiratoria fue 85,2±4,54 movimientos por minuto, la frecuencia cardíaca fue 297,13±3,46 batimientos por minuto, la PaO2 fue 81,7±9,43mmHg, la PaCO2 fue 34,49±1,59mmHg, el pH fue 7,41±0,07, el hematocrito fue 38,4±1,31%, la proteína total fue 4,33±0,29g/dL, la glucosa fue 97,13±3,75mg/dL, la presión sistólica fue 85,53±2,50mmHg, la presión diastólica fue 71,40±3,74mmHg, y la presión sanguínea promedia fue 78,73±1,13mmHg. La reacción postural de enderezamiento fue perdida en 7.20±2,05, 12,80±3,56 y 8,67±3,06 minutos, para los grupos 2MS, MS y ½ MS, respectivamente...
Assuntos
Animais , Anestesia , Anestesia , Cobaias/anormalidades , Cobaias/imunologia , Medetomidina/análise , Medetomidina/efeitos adversosRESUMO
A tetraiodinated derivative of bovine insulin, prepared at pH 1 with stable iodine, was unable to cause signs of hypoglycemia in doses up to 2.4 micrograms/g in fasting mice, when native insulin caused 100% mortality. In neutral and acidic solutions, in absence of chaotropic agents, it behaved as the monomer, and could be separated from less iodinated, active species, that appeared as dimers, by conventional gel filtration. To generate antibodies in guinea-pigs, the tetraiodinated insulin was injected in doses three times higher than native insulin, without any harm to recipient animals. The induced antiserum was compared with antiserum generated by conventional methods in radioimmunoassay (RIA) of native insulin, and parallel curves were obtained.
Assuntos
Antígenos/imunologia , Hipoglicemia/prevenção & controle , Soros Imunes , Insulina/análise , Radioimunoensaio , Animais , Cromatografia em Gel , Reações Cruzadas , Cobaias/imunologia , Cobaias/metabolismo , Hipoglicemia/induzido quimicamente , Imunização , Insulina/imunologia , Insulina/toxicidade , Radioisótopos do Iodo , Camundongos/imunologia , Camundongos/metabolismo , Peso MolecularRESUMO
The mechanisms of host resistance in hepatic amebiasis are poorly understood. Previous studies in guinea-pigs have shown that amebic liver infection is mild and cures spontaneously in approximately four days, in contrast to hamsters, where amebic liver infection progresses to coalescent abscesses that kill the animals in about one month. To determine the role of macrophages in the resistance of guinea-pigs to hepatic amebic infection, animals were treated with intraportal injection of Entamoeba histolytica, using the same route. Results showed that the amebic hepatic lesions are larger and require longer time to cure in the silica-treated group. This suggests that macrophages play a role in the resistance of the guinea-pig to amebic liver infection. The possible dependence of T lymphocytes in the resistance of guinea pigs to amebic hepatic infection was analyzed using Cyclosporin A. Results showed that resistance to E. histolytica liver infection is not related to circulating T lymphocytes. We conclude that the guinea-pig is a suitable experimental model for the study of natural host resistance mechanisms in hepatic amebiasis. Macrophages, but not T lymphocytes participate as an effective cellular immune response to eradicate amebic infection in the liver of guinea-pigs.
Assuntos
Cobaias/parasitologia , Abscesso Hepático Amebiano/imunologia , Macrófagos/fisiologia , Linfócitos T/imunologia , Animais , Ciclosporina/farmacologia , Entamoeba histolytica/isolamento & purificação , Entamoeba histolytica/patogenicidade , Cobaias/imunologia , Imunidade Celular , Imunidade Inata/imunologia , Inflamação , Isquemia/parasitologia , Fígado/irrigação sanguínea , Fígado/parasitologia , Fígado/patologia , Necrose , Linfócitos T/efeitos dos fármacosRESUMO
Se produjo un segundo anticuerpo antigammaglobulina de curiel para ser usado en el radioinmunoensayo de insulina, el cual utiliza para la separación de la hormona unida de la libre el método del doble anticuerpo. Para la obtención del antisuero se utilizó la técnica de inmunización intradérmica múltiple, con la que se lograron rápidos resultados y con una alta calidad, tanto en su título, afinidad, como especificidad
Assuntos
Coelhos , Animais , Anticorpos Anti-Idiotípicos , Cobaias/imunologia , Soros Imunes , Anticorpos Anti-Insulina , RadioimunoensaioRESUMO
During the ecological studies done in Costa Rica on Rocky Mountain spotted fever, we have been able to isolate 2 strains of rickettsiae from the rabbit tick Haemaphysalis leporispalustris, indistinguishable from R. rickettsii isolated from humans in our country. Moreover, serological evidence of this agent was demonstrated in convalescent guinea pigs and in the sera of the wild rabbit (Sylvilagus braziliensis).
Assuntos
Rickettsia rickettsii/isolamento & purificação , Carrapatos/microbiologia , Animais , Animais Selvagens/microbiologia , Costa Rica , Cobaias/imunologia , Humanos , Soros Imunes/imunologia , Masculino , Camundongos/imunologia , Coelhos/parasitologia , Rickettsia rickettsii/classificação , SorotipagemAssuntos
Vetores Artrópodes/parasitologia , Proteínas do Sistema Complemento/fisiologia , Trypanosoma cruzi/fisiologia , Trypanosoma/classificação , Animais , Cobaias/sangue , Cobaias/imunologia , Intestinos/parasitologia , Especificidade da Espécie , Trypanosoma/crescimento & desenvolvimento , Trypanosoma/fisiologia , Trypanosoma cruzi/crescimento & desenvolvimentoAssuntos
Animais , Cobaias/imunologia , Cobaias/microbiologia , Cobaias/sangue , Fungos , Fungos/química , Rhizopus , TrichophytonAssuntos
Complexo Antígeno-Anticorpo , Eritrócitos/imunologia , Imunoglobulina G/imunologia , Animais , Anticorpos/isolamento & purificação , Sítios de Ligação de Anticorpos , Bovinos/imunologia , Galinhas/imunologia , Contraimunoeletroforese , Cobaias/imunologia , Humanos , Coelhos/imunologia , Receptores Fc , Ovinos/imunologia , Especificidade da EspécieAssuntos
Citotoxicidade Celular Dependente de Anticorpos , Imunidade Celular , Animais , Galinhas/imunologia , Radioisótopos de Cromo , Proteínas do Sistema Complemento/imunologia , Testes Imunológicos de Citotoxicidade , Eritrócitos/imunologia , Cobaias/imunologia , Humanos , Imunoglobulina G/imunologia , Linfócitos/imunologia , Coelhos/imunologia , Ovinos/imunologia , Especificidade da EspécieRESUMO
The present investigation was developed to determine the presence of protecting effects in the serum of rabbits inoculated with BHK 21 cells infected with foot-and-mouth disease virus, subtype C2. The rabbits received 252 mg. of antigens harvested 60, 65, 75, 90, 120 and 210 minutes post infection. These antigens were inactivated with two procedure: formaldehyde 0.015% and beta-propiolactone 0.2% and were inyected with incomplete Freund's adjuvant; the last inoculations were given with live antigen without adjuvant. The immunization period lasted approximately for six months. A seroprotection test in suckling mice was performed with each antiserum. The antisera corresponding to 75, 120 and 210 minutes post infection had protector effect. But antisera obtained with BHK cells at 75 minutes showed highly significant protective effect, as compared with the other two sera.
Assuntos
Antígenos Virais/imunologia , Aphthovirus/imunologia , Febre Aftosa/imunologia , Soros Imunes/imunologia , Animais , Antígenos Virais/isolamento & purificação , Aphthovirus/patogenicidade , Células Cultivadas , Eletroforese em Gel de Poliacrilamida , Cobaias/imunologia , Imunidade Celular , Imunodifusão , Imunoeletroforese , Camundongos , Precursores de Proteínas/farmacologia , Coelhos/imunologiaRESUMO
Nine strains of Venezuelan encephalitis (VE) virus isolated from the Amazon region of Peru in 1971 were identified as antigenic subtype I based on plaque-reduction neutralization tests with four and 20 units of antibody. A tenth strain, 71D1252, was possibly a new subtype, but was related to subtypes I and III. Hemagglutinins of each strain made from infected mouse brains had optimals pHs of 6.2 and 6.4. Nine strains were pathogenic for adult hamsters and adult mice, but strain 71D1252 inapparently infected some adult hamsters and mice inoculated peripherally. Plaques of nine strains in Vero African green monkey kidney cell cultures were intermediate in size between representative epizootic and enzootic strains, but plaques of strain 71D1252 were small like epizootic strains.
Assuntos
Vírus da Encefalite Equina Venezuelana/classificação , Animais , Anticorpos Antivirais , Antígenos Virais , Arbovírus/imunologia , Linhagem Celular , Células Cultivadas , Embrião de Galinha , Células Clonais/imunologia , Testes de Fixação de Complemento , Cricetinae , Vírus da Encefalite Equina Venezuelana/patogenicidade , Cobaias/imunologia , Testes de Inibição da Hemaglutinação , Técnica de Placa Hemolítica , Concentração de Íons de Hidrogênio , Rim , Camundongos/imunologia , Testes de Neutralização , Peru , Coelhos/imunologia , VirulênciaAssuntos
Proteínas do Sistema Complemento , Lactoferrina/farmacologia , Lactoglobulinas/farmacologia , Animais , Complemento C1/isolamento & purificação , Complemento C3 , Depressão Química , Eritrócitos/imunologia , Cobaias/imunologia , Proteínas Hemolisinas , Humanos , Ferro/metabolismo , Ligação Proteica , Ovinos/imunologiaRESUMO
The effect of Lactoferrin (LF) on complement activity has been studied using the sheep red blood cell - haemolysin system. Although Lactoferrin itself is devoid of complement activity, it does affect complement action. In the absence of 2 C50 units of complement, lysis occurs, the amount observed depending on the ratio of complement to Lactoferrin used. C1 was shown to be the target for Lactoferrin action, since the inhibition of lysis produced by 500 ug of Lactoferrin, could be completely reversed by crude C1.C3, a contaminant of this crude preparation, had no such effect. Investigations to establish the specific effect of Lactoferrin on C1 indicate that Lactoferrin is a potent activator of C1, since a six-fold increase in C1 activity results when they are mixed together. These observations are consistent with the hypothesis, that Lactoferrin exerts an influence on the complement system, as a result of its capacity to activate C1. (AU)