RESUMO

ABSTRACT Currently, the market offers a wide variety of suture threads, made of materials with different structural and chemical properties. Among many other characteristics, they vary in origin, absorption or degradation, and structure. From this variety, the clinical doubt arises as to which material provides the patient with the best healing quality. Objective: This study aims to comparatively evaluate two different types of suture threads-Monocryl® (polyglycaprone 25) and Ethilon® (nylon)-regarding their ability to aid in tissue regeneration by a histological and immunohistochemical analysis of the skin of rats sutured with the aforementioned materials. Methods: This basic experimental study used 12 adult Wistar rats, randomly divided into three groups with four animals each and subjected to four longitudinal incisions under anesthesia. Each group corresponded to a postsurgical evaluation date (one, seven, and 14 days). Results: At 14 postoperative days, the studied groups had no histological difference. However, the use of nylon thread showed greater evidence of earlier fibrotic union. Conclusion: This study found no histological difference in healing 14 days after surgery among the techniques and the types of suture threads. Level of Evidence II, Therapeutic Studies.

RESUMO Atualmente, encontra-se disponível no mercado uma grande variedade de fios de sutura, compostos de materiais com diferentes propriedades estruturais e químicas, que variam quanto à origem, absorção ou degradação e estrutura, entre outras características. A partir dessa disponibilidade, emerge a dúvida clínica quanto ao material que propicia a melhor qualidade de cicatrização ao paciente. Objetivo: Avaliar comparativamente dois tipos de fios - Monocryl ® (poliglicaprone 25) e Ethilon ® (nylon) - quanto à sua capacidade de auxílio na regeneração tecidual, por meio da análise histológica e imuno-histoquímica da pele de ratos submetidos a suturas com esses materiais. Métodos: Neste estudo básico experimental, foram utilizados 12 ratos adultos da linhagem Wistar, randomicamente divididos em três grupos com quatros animais cada, que foram submetidos a quatro incisões longitudinais sob anestesia. Cada grupo correspondeu a uma data de avaliação pós-cirúrgica (1, 7 e 14 dias). Resultados: Passados 14 dias após a operação, não houve diferença histológica em relação aos grupos estudados. No entanto, o uso de fio de nylon apresentou evidência de união fibrótica mais precoce. Conclusão: Não há diferença histológica de cicatrização após 14 dias pós-operatórios entre as técnicas e os tipos de fio de sutura. Nível de Evidência II, Estudos Terapêuticos.

RESUMO

O objetivo deste estudo foi avaliar o perfil microbiológico e identificar padrões de agregação bacteriana, avaliar a associação desses padrões com os níveis de mediadores inflamatórios, MMPs e sinais e sintomas clínicos e ainda correlacionar os mediadores inflamatórios entre si e com os sinais e sintomas clínicos em dentes com infecção endodôntica primária e periodontite apical (PA). Para isso, 40 dentes uniradiculares, de pacientes com infecção endodôntica primária e PA, foram submetidos à avaliação clínica, com registro de sinais e sintomas, e tomográfica através do cálculo de volumetria das lesões periapicais com o software ITK Snap. Em seguida os dentes foram submetidos ao tratamento endodôntico. Logo após a abertura coronária, amostras foram coletadas de cada canal radicular utilizando cones de papel (S1) e submetidas ao método Checkerboard DNA-DNA hybridization para investigação de espécies bacterianas presentes. Foi realizado o preparo biomecânico (PBM) e em seguida o fluído intersticial da PA foi coletado (SF1) para a quantificação dos mediadores inflamatórios (IL1-ß, IL-6, TNF-α, IL-10, MMPs -2 e -9) através do ensaio multiplex e a quantificação de RvD2 através de ensaio imunoenzimático ELISA. Para a análise de correlação o teste de correlação de Spearman foi utilizado. A análise fatorial foi usada para identificar padrões de agregação bacteriana e regressão linear foi realizada para associar os escores fatoriais, mediadores e características clínicas dos pacientes (P=0,05). Correlação positiva foi encontrada entre MMP-2, -9, IL-10, IL-1ß, IL-6 e TNF-α, e entre RvD2, MMP-9, IL-10, IL-1ß, IL-6 e TNF-α (P<0,05), e correlação negativa foi encontrada entre IL-1ß e sensibilidade a percussão (P<0,05). A análise microbiológica revelou presença de DNA bacteriano em 100% das amostras analisadas com presença de pelo menos 2 das 40 espécies bacterianas investigadas (média = 24,62) por canal. As espécies mais frequentemente detectadas foram P. gingivalis, E. nodatum, F. nucleatum spp. vicentii, S. mitis, L. bucallis e A. actinomycetemcomitans. Das 6 espécies mais detectadas, 4 delas eram gram negativas, destacando o predomínio de gram-negativos das infecções endodônticas primárias com PA. A análise fatorial determinou 2 padrões de associação bacteriana e os resultados de regressão para o fator 1 revelaram uma associação com aumento de dor a percussão (coeficiente (coef) ß=0,788) e redução de dor a palpação (coefß=-0,753) e exsudato (coefß=- 0,479). Níveis mais altos de exsudato e menores de dor a palpação foram associados a bactérias do fator 2 (coefß=0,460 e -0,546, respectivamente). Concluímos que os mediadores inflamatórios formam uma rede inter-relacionada e que as periodontites apicais assintomáticas e sintomáticas tem uma etiologia bacteriana heterogênea e com combinações de espécies diferentes (AU)

The aim of this study was to evaluate the microbiological profile and identify patterns of bacterial aggregation, evaluate the association of these patterns with the levels of inflammatory mediators, MMPs and clinical signs and symptoms, and also correlate the inflammatory mediators with each other and with the clinical signs and symptoms in teeth with primary endodontic infection and apical periodontitis (AP). For this, 40 single-rooted teeth, from patients with primary endodontic infection and PA, were submitted to clinical evaluation, with registration of signs and symptoms, and tomography through the calculation of volumetry of periapical lesions with the ITK Snap software. Then the teeth were submitted to endodontic treatment. Immediately after the coronal opening, samples were collected from each root canal using paper cones (S1) and submitted to the Checkerboard DNA-DNA hybridization method to investigate bacterial species present. Biomechanical preparation (BMP) was performed and then the AP interstitial fluid was collected (SF1) for the quantification of inflammatory mediators (IL1-ß, IL-6, TNF-α, IL-10, MMPs -2 and -9) by the multiplex assay and the quantification of RvD2 by enzyme immunoassay ELISA. For correlation analysis, Spearman's correlation test was used. Factor analysis was used to identify bacterial aggregation patterns and linear regression was performed to associate factor scores, mediators and patients' clinical characteristics (P=0.05). Positive correlation was found between MMP-2, -9, IL-10, IL-1ß, IL-6 and TNF-α, and between RvD2, MMP-9, IL-10, IL-1ß, IL-6 and TNF- α (P<0.05), and a negative correlation was found between IL-1ß and sensitivity to percussion (P<0.05). The microbiological analysis revealed the presence of bacterial DNA in 100% of the samples analyzed with the presence of at least 2 of the 40 bacterial species investigated (mean = 24.62) per root canal. The most frequently detected species were P. gingivalis, E. nodatum, F. nucleatum spp. vicentii, S. mitis, L. buccallis and A. actinomycetemcomitans. Of the 6 most detected species, 4 of them were gram negative, highlighting the predominance of gram-negative primary endodontic infections with AP. Factor analysis determined 2 patterns of bacterial association and regression results for factor 1 revealed an association with increased pain on percussion (coefficient (coef) ß=0.788) and reduced pain on palpation (coefß=-0.753) and exudate (coefß=-0.479). Higher levels of exudate and lower levels of pain on palpation were associated with factor 2 bacteria (coefß=0.460 and -0.546, respectively). We conclude that inflammatory mediators form an interrelated network and that asymptomatic and symptomatic apical periodontitis has a heterogeneous bacterial etiology and combinations of different species (AU)

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ABSTRACT Introduction To evaluate the relationship between the genetic polymorphism of matrix metalloproteinases 1 and 13 and posttraumatic elbow stiffness, as well as the association of other risk factors with this condition. Materials and methods We evaluated 20 patients with posttraumatic elbow stiffness and 12 controls with traumatic elbow disorders without contracture. Deoxyribonucleic acid (DNA) was obtained from buccal mucosa epithelial cells of the volunteers. The MMP-1 and MMP-13 genotypes were determined using PCR-restriction fragment length polymorphism assays. Results We did not find any significant differences in the frequency of genotypes and alleles between the test and control groups for the polymorphism of metalloproteinases 1 and 13. We observed that genotypes 1G/2G and 2G/2G of MMP-1 were present in 65% (13/20) of patients with articular stiffness and 50% (6/12) of controls (p = 0.599). Genotypes A/A and A/G of MMP-13 were obtained in 95% (19/20) of patients and 91.6% (11/12) of controls (p = 0.491). Among the prognostic factors for elbow stiffness, only immobilization time correlated positively. The mean immobilization time for cases and controls were 16 ± 10 days and 7 ± 7 days, respectively (p = 0.017). Conclusion The genetic polymorphism of MMP-1 at position -1607 and MMP-13 at position -77 was not associated with post-traumatic elbow stiffness. Level of Evidence III; Prognosis Study; Case-Control Study.

RESUMO Introdução Avaliar a relação entre o polimorfismo genético das metaloproteinases 1 e 13 da matriz e a rigidez pós-traumática do cotovelo, assim como a associação de outros fatores de risco com essa condição. Material e método Foram avaliados 20 pacientes com rigidez pós-traumática do cotovelo e 12 controles com distúrbios traumáticos do cotovelo sem contratura. O ácido desoxirribonucleico (DNA) de voluntários foi obtido a partir de células epiteliais da mucosa bucal. Os genótipos MMP-1 e MMP-13 foram determinados usando ensaios de polimorfismo de comprimento de fragmento de restrição de PCR. Resultados Não encontramos diferença significativa na frequência de genótipos e alelos entre os grupos teste e controle para o polimorfismo das metaloproteinases 1 e 13. Observamos que os genótipos 1G/2G e 2G/2G de MMP-1 estavam presentes em 65% (13/20) dos pacientes com rigidez articular e 50% (6/12) dos controles (p = 0,599). Os genótipos A/A e A/G da MMP-13 foram obtidos em 95% (19/20) dos pacientes e 91,6% (11/12) dos controles (p = 0,491). Dentre os fatores prognósticos para rigidez de cotovelo, apenas o tempo de imobilização se correlacionou positivamente. O tempo médio de imobilização para casos e controles foi de 16 ± 10 dias e 7 ± 7 dias, respectivamente (p = 0,017). Conclusões O polimorfismo genético de MMP-1 na posição -1607 e MMP-13 na posição -77 não foi associado à rigidez pós-traumática do cotovelo. Nível de Evidência III; Estudos Prognósticos; Estudo de Caso-Controle.

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O objetivo do presente estudo foi investigar o efeito de soluções contendo fluoreto (F), hexametafosfato de sódio (HMP) e quercetina (QC), sozinhos ou em associação, sobre a erosão dentinária e sobre a inibição de metaloproteinases da matriz (MMPs) -2 e -9, em protocolos in vitro. Blocos de dentina radicular bovina (4 × 4 × 2 mm; n = 96), selecionados por dureza superficial, foram aleatoriamente divididos em 8 grupos experimentais (n = 12/grupo) e tratados 2×/dia (um minuto) com as seguintes soluções: (1) água deionizada (controle negativo); (2) 1100 ppm F ("F"); (3) 1,0% HMP ("HMP"); (4) 0,03% QC ("QC"); (5) F+HMP; (6) F+QC; (7) HMP+QC; e (8) F+HMP+QC. Os blocos foram submetidos a desafios erosivos 4×/dia, por 5 dias (exposição dinâmica a ácido cítrico 50 mmol.l-1 , pH 3,2, 90 s). Em seguida, foram analisados quanto à perda dentinária (perfilometria) e à perda de dureza integrada em profundidade (área sob a curva, ∆KHN). O potencial antiproteolítico das soluções contendo F, HMP e/ou QC foi analisado por zimografia. Os dados de perda dentinária (log10) foram submetidos a ANOVA um critério, seguido do teste de Tukey. Os resultados de ∆KHN (dados brutos) foram submetidos a ANOVA dois critérios, medidas repetidas, seguido do teste HolmSidak (p< 0,05). O menor desgaste erosivo foi observado no grupo F+HMP+QC. Nas menores profundidades (5-30 µm), os blocos tratados com a solução contendo F+HMP+QC apresentaram os maiores valores de ∆KHN. A análise zimográfica mostrou que todos os tratamentos promoveram atividade antiproteolítica total da MMP-2, com exceção da QC administrada sozinha (inibição de 77%). Para MMP-9, todas as soluções contendo HMP e a associação de F+QC apresentaram atividade antiproteolítica total. Conclui-se que a adição de HMP e QC a soluções contendo F levou a uma maior proteção contra a erosão dentinária, tanto em superfície (perda dentinária) quanto em relação ao conteúdo mineral do tecido remanescente (∆KHN), além de promover uma completa inibição da atividade de MMPs -2 e -9 in vitro(AU)

The aim of the present study was to investigate the effect of solutions containing fluoride (F), sodium hexametaphosphate (HMP) and quercetin (QC), alone or in association, on dentin erosion and on the inhibition of matrix metalloproteinases (MMPs) - 2 and -9, using in vitro protocols. Bovine root dentin blocks (4 × 4 × 2 mm; n = 96), selected by surface hardness, were randomly divided into 8 experimental groups (n = 12/group) and treated 2×/day (one minute) with the following solutions: (1) deionized water (negative control); (2) 1100 ppm F ("F"); (3) 1.0% HMP ("HMP"); (4) 0.03% QC ("QC"); (5) F+HMP; (6) F+QC; (7) HMP+QC; and (8) F+HMP+QC. Blocks were submitted to erosive challenges 4×/day for 5 days (dynamic exposure to 50 mmol.l-1 citric acid, pH 3.2, 90 s). They were then analyzed for dentin loss (profilometry) and integrated hardness loss in depth (area under the curve, ∆KHN). The antiproteolytic potential of solutions containing F, HMP and/or QC was analyzed by zymography. Dentin loss results (log10 transformed) were submitted to one-way ANOVA, followed by Tukey's test. ∆KHN data (raw) were submitted to two-way, repeated-measures ANOVA, followed by the Holm-Sidak test (p< 0.05). The lowest dentin erosive wear was promoted by F+HMP+QC. At the lowest depths (5-30 µm), blocks treated with F+HMP+QC showed the highest values of ∆KHN. Zymography analysis showed that all treatments completely inhibited MMP-2 activity, except for QC administered alone (77% inhibition). For MMP-9, all the solutions containing HMP or the association of F+QC promoted total antiproteolytic activity. It was concluded that the addition of HMP and QC to F solutions led to greater protection against dentin erosion, both at the surface (dentin loss) and in relation to the mineral content of the remaining tissue (∆KHN), in addition to promoting a complete inhibition of MMPs -2 and -9 activity in vitro(AU)

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RESUMO Introdução: 40% dos pacientes submetidos à radioterapia após reconstrução de mama por implante de prótese de silicone podem desenvolver encapsulamento da prótese. Diversas estratégias já foram testadas para prevenir a contratura da cápsula com resultados insatisfatórios. Este estudo analisou o efeito do antileucotrieno (AL) tópico na formação de contratura capsular em ratos com implantes de silicone associados à irradiação. Métodos: Foram implantados blocos de silicone na região dorsal em 20 ratas fêmeas, espécie Wistar com peso variando de 200-250g. Os animais foram divididos em dois grupos: controle (injeção de solução fisiológica 0,9% no tecido ao redor do implante) e grupo intervenção (injeção de 10mg de AL no tecido ao redor do implante). Imediatamente após a cirurgia os animais foram irradiados com dose única de 10Gy. Após dois meses, coletamos amostras de cápsulas para análise histológica e análise da expressão gênica dos seguintes biomarcadores: iNOS, VEGF-a e MMP-9. Resultados: A densidade vascular foi menor no grupo AL quando comparado ao grupo controle (55,4±30,0 vs. 81,8±26,7, p=0,05, respectivamente). Da mesma forma, o VEGF-a teve o mesmo comportamento (grupo controle - 0,34±0,1 vs. grupo Al - 0,02±0,001, p=0,04). Conclusão: Este estudo sugeriu que o tratamento com AL diminui a angiogênese em animais submetidos a implantes de silicone e submetidos à radioterapia

ABSTRACT Introduction: 40% of patients undergoing radiotherapy after breast reconstruction by silicone prosthesis implant may develop prosthesis encapsulation. Several strategies have already been tested to prevent capsule contracture with unsatisfactory results. This study analyzed the effect of topical antileukotriene (AL) on capsular contracture formation in rats with silicone implants associated with irradiation. Methods: Silicone blocks were implanted in the dorsal region in 20 female rats Wistar with weights ranging from 200-250g. The animals were divided into two groups: control (injection of 0.9% saline solution into the tissue around the implant) and intervention group (injection of 10mg of AL into the tissue around the implant). Immediately after surgery, the animals were irradiated with a single dose of 10Gy. After two months, we collected capsule samples for histological analysis and gene expression analysis of the following biomarkers: iNOS, VEGF-a and MMP-9. Results: Vascular density was lower in the AL group when compared to the control group (55.4±30.0 vs. 81.8±26.7, p=0.05, respectively). Similarly, VEGF-a had the same behavior (control group - 0.34±0.1 vs. group Al - 0.02±0.001, p=0.04). Conclusion: This study suggested that treatment with AL decreases angiogenesis in animals submitted to silicone implants and underwent radiotherapy.

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Objetivo: O objetivo deste estudo foi investigar o potencial anti-proteolítico contra MMP-2 e MMP-9 e a capacidade de induzir a remineralização da dentina, através de soluções contendo diferentes concentrações de TMP (na sua forma cíclica), diferentes concentrações de F e associação TMP/F. Métodos: Blocos de dentina radicular (6mmx4mmx2mm, n = 130) foram selecionados e divididos aleatoriamente em 13 grupos/soluções experimentais (n = 10): 1) Placebo (sem F/TMP); 2) 0,3% TMP hidrolisado; 3) 1% TMP hidrolisado; 4) 3% TMP hidrolisado; 5) 0,3% TMP; 6) 1% TMP; 7) 3% TMP; 8) 250 ppm F; 9 500 ppm F; 10) 1100 ppm F; 11) 250 ppm F associado a 0,3% TMP; 12) 500 ppm F associado a 1% TMP e 13) 1100 ppm F associado a 3% TMP. A avaliação do potencial anti-proteolítico das soluções experimentais contra as metaloproteinases da matriz dentinária (- 2 e -9) foi realizado por meio da análise zimográfica. Para as análises mecânicas, três áreas foram determinadas para cada espécime: 1- controle (sem tratamento); 2- desmineralizado (cárie artificial); 3- tratado (desmineralizado e submetido a ciclagem de pH por 7 dias, e tratado por 1 min com as soluções experimentais). Os espécimes de dentina foram analisados quanto à porcentagem de recuperação de dureza superficial (%SHR), em dureza transversal (%CSHR) e por microtomografia computadorizada (IMC). Para os dados de dureza e Micro-CT, os resultados foram analisados por ANOVA de medidas repetidas seguida do teste de Student-Newman-Keuls (p <0,05). Resultados: A análise zimográfica mostrou que 1100 ppm F + 3% de TMP promoveu inibição completa da atividade gelatinolítica (MMP-2; MMP-9). Os grupos com TMP não hidrolisados apresentaram efeito remineralizador (% SHR e % CSHR) superior aos grupos hidrolisados. O grupo 1100F + TMP promoveu a maior %SHR e %CSHR entre todos os grupos (p <0,001), sendo respectivamente 15,4 e 10,5%, superior ao grupo 1100F. Os grupos contendo 1100F e 1100F + 3%TMP apresentaram maior concentração mineral. Conclusão: Com base nos resultados, 3% TMP atua como um agente antiproteolítico contra metaloproteinases da matriz dentinária. Além disso, quando suplementado com 1100F, 3% TMP potencializa a remineralização, aumentando significativamente as propriedades mecânicas da dentina tratada. Os tratamentos com TMP não hidrolisado e associado ao F maior que as soluções fluoretadas sem o TMP. Significância clínica: Dessa forma, uma potencial estratégia preventiva e terapêutica pode ser considerada na clínica odontológica, principalmente na terapia da cárie radicular, como também para método preventivo de lesões iniciais de cárie dentinária ou no pré-tratamento da dentina, utilizando-os como agentes cross-linker em procedimentos restauradores(AU)

Objective: The aim of this study was to investigate the anti-proteolytic potential against MMP-2 and MMP-9 and the ability to induce dentin remineralization, through solutions containing different concentrations of TMP (in its cyclic form), different concentrations of F and TMP / F association. Methods: Root dentin blocks (6mmx4mmx2mm, n = 130) were selected and randomly divided into 13 groups / experimental solutions (n = 10): 1) Placebo (without F / TMP); 2) 0.3% hydrolyzed TMP; 3) 1% hydrolyzed TMP; 4) 3% hydrolyzed TMP; 5) 0.3% TMP; 6) 1% TMP; 7) 3% TMP; 8) 250 ppm F; 9,500 ppm F; 10) 1100 ppm F; 11) 250 ppm F associated with 0.3% TMP; 12) 500 ppm F associated with 1% TMP and 13) 1100 ppm F associated with 3% TMP. The evaluation of the antiproteolytic potential of experimental solutions against dentin matrix metalloproteinases (- 2 and -9) was carried out by means of zymographic analysis. For mechanical analysis, three areas were determined for each specimen: 1- control (without treatment); 2- demineralized (artificial caries); 3- treated (demineralized and subjected to pH cycling for 7 days, and treated for 1 min with the experimental solutions). The dentin specimens were analyzed for the percentage of recovery of superficial hardness (% SHR), in crosssectional hardness (% CSHR) and by computed microtomography (∆IMC). For the hardness and Micro-CT data, the results were analyzed by repeated measures ANOVA followed by the Student-Newman-Keuls test (p <0.05). Results: The zymographic analysis showed that 1100 ppm F + 3% TMP promoted complete inhibition of gelatinolytic activity (MMP-2; MMP-9). The groups with non-hydrolyzed TMP showed a remineralizing effect (% SHR and % CSHR) superior to the hydrolyzed groups. The 1100F + TMP group promoted the highest % SHR and % CSHR among all groups (p <0.001), being 15.4 and 10.5%, respectively, higher than the 1100F group. The groups containing 1100F and 1100F + 3% TMP showed higher mineral concentration. Conclusion: Based on the results, 3% TMP acts as an antiproteolytic agent against dentinal matrix metalloproteinases. In addition, when supplemented with 1100F, 3% TMP enhances remineralization, significantly increasing the mechanical properties of the treated dentin. Treatments with non-hydrolyzed TMP and associated with F greater than fluoridated solutions without TMP. Clinical significance: Thus, a potential preventive and therapeutic strategy can be considered in the dental clinic, mainly in the treatment of root caries, as well as for the preventive method of initial lesions of dental caries or in the pretreatment of dentin, using them as agents cross-linker in restorative procedures(AU)

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A inibição de alvos específicos como metaloproteinase de matriz (MMP) e histona desacetilase (HDAC) é amplamente estudada para impedir o progresso do câncer. Foi estabelecido que a inibição concomitante de MMP e HDAC é eficaz no combate de tumores sólidos e hematológicos. Ambos os alvos possuem um íon Zn2+ em seu sítio ativo, fundamental para a atividade destas enzimas. A alta afinidade dos inibidores conhecidos de MMP e de HDAC é conferida, principalmente, por um potente grupo ligante de zinco (ZBG). O ácido hidroxâmico é o ZBG mais potente conhecido atualmente, entretanto, este apresenta instabilidade farmacocinética, levando a ineficácia e genotoxicidade em testes clínicos. Frente a este contexto, o presente trabalho teve como objetivo o planejamento, síntese, modelagem molecular e avaliação biológica de novos inibidores duais MMP/HDAC não-hidroxamatos. Os compostos foram planejados utilizando estratégias de hibridação molecular, a partir de arcabouços provenientes inibidores de HDAC e MMP, gerando compostos arilsulfonamídicos com variações no tipo de ZBG inserido e na sua respectiva posição relativa na estrutura geral. Foram sintetizados sete análogos, em duas a três etapas reacionais, utilizando métodos de sulfonilação e acoplamento com agentes condensantes, partindo dos ésteres para e meta aminobenzoicos. Os rendimentos globais variaram de 25% a 55% e os produtos obtidos foram caracterizados por RMN 1H e 13C, LC/MS, CLAE e ponto de fusão. Os compostos tiveram sua atividade citotóxica avaliada em células HOG (oligodendroma) e T98G (glioblastoma), dentre os quais o 6a, que possui o ZBG 2-amino anilida, foi o mais promissor, apresentando atividade nas duas linhagens na casa de nM. Ensaios de coordenação com Fe2+ comprovaram a capacidade quelante dos análogos contendo ácido hidroxâmico e dos demais compostos citotóxicos, 4a e 4b (ZBG-2, salicilal-hidrazona), o que não foi observado para o composto 6a. Os estudos de ancoramento molecular permitiram sugerir um modo de interação para todos os ZBG propostos frente aos respectivos alvos (HDAC e MMP), sendo observado que o ZBG 4 (2-amino anilida) faria a interação de modo monodentado com a HDAC, enquanto não seria possível o encaixe no sítio catalítico da MMP. Conclui-se, portanto, que o planejamento proposto permitiu a obtenção de compostos promissores como antitumorais, e que a substituição do ácido hidroxâmico por outros ZBG fornece moléculas ativas frente a células tumorais. Entretanto, a avaliação biológica frente à MMP e HDAC é necessária para confirmar o mecanismo de ação proposto

Inhibition of specific targets such as matrix metalloproteinase (MMP) and histone deacetylase (HDAC) is extensively studied regarding arrest cancer growth. Particularly, concomitant inhibition of MMP and HDAC is effective against solid and hematologic tumors. Both targets have an ion Zn2+ at their catalytic site, which is essential for respective enzymatic activity. High affinity of known MMP and HDAC inhibitors is mainly provided by a potent zinc binding group (ZBG). Hydroxamic acid is the most potent ZBG currently known; however, it presents low pharmacokinetics stability, which results in its ineffectiveness and genotoxicity along clinical trial. So, the aim of this work comprised the design, synthesis, molecular modeling and biological evaluation of novel potential non-hydroxamate dual HDAC/ MMP inhibitors. Compounds were designed by molecular hybridation, employing scaffolds from HDAC and MMP inhibitors, which provided arylsulfonamides with variation about the ZBG type and its respective relative position in the general structure. Seven compounds were synthesized, in two to three reaction steps, through methods that comprise sulfonilation and coupling with condensing agents, using para and meta-aminobenzoic esters as starting material. Compounds showed global yields around 25-55 % and were characterized by 1H and 13C NMR, LC/MS, HPLC and melting point. Compounds were evaluated about their cytotoxicity against HOG (oligodendroma) and T98G (glioblastoma) cells, which 6a, with ZBG 2-aminobenzamide, was the most promising molecules, presenting activity against both cell lines at nM range. Coordination assays with Fe2+ proved the chelating capacity of hydroxamate analogues as well as the cytotoxic compounds, 4a and 4b (ZBG-2, salicylal-hydrazone), which was not observed about 6a. Molecular docking allowed to suggest an interaction model for all proposed ZBG with the respective targets (MMP and HDAC), showing that (ZBG-4) 2-aminobenzamide interacts with HDAC by monodentate way, but does not docks at MMP catalytic site. We conclude that the proposed design allowed obtaining promising compounds as antitumors agents, and the replacement of hydroxamic acid by other ZBG provide active molecules against tumor cells. However, biological evaluation against MMP and HDAC is necessary to confirm the proposed action mechanism

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The aim of this study was to perform the immunostaining of MMP-9 and MMP-2 and its inhibitors, TIMP-1 and TIMP-2, on normal and neoplastic canine mammary tissue in order to evaluate the behavior of these proteins in extracellular matrix (ECM) remodeling in different neoplastic mammary types. Thus, 48 samples of canine mammary tissue were analyzed, 14 of which complex carcinomas, 13 tubulopapillary carcinomas, six single adenomas and 15 normal mammary tissue. There were differences in MMP-9, TIMP-1 and TIMP-2 according to mammary histomorphology, and MMP-9 presented increased immunoexpression in epithelial and stromal cells in tubulopapillary and complex carcinomas. TIMP-1 exhibited reduced immunostaining in the stromal cells of the complex carcinomas and TIMP-2 enhanced immunostaining in the epithelial cells of tubulopapillary carcinomas. There was a positive correlation between MMP-9 and TIMP-1 in epithelial and stromal cells regarding immunostaining intensity and number of labeled cells in the normal breast. There was a positive correlation between MMP-9 and TIMP-2 in the epithelial cells of tubulopapillary carcinomas. It is concluded that balanced activity between MMP-9, MMP-2, TIMP-1 and TIMP-2 maintains normal canine mammary tissue homeostasis while increased immunoexpression of MMP-9 and TIMP-2 and reduced TIMP- 1 in carcinomas suggest a favorable condition for tumor evolution.(AU)

Este estudo teve como objetivo realizar a imunomarcação de MMP-9 e MMP-2 e seus inibidores, TIMP-1 e TIMP-2, no tecido mamário canino normal e neoplásico, a fim de avaliar o comportamento dessas proteínas no remodelamento da matriz extracelular (MEC) em diferentes tipos neoplásicos mamários. Foram analisadas 48 amostras de tecido mamário canino, sendo 14 carcinomas complexos, 13 carcinomas tubulopapilares, seis de adenomas simples e 15 mamas sem alterações. Houve diferença em MMP-9, TIMP-1 e TIMP-2 de acordo com a histomorfologia mamária, sendo que MMP-9 apresentou maior imunoexpressão em células epiteliais e estromais em carcinomas tubulopapilares e complexos. TIMP-1 exibiu menor imunomarcação nas células estromais dos carcinomas complexos e TIMP-2 maior imunomarcação nas células epiteliais dos carcinomas tubulopapilares. Houve correlação positiva entre MMP-9 e TIMP-1 nas células epiteliais e estromais quanto à intensidade de imunomarcação e número de células marcadas na mama normal. Houve correlação positiva entre MMP-9 e TIMP-2 nas células epiteliais dos carcinomas tubulopapilares. Conclui-se que a atividade equilibrada entre MMP-9, MMP-2, TIMP-1 e TIMP-2 mantém a homeostase do tecido mamário canino normal enquanto a imunoexpressão aumentada de MMP-9 e TIMP-2 e a imunoexpressão reduzida de TIMP-1 nos carcinomas sugere condição propícia à evolução tumoral.(AU)

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Objetivos: Evaluar la resistencia de unión a la microtracción en dentina humana de un sistema adhesivo universal con clorhexidina en su composición, en modo de grabado y lavado en 2 pasos, y en modo de autograbado. Metodología: 20 terceros molares divididos aleatoriamente en 4 grupos según el tipo de sistema adhesivo utilizado (Single Bond Universal®, 3MESPE y Peak Universal Bond®, Ultradent Products) y modo de uso (grabado total y autograbado). Se confeccionaron cuerpos de prueba sometidos al ensayo de microtracción utilizando una máquina de ensayos universales. Resultados: No se encontraron diferencias estadísticamente significativas entre los cuatro grupos estudiados. Conclusiones: La resistencia de unión de una resina compuesta a dentina humana no fue afectada por el uso de un sistema adhesivo universal que contiene clorhexidina en su composición aplicado en los modos de grabado total y autograbado

Objectives: To evaluate the microtensile bond strength to human dentin of chlorhexidine containing universal adhesive system applied in the total-etch and selfetch modes. Methods: Twenty third molars were randomly divided into four groups according to the universal adhesive system (Single Bond Universal ®, 3M ESPE and Peak Universal Bond®, Ultradent) and application mode used (total-etch and self-etch). Specimens were prepared and subjected to a microtensile bond strength using a MTS SANS universal testing machine. Results: No statistically significant differences were found in the microtensile bond strength between the four groups studied. Conclusions: The bond strength of a composite resin to human dentin was not affected by the use of a universal adhesive system with chlorhexidine in its composition applied in the total-etch and self-etch modes.

Objetivos: Avaliar a resistência de união á microtração na dentina humana de um sistema adesivo universal com clorexidina na sua composição, no modo de condicionamento total em dois passos e no modo autocondicionante. Metodologia: 20 terceiros molares foram divididos aleatoriamente em 4 grupos, de acordo com o tipo de sistema adesivo utilizado (Single Bond Universal®, 3MESPE e Peak Universal Bond®, Ultradent Products) e modo de uso (condicionamento total e autocondicionante). Os corpos de prova criados foram submetidos ao teste de microtração utilizando uma máquina de ensaios universal. Resultados: Não foram encontradas diferenças estatisticamente significativas entre os quatro grupos estudados. Conclusões: A resistência de união da resina composta à dentina humana não foi afetada pelo uso de um sistema adesivo universal contendo clorexidina em sua composição, aplicado nos modos de condicionamento total ou autocondicionamento.

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Resumo Fundamento A obesidade é um fator de risco para complicações médicas, incluindo o sistema cardiovascular. Há informações limitadas sobre o colágeno no coração obeso. Nosso estudo anterior demonstrou uma redução dos níveis proteicos de colágeno miocárdico tipo I em ratos obesos alimentados com uma dieta com alto teor de gordura durante 34 semanas. No entanto, os mecanismos responsáveis pelos níveis baixos não estão completamente elucidados. Objetivo O objetivo deste estudo foi testar a hipótese de que a redução do colágeno tipo I está associada ao aumento da atividade da metaloproteinase-2 (MMP-2), a qual está ligada à elevação de leptina no miocárdio de ratos obesos. Métodos Ratos Wistar machos com 30 dias de idade foram randomizados em dois grupos: controle (dieta padrão) e obeso (dieta com alto teor de gordura), e alimentados durante 34 semanas. Foram avaliados as características gerais dos animais e os perfis metabólicos e endócrinos. Foram avaliados as expressões proteicas miocárdicas de colágeno tipo I, leptina e inibidores teciduais de metaloproteinases (TIMP), bem como a atividade da MMP-2. O teste de correlação de Pearson foi aplicado para determinar as associações entre variáveis. O nível de significância foi de 5%. Resultados Os animais obesos apresentaram índice de adiposidade mais elevado em comparação ao controle. Foram observadas comorbidades como intolerância à glicose, hiperinsulinemia, resistência à insulina, hiperleptinemia e hipertensão nos ratos obesos. A obesidade reduziu o colágeno tipo I, TIMP-1 e TIMP-2, e aumentou a leptina e a MMP-2 no miocárdio. Houve uma correlação negativa entre o colágeno tipo I e a MMP-2 e uma correlação positiva entre a leptina e a MMP-2. Conclusão Foi confirmada a hipótese de que a redução do colágeno tipo I está associada ao aumento da atividade da MMP-2 e da expressão de leptina no miocárdio de ratos obesos. (Arq Bras Cardiol. 2020; 115(1):61-70)

Abstract Background Obesity is a risk factor for medical complications, including the cardiovascular system. There is limited information on collagen in the heart in obesity. Our previous study showed decreased protein levels of myocardial collagen type I in obese rats fed a high-fat diet for 34 weeks. However, the mechanisms responsible for low levels are not fully elucidated. Objective The purpose of this study was to test the hypothesis that the reduction in collagen type I is associated with increased metalloproteinase-2 (MMP-2) activity, which is linked to elevated leptin in the myocardium of obese rats. Methods Thirty-day-old male Wistar rats were randomized into two groups, control (standard diet) and obese (high-fat diet), and fed for 34 weeks. The general animal characteristics and metabolic and endocrine profiles were evaluated. Myocardial protein expressions of collagen I, leptin, tissue inhibitors of metalloproteinases (TIMP), and MMP-2 activity were assessed. Pearson correlation was employed to determine the associations between variables. The level of significance was 5%. Results The obese animals had increased adiposity index compared to control. Comorbidities such as glucose intolerance, hyperinsulinemia, insulin resistance, hyperleptinemia, and hypertension were observed in obese rats. Obesity reduced collagen I, TIMP-1, and TIMP-2, and it increased leptin and MMP-2 in the myocardium. There was a negative correlation between collagen I and MMP-2 and a positive correlation between leptin and MMP-2. Conclusion The hypothesis was confirmed; the reduction in collagen type I is associated with increased MMP-2 activity and leptin expression in the myocardium of obese rats. (Arq Bras Cardiol. 2020; 115(1):61-70)

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The aim of this study was to perform the immunostaining of MMP-9 and MMP-2 and its inhibitors, TIMP-1 and TIMP-2, on normal and neoplastic canine mammary tissue in order to evaluate the behavior of these proteins in extracellular matrix (ECM) remodeling in different neoplastic mammary types. Thus, 48 samples of canine mammary tissue were analyzed, 14 of which complex carcinomas, 13 tubulopapillary carcinomas, six single adenomas and 15 normal mammary tissue. There were differences in MMP-9, TIMP-1 and TIMP-2 according to mammary histomorphology, and MMP-9 presented increased immunoexpression in epithelial and stromal cells in tubulopapillary and complex carcinomas. TIMP-1 exhibited reduced immunostaining in the stromal cells of the complex carcinomas and TIMP-2 enhanced immunostaining in the epithelial cells of tubulopapillary carcinomas. There was a positive correlation between MMP-9 and TIMP-1 in epithelial and stromal cells regarding immunostaining intensity and number of labeled cells in the normal breast. There was a positive correlation between MMP-9 and TIMP-2 in the epithelial cells of tubulopapillary carcinomas. It is concluded that balanced activity between MMP-9, MMP-2, TIMP-1 and TIMP-2 maintains normal canine mammary tissue homeostasis while increased immunoexpression of MMP-9 and TIMP-2 and reduced TIMP- 1 in carcinomas suggest a favorable condition for tumor evolution.

Este estudo teve como objetivo realizar a imunomarcação de MMP-9 e MMP-2 e seus inibidores, TIMP-1 e TIMP-2, no tecido mamário canino normal e neoplásico, a fim de avaliar o comportamento dessas proteínas no remodelamento da matriz extracelular (MEC) em diferentes tipos neoplásicos mamários. Foram analisadas 48 amostras de tecido mamário canino, sendo 14 carcinomas complexos, 13 carcinomas tubulopapilares, seis de adenomas simples e 15 mamas sem alterações. Houve diferença em MMP-9, TIMP-1 e TIMP-2 de acordo com a histomorfologia mamária, sendo que MMP-9 apresentou maior imunoexpressão em células epiteliais e estromais em carcinomas tubulopapilares e complexos. TIMP-1 exibiu menor imunomarcação nas células estromais dos carcinomas complexos e TIMP-2 maior imunomarcação nas células epiteliais dos carcinomas tubulopapilares. Houve correlação positiva entre MMP-9 e TIMP-1 nas células epiteliais e estromais quanto à intensidade de imunomarcação e número de células marcadas na mama normal. Houve correlação positiva entre MMP-9 e TIMP-2 nas células epiteliais dos carcinomas tubulopapilares. Conclui-se que a atividade equilibrada entre MMP-9, MMP-2, TIMP-1 e TIMP-2 mantém a homeostase do tecido mamário canino normal enquanto a imunoexpressão aumentada de MMP-9 e TIMP-2 e a imunoexpressão reduzida de TIMP-1 nos carcinomas sugere condição propícia à evolução tumoral.

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As metaloproteinases (MMPs) são enzimas colagenolítcas endó- genas, capazes de degradar as fibrilas de colágeno presentes na dentina, gerando falhas da interface adesiva. Foram propostos agentes de cross-linking para diminuir essa degradação. O objetivo desta revisão de literatura foi analisar a ação de diferentes agentes de cross-linking sobre as MMPs. A seleção dos artigos foi realizada por meio de uma busca na base de dados PubMed/MEDLINE. A amostra final foi composta por 40 estudos publicados entre 2018 e 2010. Os estudos atuais apresentaram os agentes de cros-s-linking (cabordiimida, glutaraldeído, proantocianidina, riboflavina/ UV-A e quitosana) com vantagens como inespecificidade em relação aos tipos de MMPs, aumento da resistência da fibra colágena e possibilidade de bloquear o sítio de clivagem da enzima. Ob- servou-se que a cabordiimida, riboflavina/UV-A, o glutaraldeído, a proantocianidina e a quitosana apresentaram resultados positivos na diminuição da degradação da interface adesiva. A carbodiimida e riboflavina/UV-A não são citotóxicas, diferentemente do glutaraldeído. A proantocianidina, quando incorporada no adesivo, apesar de interferir na polimerização dos monômeros adesivos, pode ser efetiva quando utilizada incorporada ao condicionamen- to ácido. A quitosana é capaz de reforçar as fibrilas de colágeno. Assim, foi possível conhecer mais sobre a ação dos agentes de cross-linking disponíveis. No entanto, há necessidade de mais pesquisas sobre esses agentes.

Metalloproteases are endogenous collagenolytic enzymes, capable of degrading the collagen fibrils present in the dentin, producing adhesive interface failures. Cross-linking agents has been proposed to reduce this degradation. The aim of this literature review was to analyze the action of different cross-linking agents on MMPs. The search was conducted in the PubMed database. The final sample consisted of 40 studies published between 2018 and 2010. Current studies have shown cross-linking agents (cabordiimide, glutaraldehyde, proanthocyanidin, riboflavin / UV-A and chitosan) present some advantages as non- specificity to type of MMPs, collagen fiber's toughness development and prevent bonding to the cleavage site of the enzyme. For this reason, it is necessary to know the action of the available cross-linking agents. It was observed that Cabordiimide, riboflavin / UV-A, glutaraldehyde, proanthocyanidin and chitosan presented positive results in reducing degradation of the adhesive interface. Carbodiimide and riboflavin / UV-A are non-cytotoxic, unlike glutaraldehyde. Proanthocyanidin incorporated into the adhesive interferes with the polymerization of the adhesive monomers. Chitosan is able to reinforce collagen fibrils. Thus, it was possible to know more about the action of the available cross-linking agents. However, there is a need for more research on these agents.

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Objectives: To evaluate the inflammatory tissue response and matrix metalloproteinase (MMP)-2 and -9 expression in the pulp-dentin complex in response to RelyX TM Unicem (RU) and Ketac Cem TM Easymix (KC) cements. Methods : Class V cavities were prepared in 56 teeth from six dogs, and indirect pulp capping was performed using RU (n=20), KC (n=20), zinc oxide, and eugenol cement (control, n=16). At 7 and 70 days following indirect pulp capping, the animals were euthanized, and tissues were removed for histological evaluation. The distance from the cavity floor to the odontoblastic layer was measured, and the numbers of inflammatory cells, fibroblasts, and odontoblasts were counted in pulp tissue. MMP-2 and -9 expression levels were immunohistochemically assessed. Statistical analyses were performed for all experiments (significance level=5%). Results : The dentin remnant thickness between the cavity floor and the pulp chamber was similar for all materials, ranging from 469 to 739 µm (p>0.05). At 7 days, KC and RU induced a small inflammatory response in the pulp-dentin complex, similar to the control (p>0.05). At 70 days, RU induced a tissue response characterized by fewer odontoblasts and more mononuclear cells (p<0.05), whereas KC induced a response similar to the control (p>0.05). Lutingagents induced low levels of MMP-2 and MMP-9 expression, similar to the control (p>0.05). Conclusion : KC and RU luting agents are compatible materials for use in deep cavities close to dental pulp tissue, although RU led to a slightly diminished odontoblastic population with a higher percentage of mononuclear cells.

Objetivo : Avaliar a resposta tecidual inflamatória e a expressão de metaloproteinase de matriz (MMP) -2 e -9 no complexo polpa-dentina em resposta aos cimentos RelyX TM Unicem (RU) e Ketac Cem TM Easymix (KC). Métodos : Cavidades classe V foram preparadas em 56 dentes de seis cães, e capeamento pulpar indireto foi realizado com cimento de RU (n = 20), KC (n = 20), óxido de zinco e eugenol (controle, n = 16). Aos 7 e 70 dias após o capeamento pulpar indireto, os animais foram eutanasiados, e os tecidos foram removidos para avaliação histológica. A distância entre o assoalho da cavidade e a camada odontoblástica foi medida, e os números de células inflamatórias, fibroblastos e odontoblastos foram contados no tecido pulpar. Os níveis de expressão de MMP-2 e -9 foram avaliados por imuno-histoquímica. Análises estatísticas foram realizadas para todos os experimentos (nível de significância = 5%). Resultados : A espessura da dentina remanescente entre o assoalho da cavidade e a câmara pulpar foi semelhante para todos os materiais, variando de 469 a 739 µm (p> 0,05). Aos 7 dias, KC e RU induziram uma pequena resposta inflamatória no complexo polpa-dentina, semelhante ao controle (p> 0,05). Aos 70 dias, a RU induziu uma resposta tecidual caracterizada por menos odontoblastos e mais células mononucleares (p <0,05), enquanto o KC induziu uma resposta semelhante ao controle (p> 0,05). Os agentes cimentantes induziram baixos níveis de expressão de MMP-2 e MMP-9, semelhantes ao controle (p> 0,05). Conclusão : Os agentes cimentantes KC e RU são materiais compatíveis para uso em cavidades profundas próximas ao tecido da polpa dentária, embora a UR tenha levado a uma população odontoblástica levemente diminuída, com maior porcentagem de células mononucleares.

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Objetivo: realizar uma revisão de literatura acerca da eficácia de utilização da clorexidina (CHX) e de outros tipos de inibidores de metaloproteinases (MMPs) na resistência de união da camada híbrida. Métodos: a busca bibliográfica foi realizada na base de dados PubMed, nos meses de novembro e dezembro de 2018. A pesquisa ocorreu em três fases, com os descritores previamente selecionados. Foram incluídas publicações dos últimos 10 anos no formato de pesquisas científicas realizadas in vitro ou in vivo. Após análise, obedecendo aos critérios de inclusão e exclusão, foram incluídos sete estudos na presente revisão. Resultados/Revisão de literatura: na interface adesiva, os estudos mostram que as MMPs são ativadas durante a etapa de ataque ácido realizada nos protocolos de aplicação de sistemas adesivos, podendo ser ativada tanto por procedimentos adesivos com condicionamento ácido prévio como por sistemas adesivos autocondicionantes. Além da CHX, outras substâncias foram pesquisadas e se mostraram eficazes na inibição de MMPs. Considerações finais: por meio da inibição da atividade das MMPs, é possível obter uma maior durabilidade da interface adesiva e uma menor degradação hidrolítica do colágeno presente na camada híbrida. (AU)

Objective: to perform a literature review on the efficacy of chlorhexidine (CHX) and other types of metalloproteinase inhibitors (MMPs) on hybrid layer bond strength. Methods: the bibliographic search was performed in PubMed, in the months of november and december of 2018. The research was carried out in three phases with the previously selected descriptors. Publications have been included in the last 10 years in the form of scientific research conducted in vitro or in vivo. After analysis, following the inclusion and exclusion criteria, 7 studies were included in the present review. Results / Literature review: in the adhesive interface, the studies show that the MMPs are activated during the acid attack stage carried out in the application protocols of adhesive systems, and can be activated either by adhesive procedures with prior acid conditioning or self-etching adhesive systems. In addition to CHX, other substances were investigated and shown to be effective in inhibiting MMPs. Final considerations: through the inhibition of the MMPs activity it is possible to obtain a greater durability of the adhesive interface and lower hydrolytic degradation of the collagen present in the hybrid layer. (AU)

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This study evaluated the activity of the ethanolic extract of pequi peel (EEPP) and immunostaining with matrix metalloproteinases 2 and 9 (MMP2 and MMP9), and tissue inhibitor of metalloproteinases 1 and 2 (TIMP1 and TIMP2) in the myocardium of rats subjected to acute cardiotoxicity using doxorubicin (DOX). Thirty Wistar rats (six groups of five animals) were used as follows: sham group (SG), water and saline; group G1, 16 mg/kg of DOX and 300 mg/kg of EEPP for 17 days; group G2, 16 mg/kg of DOX and 600 mg/kg of EEPP for 17 days; group G3, 16 mg/kg of DOX and 300 mg/kg of EEPP for 10 days; group G4, 16 mg/kg of DOX and 600 mg/kg of EEPP for 10 days; and control group (CG), 16 mg/kg of DOX. Three days after administering DOX (day 17), euthanasia was performed, and samples were collected for anatomopathological analysis. Myocyte vacuolar degeneration, cardiomyocyte disorganization and myofibrillar fragmentation, necrosis, mononuclear inflammatory infiltrate, Anitschkow cells, fibrosis, congestion, and edema were observed in the hearts of DOX recipients. In G1 and G2, EEPP attenuated myocyte vacuolar degeneration whereas in G4, EEPP attenuated cardiomyocyte disorganization. The percentage of cells immunoreactive for TIMP1 was higher in G1. It was concluded that EEPP minimizes the deleterious effects of DOX on rat myocardium. Doses of 300 and 600 mg/kg for 17 days attenuate the vacuolar degeneration of myocytes. The dose of 600 mg/kg for 10 days reduced cardiomyocyte disorganization, and the dose of 300 mg/kg for 17 days increased TIMP1 expression in the myocardium of DOX-treated rats.(AU)

Avaliou-se a ação do extrato etanólico da casca do pequi (EECP) e a imunomarcação de metaloproteinases de matriz 2 e 9 (MMP2 e MMP9), e inibidores teciduais das metaloproteinases de matriz 1 e 2 (TIMP1 e TIMP2), no miocárdio de ratos submetidos à cardiotoxicidade aguda pela doxorrubicina (DOX). Utilizaram-se 30 ratos Wistar, em seis grupos de cinco animais, sendo Grupo Sham (GS) água e salina; (G1) 16 mg/kg de DOX e 300 mg/kg de EECP por 17 dias; (G2) 16 mg/kg de DOX e 600 mg/kg de EECP por 17 dias; (G3) 16 mg/kg de DOX e 300 mg/kg de EECP por 10 dias; (G4) 16 mg/kg de DOX e 600 mg/kg de EECP por 10 dias; e grupo controle (GC) 16 mg/kg de DOX. Três dias após a aplicação da DOX, no dia 17, realizaram-se a eutanásia e colheita de amostras para análises antomopatológicas. No coração dos ratos que receberam DOX observaram-se degeneração vacuolar miocítica, desorganização dos cardiomiócitos e fragmentação das miofibrilas, necrose, infiltrado inflamatório mononuclear, células de Anitschkow, fibrose, congestão e edema. Nos grupos G1 e G2 o EECP atenuou a degeneração vacuolar miocítica e no G4 atenuou a desorganização dos cardiomiócitos. TIMP1 foi constatada em maior porcentagem de células marcadas no grupo de ratos que recebeu 300 mg/kg do EECP por 17 dias. Conclui-se que o EECP minimiza os efeitos deletérios da DOX no miocárdio de ratos. Nas doses de 300 e 600 mg/kg por 17 dias atenua a degeneração vacuolar miocítica, a 600 mg/kg por 10 dias reduz a desorganização dos cardiomiócitos e a 300 mg/kg por 17 dias aumenta a expressão de TIMP1 no miocárdio de ratos tratados com DOX.(AU)

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Objective: The objective of this study was to evaluate the tissue response and expression of matrix metalloproteinases (MMP) -2 and -9 to resinous and glass ionomer cements in direct contact with the subcutaneous connective tissue. Methods: RelyXTM Unicem resinous cement (RC; n=30), KetacTM Cem Easymix glass ionomer cement (GI; n=30), and polyethylene empty tubes (control; n=30) were implanted in the dorsal subcutaneous tissue of isogenic BALB/c mice, and the tissues were biopsied after 7, 21, and 63 days for histological analysis. The inflammatory cells and fibroblasts were counted, and the fibrous capsule thickness was measured. MMP -2 and MMP-9 expression levels were investigated by immunohistochemistry. Data were analyzed statistically (significance level=5%). Results: We found that RC induced a low inflammation at day 7 and 21, which was increased at day 63 (p<0.05). GI induced a more intense mononuclear inflammatory response at day 7 and 21 (p<0.05), which was reduced at day 63 to levels similar to the control (p>0.05). The fibrous capsule thickness was thin for RC, GI, and control (p>0.05).MMP-2 was detected early for GI and RC and decreased afterwards. MMP-9 presented a similar pattern for GI, whereas the MMP -9 expression was late for RC. Conclusion: Resinous cementRelyXTM Unicem induced an inflammatory response and late MMP -9 expression in the subcutaneous connective tissue that was different from that induced by KetacTM Cem Easymixglass ionomer cement.

Objetivo: Avaliar a resposta tecidual e a expressão de metaloproteinases da matriz (MMP) -2 e -9 frente a um cimento resinoso e um cimento ionomérico, após implantação no tecido conjuntivo subcutâneo de camundongos. Métodos: O cimento resinoso RelyXTM Unicem (CR; n=30), o cimento ionomérico KetacTM Cem Easymix (CI; n=30) e tubo de polietileno vazio (controle; n=30) foram implantados no tecido subcutâneo dorsal de camundongos isogênicos BALB/c e os tecidos removidos para análise histológica após 7, 21 e 63 dias. Foram analisadas a resposta celular local, por meio da contagem de células inflamatórias e a espessura da cápsula fibrosa. A expressão de MMP -2 e -9 foi investigada por meio de imunohistoquímica. Os dados foram submetidos à análise estatística (α=5%). Resultados: Foi observado que CR induziu uma inflamação leve aos 7 e 21 dias com aumento do número de células inflamatórias aos 63 dias (p<0,05). CI induziu uma resposta inflamatória mononuclear mais intensa aos 7 e 21 dias (p<0,05), com redução do infiltrado aos 63 dias, semelhante ao observado no controle (p>0,05). Em todos os grupos a espessura da cápsula foi considerada fina (p>0,05). MMP -2 foi detectada em períodos precoces para CR e CI, com diminuição com o passar do tempo. MMP -9 apresentou um padrão semelhante ao controle para o CI, enquanto para o CR houve aumento com o passar do tempo. Conclusão: O cimento resinoso RelyXTM Unicem induziu uma resposta inflamatória e a expressão de MMP -9 mais tardia no tecido conjuntivo subcutâneo que foi diferente da resposta induzida pelo cimento ionomérico KetacTM Cem Easymix.

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SUMMARY OBJECTIVE: This study aims at investigating the expressions of TOLL-like receptor 4 (TLR-4) and matrix metalloproteinase 9 (MMP-9)/ tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (TIMP-1) in pulmonary blood vessels with chronic obstructive pulmonary disease (COPD) and their relationships with pulmonary vascular remodelling (PVR). METHODS: 60 para-tumour tissues were divided into the COPD group and the control group (n=30); the inflammations, pulmonary artery wall area/total artery area (WA%), and wall thickness/vascular outer diameter (WT%) were compared. The expressions of TLR-4, MMP-9/TIMP-1, and PCNA in pulmonary vascular smooth muscle cells were detected, and their relationships with PVR were then analysed. RESULTS: The inflammations (1.6±0.8), WA% (44.0±6.4), and WT% (27.3±3.3) in the COPD group were higher than in the control group (0.3±0.5, 26.1±2.8, 15.6±1.8), and the expressions of TLR-4 (31.4±147) and MMP-9/TIMP-1 (2.2±2.6) were increased compared to the control group (4.7±4.5, 1.9±12). Correlation analysis: TLR-4 and MMP-9/TIMP-1 were positively correlated with the inflammations (r=0.18, P<0.01), WA% (r=0.68, P<0.01), and WT% (r=0.73, P<0.01), as well as positively correlated with the expression of PCNA (r=0.44, P<0.01); the upregulation of TLR-4 was positively correlated with the expressions of MMP-9 and TIMP-1. CONCLUSIONS: The upregulation of TLR-4 in the pulmonary arterial smooth muscle cells of COPD patients could promote the inflammations and the MMP-9 expression, thus causing abnormal degradation of extracellular matrix, so it played an important role in the process of PVR.

RESUMO OBJETIVO: Este estudo tem como objetivo investigar as expressões de TOLL-like receptor 4 (TLR-4) e metaloproteinase 9 da matriz (MMP-9)/inibidor de tecido da metaloproteinase 1 (TIMP-1) em vasos sanguíneos pulmonares com doença pulmonar obstrutiva crônica (DPOC) e suas relações com o remodelamento vascular pulmonar (PVR). MÉTODOS: Sessenta tecidos paratumorais foram divididos em grupo COPD e o grupo controle (n = 30). Foram comparadas as inflamações, área da parede da artéria pulmonar/área da artéria total (WA%) e espessura da parede/diâmetro externo vascular (WT%). As expressões de TLR-4, MMP-9/TIMP-1 e PCNA em células de músculo liso vascular pulmonar foram detectadas, e suas relações com PVR foram então analisadas. RESULTADOS: As inflamações (1,6 ± 0,8), WA% (44,0 ± 6,4) e WT% (27,3 ± 3,3) no grupo COPD foram maiores que no grupo controle (0,3 ± 0,5; 26,1 ± 2,8; 15,6 ± 1,8). E as expressões de TLR-4 (31,4 ± 14,7) e MMP-9/TIMP-1 (2,2 ± 2,6) foram aumentadas em relação ao grupo controle (4,7 ± 4,5, 1,9 ± 1,2). Na análise de correlação, TLR-4 e MMP-9/TIMP-1 foram positivamente correlacionadas com as inflamações (r = 0,18; P <0,01), WA% (r = 0,68; P <0,01) e WT% (r = 0,73; P <0,01), bem como correlacionadas positivamente com a expressão de PCNA (r = 0,44; P <0,01). A elevação da TLR-4 foi correlacionada positivamente com as expressões de MMP-9 e TIMP-1. CONCLUSÕES: A regulação positiva do TLR-4 nas células do músculo liso arterial pulmonar de pacientes com DPOC poderia promover as inflamações e a expressão de MMP-9, causando assim uma degradação anormal da matriz extracelular, por isso desempenhou um papel importante no processo de PVR.

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Some studies have shown the role played by matrix metalloproteinases and their inhibitors in doxorubicin cardiotoxicity. In this study, we sought to investigate how plasma and myocardial MMP 2 and 9 perform in rabbits with doxorubicin-induced cardiomyopathy, searching for a correlation between the activity of these collagenases and cardiac remodeling. Cardiomyopathy was induced by doxorubicin given intravenously twice a week for six consecutive weeks. Plasma MMP activity and the echocardiogram were assessed at baseline, and at 15 and 45 days after first injection of doxorubicin. The myocardial activity of these enzymes was solely evaluated in nine rabbits at 45 days, and results were compared with nine healthy controls. We only identified the full-length forms of both MMP 2 and 9 throughout the study. The plasma pro-MMP 2 reduced along the deterioration of cardiac function, while the pro-MMP 9 increased significantly at T45 as compared to baseline and T15. A negative significant correlation was found to exist between the plasma activity of pro-MMP 2 and mitral E-to-mitral septal annular early diastolic velocity ratio, which is an estimate of mean left atrial pressure and congestion. Only pro-MMP 2 was found in myocardial samples, and mean activity of such enzyme was statistically lower than that recorded for healthy controls. Although no active form was documented for either collagenase, the duration of the treatment with doxorubicin played a role in the alteration of plasma pro-forms activity. However, these changes could not be associated with most echocardiographic parameters that are supportive of cardiac remodeling.(AU)

Alguns estudos já demonstraram o papel exercido pelas metaloproteinases de matriz e seus inibidores na cardiotoxicidade promovida pela doxorrubicina. Assim, este estudo teve como objetivo investigar o comportamento das MMPs 2 e 9 plasmáticas e miocárdicas em coelhos com cardiomiopatia induzida pela doxorrubicina, buscando determinar se há correlação entre a atividade dessas colagenases e o remodelamento cardíaco. A cardiomiopatia foi induzida pela doxorrubicina aplicada por via intravenosa duas vezes por semana ao longo de seis semanas consecutivas. A atividade plasmática das MMPs e o ecocardiograma foram avaliados no momento basal e aos 15 e 45 dias após a primeira aplicação da doxorrubicina. A atividade miocárdica dessas enzimas foi quantificada em apenas nove coelhos aos 45 dias e os resultados comparados com outros nove controles saudáveis. Foram identificadas apenas as formas inativas das MMPs 2 e 9 durante todo o estudo. A pro-MMP 2 plasmática reduziu à medida que a função cardiaca se deteriorou, enquanto a pro-MMP 9 aumentou significativamente em T45 quando comparada aos momentos basal e T15. Houve correlação negativa significativa entre a atividade plasmática da pro-MMP 2 e a relação entre E mitral e a velocidade anular mitral no início da diástole, um parâmetro que permite estimar a pressão atrial esquerda média e a congestão. Apenas a pro-MMP 2 foi documentada nas amostras miocárdicas dos coelhos com cardiomiopatia e atividade media dessa enzima foi estatisticamente menor que aquela observada nos controles saudáveis. Embora a forma ativa de ambas as colagenases não tenha sido identificada, o tempo de tratamento com doxorrubicina interferiu na atividade das formas inativas plasmáticas. Contudo, essas alterações não se associaram com a maioria dos parâmetros ecocardiográficos que indicam remodelamento cardíaco.(AU)

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Some studies have shown the role played by matrix metalloproteinases and their inhibitors in doxorubicin cardiotoxicity. In this study, we sought to investigate how plasma and myocardial MMP 2 and 9 perform in rabbits with doxorubicin-induced cardiomyopathy, searching for a correlation between the activity of these collagenases and cardiac remodeling. Cardiomyopathy was induced by doxorubicin given intravenously twice a week for six consecutive weeks. Plasma MMP activity and the echocardiogram were assessed at baseline, and at 15 and 45 days after first injection of doxorubicin. The myocardial activity of these enzymes was solely evaluated in nine rabbits at 45 days, and results were compared with nine healthy controls. We only identified the full-length forms of both MMP 2 and 9 throughout the study. The plasma pro-MMP 2 reduced along the deterioration of cardiac function, while the pro-MMP 9 increased significantly at T45 as compared to baseline and T15. A negative significant correlation was found to exist between the plasma activity of pro-MMP 2 and mitral E-to-mitral septal annular early diastolic velocity ratio, which is an estimate of mean left atrial pressure and congestion. Only pro-MMP 2 was found in myocardial samples, and mean activity of such enzyme was statistically lower than that recorded for healthy controls. Although no active form was documented for either collagenase, the duration of the treatment with doxorubicin played a role in the alteration of plasma pro-forms activity. However, these changes could not be associated with most echocardiographic parameters that are supportive of cardiac remodeling.(AU)

Alguns estudos já demonstraram o papel exercido pelas metaloproteinases de matriz e seus inibidores na cardiotoxicidade promovida pela doxorrubicina. Assim, este estudo teve como objetivo investigar o comportamento das MMPs 2 e 9 plasmáticas e miocárdicas em coelhos com cardiomiopatia induzida pela doxorrubicina, buscando determinar se há correlação entre a atividade dessas colagenases e o remodelamento cardíaco. A cardiomiopatia foi induzida pela doxorrubicina aplicada por via intravenosa duas vezes por semana ao longo de seis semanas consecutivas. A atividade plasmática das MMPs e o ecocardiograma foram avaliados no momento basal e aos 15 e 45 dias após a primeira aplicação da doxorrubicina. A atividade miocárdica dessas enzimas foi quantificada em apenas nove coelhos aos 45 dias e os resultados comparados com outros nove controles saudáveis. Foram identificadas apenas as formas inativas das MMPs 2 e 9 durante todo o estudo. A pro-MMP 2 plasmática reduziu à medida que a função cardiaca se deteriorou, enquanto a pro-MMP 9 aumentou significativamente em T45 quando comparada aos momentos basal e T15. Houve correlação negativa significativa entre a atividade plasmática da pro-MMP 2 e a relação entre E mitral e a velocidade anular mitral no início da diástole, um parâmetro que permite estimar a pressão atrial esquerda média e a congestão. Apenas a pro-MMP 2 foi documentada nas amostras miocárdicas dos coelhos com cardiomiopatia e atividade media dessa enzima foi estatisticamente menor que aquela observada nos controles saudáveis. Embora a forma ativa de ambas as colagenases não tenha sido identificada, o tempo de tratamento com doxorrubicina interferiu na atividade das formas inativas plasmáticas. Contudo, essas alterações não se associaram com a maioria dos parâmetros ecocardiográficos que indicam remodelamento cardíaco.(AU)

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