RESUMO

Equine herpesvirus type 1 (EHV-1) is an important pathogen that causes abortion, neonatal disease, respiratory disorders, and neurological syndrome in equine populations worldwide. To evaluate EHV-1 as a cause of abortion and perinatal mortality in Brazil, tissue samples from 105 aborted equine fetuses, stillbirths, and foals up to one month of age were examined using virus isolation, immunohistochemistry (IHC), histopathology, and nested polymerase chain reaction (PCR). Two fetuses were positive for EHV-1 by PCR, one of which showed syncytia and eosinophilic intranuclear inclusion bodies in bronchial epithelia, but it was negative by virus isolation. The other showed no characteristic histological lesions, but it was positive by viral isolation. No sample was positive by IHC. The results presented low occurrence of EHV-1 in the studied population and suggested that the use of a combination of techniques increases the likelihood of an accurate diagnosis of EHV-1.(AU)

O herpes-vírus equino tipo 1 (HVE-1) é um importante agente patogênico causador de aborto, doença neonatal, distúrbios respiratórios e síndrome neurológica em populações de equinos em todo o mundo. Para avaliar a ocorrência do HVE-1 como agente causal de abortamento e mortalidade perinatal no Brasil, foram examinadas amostras de 105 fetos equinos abortados, natimortos e potros de até 1 mês de idade, utilizando as técnicas de isolamento viral, imuno-histoquímica (IHQ), histopatologia e reação em cadeia da polimerase aninhada (nested-PCR). Dois fetos foram positivos na análise de PCR, e um deles apresentou corpúsculos de inclusão viral eosinofílicos e sincícios no epitélio brônquico, porém foi negativo na análise de isolamento viral. O outro feto não apresentou lesões histológicas características de infecção herpética, mas foi positivo na análise de isolamento viral. Nenhuma amostra apresentou resultado positivo pela análise de IHQ. Os resultados demonstraram baixa ocorrência de HVE-1 na população estudada e que o uso de diferentes técnicas diagnósticas aumenta a probabilidade de um diagnóstico preciso para o HVE-1.(AU)

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RESUMO

Equine herpesvirus type 1 (EHV-1) is an important pathogen that causes abortion, neonatal disease, respiratory disorders, and neurological syndrome in equine populations worldwide. To evaluate EHV-1 as a cause of abortion and perinatal mortality in Brazil, tissue samples from 105 aborted equine fetuses, stillbirths, and foals up to one month of age were examined using virus isolation, immunohistochemistry (IHC), histopathology, and nested polymerase chain reaction (PCR). Two fetuses were positive for EHV-1 by PCR, one of which showed syncytia and eosinophilic intranuclear inclusion bodies in bronchial epithelia, but it was negative by virus isolation. The other showed no characteristic histological lesions, but it was positive by viral isolation. No sample was positive by IHC. The results presented low occurrence of EHV-1 in the studied population and suggested that the use of a combination of techniques increases the likelihood of an accurate diagnosis of EHV-1.(AU)

O herpes-vírus equino tipo 1 (HVE-1) é um importante agente patogênico causador de aborto, doença neonatal, distúrbios respiratórios e síndrome neurológica em populações de equinos em todo o mundo. Para avaliar a ocorrência do HVE-1 como agente causal de abortamento e mortalidade perinatal no Brasil, foram examinadas amostras de 105 fetos equinos abortados, natimortos e potros de até 1 mês de idade, utilizando as técnicas de isolamento viral, imuno-histoquímica (IHQ), histopatologia e reação em cadeia da polimerase aninhada (nested-PCR). Dois fetos foram positivos na análise de PCR, e um deles apresentou corpúsculos de inclusão viral eosinofílicos e sincícios no epitélio brônquico, porém foi negativo na análise de isolamento viral. O outro feto não apresentou lesões histológicas características de infecção herpética, mas foi positivo na análise de isolamento viral. Nenhuma amostra apresentou resultado positivo pela análise de IHQ. Os resultados demonstraram baixa ocorrência de HVE-1 na população estudada e que o uso de diferentes técnicas diagnósticas aumenta a probabilidade de um diagnóstico preciso para o HVE-1.(AU)

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A case of ulcerative dermatitis caused by feline herpesvirus type 1 (FeHV-1) in an adult male domestic shorthair cat is reported. The cat was rescued from the streets and presented with ulcerative lesions at the nasal planum and tongue in addition to a history of occasional sneezing. Thirty days after of the first clinical evaluation, the cat died as a result of acute myeloid leukemia. During necropsy, ulcerative lesions were found on the superior lip, the skin of the nasal planum, and at the periorbital region. Ulcerations were also noted on the tongue and hard palate. Histological examination revealed extensive epidermal necrosis, which involved the subjacent dermis and adnexal structures; the inflammatory infiltrate consisted of neutrophils, mast cells, and lymphocytes. Amphophilic intranuclear inclusion bodies were occasionally observed in intact epithelial cells. In the immunohistochemical evaluation, positive intracytoplasmic immunolabeling was detected in the sebaceous and follicular epithelial cells as well as in the bronchiolar epithelial cells. Samples of lymphoid tissue tested positive for the presence of feline leukemia virus and feline immunodeficiency virus by immunohistochemistry. Pulmonary tissue fragments were immunolabeled for feline calicivirus. Samples obtained from a cutaneous lesion were subjected to virus isolation in a cellular culture, which revealed the cytopathic effects characteristic of herpesvirus. FeHV-1 was detected in the samples by polymerase chain reaction.(AU)

Descreve-se um caso de dermatite ulcerativa causada por herpesvírus felino tipo 1 (FeHV-1), em um gato adulto, macho, sem raça definida. O gato foi resgatado da rua e apresentava uma lesão ulcerativa no plano nasal e língua, além de espirros esporádicos. Trinta dias após o primeiro atendimento, o gato morreu por leucemia mieloide aguda. Na necropsia, o lábio superior e a pele do plano nasal e periorbital apresentaram extensa lesão ulcerativa, além de ulcerações na língua e no palato duro. Histologicamente havia extensa necrose da epiderme, estendendo-se à derme subjacente e estruturas anexas, associada ao infiltrado inflamatório, constituído por neutrófilos, mastócitos e linfócitos. Observaram-se ainda, ocasionalmente, em células epiteliais intactas, corpúsculos de inclusão intranucleares anfofílicos. Na avaliação imuno-histoquímica anti-FeHV-1 observou-se imunomarcação positiva intracitoplasmática nas células epiteliais e nas células epiteliais bronquiolares. Amostras de tecido linfoide apresentaram imunomarcação para vírus da leucemia felina, vírus da imunodeficiência felina, além de marcação para calicivírus em fragmentos pulmonares. Fragmentos da lesão cutânea foram submetidos a isolamento viral em cultivo celular, onde foi observado efeito citopático característico de herpesvírus e a amostra foi positiva na PCR para FeHV-1.(AU)

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A case of ulcerative dermatitis caused by feline herpesvirus type 1 (FeHV-1) in an adult male domestic shorthair cat is reported. The cat was rescued from the streets and presented with ulcerative lesions at the nasal planum and tongue in addition to a history of occasional sneezing. Thirty days after of the first clinical evaluation, the cat died as a result of acute myeloid leukemia. During necropsy, ulcerative lesions were found on the superior lip, the skin of the nasal planum, and at the periorbital region. Ulcerations were also noted on the tongue and hard palate. Histological examination revealed extensive epidermal necrosis, which involved the subjacent dermis and adnexal structures; the inflammatory infiltrate consisted of neutrophils, mast cells, and lymphocytes. Amphophilic intranuclear inclusion bodies were occasionally observed in intact epithelial cells. In the immunohistochemical evaluation, positive intracytoplasmic immunolabeling was detected in the sebaceous and follicular epithelial cells as well as in the bronchiolar epithelial cells. Samples of lymphoid tissue tested positive for the presence of feline leukemia virus and feline immunodeficiency virus by immunohistochemistry. Pulmonary tissue fragments were immunolabeled for feline calicivirus. Samples obtained from a cutaneous lesion were subjected to virus isolation in a cellular culture, which revealed the cytopathic effects characteristic of herpesvirus. FeHV-1 was detected in the samples by polymerase chain reaction.

Descreve-se um caso de dermatite ulcerativa causada por herpesvírus felino tipo 1 (FeHV-1), em um gato adulto, macho, sem raça definida. O gato foi resgatado da rua e apresentava uma lesão ulcerativa no plano nasal e língua, além de espirros esporádicos. Trinta dias após o primeiro atendimento, o gato morreu por leucemia mieloide aguda. Na necropsia, o lábio superior e a pele do plano nasal e periorbital apresentaram extensa lesão ulcerativa, além de ulcerações na língua e no palato duro. Histologicamente havia extensa necrose da epiderme, estendendo-se à derme subjacente e estruturas anexas, associada ao infiltrado inflamatório, constituído por neutrófilos, mastócitos e linfócitos. Observaram-se ainda, ocasionalmente, em células epiteliais intactas, corpúsculos de inclusão intranucleares anfofílicos. Na avaliação imuno-histoquímica anti-FeHV-1 observou-se imunomarcação positiva intracitoplasmática nas células epiteliais e nas células epiteliais bronquiolares. Amostras de tecido linfoide apresentaram imunomarcação para vírus da leucemia felina, vírus da imunodeficiência felina, além de marcação para calicivírus em fragmentos pulmonares. Fragmentos da lesão cutânea foram submetidos a isolamento viral em cultivo celular, onde foi observado efeito citopático característico de herpesvírus e a amostra foi positiva na PCR para FeHV-1.

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A case of ulcerative dermatitis caused by feline herpesvirus type 1 (FeHV-1) in an adult male domestic shorthair cat is reported. The cat was rescued from the streets and presented with ulcerative lesions at the nasal planum and tongue in addition to a history of occasional sneezing. Thirty days after of the first clinical evaluation, the cat died as a result of acute myeloid leukemia. During necropsy, ulcerative lesions were found on the superior lip, the skin of the nasal planum, and at the periorbital region. Ulcerations were also noted on the tongue and hard palate. Histological examination revealed extensive epidermal necrosis, which involved the subjacent dermis and adnexal structures; the inflammatory infiltrate consisted of neutrophils, mast cells, and lymphocytes. Amphophilic intranuclear inclusion bodies were occasionally observed in intact epithelial cells. In the immunohistochemical evaluation, positive intracytoplasmic immunolabeling was detected in the sebaceous and follicular epithelial cells as well as in the bronchiolar epithelial cells. Samples of lymphoid tissue tested positive for the presence of feline leukemia virus and feline immunodeficiency virus by immunohistochemistry. Pulmonary tissue fragments were immunolabeled for feline calicivirus. Samples obtained from a cutaneous lesion were subjected to virus isolation in a cellular culture, which revealed th

Descreve-se um caso de dermatite ulcerativa causada por herpesvírus felino tipo 1 (FeHV-1), em um gato adulto, macho, sem raça definida. O gato foi resgatado da rua e apresentava uma lesão ulcerativa no plano nasal e língua, além de espirros esporádicos. Trinta dias após o primeiro atendimento, o gato morreu por leucemia mieloide aguda. Na necropsia, o lábio superior e a pele do plano nasal e periorbital apresentaram extensa lesão ulcerativa, além de ulcerações na língua e no palato duro. Histologicamente havia extensa necrose da epiderme, estendendo-se à derme subjacente e estruturas anexas, associada ao infiltrado inflamatório, constituído por neutrófilos, mastócitos e linfócitos. Observaram-se ainda, ocasionalmente, em células epiteliais intactas, corpúsculos de inclusão intranucleares anfofílicos. Na avaliação imuno-histoquímica anti-FeHV-1 observou-se imunomarcação positiva intracitoplasmática nas células epiteliais e nas células epiteliais bronquiolares. Amostras de tecido linfoide apresentaram imunomarcação para vírus da leucemia felina, vírus da imunodeficiência felina, além de marcação para calicivírus em fragmentos pulmonares. Fragmentos da lesão cutânea foram submetidos a isolamento viral em cultivo celular, onde foi observado efeito citopático característico de herpesvírus e a amostra foi positiva na PCR para FeHV-1.

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A case of ulcerative dermatitis caused by feline herpesvirus type 1 (FeHV-1) in an adult male domestic shorthair cat is reported. The cat was rescued from the streets and presented with ulcerative lesions at the nasal planum and tongue in addition to a history of occasional sneezing. Thirty days after of the first clinical evaluation, the cat died as a result of acute myeloid leukemia. During necropsy, ulcerative lesions were found on the superior lip, the skin of the nasal planum, and at the periorbital region. Ulcerations were also noted on the tongue and hard palate. Histological examination revealed extensive epidermal necrosis, which involved the subjacent dermis and adnexal structures; the inflammatory infiltrate consisted of neutrophils, mast cells, and lymphocytes. Amphophilic intranuclear inclusion bodies were occasionally observed in intact epithelial cells. In the immunohistochemical evaluation, positive intracytoplasmic immunolabeling was detected in the sebaceous and follicular epithelial cells as well as in the bronchiolar epithelial cells. Samples of lymphoid tissue tested positive for the presence of feline leukemia virus and feline immunodeficiency virus by immunohistochemistry. Pulmonary tissue fragments were immunolabeled for feline calicivirus. Samples obtained from a cutaneous lesion were subjected to virus isolation in a cellular culture, which revealed th

Descreve-se um caso de dermatite ulcerativa causada por herpesvírus felino tipo 1 (FeHV-1), em um gato adulto, macho, sem raça definida. O gato foi resgatado da rua e apresentava uma lesão ulcerativa no plano nasal e língua, além de espirros esporádicos. Trinta dias após o primeiro atendimento, o gato morreu por leucemia mieloide aguda. Na necropsia, o lábio superior e a pele do plano nasal e periorbital apresentaram extensa lesão ulcerativa, além de ulcerações na língua e no palato duro. Histologicamente havia extensa necrose da epiderme, estendendo-se à derme subjacente e estruturas anexas, associada ao infiltrado inflamatório, constituído por neutrófilos, mastócitos e linfócitos. Observaram-se ainda, ocasionalmente, em células epiteliais intactas, corpúsculos de inclusão intranucleares anfofílicos. Na avaliação imuno-histoquímica anti-FeHV-1 observou-se imunomarcação positiva intracitoplasmática nas células epiteliais e nas células epiteliais bronquiolares. Amostras de tecido linfoide apresentaram imunomarcação para vírus da leucemia felina, vírus da imunodeficiência felina, além de marcação para calicivírus em fragmentos pulmonares. Fragmentos da lesão cutânea foram submetidos a isolamento viral em cultivo celular, onde foi observado efeito citopático característico de herpesvírus e a amostra foi positiva na PCR para FeHV-1.

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A case of ulcerative dermatitis caused by feline herpesvirus type 1 (FeHV-1) in an adult male domestic shorthair cat is reported. The cat was rescued from the streets and presented with ulcerative lesions at the nasal planum and tongue in addition to a history of occasional sneezing. Thirty days after of the first clinical evaluation, the cat died as a result of acute myeloid leukemia. During necropsy, ulcerative lesions were found on the superior lip, the skin of the nasal planum, and at the periorbital region. Ulcerations were also noted on the tongue and hard palate. Histological examination revealed extensive epidermal necrosis, which involved the subjacent dermis and adnexal structures; the inflammatory infiltrate consisted of neutrophils, mast cells, and lymphocytes. Amphophilic intranuclear inclusion bodies were occasionally observed in intact epithelial cells. In the immunohistochemical evaluation, positive intracytoplasmic immunolabeling was detected in the sebaceous and follicular epithelial cells as well as in the bronchiolar epithelial cells. Samples of lymphoid tissue tested positive for the presence of feline leukemia virus and feline immunodeficiency virus by immunohistochemistry. Pulmonary tissue fragments were immunolabeled for feline calicivirus. Samples obtained from a cutaneous lesion were subjected to virus isolation in a cellular culture, which revealed th

Descreve-se um caso de dermatite ulcerativa causada por herpesvírus felino tipo 1 (FeHV-1), em um gato adulto, macho, sem raça definida. O gato foi resgatado da rua e apresentava uma lesão ulcerativa no plano nasal e língua, além de espirros esporádicos. Trinta dias após o primeiro atendimento, o gato morreu por leucemia mieloide aguda. Na necropsia, o lábio superior e a pele do plano nasal e periorbital apresentaram extensa lesão ulcerativa, além de ulcerações na língua e no palato duro. Histologicamente havia extensa necrose da epiderme, estendendo-se à derme subjacente e estruturas anexas, associada ao infiltrado inflamatório, constituído por neutrófilos, mastócitos e linfócitos. Observaram-se ainda, ocasionalmente, em células epiteliais intactas, corpúsculos de inclusão intranucleares anfofílicos. Na avaliação imuno-histoquímica anti-FeHV-1 observou-se imunomarcação positiva intracitoplasmática nas células epiteliais e nas células epiteliais bronquiolares. Amostras de tecido linfoide apresentaram imunomarcação para vírus da leucemia felina, vírus da imunodeficiência felina, além de marcação para calicivírus em fragmentos pulmonares. Fragmentos da lesão cutânea foram submetidos a isolamento viral em cultivo celular, onde foi observado efeito citopático característico de herpesvírus e a amostra foi positiva na PCR para FeHV-1.

RESUMO

This study investigated the suitability of virus isolation (VI) in mouse neuroblastoma cells (N2A) and baby hamster kidney cells (BHK-21) as a confirmatory test for diagnosis of bovine rabies. Fourty-eight brain samples from cattle suspected of rabies were initially submitted to fluorescent antibody test (FAT) and mouse inoculation test (MIT) for routine diagnostic. Subsequently, these specimens were submitted to three protocols of VI in each cell line: a single 24h or 72h passage (T1, T2), or three 48h passages (T3). The FAT and MIT combined detected 32/48 positive samples, from which MIT detected 32 and FAT 31. The average time required for final MIT results was 12.3 days (8 - 21). VI in BHK-21 cells provided definitive, positive results in 100% of the samples in 72h (T2) and in 96.9% after three 48h passages (T3). VI in N2A cells yielded positive results in 100% in 72h (T2) and in 93.7% of samples after three 48h passages (T3). Sensitivity, specificity, positive and negative predictive values were 100% in T2 in N2A and BHK-21 cells, and the Kappa value was excellent in both cells (k=1). A single 24h passage (T1) in both cell lines performed poorly, detecting less than 40% of the positive samples. Taking together, these results indicate that VI in both cell lines, especially in BHK-21 cells that grow faster and are much easier to maintain, does represent an adequate alternative for MIT as a confirmatory test for rabies diagnostic in bovine specimens, yielding reliable results in reduced time.(AU)

Este estudo investigou a sensibilidade do isolamento viral (VI) em células de neuroblastoma murino (N2A) e células de rim de hamster (BHK-21) como um teste confirmatório para o diagnóstico de raiva bovina. Quarenta e oito amostras de cérebro de bovinos com suspeita de raiva foram inicialmente submetidas aos testes diagnósticos de rotina, imunofluorescência direta (FAT) e inoculação intracerebral em camundongos (MIT). Subsequentemente, essas amostras foram submetidas a três protocolos de VI em cada linhagem celular: uma única passagem de 24h ou 72h (T1, T2), ou três passagens de 48h (T3). Os testes FAT e MIT combinados detectaram 32/48 amostras positivas, das quais o MIT detectou 32 e a FAT 31. O tempo médio requerido para o resultado final no MIT foi 12,3 dias (8-21 dias). O teste de VI em células BHK-21 obteve resultados positivos em 100% das amostras em 72h (T2), e em 96,9% após três passagens de 48h (T3). O teste de VI em células N2A forneceu resultado positivo em 100% em 72h (T2), e em 30 das 32 amostras após três passagens de 48h (T3). Sensibilidade, especificidade, valores preditivos positivos e negativos foram de 100% tanto em N2A quanto em BHK-21 após 72h de incubação (T2). Além disso, o valor Kappa foi excelente em ambas as células (k=1). Uma única passagem de 24h (T1) em ambas as linhagens celulares não apresentou resultados satisfatórios, detectando menos de 40% das amostras positivas. Esses resultados indicam que o isolamento viral em ambas as linhagens celulares, especialmente em BHK-21 - que multiplica mais rápido e é de mais fácil manutenção - representa uma alternativa adequada para a substituição do MIT como um teste confirmatório para o diagnóstico da raiva em amostras de bovinos, fornecendo resultados confiáveis em tempo reduzido.(AU)

Assuntos

RESUMO

A dengue é causada por um Flavivirus que apresenta elevada diversidade genética, com quatro sorotipos e vários genótipos. A enfermidade é endêmica na maioria dos países das Américas, e as fêmeas de Aedes (Stegomyia) aegypti (Linnaeus, 1762) são as únicas transmissoras, com importância epidemiológica. Um único mosquito infectado permanece assim pelo resto de sua vida, podendo infectar múltiplos hospedeiros humanos. Com a detecção do vírus da dengue em mosquitos, podemos revelar o sorotipo circulante ou a entrada de um novo sorotipo em uma determinada região, sem quaisquer implicações éticas, além de apresentar reprodutibilidade dos resultados. Esta revisão aborda as técnicas para detecção viral em mosquitos, suas vantagens e limitações, bem como as pesquisas já realizadas com populações naturais de Aedes aegypti.

Dengue is caused by Flavivirus which exhibits high genetic diversity, with four serotypes and various genotypes. The disease is endemic in most countries in the Americas, and the female Aedes (Stegomyia) aegypti (Linnaeus, 1762) are the only transmitters of epidemiological importance. A single infected mosquito remains so for the rest of his life and can infect multiple human hosts. For dengue virus detection in mosquitoes, the circulating serotype can be revealed or detect an entry of a new serotype in the region, without any ethical implications, and reproducible results. This review covers the techniques for detecting virus in mosquitoes, their advantages and limitations, as well as previous studies with natural populations of Aedes aegypti.

El dengue es causado por un Flavivirus que presenta una alta diversidad genética, cuatro serotipos y varios genotipos. Esta enfermedad es endémica en la mayoría de los países del continente Americano y sólo las hembras de Aedes (Stegomyia) aegypti (Linnaeus, 1762) son las transmisoras de esta enfermedad de importancia epidemiológica. Un único mosquito infectado permanece así por el resto de su vida pudiendo infectar múltiples hospederos humanos. El detectar el serotipo de virus de dengue presente en los mosquitos permite conocer, ya sea, el serotipo circulante o el ingreso de un nuevo serotipo a una determinada región sin ningún tipo de implicaciones éticas presentando así resultados reproducibles. Ésta revisión aborda las técnicas de detección viral en mosquitos, sus ventajas y limitaciones, así como estudios previos con poblaciones naturales de Aedes aegypti.

Assuntos

RESUMO

Bovine respiratory syncytial viruses virus (BRSV) is one of the etiologic agents of pneumonia in young cattle. Few studies have been made aiming detection of the virus in samples collected from adult animals, especially those asymptomatic bovines. However, it is assumed that infections in these groups may occur mostly asymptomatic and this would be an important mechanism for maintaining of BRSV in herds. In this study, the goal was to conduct an analysis of the occurrence of asymptomatic infections by BRSV in lung samples (n=68) and nasal swabs (209) taken from adult animals collected in abattoirs from Southern and Southeastern Brazil respectively, to detect via polymerase chain reaction the occurrence of infected animals in populations of adult cattle. The samples that resulted positive (6) on RT-PCR were subsequently subjected to cutting with restriction enzymes and sequencing for genetic characterization (2 samples). All samples belongs to subgroup B of BRSV, which is reported as the one circulating in Brazil. The results obtained demonstrate that BRSV may be present in samples taken from adult animals, which is in agreement the hypothesis that infections in adults run in a sub-clinical way that may be of importance as a maintenance mechanism of the virus in bovine herds.(AU)

O vírus respiratório sincicial bovino (BRSV) é rebanhos. No presente estudo, o objetivo foi realizar uma um dos agentes etiológicos de pneumonias em bovinos jo-análise da prevalência de infecções assintomáticas pelo vens. Poucos estudos foram realizados visando à detecção BRSV em pulmões (n=68) e swabs nasais (209) coletados do agente em amostras coletadas de animais adultos, e em de bovinos adultos coletadas em frigoríficos da região Sul especial de bovinos assintomáticos. No entanto, presume-e Sudeste respectivamente, no sentido de detectar por in-se que as infecções ocorridas nestes grupos possam ocor-termédio de reação da polimerase em cadeia qual a taxa rer em sua maioria de forma assintomática e este seria de animais infectados em populações de animais adultos um mecanismo importante para manutenção do BRSV nos onde não ocorram sinais clínicos da infecção. As amostras positivas à RT-PCR (6) foram posteriormente submetidas ao corte com enzimas de restrição (REA) e sequenciamento para caracterização genética do gene F (2 das amostras). Todas as amostras se enquadram no subgrupo B de BRSV, o grupo circulante no Brasil conforme estudos anteriores. Os resultados obtidos demonstram que o BRSV pode estar presente em amostras obtidas de animais sadios, reforçando a hipótese de que infecções subclínicasfazem parte do mecanismo de manutenção do vírus nos rebanhos.(AU)

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RESUMO

Bovine respiratory syncytial viruses virus (BRSV) is one of the etiologic agents of pneumonia in young cattle. Few studies have been made aiming detection of the virus in samples collected from adult animals, especially those asymptomatic bovines. However, it is assumed that infections in these groups may occur mostly asymptomatic and this would be an important mechanism for maintaining of BRSV in herds. In this study, the goal was to conduct an analysis of the occurrence of asymptomatic infections by BRSV in lung samples (n=68) and nasal swabs (209) taken from adult animals collected in abattoirs from Southern and Southeastern Brazil respectively, to detect via polymerase chain reaction the occurrence of infected animals in populations of adult cattle. The samples that resulted positive (6) on RT-PCR were subsequently subjected to cutting with restriction enzymes and sequencing for genetic characterization (2 samples). All samples belongs to subgroup B of BRSV, which is reported as the one circulating in Brazil. The results obtained demonstrate that BRSV may be present in samples taken from adult animals, which is in agreement the hypothesis that infections in adults run in a sub-clinical way that may be of importance as a maintenance mechanism of the virus in bovine herds.

O vírus respiratório sincicial bovino (BRSV) é rebanhos. No presente estudo, o objetivo foi realizar uma um dos agentes etiológicos de pneumonias em bovinos jo-análise da prevalência de infecções assintomáticas pelo vens. Poucos estudos foram realizados visando à detecção BRSV em pulmões (n=68) e swabs nasais (209) coletados do agente em amostras coletadas de animais adultos, e em de bovinos adultos coletadas em frigoríficos da região Sul especial de bovinos assintomáticos. No entanto, presume-e Sudeste respectivamente, no sentido de detectar por in-se que as infecções ocorridas nestes grupos possam ocor-termédio de reação da polimerase em cadeia qual a taxa rer em sua maioria de forma assintomática e este seria de animais infectados em populações de animais adultos um mecanismo importante para manutenção do BRSV nos onde não ocorram sinais clínicos da infecção. As amostras positivas à RT-PCR (6) foram posteriormente submetidas ao corte com enzimas de restrição (REA) e sequenciamento para caracterização genética do gene F (2 das amostras). Todas as amostras se enquadram no subgrupo B de BRSV, o grupo circulante no Brasil conforme estudos anteriores. Os resultados obtidos demonstram que o BRSV pode estar presente em amostras obtidas de animais sadios, reforçando a hipótese de que infecções subclínicasfazem parte do mecanismo de manutenção do vírus nos rebanhos.

RESUMO

O vírus dengue, pertencente à família Flaviviridae, gênero Flavivirus, é constituído de RNA de fita simples que codifica proteínas estruturais e não estruturais. Possui quatro sorotipos: DENV-1, DENV-2, DENV-3 e DENV-4. O diagnóstico laboratorial rápido podeser de grande ajuda no controle da expansão da doença. O objetivo deste trabalho foi avaliar diferentes kits de detecção da proteína NS1 do vírus dengue, tendo como referência o isolamento viral. Foram utilizadas 147 amostras de soro de pacientes com suspeita de infecção pelo DENV, das quais 64 foram recebidas para isolamento devírus e 83 para ELISA IgM. O kit Dengue NS1 Ag Strip (Bio-Rad) obteve sensibilidade de 89%, especificidade de 66%, VPP 67% e VPN 88%. O Dengue Duo Test (Bioeasy) teve sensibilidade de 89%, especificidade 68%, VPP 70% e VPN 88%. O Platelia Dengue NS1ELISA Ag (Bio-Rad) apresentou sensibilidade de 95%, especificidade47%, VPP 59% e VPN 92%. O kit dengue Early ELISA (Panbio) resultou em sensibilidade de 86%, especificidade 71%, VPP 69% e VPN 86%. De forma geral, os kits avaliados podem ser empregados no diagnóstico, sempre associados a critério clínico e epidemiológico ou outros métodos laboratoriais

Assuntos

RESUMO

Relatam-se o primeiro isolamento de herpesvirus canino 1 (CaHV-1) e a localização atípica das lesões vesiculares associadas a este vírus na Argentina. A amostra foi recuperada de lesões vesiculares, localizadas na parte interna da coxa direita, em uma fêmea de raça Labrador. A cadela tinha quatro anos de idade e era de propriedade privada. O primeiro diagnóstico foi realizado pela reação em cadeia da polimerase e, posteriormente, o vírus foi isolado e sua identificação confirmada por imunofluorescência indireta e pelo teste de neutralização viral.(AU)

Assuntos

RESUMO

The present study evaluated the efficacy of various culture media for performing the isolation and growth of the rubella virus inoculated into SIRC cells. Rubella virus RA-27/3 strain and RVi/SãoPaulo/BRA99wild type strain (GenBank number DQ458965) were inoculated into SIRC cell line and cultivated in 199, DMEM, MEM and RPMI media. The inoculated cells when examined on phase contrast microscopy showed the characteristic rounded and multipolar cells. The CPE was observed at the first 48 hours cultivation in the respective tested media. The curve of the infectivity increase was higher in the cultures maintained in DMEM and RPMI media. Hence, the SIRC cellular lineage cultivated in DMEM or RPMI media is an excellent substratum for performing the rubella virus isolation. These findings are relevant since the SIRC has been one of the few cell lines described in the literature which presents a cytopathic effect, and on that account it can be useful for carrying out the virus isolation from clinical specimens.

O presente estudo avaliou a eficiência de vários meios de cultura no isolamento e crescimento do vírus da rubéola inoculado na linhagem celular SIRC. O vírus da rubéola padrão RA27/3 e o vírus selvagem RVi/SãoPaulo/BRA99 (GenBank número DQ458965) foram inoculados na linhagem celular SIRC e cultivada nos meios de cultura 199, DMEM, MEM e RPMI. As células inoculadas observadas em microscopia de fase apresentaram aspecto arredondado, com produção de células multinucleadas. O efeito citopático foi observado após 48 horas de cultivo nos respectivos meios de cultura testados e a curva do crescimento da infectividade do vírus foi maior nas células cultivadas em meios DMEM e RPMI. Os resultados obtidos indicam que SIRC é um ótimo substrato para crescimento do vírus da rubéola, uma vez que poucas linhagens celulares descritas na literatura apresentam efeito citopático considerável e mostram que o potencial dessa linhagem celular ser utilizadas para efetuar o isolamento do vírus da rubéola em amostras clínicas.

RESUMO

The propagation of infectious laryngotracheitis virus (ILTV) has been described using primary cell cultures derived from chicken embryo liver and kidney or embryonated eggs, but these cultures use Specific Pathogen Free (SPF) eggs that are time and cost expensive. Since cell line cultures are easier to maintain in laboratory conditions, the growth of ILTV was evaluated in five different cell cultures: chicken embryo related cells (CER), a cell hybrid derived from chicken embryo fibroblasts cells and BHK-21; Vero, from African green monkey kidney cells; HD11, a chicken macrophage cell line; CEC-32, an avian fibroblast cell line and a primary cell culture of chicken embryo fibroblasts (CEF). Cytophatic effect was observed until 96 hours following inoculation and the detection of the viral DNA was performed by PCR. The HD11 and CEC-32 cell lines did not support the virus growth but CEF and Vero, as already described were permissive cultures for propagation of ILTV.The results also showed that the CER cell line can be used for primary isolation and replication of ILTV.

RESUMO

The propagation of infectious laryngotracheitis virus (ILTV) has been described using primary cell cultures derived from chicken embryo liver and kidney or embryonated eggs, but these cultures use Specific Pathogen Free (SPF) eggs that are time and cost expensive. Since cell line cultures are easier to maintain in laboratory conditions, the growth of ILTV was evaluated in five different cell cultures: chicken embryo related cells (CER), a cell hybrid derived from chicken embryo fibroblasts cells and BHK-21; Vero, from African green monkey kidney cells; HD11, a chicken macrophage cell line; CEC-32, an avian fibroblast cell line and a primary cell culture of chicken embryo fibroblasts (CEF). Cytophatic effect was observed until 96 hours following inoculation and the detection of the viral DNA was performed by PCR. The HD11 and CEC-32 cell lines did not support the virus growth but CEF and Vero, as already described were permissive cultures for propagation of ILTV.The results also showed that the CER cell line can be used for primary isolation and replication of ILTV.

RESUMO

The propagation of infectious laryngotracheitis virus (ILTV) has been described using primary cell cultures derived from chicken embryo liver and kidney or embryonated eggs, but these cultures use Specific Pathogen Free (SPF) eggs that are time and cost expensive. Since cell line cultures are easier to maintain in laboratory conditions, the growth of ILTV was evaluated in five different cell cultures: chicken embryo related cells (CER), a cell hybrid derived from chicken embryo fibroblasts cells and BHK-21; Vero, from African green monkey kidney cells; HD11, a chicken macrophage cell line; CEC-32, an avian fibroblast cell line and a primary cell culture of chicken embryo fibroblasts (CEF). Cytophatic effect was observed until 96 hours following inoculation and the detection of the viral DNA was performed by PCR. The HD11 and CEC-32 cell lines did not support the virus growth but CEF and Vero, as already described were permissive cultures for propagation of ILTV.The results also showed that the CER cell line can be used for primary isolation and replication of ILTV.

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The propagation of infectious laryngotracheitis virus (ILTV) has been described using primary cell cultures derived from chicken embryo liver and kidney or embryonated eggs, but these cultures use Specific Pathogen Free (SPF) eggs that are time and cost expensive. Since cell line cultures are easier to maintain in laboratory conditions, the growth of ILTV was evaluated in five different cell cultures: chicken embryo related cells (CER), a cell hybrid derived from chicken embryo fibroblasts cells and BHK-21; Vero, from African green monkey kidney cells; HD11, a chicken macrophage cell line; CEC-32, an avian fibroblast cell line and a primary cell culture of chicken embryo fibroblasts (CEF). Cytophatic effect was observed until 96 hours following inoculation and the detection of the viral DNA was performed by PCR. The HD11 and CEC-32 cell lines did not support the virus growth but CEF and Vero, as already described were permissive cultures for propagation of ILTV.The results also showed that the CER cell line can be used for primary isolation and replication of ILTV.

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The propagation of infectious laryngotracheitis virus (ILTV) has been described using primary cell cultures derived from chicken embryo liver and kidney or embryonated eggs, but these cultures use Specific Pathogen Free (SPF) eggs that are time and cost expensive. Since cell line cultures are easier to maintain in laboratory conditions, the growth of ILTV was evaluated in five different cell cultures: chicken embryo related cells (CER), a cell hybrid derived from chicken embryo fibroblasts cells and BHK-21; Vero, from African green monkey kidney cells; HD11, a chicken macrophage cell line; CEC-32, an avian fibroblast cell line and a primary cell culture of chicken embryo fibroblasts (CEF). Cytophatic effect was observed until 96 hours following inoculation and the detection of the viral DNA was performed by PCR. The HD11 and CEC-32 cell lines did not support the virus growth but CEF and Vero, as already described were permissive cultures for propagation of ILTV.The results also showed that the CER cell line can be used for primary isolation and replication of ILTV.

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