RESUMO

Espiroquetas patogênicas do gênero Leptospira são o agente causador da leptospirose, uma doença zoonótica amplamente disseminada que afeta humanos e animais. Leptospiras patogênicas colonizam os túbulos renais de uma ampla variedade de animais selvagens e domésticos, os quais excretam as bactérias vivas, via urina, no ambiente. O homem é o hospedeiro acidental e terminal da doença, e após a infecção pode apresentar um quadro variado de manifestações clínicas. Atualmente, estima-se que anualmente cerca de 1 milhão de pessoas são acometidas pela leptospirose em todo o mundo, o que resulta em aproximadamente 60 mil mortes. O entendimento da interação patógeno-hospedeiro, bem como da resposta imune contra proteínas de Leptospira spp., é um passo fundamental para o desenvolvimento de vacinas contra a leptospirose. As proteínas presentes na membrana externa das leptospiras são alvos interessantes de estudo, pois devido a sua localização podem interagir diretamente com o hospedeiro. Resultados prévios indicam que as proteínas Leptospiral Immunoglobulin-like A e B (LigA e LigB) são candidatos vacinais interessantes; ambas proteínas apresentam uma região N-terminal bastante conservada, o que pode ser aproveitada para a geração de anticorpos que possam reconhecer concomitantemente LigA e LigB. Assim, o presente estudo tem como objetivo clonar, expressar e purificar uma sequência que corresponde a porção conservada das proteínas LigA/LigB de L. interrogans sorovar Copenhageni e avaliar suas propriedades imunogênicas. A porção conservada do gene LIC10465 (ligA) foi amplificada por PCR, clonada no vetor pAE e a proteína recombinante expressa em diferentes linhagens de E. coli. A purificação da proteína recombinante foi realizada por cromatografia de afinidade ao níquel. A proteína recombinante produzida foi detectada por Western Blotting e ELISA a partir de incubação com anticorpos monloclonais anti-his, soro hiperimune produzido em animais BALB/c e soros positivos para a leptospirose. A obtenção e validação imunológica dessa proteína, na sua forma recombinante contribuirá significativamente para o avanço dos estudos relacionados à patogenicidade das leptospiras.

RESUMO

INTRODUCTION: Contamination of cell phones can contribute to the dissemination of pathogens in the community and/or hospital environment. OBJECTIVE: To characterize Staphylococcus aureus strains isolated from cell phones of university students. METHODS: Samples were collected from 100 cell phones. Detection of genes associated with virulence factors such as biofilm formation (icaA and icaD), enterotoxins production (SEA, SEB, SEC, and SED), and resistance to methicillin (mecA and mecC) was performed in S. aureus isolates by PCR. Typing mecA gene performed by multiplex PCR. Susceptibility to antimicrobials and biofilm formation rate also evaluated by using disk diffusion test and crystal violet staining. RESULTS: S. aureus was present in 40% of the total samples and about 70% of them belonged to Nursing students. Of the isolates, 85% presented resistance to penicillin and 50% were classified as moderate biofilm producers. In addition, 92.5% of isolates contained the gene icaA and 60% of the gene icaD. Approximately 25% of the isolates presented the mecA gene. Typing of the mecA gene showed the presence of staphylococcal chromosome cassette SCCmec I and c III respectively in 20% and 10% of the isolates. 70% of the samples could not be typed by the technique. Regarding the enterotoxins, the most prevalent gene was SEA (30%) followed by the SEC gene (2.5%). The presence of SED and SEB genes not observed in any of the isolates. CONCLUSION: The cleaning and periodic disinfection of cell phones can contribute to the reduction of the risk of nosocomial infection.

INTRODUÇÃO: A contaminação de celulares pode contribuir para a disseminação de patógenos na comunidade e/ou ambiente hospitalar. OBJETIVO: Caracterizar cepas de Staphylococcus aureus de telefones celulares de estudantes universitários. MÉTODOS: Foram coletadas amostras de 100 telefones celulares. Detecção de genes associados a fatores de virulência quanto a: formação de biofilme (icaA e icaD), produção de enterotoxinas (SEA, SEB, SEC e SED) e resistência à meticilina (mecA e mecC) foi realizada em isolados de S. aureus por PCR. A Tipagem do gene mecA foi realizada por PCR multiplex. A susceptibilidade a antimicrobianos e a taxa de formação de biofilme pelo teste de difusão em disco e coloração com cristal violeta. RESULTADOS: S. aureus esteve presente em 40% do total de amostras, destas, 70% pertenciam a estudantes do curso de enfermagem. Dos isolados, 85% apresentaram resistência à penicilina e 50% foram classificados com moderada formação de biofilme. Além disso, 92,5% dos isolados continham o gene icaA e 60% o gene icaD. Aproximadamente 25% dos isolados apresentaram o gene mecA. A tipagem do gene mecA mostrou a presença do cassete cromossômico estafilocócico SSCmec I e III em respectivamente 20% e 10% dos isolados. 70% das amostras não puderam ser identificadas pela técnica. Das enterotoxinas, o gene mais prevalente foi o SEA (30%), seguido pelo gene SEC (2.5%). A presença dos genes SED e SEB não foi observada nos isolados. CONCLUSÃO: A limpeza e desinfecção periódica dos telefones celulares podem contribuir para a redução do risco de infecção nosocomiais.

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Entomopathogenic fungi (EPF) now a possible safer microbial control measure that could be considered as a substitute for chemical control of insect pests. Three EPF viz., Metarihizium anisopliae, Isaria furnosoroseus and Beauveria bassiana were evaluated for their virulence against the grubs of Khapra beetle, Trogoderma granarium (Everts) under laboratory conditions. The isolates were applied by two methods viz., diet incorporation and an immersion method with 3rd instar 20 grubs of T. granarium for each. The virulence of EPF was determined using percent mortality. Significantly higher mortality was observed in M. anisopliae applied through immersion (98.33%) and diet incorporation (93.33%) methods followed by B. bassiana (90.83 and 85.83%, respectively). The mortality caused by I. furnosoroseus was statistically lower in immersion and diet incorporation methods i.e. 81.67 and 73.33%, respectively. Based on the immersion method, all EPF were studied for multiple conidial concentration i.e., 1×104, 1×105, 1×106, 1×107 and 1×108 under the same in-vitro conditions. All the isolates were pathogenic to grub of T. granarium at the highest conidial concentration. M. anisopliae was proved the most effective virulent resulting in 98.33% mortality of the pest with LT50 4.61 days at 1 × 108 conidial concentration followed by 90.83 and 81.67 percent mortality with 5.07 and 8.01 days LT50, in the application of B. bassiana and I. furnosoroseus, respectively. M. anisopliae showed higher efficacy and could be considered as promising EPF for the development of myco-insecticides against effective biocontrol of T. granarium.

Os fungos entomopatogênicos (FPE) são agora a possível medida de controle microbiano mais segura, que pode ser considerada um substituto para o controle químico de pragas de insetos. Três EPF viz., Metarihizium anisopliae, Isaria furnosoroseus e Beauveria bassiana foram avaliados quanto à sua virulência contra as larvas do besouro Khapra, Trogoderma granarium (Everts) em condições de laboratório. Os isolados foram aplicados por dois métodos, a saber: incorporação de dieta e um método de imersão com 20 larvas de T. granarium de 3º ínstar para cada um. A virulência do EPF foi determinada usando a mortalidade percentual. Mortalidade significativamente maior foi observada em M. anisopliae aplicado pelos métodos de imersão (98,33%) e incorporação de dieta (93,33%), seguido por B. bassiana (90,83% e 85,83%, respectivamente). A mortalidade causada por I. furnosoroseus foi estatisticamente menor nos métodos de imersão e incorporação de dieta, ou seja, 81,67% e 73,33%, respectivamente. Com base no método de imersão, todos os EPFs foram estudados para múltiplas concentrações de conídios, ou seja, 1 × 104, 1 × 105, 1 × 106, 1 × 107 e 1 × 108 nas mesmas condições in vitro. Todos os isolados foram patogênicos à larva de T. granarium na maior concentração de conídios. M. anisopliae provou ser o virulento mais eficaz, resultando em 98,33% de mortalidade da praga com LT50 4,61 dias na concentração de 1 × 108 conídios seguido por 90,83% e 81,67% de mortalidade com 5,07 e 8,01 dias LT50, na aplicação de B. bassiana e I. furnosoroseus, respectivamente. M. anisopliae apresentou maior eficácia e pode ser considerada como um PFE promissor para o desenvolvimento de micoinseticidas contra o biocontrole efetivo de T. granarium.

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Abstract Entomopathogenic fungi (EPF) now a possible safer microbial control measure that could be considered as a substitute for chemical control of insect pests. Three EPF viz., Metarihizium anisopliae, Isaria furnosoroseus and Beauveria bassiana were evaluated for their virulence against the grubs of Khapra beetle, Trogoderma granarium (Everts) under laboratory conditions. The isolates were applied by two methods viz., diet incorporation and an immersion method with 3rd instar 20 grubs of T. granarium for each. The virulence of EPF was determined using percent mortality. Significantly higher mortality was observed in M. anisopliae applied through immersion (98.33%) and diet incorporation (93.33%) methods followed by B. bassiana (90.83 and 85.83%, respectively). The mortality caused by I. furnosoroseus was statistically lower in immersion and diet incorporation methods i.e. 81.67 and 73.33%, respectively. Based on the immersion method, all EPF were studied for multiple conidial concentration i.e., 1×104, 1×105, 1×106, 1×107 and 1×108 under the same in-vitro conditions. All the isolates were pathogenic to grub of T. granarium at the highest conidial concentration. M. anisopliae was proved the most effective virulent resulting in 98.33% mortality of the pest with LT50 4.61 days at 1 × 108 conidial concentration followed by 90.83 and 81.67 percent mortality with 5.07 and 8.01 days LT50, in the application of B. bassiana and I. furnosoroseus, respectively. M. anisopliae showed higher efficacy and could be considered as promising EPF for the development of myco-insecticides against effective biocontrol of T. granarium.

Resumo Os fungos entomopatogênicos (FPE) são agora a possível medida de controle microbiano mais segura, que pode ser considerada um substituto para o controle químico de pragas de insetos. Três EPF viz., Metarihizium anisopliae, Isaria furnosoroseus e Beauveria bassiana foram avaliados quanto à sua virulência contra as larvas do besouro Khapra, Trogoderma granarium (Everts) em condições de laboratório. Os isolados foram aplicados por dois métodos, a saber: incorporação de dieta e um método de imersão com 20 larvas de T. granarium de 3º ínstar para cada um. A virulência do EPF foi determinada usando a mortalidade percentual. Mortalidade significativamente maior foi observada em M. anisopliae aplicado pelos métodos de imersão (98,33%) e incorporação de dieta (93,33%), seguido por B. bassiana (90,83% e 85,83%, respectivamente). A mortalidade causada por I. furnosoroseus foi estatisticamente menor nos métodos de imersão e incorporação de dieta, ou seja, 81,67% e 73,33%, respectivamente. Com base no método de imersão, todos os EPFs foram estudados para múltiplas concentrações de conídios, ou seja, 1 × 104, 1 × 105, 1 × 106, 1 × 107 e 1 × 108 nas mesmas condições in vitro. Todos os isolados foram patogênicos à larva de T. granarium na maior concentração de conídios. M. anisopliae provou ser o virulento mais eficaz, resultando em 98,33% de mortalidade da praga com LT50 4,61 dias na concentração de 1 × 108 conídios seguido por 90,83% e 81,67% de mortalidade com 5,07 e 8,01 dias LT50, na aplicação de B. bassiana e I. furnosoroseus, respectivamente. M. anisopliae apresentou maior eficácia e pode ser considerada como um PFE promissor para o desenvolvimento de micoinseticidas contra o biocontrole efetivo de T. granarium.

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Entomopathogenic fungi (EPF) now a possible safer microbial control measure that could be considered as a substitute for chemical control of insect pests. Three EPF viz., Metarihizium anisopliae, Isaria furnosoroseus and Beauveria bassiana were evaluated for their virulence against the grubs of Khapra beetle, Trogoderma granarium (Everts) under laboratory conditions. The isolates were applied by two methods viz., diet incorporation and an immersion method with 3rd instar 20 grubs of T. granarium for each. The virulence of EPF was determined using percent mortality. Significantly higher mortality was observed in M. anisopliae applied through immersion (98.33%) and diet incorporation (93.33%) methods followed by B. bassiana (90.83 and 85.83%, respectively). The mortality caused by I. furnosoroseus was statistically lower in immersion and diet incorporation methods i.e. 81.67 and 73.33%, respectively. Based on the immersion method, all EPF were studied for multiple conidial concentration i.e., 1×104, 1×105, 1×106, 1×107 and 1×108 under the same in-vitro conditions. All the isolates were pathogenic to grub of T. granarium at the highest conidial concentration. M. anisopliae was proved the most effective virulent resulting in 98.33% mortality of the pest with LT50 4.61 days at 1 × 108 conidial concentration followed by 90.83 and 81.67 percent mortality with 5.07 and 8.01 days LT50, in the application of B. bassiana and I. furnosoroseus, respectively. M. anisopliae showed higher efficacy and could be considered as promising EPF for the development of myco-insecticides against effective biocontrol of T. granarium.(AU)

Os fungos entomopatogênicos (FPE) são agora a possível medida de controle microbiano mais segura, que pode ser considerada um substituto para o controle químico de pragas de insetos. Três EPF viz., Metarihizium anisopliae, Isaria furnosoroseus e Beauveria bassiana foram avaliados quanto à sua virulência contra as larvas do besouro Khapra, Trogoderma granarium (Everts) em condições de laboratório. Os isolados foram aplicados por dois métodos, a saber: incorporação de dieta e um método de imersão com 20 larvas de T. granarium de 3º ínstar para cada um. A virulência do EPF foi determinada usando a mortalidade percentual. Mortalidade significativamente maior foi observada em M. anisopliae aplicado pelos métodos de imersão (98,33%) e incorporação de dieta (93,33%), seguido por B. bassiana (90,83% e 85,83%, respectivamente). A mortalidade causada por I. furnosoroseus foi estatisticamente menor nos métodos de imersão e incorporação de dieta, ou seja, 81,67% e 73,33%, respectivamente. Com base no método de imersão, todos os EPFs foram estudados para múltiplas concentrações de conídios, ou seja, 1 × 104, 1 × 105, 1 × 106, 1 × 107 e 1 × 108 nas mesmas condições in vitro. Todos os isolados foram patogênicos à larva de T. granarium na maior concentração de conídios. M. anisopliae provou ser o virulento mais eficaz, resultando em 98,33% de mortalidade da praga com LT50 4,61 dias na concentração de 1 × 108 conídios seguido por 90,83% e 81,67% de mortalidade com 5,07 e 8,01 dias LT50, na aplicação de B. bassiana e I. furnosoroseus, respectivamente. M. anisopliae apresentou maior eficácia e pode ser considerada como um PFE promissor para o desenvolvimento de micoinseticidas contra o biocontrole efetivo de T. granarium.(AU)

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Entomopathogenic fungi (EPF) now a possible safer microbial control measure that could be considered as a substitute for chemical control of insect pests. Three EPF viz., Metarihizium anisopliae, Isaria furnosoroseus and Beauveria bassiana were evaluated for their virulence against the grubs of Khapra beetle, Trogoderma granarium (Everts) under laboratory conditions. The isolates were applied by two methods viz., diet incorporation and an immersion method with 3rd instar 20 grubs of T. granarium for each. The virulence of EPF was determined using percent mortality. Significantly higher mortality was observed in M. anisopliae applied through immersion (98.33%) and diet incorporation (93.33%) methods followed by B. bassiana (90.83 and 85.83%, respectively). The mortality caused by I. furnosoroseus was statistically lower in immersion and diet incorporation methods i.e. 81.67 and 73.33%, respectively. Based on the immersion method, all EPF were studied for multiple conidial concentration i.e., 1×104 , 1×105, 1×106, 1×107 and 1×108 under the same in-vitro conditions. All the isolates were pathogenic to grub of T. granarium at the highest conidial concentration. M. anisopliae was proved the most effective virulent resulting in 98.33% mortality of the pest with LT50 4.61 days at 1 × 108 conidial concentration followed by 90.83 and 81.67 percent mortality with 5.07 and 8.01 days LT50, in the application of B. bassiana and I. furnosoroseus, respectively. M. anisopliae showed higher efficacy and could be considered as promising EPF for the development of myco-insecticides against effective biocontrol of T. granarium.

Os fungos entomopatogênicos (FPE) são agora a possível medida de controle microbiano mais segura, que pode ser considerada um substituto para o controle químico de pragas de insetos. Três EPF viz., Metarihizium anisopliae, Isaria furnosoroseus e Beauveria bassiana foram avaliados quanto à sua virulência contra as larvas do besouro Khapra, Trogoderma granarium (Everts) em condições de laboratório. Os isolados foram aplicados por dois métodos, a saber: incorporação de dieta e um método de imersão com 20 larvas de T. granarium de 3º ínstar para cada um. A virulência do EPF foi determinada usando a mortalidade percentual. Mortalidade significativamente maior foi observada em M. anisopliae aplicado pelos métodos de imersão (98,33%) e incorporação de dieta (93,33%), seguido por B. bassiana (90,83% e 85,83%, respectivamente). A mortalidade causada por I. furnosoroseus foi estatisticamente menor nos métodos de imersão e incorporação de dieta, ou seja, 81,67% e 73,33%, respectivamente. Com base no método de imersão, todos os EPFs foram estudados para múltiplas concentrações de conídios, ou seja, 1 × 104, 1 × 105, 1 × 106, 1 × 107 e 1 × 108 nas mesmas condições in vitro. Todos os isolados foram patogênicos à larva de T. granarium na maior concentração de conídios. M. anisopliae provou ser o virulento mais eficaz, resultando em 98,33% de mortalidade da praga com LT50 4,61 dias na concentração de 1 × 108 conídios seguido por 90,83% e 81,67% de mortalidade com 5,07 e 8,01 dias LT50, na aplicação de B. bassiana e I. furnosoroseus, respectivamente. M. anisopliae apresentou maior eficácia e pode ser considerada como um PFE promissor para o desenvolvimento de micoinseticidas contra o biocontrole efetivo de T. granarium.

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The mortality of the Alabama argillacea and Chrysodeixis includens (Lepidoptera: Noctuidae) larvae caused by the kaolin inert powder and the entomopathogenic fungus Beauveria bassiana were determined under laboratory conditions. Using the caterpillar submersion method, the CG 138 B. bassiana isolate was more pathogenic to A. argillacea than the CG 70, GC 82, ESALQ 634, and ESALQ 645. All five tested isolates caused similar mortality of C. includens. The mortality of first-instar larvae of A. argillacea and C. includens by feeding on leaf-disc impregnated with B. bassiana (CG 138) and kaolin was also determined. Higher A. argillacea mortalities were observed in the B. bassiana (CG 138) treatments, regardless of the presence of kaolin. However, the activity of kaolin + B. bassiana (CG 138) against C. includens was higher than each ingredient alone, indicating an additive action against C. includes larvae. The mortality of A. argillacea and C. includens larvae treated with kaolin + B. bassiana (CG 138) was similar, and the A. argillacea mortality was higher than that of C. includens with kaolin and B. bassiana (GC 138) separated. The treatment kaolin + B. bassiana (CG 138) is promising for the simultaneous management of these two defoliator pests, mainly A. includes. In addition, the monophagous A. argillacea is more susceptible to both kaolin and B. bassiana (GC 138) than the polyphagous C. includens, suggesting that the nutritional ecology plays an important role in the susceptibility of these defoliator species to alternative insecticides.(AU)

A mortalidade de larvas de Alabama argillacea e Chrysodeixis includens (Lepidoptera: Noctuidae), causada pelo pó inerte do caulim e pelo fungo entomopatogênico Beauveria bassiana, foi determinada em condições de laboratório. Usando o método de submersão da lagarta, o isolado CG 138 de B. bassiana foi mais patogênico para A. argillacea que os CG 70, GC 82, ESALQ 634 e ESALQ 645 desse fungo. Os cinco isolados testados causaram mortalidade semelhante de C. includens. A mortalidade de larvas de primeiro ínstar de A. argillacea e C. includens pelo método de alimentação em discos foliares impregnados com B. bassiana (CG 138) e caulim foi, também, determinada. A mortalidade de A. argillacea foi maior nos tratamentos com B. bassiana (CG 138), independentemente da presença do caulim. A atividade do caulim + B. bassiana (CG 138) contra C. includens foi maior que cada ingrediente isolado, indicando ação aditiva contra larvas desse Lepidoptera. A mortalidade de larvas de A. argillacea e C. includens, com caulim + B. bassiana (CG 138), foi semelhante e as de A. argillacea maiores que as de C. includens com caulim e B. bassiana (GC 138) isoladamente. O tratamento caulin + B. bassiana (CG 138) é promissor para o manejo simultâneo dessas duas pragas desfolhadoras, principalmente A. includens. Além disso, a monófaga, A. argilacea, é mais suscetível ao caulim e à B. bassiana (GC 138) que a polífaga, C. includens, sugerindo que a ecologia nutricional desempenha papel importante na suscetibilidade dessas espécies desfolhadoras a inseticidas alternativos.(AU)

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Abstract The mortality of the Alabama argillacea and Chrysodeixis includens (Lepidoptera: Noctuidae) larvae caused by the kaolin inert powder and the entomopathogenic fungus Beauveria bassiana were determined under laboratory conditions. Using the caterpillar submersion method, the CG 138 B. bassiana isolate was more pathogenic to A. argillacea than the CG 70, GC 82, ESALQ 634, and ESALQ 645. All five tested isolates caused similar mortality of C. includens. The mortality of first-instar larvae of A. argillacea and C. includens by feeding on leaf-disc impregnated with B. bassiana (CG 138) and kaolin was also determined. Higher A. argillacea mortalities were observed in the B. bassiana (CG 138) treatments, regardless of the presence of kaolin. However, the activity of kaolin + B. bassiana (CG 138) against C. includens was higher than each ingredient alone, indicating an additive action against C. includes larvae. The mortality of A. argillacea and C. includens larvae treated with kaolin + B. bassiana (CG 138) was similar, and the A. argillacea mortality was higher than that of C. includens with kaolin and B. bassiana (GC 138) separated. The treatment kaolin + B. bassiana (CG 138) is promising for the simultaneous management of these two defoliator pests, mainly A. includes. In addition, the monophagous A. argillacea is more susceptible to both kaolin and B. bassiana (GC 138) than the polyphagous C. includens, suggesting that the nutritional ecology plays an important role in the susceptibility of these defoliator species to alternative insecticides.

Resumo A mortalidade de larvas de Alabama argillacea e Chrysodeixis includens (Lepidoptera: Noctuidae), causada pelo pó inerte do caulim e pelo fungo entomopatogênico Beauveria bassiana, foi determinada em condições de laboratório. Usando o método de submersão da lagarta, o isolado CG 138 de B. bassiana foi mais patogênico para A. argillacea que os CG 70, GC 82, ESALQ 634 e ESALQ 645 desse fungo. Os cinco isolados testados causaram mortalidade semelhante de C. includens. A mortalidade de larvas de primeiro ínstar de A. argillacea e C. includens pelo método de alimentação em discos foliares impregnados com B. bassiana (CG 138) e caulim foi, também, determinada. A mortalidade de A. argillacea foi maior nos tratamentos com B. bassiana (CG 138), independentemente da presença do caulim. A atividade do caulim + B. bassiana (CG 138) contra C. includens foi maior que cada ingrediente isolado, indicando ação aditiva contra larvas desse Lepidoptera. A mortalidade de larvas de A. argillacea e C. includens, com caulim + B. bassiana (CG 138), foi semelhante e as de A. argillacea maiores que as de C. includens com caulim e B. bassiana (GC 138) isoladamente. O tratamento caulin + B. bassiana (CG 138) é promissor para o manejo simultâneo dessas duas pragas desfolhadoras, principalmente A. includens. Além disso, a monófaga, A. argilacea, é mais suscetível ao caulim e à B. bassiana (GC 138) que a polífaga, C. includens, sugerindo que a ecologia nutricional desempenha papel importante na suscetibilidade dessas espécies desfolhadoras a inseticidas alternativos.

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Abstract: human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) is the etiological agent of acquired immunodeficiency syndrome (AIDS), a pandemic with high economic and social costs. The envelope glycoprotein (ENV) of the virus mediates the infectious process by binding to and entering the host cell, one of the main target components of studies since its discovery. Its endodomain or C-terminal tail (CTT) participates in late replicative cycle processes, such as intracellular trafficking, activation, and cell death, which occurs because it interacts with multiple cellular factors through motifs or signal sequences present throughout its structure. Although these interactions have not been fully understood at specific levels, studies over more than three decades leave no doubtthatthis domain plays a fundamental role in the biology of the virus and probably the development of the disease. This review describes the studies carried out to date that demonstrate the importance of the CTT, focusing on the motifs responsible for its interactions and its possible roles in the pathogenicity of the infection.

Resumen: el virus de la inmunodeficiencia humana tipo 1 (VIH-1) es el agente etiológico del síndrome de inmunodeficiencia adguirida (SIDA), una pandemia con altos costos económicos y sociales. La glicoproteína de la envoltura (ENV) del virus media el proceso infeccioso al unirse a la célula huésped y entrar en ella, uno de los principales componentes objetivo de los estudios desde su descubrimiento. Su endodominio o cola C-terminal (CTT) participa en procesos tardíos del ciclo replicativo, como tráfico intracelular, activación y muerte celular, lo que ocurre porque interactúa con múltiples factores celulares a través de motivos o secuencias señal presentes en toda su estructura. Aunque estas interacciones no se han entendido completamente a niveles específicos, los estudios durante más de tres décadas no dejan dudas de que este campo juega un papel fundamental en la biología del virus y probablemente en el desarrollo de la enfermedad. Esta revisión describe los estudios realizados hasta la fecha que demuestran la importancia de la CTT, centrándose en los motivos responsables de sus interacciones y sus posibles roles en la patogenicidad de la infección.

Resumo: o vírus da imunodeficiência humana tipo 1 (HIV-1) é o agente etiológico da síndrome da imunodeficiência adquirida (AUXILIA), urna pandemia com elevados custos económicos e sociais. A glicoproteína do envelope (ENV) do vírus media o processo infeccioso ligando-se e entrando na célula hospedeira, um dos principais componentes alvo dos estudos desde sua descoberta. Seu endo domínio ou cauda C-terminal (CTT) participa de processos do ciclo replicativo tardio, como tráfego intracelular, ativação e morte celular, que ocorre porque interage com múltiplos fatores celulares por meio de motivos ou sequências-sinal presentes em toda a sua estrutura. Embora essas interações não tenham sido totalmente compreendidas em níveis específicos, estudos ao longo de mais de três décadas não deixam dúvidas de que esse domínio desempenha um papel fundamental na biologia do vírus e provavelmente no desenvolvimento da doença. Esta revisão descreve os estudos realizados até o momento que demonstram a importância da CTT, com foco nos motivos responsáveis por suas interações e seus possíveis papéis na patogenicidade da infecção.

RESUMO

ABSTRACT: Studies on the fungal microbiota of reptiles and amphibians are necessary to better understand of host-microbe interactions and the establishment of fungal disease in these animals. However, these studies are limited. The present researchidentified yeasts from free-ranging reptiles and amphibians from the Caatinga biome andevaluated the virulence factors production, the antifungal susceptibility in planktonic and biofilm growth and the pathogenicity of Candida famata isolates. Twenty-nine isolates of the genera Candida, Cryptococcus and Rhodotorula were identified by phenotypic and/or molecular methods and production of hydrolytic enzymes in vitro by these genera of fungi was evaluated. In addition, susceptibility of planktonic cells and biofilms to azoles and amphotericin B was evaluated. The pathogenicity of C. famata, the most prevalent yeast species isolated, was evaluated using Caenorhabditis elegans model. C. famata was the most prevalent yeast in amphibian and reptilian microbiota. Phospholipase and protease production was observed in 18/29 and 11/29 of the yeast isolates, respectively, while 100% formed biofilms. Itraconazole presented high minimal inhibitory concentrations against C. famata and C. tropicalis. Amphotericin B reduced the biomass and metabolic activity of biofilms. C. famata induced the mortality of C. elegans. In conclusion, reptiles and amphibians are colonized by yeasts capable of producing important virulence factors, especially by Candida spp. that present low susceptibility to azoles which may result from imbalances in ecosystem. Finally, C. famata isolated from these animals presented high pathogenicity, showing the importance of the study of reptile and amphibians fungal microbiota.

RESUMO: Estudos sobre a microbiota fúngica de répteis e anfíbios são necessários para melhor compreender as interações hospedeiro-microrganismo e o estabelecimento de doenças fúngicas nesses animais. No entanto, esses estudos são limitados. O objetivo da presente pesquisa foi identificar leveduras isoladas de répteis e anfíbios do bioma Caatinga e avaliar a produção de fatores de virulência, a sensibilidade a antifúngicos no crescimento planctônico e de biofilme e a patogenicidade de Candida famata. Vinte e nove isolados dos gêneros Candida, Cryptococcus e Rhodotorula foram identificados por métodos fenotípicos e/ou moleculares e a produção de enzimas hidrolíticas in vitro por esses gêneros de fungos foi avaliada. Além disso, foi avaliada a suscetibilidade de células planctônicas e biofilmes a azólicos e anfotericina B. A patogenicidade de C. famata, a espécie de levedura isolada mais prevalente, foi avaliada usando Caenorhabditis elegans. C. famata foi a levedura mais prevalente na microbiota de anfíbios e répteis. A produção de fosfolipase e protease foi observada em 18/29 e 11/29 dos isolados de levedura, respectivamente, enquanto 100% formaram biofilmes. O itraconazol apresentou altas concentrações inibitórias mínimas contra C. famata e C. tropicalis. A anfotericina B reduziu a biomassa e atividade metabólica dos biofilmes. C. famata induziu a mortalidade de C. elegans. Em conclusão, répteis e anfíbios são colonizados por leveduras capazes de produzir importantes fatores de virulência, especialmente por cepas de Candida spp. que apresentam baixa suscetibilidade a azólicos que podem resultar de desequilíbrio no ecossistema. Por fim, C. famata isolados desses animais apresentaram alta patogenicidade, mostrando a importância do estudo da microbiota fúngica de répteis e anfíbios.

RESUMO

Studies on the fungal microbiota of reptiles and amphibians are necessary to better understand of host-microbe interactions and the establishment of fungal disease in these animals. However, these studies are limited. The present researchidentified yeasts from free-ranging reptiles and amphibians from the Caatinga biome andevaluated the virulence factors production, the antifungal susceptibility in planktonic and biofilm growth and the pathogenicity of Candida famata isolates. Twenty-nine isolates of the genera Candida, Cryptococcus and Rhodotorula were identified by phenotypic and/or molecular methods and production of hydrolytic enzymes in vitro by these genera of fungi was evaluated. In addition, susceptibility of planktonic cells and biofilms to azoles and amphotericin B was evaluated. The pathogenicity of C. famata, the most prevalent yeast species isolated, was evaluated using Caenorhabditis elegans model. C. famata was the most prevalent yeast in amphibian and reptilian microbiota. Phospholipase and protease production was observed in 18/29 and 11/29 of the yeast isolates, respectively, while 100% formed biofilms. Itraconazole presented high minimal inhibitory concentrations against C. famata and C. tropicalis. Amphotericin B reduced the biomass and metabolic activity of biofilms. C. famata induced the mortality of C. elegans. In conclusion, reptiles and amphibians are colonized by yeasts capable of producing important virulence factors, especially by Candida spp. that present low susceptibility to azoles which may result from imbalances in ecosystem. Finally, C. famata isolated from these animals presented high pathogenicity, showing the importance of the study of reptile and amphibians fungal microbiota.(AU)

Estudos sobre a microbiota fúngica de répteis e anfíbios são necessários para melhor compreender as interações hospedeiro-microrganismo e o estabelecimento de doenças fúngicas nesses animais. No entanto, esses estudos são limitados. O objetivo da presente pesquisa foi identificar leveduras isoladas de répteis e anfíbios do bioma Caatinga e avaliar a produção de fatores de virulência, a sensibilidade a antifúngicos no crescimento planctônico e de biofilme e a patogenicidade de Candida famata. Vinte e nove isolados dos gêneros Candida, Cryptococcus e Rhodotorula foram identificados por métodos fenotípicos e/ou moleculares e a produção de enzimas hidrolíticas in vitro por esses gêneros de fungos foi avaliada. Além disso, foi avaliada a suscetibilidade de células planctônicas e biofilmes a azólicos e anfotericina B. A patogenicidade de C. famata, a espécie de levedura isolada mais prevalente, foi avaliada usando Caenorhabditis elegans. C. famata foi a levedura mais prevalente na microbiota de anfíbios e répteis. A produção de fosfolipase e protease foi observada em 18/29 e 11/29 dos isolados de levedura, respectivamente, enquanto 100% formaram biofilmes. O itraconazol apresentou altas concentrações inibitórias mínimas contra C. famata e C. tropicalis. A anfotericina B reduziu a biomassa e atividade metabólica dos biofilmes. C. famata induziu a mortalidade de C. elegans. Em conclusão, répteis e anfíbios são colonizados por leveduras capazes de produzir importantes fatores de virulência, especialmente por cepas de Candida spp. que apresentam baixa suscetibilidade a azólicos que podem resultar de desequilíbrio no ecossistema. Por fim, C. famata isolados desses animais apresentaram alta patogenicidade, mostrando a importância do estudo da microbiota fúngica de répteis e anfíbios.(AU)

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Pseudomonas syringae pv. actinidiae is a bacterial pathogen of kiwifruit. Based on the results of the pathogenicity assay, we sequenced the strain Pseudomonas syringae (Psa3) P155 which possesses a series of virulence and resistance genes, CRISPR candidate elements, prophage related sequences, methylation modifications, genomic islands as well as one plasmid. Most importantly, the copper resistance genes copA, copB, copC, copD, and copZ as well as aminoglycoside resistance gene ksgA were identified in strain P155, which would pose a threat to kiwifruit production. The complete sequence we reported here will provide valuable information for a better understanding of the genetic structure and pathogenic characteristics of the genome of P155.

Pseudomonas syringae pv. actinidiae agente causal do cancro bacteriano do kiwi. Com base nos resultados do teste de patogenicidade, foi sequenciado um isolado de Pseudomonas syringae (Psa3) P155, que abriga a uma série de genes de virulência e resistência, elementos candidatos CRISPR, sequências relacionadas a profagos, modificações na metilação, ilhas genômicas, e também um plasmídeo. O mais importante foram os genes de resistência ao cobre, copA, copB, copC, copD e copZ, bem como, o gene de resistência aminoglicosídea ksgA identificados na estirpe P155, os quais representariam uma ameaça à produção de kiwi. A sequência completa relatada fornecerá informações valiosas para uma melhor compreensão da estrutura genética e as características patogênicas do genoma de P155.

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Objetivou-se avaliar características de virulência, perfil de resistência antimicrobiana e padrão de similaridade genética de 71 cepas de Salmonella Minnesota isoladas na cadeia produtiva de frangos de corte, entre 2009 e 2010, em duas unidades de uma empresa (A e B). Os isolados foram sorotipificados e submetidos ao teste de susceptibilidade antimicrobiana pelo teste de difusão em disco. Utilizando-se PCR, foi avaliada a presença dos genes invA, lpfA, agfA e sefA e os genes de resistência aos betalactâmicos (bla TEM , bla SHV e bla CTX-M ). A relação filogenética foi determinada por RAPD-PCR. Os maiores percentuais de resistência foram para tetraciclina e sulfonamida. Foram reconhecidos oito perfis de resistência aos antimicrobianos entre as cepas isoladas na indústria A, e 11 perfis de resistência na indústria B. Do total de cepas, 100% foram positivas para o gene invA, 98,6% para o gene agfA, 49,3% para o gene lpfA e nenhuma para o gene sefA. Três cepas foram positivas para o gene bla TEM (4,2%) e 11 (15,5%) para o gene bla CTX-M . A avaliação filogenética demonstrou a presença de sete clusters com similaridade superior a 80% e três perfis distintos. Com base no dendrograma, observou-se a disseminação de um mesmo perfil em ambas as empresas.(AU)

The aim of this study was to evaluate virulence characteristics, antimicrobial resistance profile and the pattern of genetic similarity of 71 strains of Salmonella Minnesota isolated in the production chain of broilers between 2009 and 2010, into two units of a company (A and B). Isolates were serotyped and submitted to antimicrobial susceptibility by disk diffusion test. Using PCR, the presence of genes invA, lpfA, agfA and sefA and the genes conferring resistance to beta-lactam (blaTEM, blaSHV and blaCTX-M) were evaluated. The phylogenetic relationship was determined by the RAPD-PCR method. The highest percentages of resistance were to tetracycline and sulfonamide. Eight antimicrobial resistance profiles were recognized among strains isolated in industry A, and 11 resistance profiles in industry B. Of all strains of both industries, 100% were positive for the invA gene, 98.6% to agfA gene, 49.3% for lpfA gene, and no strain showed the sefA gene. Three strains were positive for the gene blaTEM (4.2%), 11 (15.5%) for the blaCTX-M gene. Phylogenetic evaluation showed the presence of seven clusters with similarity greater than 80% and three distinct profiles. Based on the dendrogram we observed the spread with similar profiles in both companies.(AU)

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Objetivou-se avaliar características de virulência, perfil de resistência antimicrobiana e padrão de similaridade genética de 71 cepas de Salmonella Minnesota isoladas na cadeia produtiva de frangos de corte, entre 2009 e 2010, em duas unidades de uma empresa (A e B). Os isolados foram sorotipificados e submetidos ao teste de susceptibilidade antimicrobiana pelo teste de difusão em disco. Utilizando-se PCR, foi avaliada a presença dos genes invA, lpfA, agfA e sefA e os genes de resistência aos betalactâmicos (bla TEM , bla SHV e bla CTX-M ). A relação filogenética foi determinada por RAPD-PCR. Os maiores percentuais de resistência foram para tetraciclina e sulfonamida. Foram reconhecidos oito perfis de resistência aos antimicrobianos entre as cepas isoladas na indústria A, e 11 perfis de resistência na indústria B. Do total de cepas, 100% foram positivas para o gene invA, 98,6% para o gene agfA, 49,3% para o gene lpfA e nenhuma para o gene sefA. Três cepas foram positivas para o gene bla TEM (4,2%) e 11 (15,5%) para o gene bla CTX-M . A avaliação filogenética demonstrou a presença de sete clusters com similaridade superior a 80% e três perfis distintos. Com base no dendrograma, observou-se a disseminação de um mesmo perfil em ambas as empresas.(AU)

The aim of this study was to evaluate virulence characteristics, antimicrobial resistance profile and the pattern of genetic similarity of 71 strains of Salmonella Minnesota isolated in the production chain of broilers between 2009 and 2010, into two units of a company (A and B). Isolates were serotyped and submitted to antimicrobial susceptibility by disk diffusion test. Using PCR, the presence of genes invA, lpfA, agfA and sefA and the genes conferring resistance to beta-lactam (blaTEM, blaSHV and blaCTX-M) were evaluated. The phylogenetic relationship was determined by the RAPD-PCR method. The highest percentages of resistance were to tetracycline and sulfonamide. Eight antimicrobial resistance profiles were recognized among strains isolated in industry A, and 11 resistance profiles in industry B. Of all strains of both industries, 100% were positive for the invA gene, 98.6% to agfA gene, 49.3% for lpfA gene, and no strain showed the sefA gene. Three strains were positive for the gene blaTEM (4.2%), 11 (15.5%) for the blaCTX-M gene. Phylogenetic evaluation showed the presence of seven clusters with similarity greater than 80% and three distinct profiles. Based on the dendrogram we observed the spread with similar profiles in both companies.(AU)

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