RESUMO
κ-Cn and ß-lactoglobulin are important candidate genes associated with milk yield and milk protein content. The present investigation is carried out to determine the polymorphisms status of κ-Cn and ß-lactoglobulin genes in Anatolian Black cattle and Holstein breeds. PCR-RFLP technique was used to determine Kappa-Casein and ß-lactoglobulin polymorphisms in both cattle breeds. The allele frequency of Anatolian Black cattle in terms of κ-Cn and ß-lactoglobulin genes were 0.50 (A) 0.50 (B) and 0.20 (A) 0.80 (B) respectively, whereas in Holstein were 0.29 (A) 0.71 (B) and 0.44 (A) 0.56 (B) respectively. The chi-square test showed that each cattle breed was in Hardy-Weinberg equilibrium (P>0.05).
κ-Cn e ß-lactoglobulina são importantes genes candidatos associados à produção de leite e ao teor de proteína do leite. A presente investigação é realizada para determinar o status de polimorfismos dos genes κ-Cn e ß-lactoglobulina nas raças Anatolian Black cattle e Holstein. A técnica PCR-RFLP foi utilizada para determinar os polimorfismos Kappa-Casein e ß-lactoglobulina em ambas as raças de gado. A freqüência dos alelos do gado negro anatólio em termos de κ-Cn e ß-lactoglobulina foi de 0,50 (A) 0,50 (B) e 0,20 (A) 0,80 (B) respectivamente, enquanto que em Holstein foi de 0,29 (A) 0,71 (B) e 0,44 (A) 0,56 (B) respectivamente. O teste do qui-quadrado mostrou que cada raça bovina estava em equilíbrio de Hardy-Weinberg (P>0,05).
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Animais , Bovinos , Caseínas/isolamento & purificação , Caseínas/genética , Lactoglobulinas/isolamento & purificação , Lactoglobulinas/genética , Turquia , Reação em Cadeia da Polimerase , Proteínas do Soro do Leite/isolamento & purificação , Proteínas do Soro do Leite/genéticaRESUMO
Casein glycomacropeptide (CMP) is a 64- amino acid peptide found in cheese whey, which is released after κ-casein specific cleavage by chymosin. CMP lacks aromatic amino acids, a characteristic that makes it usable as a nutritional supplement for people with phenylketonuria. CMP consists of two nonglycosylated isoforms (aCMP A and aCMP B) and its different glycosylated forms (gCMP A and gCMP B). The most predominant carbohydrate of gCMP is N-acetylneuraminic acid (sialic acid). Here, we developed a CMP purification process based on the affinity of sialic acid for wheat germ agglutinin (WGA). After formation of chitosan beads and adsorption of WGA, the agglutinin was covalently attached with glutaraldehyde. Two matrices with different WGA density were assayed for CMP adsorption. Maximum adsorption capacities were calculated according to the Langmuir model from adsorption isotherms developed at pH 7.0, being 137.0 mg/g for the matrix with the best performance. In CMP reduction from whey, maximum removal percentage was 79% (specifically 33.7% of gCMP A and B, 75.8% of aCMP A, and 93.9% of aCMP B). The CMP was recovered as an aggregate with an overall yield of 64%. Therefore, the matrices developed are promising for CMP purification from cheese whey. © 2016 American Institute of Chemical Engineers Biotechnol. Prog., 33:171-180, 2017.
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Aminoácidos/química , Caseínas/isolamento & purificação , Ácido N-Acetilneuramínico/química , Fragmentos de Peptídeos/isolamento & purificação , Proteínas do Soro do Leite/isolamento & purificação , Adsorção , Aminoácidos/metabolismo , Animais , Caseínas/química , Bovinos , Quitosana/química , Cromatografia de Afinidade , Glicosilação , Leite/química , Fragmentos de Peptídeos/química , Soro do Leite/química , Proteínas do Soro do Leite/químicaRESUMO
Cheese whey level and caseinomacropeptide (CMP) index of fermented milk beverages added with four levels of cheese whey (0, 10, 20, and 40percent) and stored at 8-10oC for 0, 7, 14 and 21 days were determined by high performance liquid chromatography-gel filtration (HPLC-GF). Additionally, the interference of the starter culture and the storage time on the detection of cheese whey and CMP were investigated. Refrigerated storage up to 21 days did not affect (P>0.05) cheese whey and CMP amounts in milk (0 percent of cheese whey) and in fermented milk beverages added with 10 and 20percent of cheese whey (P>0.05). However, cheese whey and CMP amounts were higher than expected (P<0.05) in fermented milk beverages added with 40 percent of cheese whey and stored for 21 days...
O presente trabalho teve como objetivos quantificar o teor de soro e o índice de caseinomacropeptídeo (CMP) de bebidas lácteas fermentadas preparadas em laboratório, adicionadas de diferentes concentrações de soro (0, 10, 20 e 40 por cento), fermentadas e armazenadas em refrigeração (8-10oC) por tempos distintos (zero, sete, 14 e 21 dias), por cromatografia líquida de alta eficiência-filtração em gel (CLAE-FG), bem como verificar a interferência da cultura utilizada no preparo das bebidas lácteas fermentadas e do tempo de armazenamento na detecção de soro lácteo e CMP. Quando os teores de soro lácteo e os índices de CMP obtidos por CLAE-FG de bebidas lácteas fermentadas foram analisados ao longo do tempo de armazenamento, verificou-se que não houve diferença (p>0,05) para o leite (0 por cento de soro) e as bebidas lácteas com 10 e 20 por cento de soro nos tempos de zero, sete, 14 e 21 dias de armazenamento. No entanto, para a bebida láctea fermentada adicionada de 40 por cento de soro, foi observada diferença para o tempo de armazenamento de 21 dias (p<0,05), em que o teor de soro e o índice de CMP obtidos foram maiores que os demais, que se mostraram equivalentes entre si (p>0,05) para os tempos de zero, sete e 14 dias...
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Animais , Queijo , Caseínas/isolamento & purificação , Leite/química , Peptídeos/isolamento & purificação , Produtos Fermentados do Leite/química , Cromatografia Líquida de Alta Pressão , Tecnologia de Alimentos , Lacticaseibacillus casei/isolamento & purificaçãoRESUMO
Cheese whey level and caseinomacropeptide (CMP) index of fermented milk beverages added with four levels of cheese whey (0, 10, 20, and 40percent) and stored at 8-10oC for 0, 7, 14 and 21 days were determined by high performance liquid chromatography-gel filtration (HPLC-GF). Additionally, the interference of the starter culture and the storage time on the detection of cheese whey and CMP were investigated. Refrigerated storage up to 21 days did not affect (P>0.05) cheese whey and CMP amounts in milk (0 percent of cheese whey) and in fermented milk beverages added with 10 and 20percent of cheese whey (P>0.05). However, cheese whey and CMP amounts were higher than expected (P<0.05) in fermented milk beverages added with 40 percent of cheese whey and stored for 21 days.(AU)
O presente trabalho teve como objetivos quantificar o teor de soro e o índice de caseinomacropeptídeo (CMP) de bebidas lácteas fermentadas preparadas em laboratório, adicionadas de diferentes concentrações de soro (0, 10, 20 e 40 por cento), fermentadas e armazenadas em refrigeração (8-10oC) por tempos distintos (zero, sete, 14 e 21 dias), por cromatografia líquida de alta eficiência-filtração em gel (CLAE-FG), bem como verificar a interferência da cultura utilizada no preparo das bebidas lácteas fermentadas e do tempo de armazenamento na detecção de soro lácteo e CMP. Quando os teores de soro lácteo e os índices de CMP obtidos por CLAE-FG de bebidas lácteas fermentadas foram analisados ao longo do tempo de armazenamento, verificou-se que não houve diferença (p>0,05) para o leite (0 por cento de soro) e as bebidas lácteas com 10 e 20 por cento de soro nos tempos de zero, sete, 14 e 21 dias de armazenamento. No entanto, para a bebida láctea fermentada adicionada de 40 por cento de soro, foi observada diferença para o tempo de armazenamento de 21 dias (p<0,05), em que o teor de soro e o índice de CMP obtidos foram maiores que os demais, que se mostraram equivalentes entre si (p>0,05) para os tempos de zero, sete e 14 dias.(AU)
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Animais , Leite/química , Queijo , Produtos Fermentados do Leite/química , Peptídeos/isolamento & purificação , Caseínas/isolamento & purificação , Tecnologia de Alimentos , Lacticaseibacillus casei/isolamento & purificação , Cromatografia Líquida de Alta PressãoRESUMO
The protein composition of goat milk differs between goat breeds and could present regional trends. The aim of this study was to comparatively analyze the protein composition of goat milk produced by the Alpine and Saanen breeds in northeastern Brazil and to evaluate the antibacterial activity of its protein fractions. SDS-PAGE, 2-DE electrophoresis and RP-HPLC analyses revealed the absence of αs1-casein in the milk of both breeds and no differences between the αs2-casein, ß-casein, ß-lactoglobulin and α-lactalbumin profiles. The amounts of soluble proteins and ß-casein hydrolysis residues were higher in Saanen milk. Only the protein fraction containing the largest amounts of casein (F60-90%) inhibited bacterial growth, with MIC values between 50 and 100 mg/mL. This study describe for the first time three important points about the goat milk protein of two Brazilian goat breeders: absence of α-s1 casein in the protein profile, differences between the milk protein composition produced by goats of Alpine and Saanen breeders and antibacterial activity of unbroken proteins (casein-rich fraction) present in these milk.
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Antibacterianos/farmacologia , Caseínas/farmacologia , Lactalbumina/farmacologia , Leite/química , Animais , Antibacterianos/química , Antibacterianos/isolamento & purificação , Bacillus subtilis/efeitos dos fármacos , Bacillus subtilis/crescimento & desenvolvimento , Brasil , Cruzamento , Caseínas/química , Caseínas/isolamento & purificação , Escherichia coli/efeitos dos fármacos , Escherichia coli/crescimento & desenvolvimento , Feminino , Cabras , Hidrólise , Lactalbumina/química , Lactalbumina/isolamento & purificação , Masculino , Testes de Sensibilidade Microbiana , Pseudomonas aeruginosa/efeitos dos fármacos , Pseudomonas aeruginosa/crescimento & desenvolvimento , Staphylococcus aureus/efeitos dos fármacos , Staphylococcus aureus/crescimento & desenvolvimentoRESUMO
BACKGROUND: Bioactive peptides might be released from precursor proteins through enzymatic hydrolysis. These molecules could be potentially employed in health and food products. In this investigation, ovine milk caseinate hydrolysates obtained with a novel microbial protease derived from Bacillus sp. P7 were evaluated for antioxidant, antimicrobial, and angiotensin I-converting enzyme (ACE)-inhibitory activities. RESULTS: Antioxidant activity measured by the 2,2'-azino-bis-(3-ethylbenzothiazoline)-6-sulfonic acid method increased with hydrolysis time up to 2 h, remaining stable for up to 4 h. Hydrolysates showed low 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl radical-scavenging abilities, with higher activity (31%) reached after 1 h of hydrolysis. Fe(2+) -chelating ability was maximum for 0.5 h hydrolysates (83.3%), decreasing thereafter; and the higher reducing power was observed after 1 h of hydrolysis. ACE-inhibitory activity was observed to increase up to 2 h of hydrolysis (94% of inhibition), declining afterwards. 3 h hydrolysates were shown to inhibit the growth of Bacillus cereus, Corynebacterium fimi, Aspergillus fumigatus, and Penicillium expansum. CONCLUSION: Ovine caseinate hydrolyzed with Bacillus sp. P7 protease presented antioxidant, antihypertensive, and antimicrobial activities. Hydrolysis time was observed to affect the evaluated bioactivities. Such hydrolysates might have potential applications in the food industry.
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Anti-Infecciosos/farmacologia , Anti-Hipertensivos/farmacologia , Antioxidantes/farmacologia , Proteínas de Bactérias/metabolismo , Caseínas/metabolismo , Endopeptidases/metabolismo , Hidrolisados de Proteína/farmacologia , Inibidores da Enzima Conversora de Angiotensina/química , Inibidores da Enzima Conversora de Angiotensina/farmacologia , Animais , Anti-Infecciosos/química , Anti-Hipertensivos/química , Antioxidantes/química , Bacillus cereus/efeitos dos fármacos , Proteínas de Bactérias/isolamento & purificação , Caseínas/isolamento & purificação , Corynebacterium/efeitos dos fármacos , Endopeptidases/isolamento & purificação , Feminino , Hidrólise , Quelantes de Ferro/química , Quelantes de Ferro/farmacologia , Cinética , Fungos Mitospóricos/efeitos dos fármacos , Oxirredução , Fragmentos de Peptídeos/análise , Fragmentos de Peptídeos/farmacologia , Hidrolisados de Proteína/química , Carneiro Doméstico , Espectrometria de Massas por Ionização por ElectrosprayRESUMO
In order to develop a new strategy for ß-lactoglobulin (ß-lg) removal from whey protein, partitioning of α-lactalbumin (α-la), ß-lg and glycomacropeptide (Gmp) was studied using aqueous two phase systems (ATPS). A system composed of 13% (w/w) polyethylene glycol (PEG, average molar mass 2000 g/mol) and 13% (w/w) potassium phosphate was used at 25°C. A central composite rotatable design (CCRD) associated to the response surface methodology (RSM) was applied to investigate the effects of NaCl concentration and pH on the partition of these proteins. It was found that α-la and Gmp partitioned to the top phase rich in PEG, whereas ß-lg partitioned to the bottom phase rich in salt. According to the RSM, optimal conditions for ß-lg removal where found where pH was equal to 6.7 and salt concentration was 0.35 mol/L. Under these conditions, the partition coefficient K(α) was 0.48 and K(Gmp) was 0.92. On the other hand, the partition coefficient K(ß) was only 0.01. In such conditions ß-lg preferentially concentrates in the bottom phase, while the top phase exclusively contains the proteins α-la and Gmp. Fractionation of the proteins from fresh whey was performed in a three stage cross-flow extraction system. The extraction yield for ß-lg in the bottom phase was 97.3%, while the yields for α-la and Gmp in the top phase were 81.1% and 97.8%, respectively.
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Fracionamento Químico/métodos , Proteínas do Leite/isolamento & purificação , Fosfatos/química , Polietilenoglicóis/química , Compostos de Potássio/química , Caseínas/química , Caseínas/isolamento & purificação , Cromatografia Líquida de Alta Pressão , Concentração de Íons de Hidrogênio , Lactalbumina/química , Lactalbumina/isolamento & purificação , Lactoglobulinas/química , Lactoglobulinas/isolamento & purificação , Proteínas do Leite/química , Fragmentos de Peptídeos/química , Fragmentos de Peptídeos/isolamento & purificação , Análise de Regressão , Cloreto de Sódio/química , Proteínas do Soro do LeiteRESUMO
Os peptideos INKKI e YPQPFTE foram isolados a patir da hidrolise da B caseina bovina e correspondem as sequencias 26-30 e 114-121 respectivamente. Trabalhos anteriores mostram que estes peptideos apresentaram atividades potenciadoras da bradicinina ...
Peptides INKKI and YPQPFTE were isolated from the bovine B casein after this hidrolysis corresponding to the 23-30 and 114-121 sequence respectively. Previous works had shown that these peptides presented bradkynin potentialing activity ...
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Masculino , Feminino , Animais , Camundongos , Caseínas/análise , Caseínas/farmacologia , Caseínas/isolamento & purificação , Caseínas/química , Peptídeos/análise , Peptídeos/isolamento & purificação , Peptídeos/química , Anticorpos Antineoplásicos/biossíntese , Anticorpos Antineoplásicos/químicaRESUMO
Avaliaram-se os componentes, as frações de caseína e o rendimento na produção de queijo do leite de cabras das raças Saanen e Anglo-Nubiana, principais raças criadas no Uruguai. O estudo foi realizado em uma fazenda com sistema de criação semi-intensiva. O leite das cabras Anglo-Nubianas apresentou teores mais elevados de gordura (4,65 vs 3,59 por cento), proteína total (3,48 vs 2,84 por cento), caseína total (2,82 vs 2,23 por cento), e maior rendimento na produção de queijos (22,00 vs 15,03kg/100l) que o leite das cabras Saanen. As fraçoes de αs1-caseína (6,99 vs 2,37g/l), β-caseína (13,95 vs 12,75g/l) e κ-caseína (4,24 vs 3,64g/l) também foram mais elevadas no leite das cabras Anglo-Nubianas, porém no teor de αs2-caseína (3,02 vs 3,60g/l) não se observaram diferenças. O rendimento na produção de queijos foi significativamente correlacionado com os teores de gordura, proteína, caseína total e com as frações de caseína. A αs1-caseína representou a fração com maior correlação com os teores de proteína total, caseína, gordura e produção de queijo. Demonstrou-se, neste estudo, que o leite de cabras Anglo-Nubianas é mais indicado para a produção de queijo e o de cabras Saanen para utilização como leite fluido.
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Animais , Queijo , Caseínas/isolamento & purificação , Produção de Alimentos , Leite/química , Cabras , UruguaiRESUMO
Avaliaram-se os componentes, as frações de caseína e o rendimento na produção de queijo do leite de cabras das raças Saanen e Anglo-Nubiana, principais raças criadas no Uruguai. O estudo foi realizado em uma fazenda com sistema de criação semi-intensiva. O leite das cabras Anglo-Nubianas apresentou teores mais elevados de gordura (4,65 vs 3,59 por cento), proteína total (3,48 vs 2,84 por cento), caseína total (2,82 vs 2,23 por cento), e maior rendimento na produção de queijos (22,00 vs 15,03kg/100l) que o leite das cabras Saanen. As fraçoes de αs1-caseína (6,99 vs 2,37g/l), β-caseína (13,95 vs 12,75g/l) e κ-caseína (4,24 vs 3,64g/l) também foram mais elevadas no leite das cabras Anglo-Nubianas, porém no teor de αs2-caseína (3,02 vs 3,60g/l) não se observaram diferenças. O rendimento na produção de queijos foi significativamente correlacionado com os teores de gordura, proteína, caseína total e com as frações de caseína. A αs1-caseína representou a fração com maior correlação com os teores de proteína total, caseína, gordura e produção de queijo. Demonstrou-se, neste estudo, que o leite de cabras Anglo-Nubianas é mais indicado para a produção de queijo e o de cabras Saanen para utilização como leite fluido.(AU)
Assuntos
Animais , Leite/química , Queijo , Caseínas/isolamento & purificação , Produção de Alimentos , Cabras , UruguaiRESUMO
A rapid capillary zone electrophoresis (CZE) method was established for separating and quantifying major casein and whey proteins in milk. Optimum sample preparation and electrophoretic conditions in a coated capillary maintained at 40 degrees C allowed accurate and reproducible quantification of milk proteins in a single analysis. Sample and run buffer allowed caseins to be maintained in solution by using a combination of urea and a nonionic detergent in phosphate buffer at pH 2.5. Quantitative CZE protein data were derived by calculating percentages and concentrations (mg/mL) of alpha-casein, beta-casein, alpha-lactalbumin, and beta-lactoglobulin. Calibration curves followed linear relationships with highly significant (p < 0.1) correlation coefficients. Relative standard deviations of less than 0.82 (%) for migration times and 2.18 (%) for percent protein indicated that the technique was reproducible. Electrophoretic protein profiles of fresh bovine milk and rehydrated dry milk showed marked quantitative differences in whey protein concentrations. Whey protein represented 12.37 +/- 0.07% beta-lactoglobulin and 3.05 +/- 0.08% alpha-lactalbumin of total protein in typical fresh milk, while only 1.90 +/- 0.16% beta-lactoglobulin and 0.86 +/- 0.04% alpha-lactalbumin of total protein were detected in a commercial rehydrated milk powder. By quantifying these differences, the established technique may allow the detection of substitution of fresh milk with rehydrated milk powder. The accuracy and reproducibility of the technique permitted the quantitation of individual protein concentrations in milk samples, which agreed with ranges reported in the literature. CZE may be well suited for routine use by dairies and regulatory agencies, since it allows the determination of milk proteins in less than 60 min.