RESUMO
In this work, we identified the expression, regulation, and viral targeting of Scribble and Dlg1 in antigen-presenting cells. Scribble and Dlg1 belong to the family of PDZ (postsynaptic density (PSD95), disc large (Dlg), and zonula occludens (ZO-1)) proteins involved in cell polarity. The relevance of PDZ proteins in cellular functions is reinforced by the fact that many viruses interfere with host PDZ-dependent interactions affecting cellular mechanisms thus favoring viral replication. The functions of Scribble and Dlg have been widely studied in polarized cells such as epithelial and neuron cells. However, within the cells of the immune system, their functions have been described only in T and B lymphocytes. Here we demonstrated that Scribble and Dlg1 are differentially expressed during antigen-presenting cell differentiation and dendritic cell maturation. While both Scribble and Dlg1 seem to participate in distinct dendritic cell functions, both are targeted by the viral protein NS1 of influenza A in a PDZ-dependent manner in dendritic cells. Our findings suggest that these proteins might be involved in the mechanisms of innate immunity and/or antigen processing and presentation that can be hijacked by viral pathogens.
Assuntos
Proteínas Adaptadoras de Transdução de Sinal/metabolismo , Células Apresentadoras de Antígenos/imunologia , Interações Hospedeiro-Patógeno , Vírus da Influenza A/patogenicidade , Influenza Humana/virologia , Proteínas de Membrana/metabolismo , Proteínas Supressoras de Tumor/metabolismo , Proteínas não Estruturais Virais/metabolismo , Proteínas Adaptadoras de Transdução de Sinal/genética , Células Apresentadoras de Antígenos/metabolismo , Células Apresentadoras de Antígenos/virologia , Células Dendríticas/imunologia , Células Dendríticas/metabolismo , Células Dendríticas/virologia , Proteína 1 Homóloga a Discs-Large , Humanos , Influenza Humana/imunologia , Influenza Humana/metabolismo , Macrófagos/imunologia , Macrófagos/metabolismo , Macrófagos/virologia , Proteínas de Membrana/genética , Monócitos/imunologia , Monócitos/metabolismo , Monócitos/virologia , Domínios PDZ , Proteínas Supressoras de Tumor/genética , Proteínas não Estruturais Virais/genéticaRESUMO
Foram produzidos quatro lotes de antigeno rabico a partir de suspensoes de virus resultantes de celulas BHK21 infectadas, aderidas a microcarregadores do tipo Cytodex 1 e cultivadas em biorreator. Em paralelo foi utilizada a metodologia de producao de virus rabico com celulas BHK21 em monocamadas, contidas em garrafas de 350cm2. Os resultados encontrados demonstraram que os titulos infectantes foram de 10 elevado a 6.69 DL50/mL para as suspensoes virais obtidas em garrafas e 10 elevado a 7.28 DL50/mL para as do biorreator. Os volumes das suspensoes virais colhidas foram, em media de 11.900 mL por lote do biorreator e 800 mL por garrafa. Com o antigeno produzido no biorreator foram imunizados 10 cavalos. As medias dos titulos de anticorpos anti-rabicos encontrados nos soros destes animais foram de 240 e 212 UI/mL, respectivamente apos a base e o primeiro reforco. Atraves da infeccao de celulas BHK21 aderidas, a microcarregadores e cultivadas em biorreator, pode-se obter antigeno rabico em larga escala e com titulos infectantes satisfatorios