RESUMO

Abstract The impact of fish oil concentration on the oxidative stability of microcapsules through the spray drying process using chitosan and maltodextrin as wall material was studied. Emulsions were prepared with different Tuna fish oil (TFO) content (TFO-10%, TFO20%, TF030% TF0-40%) while wall material concentration was kept constant. Microencapsulated powder resulting from emulsion prepared with high fish oil load have high moisture content, wettability, total oil and low encapsulation efficiency, hygroscopicity and bulk tapped density. Oxidative stability was evaluated periodically by placing microcapsules at room temperature. Microcapsules prepared with TFO-10% presented high oxidative stability in terms of peroxide value (2.94±0.04) and anisidine value (1.54±0.02) after 30 days of storage. It was concluded that optimal amounts of fish oil for microencapsulation are 10% and 20% using chitosan and maltodextrin that extended its shelf life during study period.

Resumo Foi estudado o impacto da concentração de óleo de peixe na estabilidade oxidativa de microcápsulas por meio do processo de secagem por atomização, utilizando quitosana e maltodextrina como material de parede. As emulsões foram preparadas com diferentes teores de óleo de atum (TFO) (TFO-10%, TFO20%, TF030% TF0-40%), enquanto a concentração de material de parede foi mantida constante. O pó microencapsulado resultante da emulsão preparada com alta carga de óleo de peixe tem alto teor de umidade, molhabilidade e óleo total e baixa eficiência de encapsulação, higroscopicidade e densidade extraída a granel. A estabilidade oxidativa foi avaliada periodicamente colocando microcápsulas à temperatura ambiente. As microcápsulas preparadas com TFO-10% apresentaram alta estabilidade oxidativa em termos de valor de peróxido (2,94 ± 0,04) e valor de anisidina (1,54 ± 0,02) após 30 dias de armazenamento. Concluiu-se que as quantidades ideais de óleo de peixe para microencapsulação são de 10% e 20% usando quitosana e maltodextrina que prolongaram sua vida útil durante o período de estudo.

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RESUMO

Abstract The impact of fish oil concentration on the oxidative stability of microcapsules through the spray drying process using chitosan and maltodextrin as wall material was studied. Emulsions were prepared with different Tuna fish oil (TFO) content (TFO-10%, TFO20%, TF030% TF0-40%) while wall material concentration was kept constant. Microencapsulated powder resulting from emulsion prepared with high fish oil load have high moisture content, wettability, total oil and low encapsulation efficiency, hygroscopicity and bulk tapped density. Oxidative stability was evaluated periodically by placing microcapsules at room temperature. Microcapsules prepared with TFO-10% presented high oxidative stability in terms of peroxide value (2.94±0.04) and anisidine value (1.54±0.02) after 30 days of storage. It was concluded that optimal amounts of fish oil for microencapsulation are 10% and 20% using chitosan and maltodextrin that extended its shelf life during study period.

Resumo Foi estudado o impacto da concentração de óleo de peixe na estabilidade oxidativa de microcápsulas por meio do processo de secagem por atomização, utilizando quitosana e maltodextrina como material de parede. As emulsões foram preparadas com diferentes teores de óleo de atum (TFO) (TFO-10%, TFO20%, TF030% TF0-40%), enquanto a concentração de material de parede foi mantida constante. O pó microencapsulado resultante da emulsão preparada com alta carga de óleo de peixe tem alto teor de umidade, molhabilidade e óleo total e baixa eficiência de encapsulação, higroscopicidade e densidade extraída a granel. A estabilidade oxidativa foi avaliada periodicamente colocando microcápsulas à temperatura ambiente. As microcápsulas preparadas com TFO-10% apresentaram alta estabilidade oxidativa em termos de valor de peróxido (2,94 ± 0,04) e valor de anisidina (1,54 ± 0,02) após 30 dias de armazenamento. Concluiu-se que as quantidades ideais de óleo de peixe para microencapsulação são de 10% e 20% usando quitosana e maltodextrina que prolongaram sua vida útil durante o período de estudo.

RESUMO

A eficácia dos implantes osseointegrados é amplamente reconhecida na literatura científica. Contudo, infiltrações bacterianas na junção implante-pilar podem desencadear inflamação nos tecidos circundantes, contribuindo para a evolução de condições mais sérias, como a peri-implantite. O objetivo desse estudo foi produzir complexos polieletrólitos (PECs) de quitosana (Q) e xantana (X) em forma de membranas, carregá-las com ativos naturais e sintéticos antimicrobianos, caracterizálas estruturalmente e avaliá-las frente a degradação enzimática, cinética de liberação e ações antimicrobianas com finalidade de aplicação para drug delivery. Membranas de QX a 1% (m/v) foram produzidas em três proporções, totalizando doze grupos experimentais: QX (1:1); QX (1:2), QX (2:1), QX-P (com própolis) (1:1); QX-P (1:2); QX-P (2:1); QX-C (com canela) (1:1); QX-C (1:2); QX-C (2:1) e CLX (com clorexidina 0,2%) (1:1); CLX (1:2); CLX (2:1). Para os estudos de caracterização foram feitas análises da espessura em estado seco; análises morfológicas superficial e transversal em Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV); análise estrutural de espectroscopia de infravermelho por transformada de Fourier (FTIR); análise de degradação por perda de massa sob ação da enzima lisozima; e análise da cinética de liberação dos ativos em saliva artificial. Para os testes microbiológicos, análises de verificação de halo de inibição e ação antibiofilme foram feitas contra cepas de Staphylococcus aureus (S. aureus) e Escherichia coli (E. coli). Os resultados demonstraram que a espessura das membranas variou conforme a proporção, sendo que o grupo QX (1:2) apresentou a maior média de 1,022 mm ± 0,2, seguida respectivamente do QX (1:1) com 0,641 mm ± 0,1 e QX (2:1) com 0,249 mm ± 0,1. Nas imagens de MEV é possível observar uma maior presença de fibras, rugosidade e porosidade nos grupos QX (1:2) e QX (1:1) respectivamente, e, no QX (2:1) uma superfície mais lisa, uniforme e fina. No FTIR foram confirmados os picos característicos dos materiais isoladamente, além de observar as ligações iônicas que ocorreram para formação dos PECs. Na análise de degradação, os grupos com ativos naturais adicionados tiveram melhores taxas de sobrevida do que os grupos QX. No teste de liberação, os grupos QX-P tiveram uma cinética mais lenta que os QX-C, cuja liberação acumulada de 100% foi feita em 24 h. Já nos testes do halo inibitório, somente os grupos CLX tiveram ação sobre as duas cepas, e os QX-P tiveram sobre S. aureus. Nas análises antibiofilme, os grupos CLX apresentaram as maiores taxas de redução metabólica nas duas cepas (± 79%); os grupos QX-P apresentaram taxas de redução similares em ambas as cepas, porém com percentual um pouco maior para E. coli (60- 80%) e os grupos QX-C tiveram grande discrepância entre as duas cepas: de 35 a 70% para S. aureus e 14 a 19% para E. coli. Pode-se concluir que, frente as análises feitas, o comportamento do material foi afetado diretamente pelos ativos adicionados a matriz polimérica. As proporções de Q ou X afetaram somente a espessura final. Quanto a aplicação proposta de drug delivery, os dispositivos apresentaram grande potencial, principalmente os grupos CLX e QX-P. (AU)

The effectiveness of osseointegrated implants is widely recognized in scientific literature. However, bacterial infiltrations at the implant-abutment interface may trigger inflammation in surrounding tissues, contributing to the development of more serious conditions, such as peri-implantitis. The aim of this study was to produce chitosan (Q) and xanthan (X) polyelectrolyte complexes (PECs) in the form of membranes, load and evaluate them for enzymatic degradation, release kinetics, and antimicrobial actions for drug delivery applications. QX membranes at 1% (w/v) were produced in three proportions, totaling twelve experimental groups: QX (1:1), QX (1:2), QX (2:1), QX-P (with propolis) (1:1), QX-P (1:2), QX-P (2:1), QX-C (with cinnamon) (1:1), QX-C (1:2), QX-C (2:1), and CLX (with 0.2% chlorhexidine) (1:1), CLX (1:2), CLX (2:1). Characterization studies included analyses of dry state thickness, surface and crosssectional morphology using Scanning Electron Microscopy (SEM), structural analysis by Fourier Transform Infrared (FTIR) spectroscopy, mass loss degradation analysis under lysozyme action, and active release kinetics analysis in artificial saliva. Microbiological tests included verification analyses of inhibition halos and antibiofilm action against strains of Staphylococcus aureus (S. aureus) and Escherichia coli (E. coli). Results showed that membrane thickness varied according to proportion, with group QX (1:2) presenting the highest average of 1.022 mm ± 0.2, followed by QX (1:1) with 0.641 mm ± 0.1, and QX (2:1) with 0.249 mm ± 0.1. SEM images showed greater presence of fibers, roughness, and porosity in groups QX (1:2) and QX (1:1) respectively, while QX (2:1) exhibited a smoother, more uniform, and thinner surface. FTIR confirmed characteristic peaks of the materials individually, besides showing ionic bonds formed for PECs. Degradation analysis revealed that groups with added natural actives had better survival rates than QX groups. In release tests, QX-P groups exhibited slower kinetics than QX-C, with 100% cumulative release achieved in 24 h. inhibitory halo tests, only CLX groups exhibited action against both strains, while QX-P acted against S. aureus. Antibiofilm analyses showed CLX groups with the highest metabolic reduction rates in both strains (± 79%); QX-P groups showed similar reduction rates in both strains, slightly higher for E. coli (60-80%), and QX-C groups had a significant discrepancy between strains: 35-70% for S. aureus and 14-19% for E. coli. In conclusion, material behavior was directly affected by added actives to the polymeric matrix. Proportions of Q or X only affected final thickness. Regarding proposed drug delivery applications, the devices showed great potential, especially CLX and QX-P groups.(AU)

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Resumen El aumento de la resistencia a los antibióticos por parte de bacterias patógenas ha motivado la búsqueda de alternativas para disminuir su utilización. Dentro de las opciones propuestas se encuentra la terapia de antiadherencia, en la cual se utilizan moléculas análogas a los glicoepítopes que son reconocidos por las bacterias para impedir la unión de éstas al tejido celular. En este estudio se llevó a cabo la obtención de glicoconjugados por medio de la reacción de Maillard partiendo de albúmina sérica bovina (BSA) y oligosacáridos de quitosano (oligosacáridos sin ultrafiltrar, ultrafiltrados y ultrafiltrados acetilados), en proporción 1:1 (p/p) a tres temperaturas de incubación (50, 60 y 70 °C) por 30 min. La caracterización de los conjugados sintetizados se realizó utilizando electroforesis (SDS-PAGE), espectroscopía de infrarrojo y espectroscopía de fluorescencia. Se realizaron ensayos de reconocimiento usando aglutinina de germen de trigo (WGA) y bacterias [Escherichia coli (K88ac y K88+)]. La caracterización por medio de electroforesis y espectroscopía de infrarrojo evidenció la unión de los oligosacáridos de quitosano a la estructura de la BSA. Además, los ensayos evidenciaron el reconocimiento de las moléculas sintetizadas tanto por la lectina WGA como por las bacterias. Los glicoconjugados sintetizados sin ultrafiltrar ni acetilar mostraron resultados muy favorables en el reconocimiento por ambas bacterias, lo que constituye una ventaja práctica, ya que su implementación a mayor escala reduciría costos de producción

Abstract The increase in antibiotic resistance by pathogenic bacteria has motivated the search for alternatives to reduce the use of antibiotics. Among these alternatives is anti-adhesion therapy, in which molecules that mimic the glycoepitopes that recognise bacteria are used to prevent their binding to cellular tissue. In this study, glycoconjugates were obtained by means of the Maillard reaction starting from bovine serum albumin (BSA) and chitosan oligosaccharides (unfiltered oligosaccharides, ultrafiltered and acetylated ultrafiltered), in a ratio of 1:1 (w/w) at three incubation temperatures (50, 60 and 70 °C) per 30 min. The characterisation was performed using the techniques of electrophoresis (SDS-PAGE), infrared spectroscopy and fluorescence spectroscopy. Recognition assays were performed using wheat germ agglutinin (WGA) and Escherichia coli bacteria (K88ac and K88+). Characterisation by electrophoresis and infrared spectroscopy demonstrated the binding of chitosan oligosaccharides to the structure of BSA. In addition, the tests showed the recognition of the molecules synthesised by both the WGA lectin and the E. coli bacteria. The glycoconjugates synthesised without ultrafiltration or acetylation showed very favourable results in recognition with both bacteria, which is an advantage, since its implementation on a larger scale would reduce production costs.

Resumo O aumento da resistência aos antibióticos por bactérias patogênicas tem motivado a busca de alterna­tivas para reduzir seu uso. Entre essas alternativas está a terapia anti-adesão, na qual são utilizadas moléculas análogas aos glicoepítopos que são reconhecidas pelas bactérias para impedir sua união ao tecido celular. Neste estudo, os glicoconjugados foram obtidos por meio da reação de Maillard a partir de albumina sérica bovina (BSA) e oligossacarídeos de quitosana (oligossacarídeos não ultra­filtrados, ultrafiltrados e acetilados ultrafiltrados), na proporção de 1:1 (p/p) em três temperaturas de incubação (50, 60 e 70 °C) durante 30 min. A caracterização dos conjugados sintetizados foi realizada utilizando a eletroforese (SDS-PAGE), espectroscopia de infravermelho e espectroscopia de fluorescência. Os ensaios de reconhecimento foram realizados utilizando aglutinina de germe de trigo (WGA) e bactérias [Escherichia coli (K88ac e K88+)]. A caracterização por meio de eletroforese e espectroscopia de infravermelho demonstrou a união dos oligossacarídeos de quitosana à estrutura da BSA. Além disso, os testes evidenciaram o reconhecimento das moléculas sintetizadas tanto pela lectina WGA quanto pelas bactérias. Os glicoconjugados sintetizados sem ultrafiltração ou acetilação apresentaram resultados muito favoráveis no reconhecimento por ambas as bactérias, o que é uma vantagem, visto que sua implementação em maior escala reduziria custos de produção.

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A cicatrização de úlceras cutâneas depende de fatores-chave que incluem a interação adequada dos diferentes constituintes celulares da epiderme, derme e tecido subcutâneo. A restauração da barreira epidérmica é altamente eficiente durante o período embrionário, com um relativo decréscimo na vida adulta. Distúrbios sistêmicos, como diabetes e hanseníase, podem comprometer a capacidade de reparação da pele, gerando ulceras crônicas, que são consideradas como relevantes problemas de saúde pública. O presente estudo se propôs a estabelecer parâmetros de eficiência de membranas bioativas, preparadas com o biopolímero quitosana (QT), em associação ao extrato vegetal, madecassoside (MA). Nas preparações obtidas, foram avaliadas características físico-químicas e propriedades antimicrobianas. A biocompatibilidade das preparações, e sua capacidade de promover migração celular, foi testada in vitro em fibroblastos da linhagem NIH/3T3. As membranas foram divididas em grupos: QT 2%; QT/MA 0,10% (QTMA010); QT/MA 0,25% (QTMA025); QT/MA 0,50% (QTMA050). Os grupos foram avaliados em diferentes intervalos de tempo, de 0 a 96 horas (T0, T24, T48, T72, T96). Nossos dados indicam que membranas bioativas, preparadas com quitosana (QT 2%) e madecassoside (MA 0,10%, 0,25%, 0,50%), são biocompatíveis e possuem propriedades físico-químicas adequadas. As preparações contendo associação de ambos os compostos se mostraram superiores à QT. A capacidade de promover migração de fibroblastos, in vitro, foi estatisticamente superior em todos os grupos acrescidos de MA, indicando um papel relevante desse composto em preparações de utilização tópica para cicatrização úlceras cutâneas.

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Abstract Recently exposure of olive trees to many stresses particularly oil varieties led to decline in the olive yield. The target of the study is to improve vegetative growth and increase olive fruits quality as well as the fruit oil % and oil quality by applying chitosan nanoparticles (CHNPs) and N-acetyl thiazolidine 4-carboxylic acid (N-ATCA) under the conditions of Egypt. The experiment was carried out in the seasons of 2021 and 2022 on Arbosana olive trees 8 years old and 4×6 m apart the trees sprayed three times on 15th Sept., 1st Oct. and 15th Oct. with (CHNPs at 500, 1000 and 1500 ppm), (N-ATCA at 50, 100 and 150 ppm) and a combination between them and evaluate the vegetative growth of trees, fruit physiochemical characteristics, and oil properties during both study seasons. The application of CHNPs and N-ATCA and a combination of them led to increasing leaf area, total chlorophyll and proline content also increment fruit weight, flesh weight, oil color and oil % moreover improving the quality of produced oil. The improvement in growth, fruit quality, oil % and oil quality, were associated with increasing concentrations of CHNPs, N-ATCA and a combination of them especially (CHNPs at 1500 ppm + N-ATCA at 100 ppm and CHNPs at 1500 ppm + N-ATCA at 150 ppm). Spraying (CHNPs at 1500 ppm + N-ATCA at 150 ppm) is recommended to improve the tree growth, fruit quality, oil % and quality of Arbosana olive.

Resumo Recentemente, a exposição das oliveiras a muitos estresses, particularmente as variedades de azeite, levou ao declínio no rendimento da azeitona. O objetivo do estudo é melhorar o crescimento vegetativo e aumentar a qualidade dos frutos de oliveira, bem como a % de óleo do fruto e a qualidade do óleo, aplicando nanopartículas de quitosana (CHNPs) e ácido N-acetil tiazolidina 4-carboxílico (N-ATCA) nas condições do Egito. O experimento foi realizado nas temporadas de 2021 e 2022 em oliveiras Arbosana de 8 anos e 4×6 m de distância das árvores pulverizadas três vezes em 15 de setembro, 1º de outubro e 15 de outubro com (CHNPs a 500, 1000 e 1500 ppm), (N-ATCA a 50, 100 e 150 ppm) e uma combinação entre eles e avaliar o crescimento vegetativo das árvores, características físico-químicas dos frutos e propriedades do óleo durante as duas épocas de estudo. A aplicação de CHNPs e N-ATCA e uma combinação deles levou ao aumento da área foliar, teor de clorofila total e prolina, além de incrementar o peso do fruto, peso da polpa, cor do óleo e % de óleo, e melhorou a qualidade do óleo produzido. A melhora no crescimento vegetativo, qualidade da fruta, % de óleo e qualidade do óleo foram associados com concentrações crescentes de CHNPs e N-ATCA e uma combinação deles em especial (CHNPs a 1500 ppm + N-ATCA a 100 ppm e CHNPs a 1500 ppm + N-ATCA a 150 ppm). A pulverização (CHNPs a 1500 ppm + N-ATCA a 150 ppm) é recomendada para melhorar o crescimento das árvores, qualidade dos frutos, % de óleo e qualidade da azeitona Arbosana.

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A regeneração óssea guiada (ROG) é uma técnica muito utilizada na odontologia para reconstrução de defeitos alveolares para posterior instalação de implantes dentários. Para que a técnica seja efetiva, uma membrana que permita o isolamento de diferentes tipos teciduais é necessária. A quitosana nanoestruturada modificada por hidróxidos duplos lamelares (HDL) é um biopolímero sintético que busca unir as características promissoras da quitosana como material bioadesivo e com propriedades antimicrobianas com a hidrocalcita buscando aprimorar suas características estruturais. O objetivo deste estudo in vivo foi avaliar a biocompatibilidade e o potencial de regeneração óssea guiada de uma nova membrana produzida à base de quitosana nanoestrutada modificada por HDL. Ratos Wistar machos adultos (n=64) foram divididos randomicamente em 2 grupos de acordo com o tratamento: Colágeno (COL) e Quitosana (QTS). Os animais foram submetidos à cirurgia para instalação de uma membrana no subcutâneo da região dorsal e à realização de 2 defeitos críticos na calota craniana, respeitando cada lado do animal. O defeito do lado direito foi coberto por uma das membranas testadas (COL ou QTS) enquanto o outro permanecia descoberto (Controle). Oito animais de cada grupo foram sacrificados em 4 tempos de acompanhamento: 3, 7, 14 e 30 dias. Amostras de calota e subcutâneo foram coletadas e preservadas em paraformaldeído 4%. As amostras de calota foram escaneadas em viii microtomógrafico para análise da quantidade de osso neoformado. Em seguida, os espécimes de calota e subcutâneo foram processados laboratorialmente para exames histológicos em parafina: para avaliação histomorfológica das características do processo cicatricial e de degradação das membranas e histomorfométrica para quantificação do processo inflamatório e do nível de reação tecidual por meio do escore global de reação tecidual (EGRT). Análises descritivas e inferenciais foram realizadas para comparação entre os grupos com nível de significância de 5%. Os resultados não demonstraram diferenças entre os grupos COL e QTS quanto à intensidade do processo inflamatório e EGRT. Já em relação aos defeitos na calota, o grupo QTS apresentou maior neoformação óssea em relação ao grupo controle aos 30 dias (p=0,04). Com base nos resultados conclui-se que as membranas de quitosana nano particuladas modificadas por HDL apresentaram biocompatibilidade compatível com a membrana de colágeno e efetividade para uso como barreira em ROG. (AU)

Guided bone regeneration (GBR) is a technique widely used in dentistry to reconstruct alveolar defects for subsequent installation of dental implants. For the technique to be effective, a membrane that allows the isolation of different tissue types is necessary. Nanostructured chitosan modified by lamellar double hydroxides (HDL) is a synthetic biopolymer that seeks to combine the promising characteristics of chitosan as a bioadhesive material with antimicrobial properties with hydrocalcite seeking to improve its structural characteristics. The objective of this in vivo study was to evaluate the biocompatibility and guided bone regeneration potential of a new membrane produced based on nanostructured chitosan modified by HDL. Adult male Wistar rats (n=64) were randomly divided into 2 groups according to treatment: Collagen (COL) and Chitosan (QTS). The animals underwent surgery to install a membrane in the subcutaneous tissue of the dorsal region and to perform 2 critical defects in the cranial vault, respecting each side of the animal. The defect on the right side was covered by one of the tested membranes (COL or QTS) while the other remained uncovered (Control). Eight animals from each group were sacrificed at 4 follow-up times: 3, 7, 14 and 30 days. Calvary and subcutaneous samples were collected and preserved in 4% paraformaldehyde. The cap samples were scanned in a microtomograph to analyze the amount of newly formed bone. Then, the cap and subcutaneous specimens were processed in the laboratory for histological examinations in paraffin: for histomorphological evaluation of the characteristics of the scarring process and membrane degradation and histomorphometric for quantification of the inflammatory process and the level of tissue reaction through the global score of tissue reaction (EGRT). Descriptive and inferential analyzes were performed for comparison between groups with a significance level of 5%. The results showed no differences between the COL and QTS groups regarding the intensity of the inflammatory process and EGRT. In relation to the defects in the calvaria, x the QTS group presented greater new bone formation in relation to the control group at 30 days (p=0.04). Based on the results, it is concluded that the nanoparticulate chitosan membranes modified by HDL showed biocompatibility compatible with the collagen membrane and effectiveness for use as a barrier in GBR. (AU)

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Several types of periodontal and peri-implant soft tissue defects require surgical treatment to reestablish function and aesthetics. However, local, and systemic factors can jeopardize tissue repair leading to unexpected outcomes and postoperative discomfort. In order to overcome this problem, new devices have been developed to improve surgical procedures outcomes and patient experience. The aim of the present study was to develop a new silk fibroin (SF)/chitosan (CH) film loaded with insulin as a drug delivery system to improve palatal donor area healing after free gingival graft harvesting for ridge preservation. For this, biomaterial development, characterization and in vitro assessment were performed to evaluate the new delivery system. In addition, 3- months outcomes from palatal wound healing following the use of the proposed delivery system were assessed through clinical, patient centered parameters, immunological, microbiological, and histological evaluations. Sixty-nine patients with indication of tooth extraction were enrolled into 3 groups: Control Group (C) (n=23): open wound on palatal mucosa followed by spontaneous healing; SF/CH Film (F) (n=23): open wound on palatal mucosa and silk fibroin film as dressing; Insulin-loaded SF/CH film (IF) (n=23): open wound on palatal mucosa and an insulin- loaded silk fibroin film as a delivery system. : It was verified some characteristics that are favorable to the oral environment, such as mechanical properties, swelling and permeability to water vapor. The biomaterial presented a standard of a controlled release system through diffusion with delivery stability in human saliva, along with an excellent biocompatibility with the absence of cytotoxicity and genotoxicity increasing cell viability in lineage cells (HaCat). F and IF promoted accelerated palatal wound closure on day 7 and 14 after surgery, as well as an early epithelialization, compared to the C group. Both films were capable to reduce pro-inflammatory cytokines (IL-6, TNF-α, IL-1ß) and modulate biomarkers correlated to tissue degradation/remodeling. Spontaneous healing microbiome reported higher genus/species with pathogenic role in the oral mucosa with reduction in health species following this profile until de end of the follow-up. A tendency of eubiosis was observed in F and IF groups throughout healing process. It seems that this new device has a promising application in oral cavity and positively influence wound healing. (AU)

Diversos tipos de defeitos mucogengivais requerem abordagem cirúrgica para o reestabelecimento funcional e estético. Porém, alterações locais e sistêmicas podem prejudicar o processo de reparo gerando resultados inesperados e desconforto ao paciente. Biomateriais vem sendo desenvolvidos para melhorar os resultados dos procedimentos cirúrgicos e a experiência clínica do paciente. O objetivo do presente estudo foi desenvolver um filme de fibroína de seda (FS) e quitosana (QT) carregado com insulina (INS), atuando como um sistema de liberação, para acelerar a cicatrização de feridas na área doadora palatina após procedimento de preservação de rebordo com uso de enxerto gengival livre. Para isso, foi executado o desenvolvimento, caracterização e avaliação in vitro do biomaterial. Ademais, o resultado de 3 meses do reparo das feridas palatinas foi verificado por meio de avaliações clínicas, imunológica, microbiológica, histológica, bem como parâmetros centrados no paciente. Sessenta e nove pacientes foram alocados aleatoriamente nos grupos Controle (C) (n=23): ferida aberta em palato seguido de cicatrização espontânea; Filme de FS/QT (F) (n=23): ferida aberta em palato associada ao filme na área doadora; Filme de FS/QT carregado com INS (IF) (n=23): ferida aberta em palato associada ao filme carregado com INS na área doadora. Verificou-se propriedades mecânicas, bem como de entumecimento e permeabilidade ao vapor de água, favoráveis ao meio bucal sem nenhuma alteração com a inclusão da INS. O dispositivo apresentou liberação controlada por meio de difusão com estabilidade em saliva humana. Excelente biocompatibilidade com ausência de cito e genotoxicidade foi observada em diversos tipos celulares aumentando a viabilidade celular em células de linhagem (HaCat). F e IF favoreceram um fechamento acelerado da ferida palatina aos 7 e 14 dias pós-injuria, assim como uma epitelização precoce destes comparado ao grupo C. F e IF reduziram citocinas pró-inflamatórias (IL6, TNF-α, IL-1ß) além de apresentarem função modulatória na quantificação de biomarcadores relacionados a degradação tecidual. O Grupo C apresentou gênero/espécies com potencial patogênico e redução de microrganismos relacionados a saúde mantendo este perfil aos 14 e 30 dias. Enquanto isso, uma tendência a eubiose foi observado em F e IF ao longo do processo de cicatrização. Deste modo, verifica-se a aplicação promissora do novo dispositivo na cavidade oral bem como capacidade de influenciar positivamente o reparo da mucosa oral. (AU)

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ABSTRACT Aim: This study evaluated the influence of chitosan added to a universal adhesive system used in totaletch (TE) or self-etch (SE) mode on dentin permeability, and on the micromorphology of the adhesive layer. Materials and Method: Dentin discs were obtained from human third molars and randomly distributed according to bonding strategy (TE or SE), and to whether or not 1% chitosan (C) was added to a universal adhesive system (Single Bond Universal/3M ESPE), to create the following groups (n=10): TE, TEC, SE, and SEC. Dentin permeability was measured at baseline and after application of dentin treatments. The surface of the adhesive layer (AL) and the dentin adjacent to the AL were examined under a scanning electron microscope. Results: There were no significant differences in permeability percentage between the groups with and without C (TE and SE versus TEC and SEC) (p>0.05; Mann Whitney test). Dentin permeability was lower when the adhesive system was applied in the SE mode, regardless of the addition of C. The micromorphology of the AL surface showed irregularities, and a greater degree of porosity, when the adhesive system was applied in the SE mode, regardless of chitosan addition. There was a greater depth of penetration of the adhesives into the dentin adjacent to the AL in both the TE and TEC groups. Chitosan added to the adhesive system did not influence dentin permeability. Conclusions: The self-etch strategy led to lower dentin permeability, and to more irregularities on the surface of the adhesive layer.

RESUMO Objetivo: Este estudo avaliou a influência da quitosana adicionada a um sistema adesivo universal usado no modo total-etch (TE) ou self-etch (SE) na permeabilidade dentinária e na micromorfologia da camada adesiva. Materiais e método: Discos de dentina foram obtidos de terceiros molares humanos e distribuídos aleatoriamente de acordo com a estratégia de união (TE ou SE), e para incorporação ou não de quitosana a 1% (Q) em um sistema adesivo universal (Single Bond Universal/3M ESPE), para obter os seguintes grupos (n=10): TE, TEQ, SE e SEQ. A permeabilidade da dentina foi medida no início e após a aplicação dos tratamentos de dentina. A superfície da camada adesiva (CA) e a dentina adjacente à CA foram examinadas em microscópio eletrônico de varredura. Resultados: Não houve diferenças significativas no percentual de permeabilidade entre os grupos com e sem Q (TE e SE versus TEQ e SEQ) (p>0,05; teste de Mann Whitney). Houve um menor percentual de permeabilidade dentinária quando o sistema adesivo foi aplicado no modo SE, independentemente da incorporação de Q. A micromorfologia da superfície da CA apresentou irregularidades e maior grau de porosidade quando o sistema adesivo foi aplicado no modo SE, independentemente da adição de Q. Houve maior profundidade de penetração dos adesivos na dentina adjacente à CA nos grupos TE e TEQ. A quitosana adicionada ao sistema adesivo não influenciou a permeabilidade dentinária. Conclusões: A estratégia autocondicionante levo

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Abstract Objective This study aimed to evaluate the influence of sterilization on the compressive and flexural mechanical strength of hydroxyapatite-based biocomponents obtained through freeze-dried bovine bone, and its association with chitosan. Methods Freeze-dried bovine bone was processed into 100 μm particles and mixed with 50% of its weight in chitosan. The mixture was packed in metallic molds for preparing the specimens, and sterilized at 127°C using an autoclave for subsequent experimentation. The specimens were subjected to compression and flexion tests following norm 5833 of the International Organization for Standardization (ISO), with 6 × 12 mm cylindrical blocks (for compression tests) and 75 × 10 × 3.3 mm plates (for flexion tests) as samples. The samples were divided into four groups of 20 specimens each, with 10 for compression and 10 for flexion tests. Three groups were sterilized (autoclave, gamma rays, and ethylene oxide), whereas the fourth group (control) was not. The mechanical tests obtained from the different sterilization processes were compared using analysis of variance (ANOVA, p< 0.05), followed by the Tukey multiple comparison test of means, with a 95% confidence interval. Results The specimens presented mean compressive strengths of 10.25 MPa for the control group and 3.67 MPa, 9.65 MPa, and 9.16 MPa after ethylene oxide, gamma ray, and autoclave sterilization, respectively. Flexion test results showed an average resistance of 0.40 MPa in the control group, and 0.15 MPa, 0.17 MPa, and 0.30 MPa after ethylene oxide, gamma ray, and autoclave sterilization, respectively. There were statistically significant differences observed in the maximum compression of the ethylene oxide-sterilized group compared with that of the control group (p= 0.0002), gamma ray-sterilized (p= 0.0003), and the autoclaved (p= 0.0006) groups. There was a statistically significant difference in maximum flexion of the specimens sterilized by gamma rays when compared with the control group (p= 0.0245). However, low flexural strengths were observed in all specimens. Conclusion The autoclave sterilization group did not result in statistically significant differences in either compression or flexion strength tests. Thus, the autoclave proved to be the best sterilization option for the hydroxyapatite-based biocomponents in this study.

Resumo Objetivo O objetivo deste estudo foi avaliar a influência da esterilização na resistência mecânica à compressão e flexão de biocomponentes à base de hidroxiapatita obtida a partir de osso bovino liofilizado e sua associação com quitosana. Métodos O osso bovino liofilizado foi processado em partículas de 100 μm e misturado à quitosana em proporção de 50% de seu peso. A mistura foi acondicionada em moldes metálicos para preparo dos espécimes e esterilizada a 127°C em autoclave para posterior experimentação. Os espécimes foram submetidos a ensaios de compressão e flexão seguindo a norma 5833 da International Organization for Standardization (ISO); os espécimes eram blocos cilíndricos de 6 × 12 mm (para ensaios de compressão) e placas de 75 × 10 × 3,3 mm (para ensaios de flexão). As amostras foram divididas em quatro grupos de 20 espécimes cada, sendo 10 para ensaios de compressão e 10 para ensaios de flexão. Três grupos foram esterilizados (por autoclavagem, raios gama e óxido de etileno), enquanto o quarto grupo (controle) não foi. Os testes mecânicos obtidos nos diferentes processos de esterilização foram comparados por análise de variância (ANOVA, p< 0,05) seguido pelo teste de comparação múltipla de médias de Tukey, com intervalo de confiança de 95%. Resultados Os espécimes apresentaram resistências médias à compressão de 10,25 MPa para o grupo de controle e 3,67 MPa, 9,65 MPa e 9,16 MPa após esterilização com óxido de etileno, raios gama e autoclavagem, respectivamente. Os resultados do teste de flexão mostraram uma resistência média de 0,40 MPa no grupo de controle, e 0,15 MPa, 0,17 MPa e 0,30 MPa após esterilização com óxido de etileno, raios gama e autoclavagem, respectivamente. A compressão máxima observada no grupo esterilizado com óxido de etileno foi estatisticamente diferente à obtida no grupo de controle (p= 0,0002), esterilizado com raios gama (p= 0,0003) e autoclavado (p= 0,0006). A flexão máxima dos espécimes esterilizados com raios gama foi estatisticamente diferente à observada no grupo de controle (p= 0,0245). No entanto, a resistência à flexão foi baixa em todos os espécimes. Conclusão A esterilização em autoclave não foi associada a diferenças estatisticamente significativas nos testes de compressão ou flexão. Assim, a autoclave foi a melhor opção de esterilização para os biocomponentes à base de hidroxiapatita neste estudo.

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This study reports the optimization of the preparation of etoricoxib (ETX)-loaded low molecular weight of chitosan (LMWC) nanoparticles (ETX-LMWC-NPs) by ionic gelation method with sodium tripolyphosphate (TPP) as cross-linking agent. The independent variables (LMWC/TPP mass ratio, LMWC, and poloxamer 188 concentration) were formulated and optimized using response surface methodology (RSM) Box-Behnken design (BBD) with three levels for each factor. Size of particles, polydispersity index (PDI), and encapsulation efficiency was investigated as the dependent variable. ETX-LMWC-NPs were characterized by particle size analyzer, scanning electron microscope, UV-Vis spectrophotometry, and Fourier transforms infrared spectroscopy. The ETX-LMWC-NPs have an average particle size of 259.91 nm, a PDI of 0.041, and encapsulation efficiency of 51.25%. ETX-LMWC-NPs are spherical and have a spectrum at wavenumber 1656 cm-1 and 718 cm-1, respectively, indicating the presence of C=N and C-Cl originating from the ETX compound. The ETX release profile at pH 1.2 and 6.8 mediums approach the Korsmeyer-Peppas model. ETX released pH 1.2 did not differ significantly from free ETX with a maximum 10-12% release. ETX release at pH 6.8 had a maximum release of 21% and showed a 19% increase in dissolution rate than free ETX. The ETX-LMWC-CSNPs prepared by optimum formula (2.65 % LMWC, 5.5 LMWC/TPP mass ratio, and 1 mg/mL) showed stable monodispersity nanoparticles and easily soluble in water.

Este experimento relata a otimização da preparação de nanopartículas de quitosana de baixo peso molecular (LMWC) (ETX-LMWC-NPs) carregadas com etoricoxibe (ETX) pelo método de gelificação iônica com tripolifosfato de sódio (TPP) como agente de reticulação. As variáveis ​​independentes (razão de massa LMWC / TPP, LMWC e concentração de poloxamer 188) foram formuladas e otimizadas usando metodologia de superfície de resposta (RSM) projeto Box-Behnken (BBD) com três níveis para cada fator. Tamanho das partículas, índice de polidispersidade (PDI) e eficiência de encapsulação foram investigados como a variável dependente. ETX-LMWC-NPs foram caracterizados por analisador de tamanho de partícula, microscópio eletrônico de varredura, espectrofotometria UV-Vis e espectroscopia de infravermelho com transformada de Fourier. Os ETX-LMWC-NPs têm um tamanho médio de partícula de 259,91 nm, um PDI de 0,041 e eficiência de encapsulação de 51,25%. ETX-LMWC-NPs são esféricos e apresentam um espectro no número de onda 1656 cm-1 e 718 cm-1, respectivamente, indicando a presença de C = N e C-Cl originários do composto ETX. O perfil de liberação de ETX em meios de pH 1,2 e 6,8 se aproxima do modelo Korsmeyer-Peppas. O ETX liberado em pH 1,2 não diferiu significativamente do ETX livre com uma liberação máxima de 10-12%. A liberação de ETX em pH 6,8 teve uma liberação máxima de 21% e mostrou um aumento de 19% na taxa de dissolução do que o ETX livre. Os ETX-LMWC-CSNPs preparados pela fórmula ótima (2,65% LMWC, 5,5 LMWC / razão de massa TPP e 1 mg / mL) mostraram nanopartículas de monodispersidade estáveis ​​e facilmente solúveis em água.

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This study aims to isolate and identify certain bactеrial and fungal pathogеns from silkworm, Bombyx mori L. such as promising chitosan, plus silvеr nanoparticlеs as its antimicrobial activity undеr laboratory condition. Silkworm, B. mori (H1xKKxG2xV2-Bolgaria) eggs werе attained from Sеriculture Rеsearch Cеntеr from Giza Governorate, Egypt. Chitosan and silvеr nanoparticlеs matеrials were assembled at the laboratory of Biochеmistry Departmеnt, Faculty of Agriculturе, Al-Azhar University, Cairo, Egypt. Herein total of 7 bactеrial and 5 fungal were isolatеd from the еxtеrnal and internal silkworm larvae. As a result, the mean percentage decrease in weight was elevated in diseased fifth instars (88%) compared to fourth diseased instars (62%). In addition, two bactеrial spеcies isolatеd from the infectеd larvae were identified as follows: Staphylococcus aurеus and Enterococcus faеcalis, whereas thrее fungal spеcies were isolatеd as follows: Aspergillus flavus, Aspergillus tamarii and Beauveria bassiana. Transmission elеctron microscopе imaging demonstrated the morphological propеrties and surfacе appеarance of silvеr and chitosan nanoparticlеs which havе a nеarly sphеrical shapе and smooth surfacе. The avеrage particlе size of 18.7 - 26.0 nm and 18.8 to 21.8 nm of silvеr and chitosan nanoparticles were recordеd. Furthermore, the highеst activity among nanoparticlеs tested against all pathogеnic bacteria and fungi isolatеd and idеntified in our study was rеcordеd by chitosan at 100 µg/ml in sеries, whilst silvеr nanoparticle еxhibitеd modеrate antibacterial and antifungal activity.

Este estudo visa isolar e identificar certos patógenos bacterianos e fúngicos do bicho-da-seda (Bombyx mori L.), como a promissora quitosana, além de nanopartículas de prata como sua atividade antimicrobiana em condições de laboratório. Ovos de B. mori (H1xKKxG2xV2-Bolgaria) foram obtidos do Centro de Pesquisa em Sericultura da Província de Gizé, Egito. Materiais de nanopartículas de quitosana e prata foram montados no laboratório do Departamento de Bioquímica, Faculdade de Agricultura, Universidade Al-Azhar, Cairo, Egito. Aqui, foi isolado um total de 7 bactérias e 5 fungos das larvas de bicho-da-seda externas e internas. Como resultado, a diminuição percentual média no peso foi elevada no quinto instar doente (88%) em comparação com o quarto instar doente (62%). Além disso, foram identificadas duas espécies bacterianas isoladas das larvas infectadas (Staphylococcus aureus e Enterococcus faecalis), enquanto três espécies fúngicas foram isoladas (Aspergillus flavus, Aspergillus tamarii e Beauveria bassiana). A imagem de microscopia eletrônica de transmissão demonstrou as propriedades morfológicas e aparência de superfície de nanopartículas de prata e quitosana que têm uma forma quase esférica e superfície lisa. Foi registrado o tamanho médio das partículas de 18,7-26,0 nm e 18,8-21,8 nm de nanopartículas de prata e quitosana, respectivamente. Além disso, a atividade mais alta entre as nanopartículas testadas contra todas as bactérias patogênicas e fungos isolados e identificados em nosso estudo foi registrada pela quitosana em 100 µg/ml em série, enquanto a nanopartícula de prata exibiu atividade antibacteriana e antifúngica moderada.

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Os objetivos do presente estudo foram montar e caracterizar um novo nanocarreador dual de clorexidina (CLX) e fluconazol (FLZ), bem como avaliar seu efeito sobre biofilmes microcosmos e sua citotoxicidade sobre queratinócitos orais. Para montar o nanocarreador dual, CLX e FLZ foram adicionados a nanopartículas de óxido de ferro (NPsOF) previamente revestidas por quitosana (QTS), seguido de um processo de solubilização sob agitação magnética. O nanocarreador foi, então, caracterizado por microscopia eletrônica de transmissão, difração de raios X, espectroscopia no infravermelho por transformada de Fourier e análise termogravimétrica. A suscetibilidade de Candida albicans e Candida glabrata no estado planctônico ao nanocarreador dual foi determinada pelos valores de concentração inibitória mínima, utilizando o método da microdiluição em caldo. Um pool de saliva de 2 doadores saudáveis suplementado com espécies de Candida foi usado como inóculo para a formação de biofilmes microcosmos. Os biofilmes foram cultivados (72 h) sobre discos de vidro posicionados no Amsterdam Active Attachment model e tratados (24 h) com NPsOF-QTS carreando 39 µg/mL de CLX + 156 µg/mL de FLZ (NPsOF-QTS-CLX39-FLZ156), 78 µg/mL de CLX + 312 µg/mL de FLZ (NPsOF-QTS-CLX78-FLZ312) e 156 µg/mL de CLX + 624 µg/mL de FLZ (NPsOF-QTS-CLX156-FLZ624). NPsOF (218,5 µg/mL), QTS (218,5 µg/mL) e 156 µg/mL de CLX + 624 µg/mL de FLZ (CLX156-FLZ624) foram testados como controles. Posteriormente, foram realizadas as análises de quantificação das unidades formadoras de colônias (UFCs), produção de ácido lático (LA), composição da matriz extracelular (ME) e viabilidade celular por microscopia confocal de varredura a laser (MCVL). Para o ensaio de citotoxicidade, queratinócitos orais humanos (linhagem NOKsi) foram expostos a diferentes concentrações do nanocarreador dual, por 24 ou 48 h, e a viabilidade celular foi determinada pelo ensaio de redução de MTT. Os dados foram analisados por ANOVA ou teste de Kruskal-Wallis, seguidos dos testes de Fisher LSD ou Tukey (α = 0,05). Os testes de caracterização físico-química mostraram que um nanocarreador dual com dimensões em torno de 6 nm foi obtido, sem comprometer a propriedade cristalina e a estabilidade de NPsOF. Os compostos que formam o nanocarreador estabeleceram uma interação sinérgica em relação ao efeito sobre células planctônicas de Candida. Para os ensaios de biofilme, NPsOF-QTS-CLX156-FLZ624 foi o composto mais eficaz na redução de UFCs de Streptococcus mutans, Lactobacillus spp., C. albicans e C. glabrata, diferindo significativamente dos outros grupos, e esses achados foram confirmados por MCVL. NPsOF-QTS-CLX39-FLZ156, NPsOF-QTS-CLX78-FLZ312 e CLX156- FLZ624 mostraram efeitos antibiofilme similares. O nanocarreador dual também reduziu significativamente a produção de AL e a quantidade de carboidratos e ácidos nucleicos da ME. Um efeito citotóxico dose-dependente sobre queratinócitos orais foi observado para o nanocarreador dual, independentemente do período de exposição testado (24 ou 48 h). NPsOF-QTS-CLX-FLZ e CLX-FLZ reduziram significativamente a viabilidade dos queratinócitos em concentrações de CLX e FLZ iguais ou superiores a 7,8 e 31,25 µg/mL, respectivamente. Por fim, a nanoterapia testada no presente estudo é promissora e constitui um grande avanço dentro dos métodos alternativos aos antimicrobianos tradicionais para o controle da candidíase oral(AU)

The objectives of the present study were to assemble and characterize a new dual nanocarrier of chlorhexidine (CHX) and fluconazole (FLZ), and evaluate its effect on microcosm biofilms and its cytotoxicity against oral keratinocytes. To assemble the dual nanocarrier, CHX and FLZ were added to iron oxide nanoparticles (IONPs) previously coated by chitosan (CS), followed by a solubilization process under magnetic stirring. The nanocarrier was then characterized by transmission electron microscopy, X-ray diffraction, Fourier transform infrared spectroscopy, and thermogravimetric analysis. The susceptibility of Candida albicans and Candida glabrata in the planktonic state to the dual nanocarrier was determined by the minimum inhibitory concentration values, using the broth microdilution method. A saliva pool from 2 healthy donors supplemented with Candida species was used as an inoculum for microcosm biofilm formation. Biofilms were grown (72 h) on glass discs positioned in the Amsterdam Active Attachment model and treated (24 h) with IONPs-CS carrying 39 µg/mL CHX + 156 µg/mL FLZ (IONPsCS-CHX39-FLZ156), 78 µg/mL CHX + 312 µg/mL FLZ (IONPs-CS-CHX78-FLZ312), and 156 µg/mL CHX + 624 µg/mL FLZ (IONPs-CS-CHX156-FLZ624). IONPs at 218.5 µg/mL, 218.5 µg/mL CS, and 156 µg/mL CHX + 624 µg/mL FLZ (CHX156-FLZ624) were tested as controls. Next, analyses of the quantification of colony-forming units (CFUs), lactic acid production (LA), composition of the extracellular matrix (EM), and viability by confocal laser scanning microscopy (CLSM) were performed. For the cytotoxicity assay, human oral keratinocytes (NOKsi lineage) were exposed to different concentrations of the dual nanocarrier, for 24 or 48 h, and cell viability was determined by the MTT reduction assay. Data were analyzed by ANOVA or Kruskal-Wallis test, followed by Fisher LSD or Tukey tests (α = 0.05). The physico-chemical characterization tests showed that a dual nanocarrier with dimensions around 6 nm was assembled, without compromising the crystalline property and stability of IONPs. The compounds that form the nanocarrier established a synergistic interaction in relation to the effect on Candida planktonic cells. Regarding biofilm assays, IONPs-CS-CHX156-FLZ624 was the most effective compound in reducing CFUs from Streptococcus mutans, Lactobacillus spp., C. albicans, and C. glabrata, differing significantly from the other groups, and these findings were confirmed by CLSM. IONPs-CS-CHX39-FLZ156, IONPs-CS-CHX78-FLZ312, and CHX156-FLZ624 showed similar antibiofilm effects. The dual nanocarrier also significantly reduced LA production and the amount of carbohydrates and nucleic acids from the EM. A dose-dependent cytotoxic effect against oral keratinocytes was observed for the dual nanocarrier, regardless of the exposure period tested (24 or 48 h). IONPs-CSCHX-FLZ and CHX-FLZ significantly reduced keratinocyte viability at CHX and FLZ concentrations equal to or greater than 7.8 and 31.25 µg/mL, respectively. In conclusion, the nanotherapy tested in the current study is promising and constitutes a major advance in alternative methods to traditional antimicrobials for oral candidiasis control(AU)

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O objetivo do tratamento endodôntico é manter a integridade da raiz, bem como, prevenir ou resolver doenças periapicais, pela erradicação dos microrganismos e de suas fontes de nutrientes provenientes do sistema de canais radiculares. A complexidade da anatomia dos canais radiculares e dos biofilmes multiespécies aumenta a dificuldade em eliminar os microrganismos e controlar a inflamação por procedimentos químico-mecânicos convencionais, o que justifica o uso de medicações intracanais. Novos compostos com amplo efeito antimicrobiano e potencial antiinflamatório, como os ácidos fenólicos, poderiam ser explorados como princípios ativos de medicamentos intracanais. Entretanto, para aumentar a solubilidade, controlar a liberação e estender os efeitos biológicos dos ácidos fenólicos, seria interessante incorporá-los em carreadores de medicamentos como os hidrogéis de quitosana. Este estudo foi dividido em dois capítulos que apresentaram como objetivos: 1) avaliar as atividades antimicrobiana, antibiofilme e antiinflamatória e a citotoxicidade do ácido cinâmico e seus derivados; 2) sintetizar e caracterizar as propriedades químicas e físico-mecânicas de hidrogéis termossensíveis de quitosana e poloxamer contendo ácidos fenólicos, e avaliar o efeito desses hidrogéis sobre biofilmes multiespécies e na viabilidade de macrófagos e fibroblastos. No capítulo 1, a atividade antimicrobiana do ácido cinâmico (CI) e seus derivados ácido cumárico (CO), ácido cafeico (CA), ácido ferúlico (FE) e ácido sinápico (SI) foi avaliada pela determinação da concentração inibitória e bactericida mínima (CIM/CBM) e Concentração Inibitória Fracionada (CIF) sobre Enterococcus faecalis, Streptococcus mutans, Lactobacillus casei, Actinomyces israelii e Fusobacterium nucleatum. Os ácidos fenólicos foram selecionados e seu efeito em biofilmes dual-espécies e multiespécies com as mesmas cepas padrão ou cepas clínicas foram avaliados por contagem bacteriana, microscopia eletrônica de varredura e microscopia confocal. A viabilidade de fibroblastos L929 e macrófagos RAW 264.7 na presença desses ácidos fenólicos foi avaliada por ensaios de resazurina. Além disso, os níveis de mRNA dos marcadores pró-inflamatórios TNF-α, IL-1ß, iNOS e COX-2 foram determinados por PCR quantitativo TaqMan após exposição de macrófagos aos ácidos fenólicos e ao lipopolissacarídeo (LPS). No capítulo 2, foi realizada a síntese e caracterização físicomecânica de hidrogéis de quitosana-poloxamer (CPH) contendo ácidos fenólicos e avaliado seus efeitos no biofilme multiespécies e na viabilidade de macrófagos e fibroblastos. Os dados foram analisados estatisticamente considerando p< 0,05. O ácido cinâmico e o ácido cafeico apresentaram efeito inibitório e bactericida contra todas as espécies bacterianas testadas, com os menores valores de CIM e CBM. Entretanto, não houve efeito sinérgico entre eles (FICI> 0,5). Ambos os compostos (5x a CIM mais alta) foram eficazes na eliminação de biofilmes dual-espécies e na redução significativa de biofilmes multiespécies, especialmente o ácido cinâmico. O ácido cinâmico causou toxicidade mínima para ambas as culturas celulares nas concentrações de CIM e o ácido cafeico não foi citotóxico em concentrações abaixo de 0,125 mg/mL. Ambos os compostos reduziram significativamente TNF-α, IL-1ß, iNOS e COX-2, de maneira dose-dependente. Os CPH foram caracterizados como termorreversíveis e com propriedades mecânicas e bioadesivas desejáveis. O efeito dos hidrogéis CPH+CA (77,8%) e CPH+CI (73,2%) em reduzir os biofilmes multiespécies foi superior ao CPH+ hidroxido de cálcio (CH) (53,6%) e CPH+ clorexidina (CHX) (39,9%). Em geral, CPH + CI causou menor citotoxicidade quando comparado a CPH + CA, para ambas as linhagens celulares. Conclui-se que o ácido cinâmico e ácido cafeico apresentaram efeito bactericida e contra biofilmes formados por bactérias associadas com infecções endodônticas, causando baixa citotoxicidade. Ambos os compostos apresentaram efeito antiinflamatório, inibindo a expressão de marcadores próinflamatórios em macrófagos estimulados por LPS. Os hidrogéis de quitosana-poloxamer foram termorreversíveis e apresentaram adequadas propriedades mecânicas e adesivas para aplicação clínica, e quando combinados principalmente com ácido cinâmico, promoveram a redução de biofilmes multiespécies formados nos túbulos dentinários, causando baixa toxicidade em fibroblastos e macrófagos(AU)

The objective of endodontic treatment is to maintain the integrity of the root, as well as to prevent or resolve periapical diseases, by eradicating microorganisms and their sources of nutrients from the root canal system. The complexity of root canal anatomy and multispecies biofilms increases the difficulty in eliminating microorganisms and controlling inflammation by conventional chemical-mechanical procedures, which justifies the use of intracanal medications. New compounds with broad antimicrobial effect and anti-inflammatory potential, such as phenolic acids, could be explored as active principles of intracanal medications. However, to increase the solubility, control the release and extend the biological effects of phenolic acids, it would be interesting to incorporate them into drug carriers such as chitosan hydrogels. This study was divided into two chapters with the following objectives: 1) to evaluate the antimicrobial, antibiofilm and anti-inflammatory activities and the cytotoxicity of cinnamic acid and its derivatives; 2) synthesize and characterize chemical and physicomecanical properties of thermosensitive chitosan and poloxamer hydrogels containing phenolic acids and evaluate the effect of these hydrogels on multispecies biofilms and on the viability of macrophages and fibroblasts. In chapter 1, the antimicrobial activity of cinnamic acid (CI) and its derivatives coumaric acid (CO), caffeic acid (CA), ferulic acid (FE) and sinapic acid (SI) was evaluated by determining the minimum inhibitory and bactericidal concentration (MIC/MBC) and Fractional Inhibitory Concentration (FIC) on Enterococcus faecalis, Streptococcus mutans, Lactobacillus casei, Actinomyces israelii and Fusobacterium nucleatum. Phenolic acids were selected and their effect on bispecies and multispecies biofilms with the same standard or clinical strains were evaluated by bacterial counts, scanning electron microscopy and confocal microscopy. The viability of L929 fibroblasts and RAW 264.7 macrophages in the presence of these phenolic acids was evaluated by resazurin assays. In addition, mRNA levels of the proinflammatory markers TNF-α, IL-1ß, iNOS and COX-2 were determined by quantitative TaqMan PCR after macrophage exposure to phenolic acids and lipopolysaccharide (LPS). In chapter 2, the synthesis and physical-mechanical characterization of chitosanpoloxamer (CPH) hydrogels containing phenolic acids were performed and their effects on multispecies biofilm and on the viability of macrophages and fibroblasts were evaluated. Data were statistically analyzed considering p< 0.05. Cinnamic acid and caffeic acid showed an inhibitory and bactericidal effect against all bacterial species tested, with the lowest MIC and MBC values. However, no synergistic effect was observed between the compounds (FICI> 0.5). Both compounds (at 5x the highest MIC) were effective in eliminating dual-species biofilms and significantly decreasing multispecies biofilms, especially cinnamic acid. Cinnamic acid caused minimal toxicity to both cell cultures at MIC concentrations and caffeic acid was not cytotoxic at concentrations below 0.125 mg/mL. Both compounds significantly reduced TNF-α, IL1ß, iNOS and COX-2, in a dose-dependent manner. CPH were characterized as thermoreversible and with adequate mechanical and bioadhesive properties. The effect of CPH+CA (77.8%) and CPH+CI (73.2%) hydrogels against multispecies biofilms was superior to CPH + calcium hydroxide (CH) (53.6%) and CPH + chlorhexidine (CHX) (39.9%). In general, CPH + CI caused less cytotoxicity when compared to CPH + CA, for both cell lines. In conclusion, cinnamic acid and caffeic acid showed bactericidal effect and against biofilms of bacteria associated with endodontic infections, causing minimal cytotoxicity. In addition, both compounds showed an anti-inflammatory effect, inhibiting the expression of pro-inflammatory markers in LPS-stimulated macrophages. The chitosan-poloxamer hydrogels were thermoreversible and presented adequate mechanical and bioadhesive properties for clinical application, and when combined specially with cinnamic acid, they promoted the reduction of multispecies biofilms formed in the dentinal tubules, causing low toxicity to fibroblasts and macrophages(AU)

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Objective: To assess the shear bond strength (SBS) of resin composite to deep dentin, using 1 and 2.5% chitosan pretreatment as well as different adhesive systems. Material and Methods: 80 human maxillary molars were randomly divided to eight groups according to the type of adhesive system and dentin pretreatment (n = 10): I) two-step self-etch system (Clearfil SE bond); II) two-step etch-and-rinse system (Adper single bond 2); III) 2.5% chitosan + Clearfil SE bond; IV) 2.5% chitosan +etch + Adper single bond 2; V) etch + 2.5% chitosan + Adper single bond 2; VI) 1% chitosan + Clearfil SE bond; VII) 1% chitosan + etch + Adper single bond 2; VIII) etch + 1% chitosan + Adper single bond 2 (chitosan solution (w/v): 2.5 g and 1 g of chitosan (Sigma Aldrich, USA) was dissolved in 100 ml of 1% acetic acid). Plastic molds were positioned on dentin and filled with composite (Z350, 3M ESPE, USA). SBS (MPa) was tested using a universal testing machine. ANOVA tests, Tukey's test, and independent t test were used to analyze data (p ≤ 0.05). Results: The highest SBS value among self-etch groups was observed with 1% chitosan (p = 0.001). In the etch-and-rinse group, the SBS of 1% chitosan was significantly lower than the other groups. Chitosan treatment following acid etching led to higher SBS in comparison to when chitosan was applied before etching, with the significant difference in 1% concentration (p = 0.030). A predominance of mix fractures was observed in dentin. Conclusion: Improved dentin bond strength can be achieved through immediate dentin pretreatment with 1% chitosan in self-etch adhesive systems. Chitosan Pretreatment may not be advantageous for etch-and-rinse adhesive systems. (AU)

Objetivo: Avaliar a resistência ao cisalhamento (RC) da resina composta em dentina profunda, utilizando quitosana de 1 e 2,5% como pré-tratamento, e também diferentes sistemas adesivos. Materiai e métodos: 80 molares superiores humanos foram divididos aleatoriamente em oito grupos de acordo com o tipo de sistema adesivo e pré-tratamento dentinário (n = 10): I) sistema autocondicionante de dois passos (Clearfil SE bond); II) sistema convencional de dois passos (Adper Single Bond II); III) quitosana 2,5% + Clearfil SE bond; IV) quitosana 2,5% + ácido + Adper single bond; V) ácido + quitosana 2,5% + Adper single bond II; VI) quitosana 1% + Clearfil SE bond; VII) quitosana 1% + ácido + Adper single bond II; VIII) ácido + quitosana 1% + Adper single bond II (solução de quitosana (w/w): 2,5 ge 1 g de quitosana (Sigma Aldrich, EUA) foi dissolvido em 100 ml de ácido acético a 1%). Moldeiras foram posicionados na dentina e preenchidos com resina composta (Z350, 3M ESPE, EUA). O RC (MPa) foi testado em uma máquina de teste universal. Os testes ANOVA, teste de Tukey e teste t foram usados para analisar os dados (p ≤ 0,05). Resultados: O maior valor de RC entre os grupos autocondicionantes foi observado com quitosana a 1% (p = 0,001). No grupo do condicionamento total a RC da quitosana a 1% foi significativamente menor do que nos outros grupos. O tratamento com quitosana após o condicionamento ácido levou a um maior RC em comparação a quitosana aplicada antes do condicionamento, com diferença significativa na concentração de 1% (P = 0,030). Observou-se predomínio de fraturas na dentina. Conclusão: A resistência de união à dentina pode ser alcançada por meio do pré-tratamento imediato da dentina com quitosana a 1% em sistemas adesivos autocondicionantes. O pré-tratamento com quitosana pode não ser vantajoso para sistemas adesivos de condicionamento total. (AU)

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A terapia fotodinâmica (TFD) vem se mostrando como um método eficaz no controle de micro-organismos patogênicos, sendo investigada para o tratamento de diversas doenças infecciosas, como a candidose bucal. Recentemente, alguns agentes potencializadores dessa terapia têm sido estudados, incluindo a Quitosana (QT), um polímero natural extraído do exoesqueleto de crustáceos. O objetivo desse estudo foi avaliar o efeito potencializador da QT na TFD mediada pelo fotossensibilizador Azul de Metileno (AM) sobre cepas de Candida albicans, investigando sua ação em culturas planctônicas, biofilmes e células persistentes ao fluconazol. Além disso, foi avaliado a capacidade da QT em interferir na absorção do AM pelas células de Candida. Foram utilizadas duas cepas de C. albicans, sendo uma padrão (ATCC 18804) e uma clínica isolada de candidose orofaríngea (70). Para os ensaios em culturas planctônicas, as cepas de C. albicans foram cultivadas em caldo Yeast Nitrogen Base (YNB) por 24 horas. Os biofilmes foram formados por 48 horas no fundo das placas de 96 poços. Para indução de células persistentes, C. albicans foi cultivada com altas concentrações de fluconazol por 48 horas. A seguir, foram realizados os tratamentos com QT a 5 mg/mL (pH de 6,5), AM nas concentrações de 300 ou 600 µM, e irradiação com LED (660 nm) na densidade de energia de 30 J/cm2. Foram incluídos oito grupos experimentais: TFD com AM e QT na presença de Luz (AM+QT+L+), AM e QT sem Luz (AM+QT+L-), QT e Luz (QT+L+), QT sem Luz (QT+L-), TFD com AM e Luz (AM+L+), AM sem Luz (AM+L-), Solução Fisiológica com Luz (F-L+) e apenas Solução Fisiológica (F-L-). Após os tratamentos, foi realizada contagem de unidades formadoras de colônias (UFC/mL). Para determinar a absorção do fotossensibilizador pelas células de C. albicans, as células foram lisadas e centrifugadas para leitura da densidade óptica. Os dados foram analisados por ANOVA e teste de Tukey (p<0,05%). Na TFD em culturas planctônicas, o AM (300 µm) reduziu as células de Candida em 1,6 log (UFC/mL), enquanto que a associação AM+QT levou à redução de 4,7 log. Na TFD em biofilmes, ocorreu redução microbiana de 2,9 log para o tratamento com AM (600 µm) e de 5,3 log para AM+QT. Em relação às células persistentes, a redução encontrada foi de 0,8 log para AM e 1,5 log para AM+QT. No teste de absorção, a penetração do AM nas células de Candida (DO 0,02) foi aumentada na presença da QT (DO 0,39). Concluiu-se que a QT potencializou o efeito antimicrobiano da TFD em culturas planctônicas, biofilmes e células persistentes de C. albicans, provavelmente por facilitar a penetração do AM nas células fúngicas.

Photodynamic therapy (PDT) has been shown to be an effective method to control pathogenic microorganisms, being investigated for the treatment of several infectious diseases, such as oral candidiasis. Recently, some agents that enhance this therapy have been studied, including Chitosan (CS), a natural polymer extracted from the exoskeleton of crustaceans. The aim of this study was to evaluate the potentiating effect of CS on Methylene Blue (MB) photosensitizer-mediated PDT on Candida albicans strains, investigating its action on planktonic cultures, biofilms and persister cells to fluconazole. In addition, the ability of CS to interfere with MB absorption by Candida cells was evaluated. Two strains of C. albicans were used, one standard (ATCC 18804) and one isolated clinical of oropharyngeal candidosis (70). For assays in planktonic cultures, C. albicans strains were cultivated in Yeast Nitrogen Base broth (YNB) for 24 hours. Biofilms were formed for 48 hours at the bottom of 96-well plates. For the induction of persister cells, C. albicans was cultivated with high concentrations of fluconazole for 48 hours. Next, treatments were performed with CS at 5 mg/mL (pH 6.5), MB at concentrations of 300 or 600 µM, and irradiation with LED (660 nm) at an energy density of 30 J/cm2. eight experimental groups were included: PDT with MB and CS in the presence of Light (MB+CS+L+), MB and CS without Light (MB+CS+L-), CS and Light (CS+L+), CS without Light (CS +L-), PDT with MB and Light (MB+L+), MB without Light (MB+L-), Physiological Solution with Light (F-L+) and Physiological Solution only (FL-). After the treatments, colony forming units (CFU/mL) were counted. To determine the absorption of the photosensitizer by C. albicans cells, the cells were lysed and centrifuged for optical density reading. Data were analyzed by ANOVA and Tukey test (p<0.05%). In PDT in planktonic cultures, MB (300 µm) reduced Candida cells by 1.6 log (CFU/mL), while the MB+CS association led to a 4.7 log reduction. In PDT in biofilms, there was a microbial reduction of 2.9 log for the treatment with MB (600 µm) and of 5.3 log for MB+CS. Regarding persister cells, the reduction found was 0.8 log for MB and 1.5 log for MB+CS. In the absorption test, the penetration of MB into Candida cells (OD 0.02) was increased in the presence of CS (OD 0.39). It was concluded that CS potentiated the antimicrobial effect of PDT in planktonic cultures, biofilms and persister cells of C. albicans, probably by facilitating the penetration of MB into fungal cells .

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A engenharia de tecidos caracteriza-se como ciência interdisciplinar, a qual vem desenvolvendo biomateriais para a regeneração do tecido ósseo no âmbito das medicinas humana e veterinária. O objetivo desta pesquisa foi avaliar a regeneração óssea obtida da aplicação do hidrogel de quitosana associado ao glicerol fosfato em falha óssea experimentalmente induzida no rádio de coelhos. Foram utilizados 15 coelhos adultos, distribuídos aleatoriamente em dois grupos, representados por cada um dos rádios de cada animal, sendo um grupo tratado com hidrogel de quitosana associado ao glicerol fosfato (grupo biomaterial - GB) e um grupo que não recebeu tratamento com o biomaterial (grupo controle - GC). Os animais foram avaliados radiograficamente, por densitometria óptica e análise histológica, nos períodos 30, 60 e 90 dias pós-operatórios. Houve superioridade estatística na média geral das avaliações radiográficas do GB (2,33±0,48) sobre o GC (1,77±0,06). As médias gerais de avaliação densitométrica do GB foram superiores às do GC, sendo 6,207±1,374 e 5,71±1,512, respectivamente. A avaliação histopatológica do GB foi superior à do GC nos períodos de 30, 60 e 90 dias. Assim, é possível afirmar que o hidrogel de quitosana constitui biomaterial de características desejáveis, promovendo consolidação óssea mais rápida e eficiente, sem causar reações adversas.(AU)

Tissue engineering is an interdisciplinary science that has been developing biomaterials for bone regeneration in medicine and veterinary medicine, following an imminent need. The aim of this study was to evaluate bone regeneration after use of chitosan hydrogel associated with glycerol phosphate in experimentally induced bone gap in the radius of rabbits. Fifteen adult rabbits were randomly distributed in two experimental groups, represented by each radius of every single animal. The animals in the Biomaterial Group (GB) were treated with a glycerol phosphate-associated chitosan hydrogel and in the Control Group (GC) they received no treatment with the biomaterial. The animals were evaluated clinically, radiographically, histologically and by optic densitometry at 30, 60 and 90 days postoperatively. There was statistical superiority in the general average of the radiographic estimates of GB (2.33 ± 0.48) over the CG (1.77 ± 0.06). The general averages of GB densitometric evaluation were higher than the CG, being 6.207 ± 1.374 and 5.71 ± 1.512, respectively. Histopathological evaluation of GB was superior to CG in periods of 30, 60 and 90 days. Chitosan hydrogel constitutes a biomaterial of desired characteristics, promoting faster and more efficient bone repair when compared to GC.(AU)

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The objectives of this research were to evaluate the effects of commercial probiotic and chitosan as food additives on the quality and meat composition of 36 New Zealand White rabbits (57 ± 8 days old and 1,648 ± 0.194 kg) and on the fatty acid profile of caecotrophs. The treatments were CT (diets without inclusion of additives), PRO (inclusion of 4 g / kg of commercial probiotic) and CHI (inclusion of 4 g / kg of chitosan). The additives increased triglycerides and decreased urea compared to the control group, as well as increased oleic and linoleic acids, Ʃ unsaturated, Ʃ monounsaturated and Ʃ polyunsaturated in caecotrophs. CHI animals showed a decrease in myristic and palmitic acids compared to PRO. CHI decreased the meat's crude protein and the meat's fat. In addition, there was a decrease in omega-3, omega-6 and the relationship unsaturated and saturated fatty acids for the CHI group and an increase in erucic acid and a decrease in the rate of hypocholesterolemic acids. As a conclusion, the data showed that the animals that ingested probiotic had better meat quality, for having better fatty acid profile and hypocholesterolemic index, compared to the treatment with chitosan. The additives improved the caecotrophs fatty acid profile.(AU)

Os objetivos desta pesquisa foram avaliar os efeitos do probiótico e da quitosana como aditivos alimentares na qualidade e composição da carne de 36 coelhos da raça Nova Zelândia Branco (57±8 dias de idade e 1.648±0.194 kg) e no perfil de ácidos graxos dos cecotrofos. Os tratamentos foram CT (dietas sem inclusão de aditivos), PRO (inclusão de 4 g/kg de probiótico) e CHI (inclusão de 4 g/kg de quitosana). Os aditivos aumentaram os triglicerídeos e diminuíram a ureia em comparação ao grupo controle, bem como amentaram os ácidos oleico e linoleico, Ʃ insaturados, Ʃ monoinsaturados e Ʃ poli-insaturados nos cecotrofos. Os animais CHI apresentaram diminuição nos ácidos mirístico e palmítico em comparação ao PRO. A CHI diminuiu a proteína bruta da carne e o extrato etéreo da carne. Além disso, houve uma diminuição no ômega-3, ômega-6 e a relação entre ácidos graxos insaturados e saturados para o grupo CHI e aumento do ácido erúcico e diminuição do índice de hipocolesterolemia. Como conclusão, os dados mostraram que os animais que ingeriram probiótico apresentaram melhor qualidade da carne, por apresentarem melhores perfil de ácidos graxos e índice hipocolesterolêmico, em comparação ao tratamento com quitosana. Os aditivos melhoraram o perfil de ácidos graxos dos cecotrofos.(AU)

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The objectives of this research were to evaluate the effects of commercial probiotic and chitosan as food additives on the quality and meat composition of 36 New Zealand White rabbits (57 ± 8 days old and 1,648 ± 0.194 kg) and on the fatty acid profile of caecotrophs. The treatments were CT (diets without inclusion of additives), PRO (inclusion of 4 g / kg of commercial probiotic) and CHI (inclusion of 4 g / kg of chitosan). The additives increased triglycerides and decreased urea compared to the control group, as well as increased oleic and linoleic acids, Ʃ unsaturated, Ʃ monounsaturated and Ʃ polyunsaturated in caecotrophs. CHI animals showed a decrease in myristic and palmitic acids compared to PRO. CHI decreased the meat's crude protein and the meat's fat. In addition, there was a decrease in omega-3, omega-6 and the relationship unsaturated and saturated fatty acids for the CHI group and an increase in erucic acid and a decrease in the rate of hypocholesterolemic acids. As a conclusion, the data showed that the animals that ingested probiotic had better meat quality, for having better fatty acid profile and hypocholesterolemic index, compared to the treatment with chitosan. The additives improved the caecotrophs fatty acid profile.

Os objetivos desta pesquisa foram avaliar os efeitos do probiótico e da quitosana como aditivos alimentares na qualidade e composição da carne de 36 coelhos da raça Nova Zelândia Branco (57±8 dias de idade e 1.648±0.194 kg) e no perfil de ácidos graxos dos cecotrofos. Os tratamentos foram CT (dietas sem inclusão de aditivos), PRO (inclusão de 4 g/kg de probiótico) e CHI (inclusão de 4 g/kg de quitosana). Os aditivos aumentaram os triglicerídeos e diminuíram a ureia em comparação ao grupo controle, bem como amentaram os ácidos oleico e linoleico, Ʃ insaturados, Ʃ monoinsaturados e Ʃ poli-insaturados nos cecotrofos. Os animais CHI apresentaram diminuição nos ácidos mirístico e palmítico em comparação ao PRO. A CHI diminuiu a proteína bruta da carne e o extrato etéreo da carne. Além disso, houve uma diminuição no ômega-3, ômega-6 e a relação entre ácidos graxos insaturados e saturados para o grupo CHI e aumento do ácido erúcico e diminuição do índice de hipocolesterolemia. Como conclusão, os dados mostraram que os animais que ingeriram probiótico apresentaram melhor qualidade da carne, por apresentarem melhores perfil de ácidos graxos e índice hipocolesterolêmico, em comparação ao tratamento com quitosana. Os aditivos melhoraram o perfil de ácidos graxos dos cecotrofos.

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The aim of this study was to develop a chitosan biofilm against Salmonella enteritidis, for the conservation of fertile and table eggs. Two experiments were performed. Experiment 1: 400 specific pathogen-free table eggs were divided in a completely randomized design into four treatments, five replicates and each replicate with 20 table eggs. Experimental groups were assigned to control and 1, 5 and 10% chitosan treatment. The eggs were immersed in the chitosan solution. They were then exposed to Salmonella enteritidis and stored for 1, 24, 96 and 168h at 4ºC. The eggs were then washed with 10mL of physiological saline solution. Experiment 2: 80 specific pathogen-free fertile eggs were tested, the assays were assigned to control and 1, 5 and 10% chitosan treatment. Each treatment had 20 fertile eggs. The eggs were immersed in the chitosan solution. They were individually weighed and incubated. Egg weight, humidity loss, and hatchability (weight and length of newly hatched chicks) characteristics were assessed. In Experiment 1, comparison between treatments showed differences (P< 0.05) in the total recovered of Salmonella enteritidis on eggshell, with the lower values in 5 y 10% chitosan treatment at 96 y 168h respectively. In Experiment 2, chitosan did not show any effect on the egg weight and chick weight, where the average was 57.44 and 38.23g respectively. The humidity loss and chick length showed differences (P< 0.05), with the lower values in 5 y 10% chitosan treatment. The antibacterial activity of chitosan biofilm provide a practical tool against Salmonella enteritidis in fertile and table eggs because the chitosan did not affect egg weight and chick weight, relevant parameters in the poultry industry.(AU)

O presente estudo teve como objetivo desenvolver um biofilme de quitosana contra Salmonella enteritidis, para conservação de ovos férteis e de mesa. Dois experimentos foram realizados. Experimento 1: 400 ovos de mesa livres de patógenos especificados foram divididos em delineamento inteiramente casualizado em quatro tratamentos, cinco repetições e cada réplica contendo 20 ovos de mesa. Grupos experimentais foram designados para controle e 1, 5 e 10% de tratamento com quitosana. Os ovos foram imersos em solução de quitosana. Em seguida foram expostos a Salmonella enteritidis, e armazenados por 1, 24, 96 e 168h a 4ºC. Após, os ovos foram lavados com 10mL de solução salina fisiológica. Experimento 2: 80 ovos férteis livres de patógenos especificados foram testados. Os ensaios foram atribuídos a controle e 1, 5 e 10% de tratamento com quitosana. Cada tratamento teve 20 ovos férteis. Os ovos foram imersos em solução de quitosana. Em seguida foram individualmente pesados e incubados. Peso dos ovos, perda de umidade e características de eclodibilidade (peso e comprimento dos pintinhos recém-nascidos) foram avaliados. No Experimento 1, a comparação entre tratamentos mostrou diferenças (P< 0,05) na quantidade total recuperada de Salmonella enteritidis na casca, com os menores valores em 5 e 10% de tratamento com quitosana a 96 e 168h respetivamente. No experimento 2, a quitosana não mostrou nenhum efeito no peso do ovo e no peso do pintinho, onde a média foi de 57,44 e 38,23g respetivamente. A perda de umidade e comprimento do pintinho apresentaram diferenças (P< 0,05), com os menores valores em 5 e 10% de tratamento com quitosana. A atividade antibacteriana do biofilme de quitosana, fornece uma ferramenta prática contra Salmonella enteritidis em ovos férteis e de mesa, pois a quitosana não afetou o peso do ovo e peso do pintinho, parâmetros relevantes na indústria avícola.(AU)

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