RESUMO
A presente revisão tem por objetivo abordar aspectos relacionados ao bem-estar animal na produção in vivo de embriões ovinos. A cobrança da sociedade tem impulsionado o uso de práticas que atendam os preceitos de bem-estar na produção animal. Nesse contexto, destaca-se a necessidade de aprimoramento de procedimentos menos invasivos, como a coleta não cirúrgica de embriões. Avanços recentes nos protocolos de dilatação cervical melhoraram os resultados e tornaram essa técnica uma alternativa viável na espécie ovina. No entanto, a avaliação do estado de bem-estar das doadoras submetidas à coleta transcervical mostra a necessidade de melhor controle da dor durante a sua realização. Assim, acreditamos que a associação dos esforços de diferentes pesquisas pode proporcionar a resolução desses entraves e possibilitar maior aplicabilidade comercial da biotécnica.(AU)
This review aims to address aspects related to animal welfare in the in vivo production of ovine embryos. The use of practices that meet the precepts of welfare in animal production has been driven by demands from society. In this context, there is a need to improve less invasive procedures, such as nonsurgical embryo collection. Recent advances in cervical dilation protocols have improved results and made this technique a viable alternative in sheep. However, the assessment of the state of welfare of donors undergoing transcervical collection shows the need for better pain control during its performance. Thus, the association of different research efforts can provide the resolution of these obstacles and enable greater commercial applicability of the biotechnique.(AU)
Assuntos
Animais , Feminino , Ovinos/fisiologia , Técnicas de Cultura Embrionária/métodos , Bem-Estar do AnimalRESUMO
This study aimed to evaluate the efficacy of adding sucrose in vitrification solution of ovine embryos produced in vivo. Forty Dorper ewes were selected and superovulated. Immediately prior to the embryo collection by laparotomy, a laparoscopy was performed to verify the superovulatory response. The recovered flushing was followed by embryo evaluation and embryos were divided in two experimental groups where embryos from Control group were submitted to a traditional vitrification protocol and embryos from Sucrose group to a modified vitrification protocol with sucrose. After warming, embryos were again divided regarding cryoprotectant removal (Indirect) or not (Direct). The embryo quality was classified as embryos of degrees I (excellent or good), II (regular), III (poor) and IV (dead or degenerate). It was also verified the homogeneity of mass, occurrence of embryonic mass retraction and rupture of pellucid zone. The results were expressed as percentages and were subjected to Chi-square test with P 0.05. The embryos vitrified in the presence of sucrose had lower proportions of lower-quality embryos after warming (22.20 vs. 44.50%), higher percentages of homogeneous embryos after warming (63.89 vs. 38.89 %) while concerning other parameters there was no difference between these groups. It can be concluded that the addition of 0.4 M sucrose during vitrification improves the embryo quality.
Este estudo objetivou avaliar a eficácia da adição de sacarose na solução de vitrificação de embriões ovinos produzidos in vivo. Foram selecionadas 40 ovelhas da raça Dorper as quais foram superovuladas. Imediatamente antes da colheita de embriões por laparotomia, uma laparoscopia foi realizada para verificar a resposta superovulatória. O lavado recuperado foi submetido à procura e avaliação de embriões e estes foram divididos em dois grupos experimentais, onde os embriões do Grupo Controle foram submetidos ao protocolo tradicional de vitrificação e os embriões do Grupo Sacarose a um protocolo modificado de vitrificação com sacarose. Após a descongelação, os embriões foram novamente divididos considerando a remoção (Indireto) ou não (Direto) do crioprotetor. A qualidade embrionária foi classificada como embriões de graus I (excelente ou bom), II (regular), III (pobre) e IV (morto ou degenerado). Foi também verificada a homogeneidade da massa, ocorrência de retração da massa e ruptura de zona pelúcida. Os resultados foram expressos em porcentagem e foram submetidos ao teste do Qui-quadrado com P < 0.05. Os embriões vitrificados na presença de sacarose apresentaram menores proporções de embriões de menor qualidade após a descongelação (22,20 vs. 44,50%), e maiores percentuais de embriões homogêneos após a descongelação (63,89 vs. 38,89%) enquanto com relação aos demais parâmetros não existiram diferenças entre grupos. Pode-se concluir que a adição de 0,4 M de sacarose durante os procedimentos de vitrificação e descongelação beneficia a qualidade embrionária.
Assuntos
Feminino , Animais , Crioprotetores/química , Ovinos/embriologia , Sacarose/administração & dosagem , VitrificaçãoRESUMO
This study aimed to evaluate the efficacy of adding sucrose in vitrification solution of ovine embryos produced in vivo. Forty Dorper ewes were selected and superovulated. Immediately prior to the embryo collection by laparotomy, a laparoscopy was performed to verify the superovulatory response. The recovered flushing was followed by embryo evaluation and embryos were divided in two experimental groups where embryos from Control group were submitted to a traditional vitrification protocol and embryos from Sucrose group to a modified vitrification protocol with sucrose. After warming, embryos were again divided regarding cryoprotectant removal (Indirect) or not (Direct). The embryo quality was classified as embryos of degrees I (excellent or good), II (regular), III (poor) and IV (dead or degenerate). It was also verified the homogeneity of mass, occurrence of embryonic mass retraction and rupture of pellucid zone. The results were expressed as percentages and were subjected to Chi-square test with P 0.05. The embryos vitrified in the presence of sucrose had lower proportions of lower-quality embryos after warming (22.20 vs. 44.50%), higher percentages of homogeneous embryos after warming (63.89 vs. 38.89 %) while concerning other parameters there was no difference between these groups. It can be concluded that the addition of 0.4 M sucrose during vitrification improves the embryo quality.(AU)
Este estudo objetivou avaliar a eficácia da adição de sacarose na solução de vitrificação de embriões ovinos produzidos in vivo. Foram selecionadas 40 ovelhas da raça Dorper as quais foram superovuladas. Imediatamente antes da colheita de embriões por laparotomia, uma laparoscopia foi realizada para verificar a resposta superovulatória. O lavado recuperado foi submetido à procura e avaliação de embriões e estes foram divididos em dois grupos experimentais, onde os embriões do Grupo Controle foram submetidos ao protocolo tradicional de vitrificação e os embriões do Grupo Sacarose a um protocolo modificado de vitrificação com sacarose. Após a descongelação, os embriões foram novamente divididos considerando a remoção (Indireto) ou não (Direto) do crioprotetor. A qualidade embrionária foi classificada como embriões de graus I (excelente ou bom), II (regular), III (pobre) e IV (morto ou degenerado). Foi também verificada a homogeneidade da massa, ocorrência de retração da massa e ruptura de zona pelúcida. Os resultados foram expressos em porcentagem e foram submetidos ao teste do Qui-quadrado com P < 0.05. Os embriões vitrificados na presença de sacarose apresentaram menores proporções de embriões de menor qualidade após a descongelação (22,20 vs. 44,50%), e maiores percentuais de embriões homogêneos após a descongelação (63,89 vs. 38,89%) enquanto com relação aos demais parâmetros não existiram diferenças entre grupos. Pode-se concluir que a adição de 0,4 M de sacarose durante os procedimentos de vitrificação e descongelação beneficia a qualidade embrionária.(AU)
Assuntos
Animais , Feminino , Ovinos/embriologia , Sacarose/administração & dosagem , Crioprotetores/química , VitrificaçãoRESUMO
Background: Os programas de múltipla ovulação e transferência de embriões (MOTE) em ovinos têm sido implantados com sucesso em todo mundo. O impacto é evidente nos programas de melhoramento genético, zootécnicos e sanitários, bem como, no resgate e conservação de raças ameaçadas de extinção e no apoio a outras biotécnicas relacionadas. A simplificação da técnica, incremento da eficiência dos resultados, assim como, o aumento no número de técnicos capacitados, pode acelerar ainda mais este desenvolvimento. De suas etapas, os protocolos superovulatórios são os responsáveis por induzir ampla variabilidade das respostas ovulatórias e produção de embriões. Tal efeito é, indubitavelmente, o principal limitante da MOTE nesta espécie. Revisão: Tradicionalmente os protocolos utilizados consideram fundamentalmente a duração do ciclo estral, e não o fenômeno biológico da dinâmica folicular, desconhecendo-se as condições prejudiciais ao desenvolvimento folicular adequado e produção de oócitos/embriões de qualidade. Alguns pontos críticos têm sido apontados como potenciais responsáveis pelos efeitos negativos, destacando-se: (i) o perfil de progesterona induzido pelos dispositivos utilizados no tratamento; (ii) a condição folicular presente ao início do protocolo superestimulatório e; (iii) a deficiência ou inexistência do pico pré-ovulatório de LH após tratamento com gonadotrofinas. As respostas são acompanhadas pela ampla variação nas taxas de ovulação e fecundação dos oócitos, bem como, no número e qualidade dos embriões recuperados. Neste contexto, diversos estudos têm buscado desenvolver novas estratégias para o controle da dinâmica folicular. Acredita-se que há um efeito prejudicial da dominância folicular na resposta superovulatória em pequenos ruminantes. Nos tratamentos tradicionais, 70- 85% das doadoras apresentam grandes folículos dominantes ao início dos tratamentos com FSH. Considerando a imprevisibilidade do dia da emergência de cada onda folicular em ovinos, a verdadeira questão é como sincronizá-la. O emprego da pré-sincronização do estro e superestimulação da primeira onda emergente têm promovido maior eficiência. Outra estratégia, comumente empregada em bovinos, é a indução de uma nova onda folicular pelo emprego de estrógenos associado ao progestágeno, entretanto, sua eficiência em ovinos ainda é incipiente. Paralelamente, a indução do pico de LH ao final do tratamento superestimulatório tem sido investigada quanto aos benefícios em promover incremento da taxa ovulatória e número de embriões viáveis, bem como, melhoria da sincronia entre as ovulações visando aumentar a taxa de fecundação dos oócitos. A regressão luteal precoce é outra problemática que afeta os resultados dos programas de MOTE em pequenos ruminantes. Este fenômeno parece estar associado a elevadas concentrações plasmáticas de estrógenos durante a fase luteal inicial, resultando em decréscimo na resposta superovulatória e diminuição do número e qualidade dos embriões. A administração de progesterona exógena, agentes anti-luteolíticos ou luteotróficos pode prevenir ou reduzir os efeitos deletérios da regressão luteal precoce. Conclusão: A indústria da múltipla ovulação e transferência de embrião tem se tornado um negócio de escala internacional. As inúmeras vantagens relacionadas à biotécnica, a crescente exigência mundial por produção de alimentos seguros e sustentáveis têm demandado o incremento da eficiência reprodutiva e produtiva dos animais. Neste contexto, esta revisão abordará o estado da arte da superovulação em ovinos, bem como, as perspectivas voltadas a melhoria de seus resultados e dos programas de MOTE.
Assuntos
Animais , Superovulação/fisiologia , Ovinos/fisiologia , Transferência Embrionária/veterinária , Indução da Ovulação/veterináriaRESUMO
A Transferência de Embrião e Múltipla Ovulação (MOET) possibilitam a produção de mais de uma cria por fêmea por ano e pode ser impulsionada com o uso de sêmen sexado, já que a tolerância a criopreservação dos embriões produzidos in vitro ainda é baixa, limitando o uso desta biotécnica. Todavia, pesquisas têm procurado estabelecer protocolos de sincronização/superovulação para elevar a taxa de fertilização na MOET com sêmen sexado. No entanto, os resultados com sêmen sexado, quando utilizado em animais superovulados, ainda são inferiores àqueles obtidos com o sêmen convencional. Desta forma, nesta revisão objetivou- -se abordar alguns aspectos da produção in vivo de embriões bovinos e o processo de sexagem espermática, bem como os resultados relatados com a utilização de sêmen sexado em programas de MOET.(AU)
The Multiple Ovulation and Embryo Transfer (MOET) enable the production of more than one calf per female per year and may be stimulated with the use of sorted semen, as the tolerance of the in vitro produced embryo is still low, limiting the use of this biotechnique. However, researches have aimed to establish synchronization/ superovulation protocols to increase the fertilization rate in MOET with sorted semen. Still, the results with sexed semen, when utilized in superovulated cows still are inferior than unsorted semen. Thus, the objective of this review is to approach some aspects of the in vivo embryo production from cow and the process of sorting of semen, as well as the results reported with use of sorted semen in MOET programs. (AU)
Assuntos
Animais , Masculino , Bovinos , Criopreservação , Transferência Embrionária , Técnicas In VitroRESUMO
Realizaram-se estudos para aferir as prováveis causas da baixa taxa de recuperação de estruturas embrionárias em búfalas superovuladas. No primeiro estudo (Experimento 1), foram utilizados sistemas genitais de búfalas e de bovinas tratadas para a indução de ovulações únicas ou múltiplas, os quais foram submetidos à morfometria, seguidos de lavagem dos ovidutos para a recuperação dos oócitos. Posteriormente, os ovidutos foram encaminhados à histologia. No Experimento 2, foram utilizados ovidutos de búfalas e de bovinas, tratadas para a indução de ovulação única. O lúmen do oviduto foi exposto e, após isso, os ovidutos foram incubados em meio de cultura com ou sem E2, com posterior colocação de microesferas na sua superfície para a aferição do movimento ciliar. No Experimento 3, foram utilizados ovidutos de búfalas e de bovinas tratadas para a indução de ovulação única. Os ovidutos foram incubados em meio de cultura com ou sem E2, com a inserção de oócitos bubalinos ou bovinos em seu lúmen, sendo posteriormente lavados para a recuperação e contagem dos oócitos. No Experimento 4, búfalas e bovinas foram tratadas para a indução de ovulações únicas ou múltiplas. Após a ovulação, os animais foram submetidos à laparotomia para a inserção de oócitos bubalinos ou bovinos no oviduto.(AU)
Studies were performed to assess the probable causes of the low embryonic structures recovery rate in superovulated buffaloes. In the first study (Experiment 1) were used buffaloes and bovines genital systems treated to induce single or multiple ovulations, which were submitted to morphometry followed by oviducts flushing for the oocytes recovery. Subsequently, the oviducts were sent to histology. In Experiment 2, were used buffaloes and bovines oviducts treated for single ovulation. The oviduct lumen was exposed and, thereafter, incubated in culture medium with or without E2, with subsequent placement of microspheres on its surface for the ciliary movement measure. In Experiment 3, were used buffaloes and bovines oviducts treated for a single ovulation. The oviducts were incubated in culture medium with or without E2, with the inclusion of bovine or buffalo oocytes in the lumen, and subsequently flushed for the oocytes recovery and counting. In Experiment 4, buffaloes and bovines were treated to induce single or multiple ovulations. After ovulation, the animals underwent laparotomy for the insertion of bovine or buffalo oocytes in the oviduct. Later (five and six days after buffalo and bovine oocytes insertion, respectively), the genital systems were flushed in vivo for the embryonic structures recovery.(AU)
Assuntos
Animais , Feminino , Bovinos , Genitália Feminina/anatomia & histologia , Genitália Feminina/embriologia , Transferência Embrionária/métodos , Transferência Embrionária/veterinária , Búfalos/anatomia & histologia , Búfalos/embriologia , Ovulação , OócitosRESUMO
Realizaram-se estudos para aferir as prováveis causas da baixa taxa de recuperação de estruturas embrionárias em búfalas superovuladas. No primeiro estudo (Experimento 1), foram utilizados sistemas genitais de búfalas e de bovinas tratadas para a indução de ovulações únicas ou múltiplas, os quais foram submetidos à morfometria, seguidos de lavagem dos ovidutos para a recuperação dos oócitos. Posteriormente, os ovidutos foram encaminhados à histologia. No Experimento 2, foram utilizados ovidutos de búfalas e de bovinas, tratadas para a indução de ovulação única. O lúmen do oviduto foi exposto e, após isso, os ovidutos foram incubados em meio de cultura com ou sem E2, com posterior colocação de microesferas na sua superfície para a aferição do movimento ciliar. No Experimento 3, foram utilizados ovidutos de búfalas e de bovinas tratadas para a indução de ovulação única. Os ovidutos foram incubados em meio de cultura com ou sem E2, com a inserção de oócitos bubalinos ou bovinos em seu lúmen, sendo posteriormente lavados para a recuperação e contagem dos oócitos. No Experimento 4, búfalas e bovinas foram tratadas para a indução de ovulações únicas ou múltiplas. Após a ovulação, os animais foram submetidos à laparotomia para a inserção de oócitos bubalinos ou bovinos no oviduto.
Studies were performed to assess the probable causes of the low embryonic structures recovery rate in superovulated buffaloes. In the first study (Experiment 1) were used buffaloes and bovines genital systems treated to induce single or multiple ovulations, which were submitted to morphometry followed by oviducts flushing for the oocytes recovery. Subsequently, the oviducts were sent to histology. In Experiment 2, were used buffaloes and bovines oviducts treated for single ovulation. The oviduct lumen was exposed and, thereafter, incubated in culture medium with or without E2, with subsequent placement of microspheres on its surface for the ciliary movement measure. In Experiment 3, were used buffaloes and bovines oviducts treated for a single ovulation. The oviducts were incubated in culture medium with or without E2, with the inclusion of bovine or buffalo oocytes in the lumen, and subsequently flushed for the oocytes recovery and counting. In Experiment 4, buffaloes and bovines were treated to induce single or multiple ovulations. After ovulation, the animals underwent laparotomy for the insertion of bovine or buffalo oocytes in the oviduct. Later (five and six days after buffalo and bovine oocytes insertion, respectively), the genital systems were flushed in vivo for the embryonic structures recovery.