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Molecular analysis of blood groups is important in transfusion medicine, allowing the prediction of red blood cell (RBC) antigens. Many blood banks use single nucleotide variant (SNV) based methods for blood group analysis. While this is a well-established approach, it is limited to the polymorphisms included in genotyping panels. Thus, variants that alter antigenic expression may be ignored, resulting in incorrect prediction of phenotypes. The popularization of next-generation sequencing (NGS) has led to its application in transfusion medicine, including for RBC antigens determination. The present review/meta-analysis aimed to evaluate the applicability of the NGS for the prediction of RBC antigens. A systematic review was conducted following a comprehensive literature search in accordance with the Preferred Reporting Items for Systematic Review and Meta-Analysis guidelines. Studies were selected based on predefined criteria and evaluated using Strengthening the Reporting of Observational studies in Epidemiology guidelines. The characteristics and results of the studies were extracted and meta-analysis was performed to verify the agreement between results from standard molecular methods and NGS. Kell (rs8176058), Duffy (rs2814778, rs12078), or Kidd (rs1085396) alleles were selected as a model for comparisons. Additionally, results are presented for other blood group systems. Of the 864 eligible studies identified, 10 met the inclusion criteria and were selected for meta-analysis. The pooled concordance proportion for NGS compared to other methods ranged from 0.982 to 0.994. The sequencing depth coverage was identified as crucial parameters for the reliability of the results. Some studies reported difficulty in analyzing more complex systems, such as Rh and MNS, requiring the adoption of specific strategies. NGS is a technology capable of predicting blood group phenotypes and has many strengths such as the possibility of simultaneously analyzing hundred individuals and gene regions, and the ability to provide comprehensive genetic analysis, which is useful in the description of new alleles and a better understanding of the genetic basis of blood groups. The implementation of NGS in the routine of blood banks depends on several factors such as cost reduction, the availability of widely validated panels, the establishment of clear quality parameters and access to bioinformatics analysis tools that are easy to access and operate.

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Introduction: Autoimmune hemolytic anemia is a rare disorder characterized by hemolysis mediated by autoantibodies directed against red blood cells. The demonstration of antibody specificity is a very difficult procedure since autoantibodies in general are nonspecific of antigens and react with all erythrocytes analyzed. Occasionally, specificity is observed against the Rh system antigens. Objective: To determinate the specificity of erythrocytes autoantibodies in DAT positive autoimmune hemolytic anemia by MAIEA technique. Methods: The specificity and isotype of erythrocyte autoantibodies were determined in the eluate of 109 blood samples from patients with warm autoimmune hemolytic anemia, by means of the MAIEA technique and the use of monoclonal antibodies that recognized 11 blood group systems and the protein CD47. Results: In 100 percent of cases autoantibodies against Rh system antigens were detected; in 24 cases we detected autoantibodies of IgA and IgM isotypes that recognized different antigens that were recognized by IgG isotype autoantibodies. For idiopathic and secondary warm autoimmune hemolytic anemias, predominance was observed against three or more specificities. IgG was detected in 99.09 percent of the eluates, IgA in 35.77 percent and IgM in 16.51 percent. The high degree of hemolysis was related to the presence of several isotype autoantibodies against four or more blood group specificities. Conclusions: The MAIEA technique is a sensitive method that can be used to determine the specificities and isotypes of autoantibodies in patients with warm autoimmune hemolytic anemia.

Introducción: La anemia hemolítica autoinmune es un trastorno poco común, caracterizado por hemólisis mediada por autoanticuerpos dirigidos contra los glóbulos rojos. La demostración de la especificidad de los anticuerpos es un procedimiento muy difícil, ya que los autoanticuerpos en general no son específicos de los antígenos y reaccionan con todos los eritrocitos analizados. Ocasionalmente, se observa especificidad contra los antígenos del sistema Rh. Objetivo: Determinar la especificidad de los autoanticuerpos eritrocitarios en pacientes con anemias hemolíticas autoinmunes PAD positivas con el empleo de la técnica MAIEA Métodos: Se determinó la especificidad e isotipo de los autoanticuerpos eritrocitarios en el eluido de 109 muestras de sangre de pacientes con anemia hemolítica autoinmune caliente, mediante la técnica de MAIEA y el uso de anticuerpos monoclonales que reconocieron 11 sistemas de grupos sanguíneos y la proteína CD47. Resultados: En el ciento por ciento de los casos se detectaron autoanticuerpos contra los antígenos del sistema Rh. En 24 casos se descubrió autoanticuerpos de isotipos IgA e IgM que reconocieron diferentes antígenos que fueron a su vez reconocidos por autoanticuerpos de isotipo IgG. Se observó para las anemias hemolíticas autoinmunes calientes idiopáticas y secundarias; predominio frente a tres o más especificidades. Se detectó IgG en el 99,09 por ciento de los eluidos, IgA en 35,77 por ciento e IgM en 16,51 por ciento. El alto grado de hemólisis se relacionó con la presencia de varios isotipos de autoanticuerpos contra cuatro o más especificidades de grupos sanguíneos. Conclusiones: La técnica MAIEA es un método sensible que puede usarse para determinar las especificidades e isotipos de autoanticuerpos en pacientes con anemia hemolítica autoinmune caliente.

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INTRODUCTION: Hemolytic reactions are adverse complications associated with red blood cell transfusion. These reactions are associated with clinically important erythrocyte antigens, such as those of Duffy blood Meny (2010). Individuals with the Duffy null phenotype Fy (a-b-) are more likely to develop an alloimmunization reaction, resulting in an incompatibility with all available red blood cell units, thus increasing the risk of complications from their underlying disease Höher et al. (2018). Hence, it is important to determine the prevalence of the Fy (a-b-) phenotype in blood donors in our population and to create a database to ensure safe transfusion in patients with this phenotype. Moreover, we intend to establish whether there is any relationship between individuals with this phenotype and the sickle cell trait. We conducted this study to measure the prevalence of the Fy (a-b-) phenotype in our blood donors. MATERIALS AND METHODS: This prospective, descriptive study included black blood donors visiting the blood bank of a tertiary care university hospital between January 2019 and July 2019. We used Fitzpatrick classification phototype VI and self-identification to select donors in the study. The presence of the Duffy antigens Fya and Fyb was determined by the Coombs test using monoclonal antibodies. To establish the presence of hemoglobin S (HbS) and sickle cell traits, a hemoglobin electrophoresis test was performed. RESULTS: We included 166 patients in the study. Seventy-nine donors were identified as having Fy (a-b-). The prevalence of the Fy (a-b-) phenotype was 48 %. Sickle cell trait hemoglobinopathy was found in 6 blood donors (8%). CONCLUSION: This information is relevant for the implementation of a database of blood donors to guarantee the safety of transfusion in patients with a Fitzpatrick skin type 6at our institution. Moreover, it may provide information of interest to other blood banks in case donors with this phenotype are needed. No significant association was found between the donor Fy (a-b-) phenotype and the sickle cell trait.

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A imunohematologia veterinária vem ganhando interesse nos últimos anos devido a maior acessibilidade a tecnologias de detecção de antígenos e anticorpos, interesse dos donos e médicos veterinários em buscar uma melhor qualidade de vida para os animais e as necessidades de transfusões com o menor índice possível de reações indesejadas. Os cães possuem antígenos presentes na membrana de suas células vermelhas, podendo causar reações durante e após transfusões. Diferentemente de humanos e felinos, cães não possuem anticorpos naturais para os principais antígenos, a priori podendo ser transfundidos com qualquer tipo sanguíneo sem consequências posteriores, porém, se submetidos a uma segunda transfusão, sendo essa de um tipo sanguíneo incompatível e previamente sensibilizados, as chances de ocorrer reações transfusionais graves aumentam drasticamente, ocasionando danos ao animal, podendo levá-lo à morte. Por conta desses riscos se faz necessário uma maior atenção aos tipos sanguíneos desses animais onde 8 sistemas são reconhecidos internacionalmente classificados como sistema DEA, sendo eles DEA 1 e seus subtipos (DEA 1.1; DEA1.2; DEA 1.3); DEA 3; DEA 4; DEA 5; DEA 6; DEA 7 e DEA 8, e recentemente um novo sistema denominado Dal. Não há disponível ainda soros para os sistemas DEA 6 e DEA 8, tornando a pesquisa sobre esses antígenos dificultosa.(AU)

Veterinary immunohematology is gaining interest in recent years due to greater accessibility to antigen and antibody detection technologies, the interests of pet owners and veterinarians in seeking a better quality of life for animals, and requirement of transfusions with the lowest possible rate of collateral reactions. Dogs have antigens present in the membrane of their red blood cells that can cause reactions during and after transfusions. Unlike humans and cats, dogs do not have natural antibodies to the key antigens, and a priori they can be transfused with any type of blood without any further consequences. However, if they are ever subjected to a second transfusion, if using incompatible blood types and being previously sensitized, the likelihood of having serious transfusion reactions drastically increase, causing damage to the animal, which may even lead it to death. Due to those risks, greater attention is required to the blood type of those animals, which present 8 systems, internationally recognized and classified as the DEA system, namely DEA 1 and its subtypes (DEA 1.1; DEA 1.2; DEA 1.3); DEA 3; DEA 4; DEA 5; DEA 6; DEA 7 and DEA 8, and recently a new system referred to as Dal. No serum is yet available for DEA 6 and DEA 8 systems, hindering the research on those antigens.(AU)

La inmunohematología veterinaria ha ganado atención en los últimos años debido mayor accesibilidad a tecnologías de detección de antígenos y anticuerpos, interés de dueños y médicos veterinarios en buscar mejor calidad de vida para los animales y las necesidades de transfusiones con menor índice posible de reacciones indeseadas. Los perros poseen antígenos presentes en la membrana de sus células rojas, pudiendo causar reacciones durante y después de transfusiones. Diferentemente de humanos y felinos, perros no tienen anticuerpos naturales para los principales antígenos, a priori, pudiendo ser transfundidos con cualquier tipo de sangre sin consecuencias posteriores, todavía, si sometidos a una segunda transfusión, siendo esa de un tipo sanguíneo incompatible y previamente sensibilizados, la posibilidad de ocurrir reacciones transfusional grave aumenta drásticamente, ocasionando daños al animal, pudiendo llevarlo a la muerte. Por esos riesgos se hace necesario más atención a los tipos sanguíneos de esos animales, donde 8 sistemas son reconocidos internacionalmente y clasificados como sistema DEA, siendo ellos DEA 1 y sus subtipos (DEA 1.1; DEA 1.2; DEA 1.3); DEA 3; DEA 4; DEA 5; DEA 6; DEA 7 y DEA 8, y recién un nuevo sistema denominado Dal. No hay aún disponible sueros para los sistemas DEA 6 y DEA 8, haciendo dificultosa la investigación sobre esos antígenos.(AU)

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A imunohematologia veterinária vem ganhando interesse nos últimos anos devido a maior acessibilidade a tecnologias de detecção de antígenos e anticorpos, interesse dos donos e médicos veterinários em buscar uma melhor qualidade de vida para os animais e as necessidades de transfusões com o menor índice possível de reações indesejadas. Os cães possuem antígenos presentes na membrana de suas células vermelhas, podendo causar reações durante e após transfusões. Diferentemente de humanos e felinos, cães não possuem anticorpos naturais para os principais antígenos, a priori podendo ser transfundidos com qualquer tipo sanguíneo sem consequências posteriores, porém, se submetidos a uma segunda transfusão, sendo essa de um tipo sanguíneo incompatível e previamente sensibilizados, as chances de ocorrer reações transfusionais graves aumentam drasticamente, ocasionando danos ao animal, podendo levá-lo à morte. Por conta desses riscos se faz necessário uma maior atenção aos tipos sanguíneos desses animais onde 8 sistemas são reconhecidos internacionalmente classificados como sistema DEA, sendo eles DEA 1 e seus subtipos (DEA 1.1; DEA1.2; DEA 1.3); DEA 3; DEA 4; DEA 5; DEA 6; DEA 7 e DEA 8, e recentemente um novo sistema denominado Dal. Não há disponível ainda soros para os sistemas DEA 6 e DEA 8, tornando a pesquisa sobre esses antígenos dificultosa.(AU)

Veterinary immunohematology is gaining interest in recent years due to greater accessibility to antigen and antibody detection technologies, the interests of pet owners and veterinarians in seeking a better quality of life for animals, and requirement of transfusions with the lowest possible rate of collateral reactions. Dogs have antigens present in the membrane of their red blood cells that can cause reactions during and after transfusions. Unlike humans and cats, dogs do not have natural antibodies to the key antigens, and a priori they can be transfused with any type of blood without any further consequences. However, if they are ever subjected to a second transfusion, if using incompatible blood types and being previously sensitized, the likelihood of having serious transfusion reactions drastically increase, causing damage to the animal, which may even lead it to death. Due to those risks, greater attention is required to the blood type of those animals, which present 8 systems, internationally recognized and classified as the DEA system, namely DEA 1 and its subtypes (DEA 1.1; DEA 1.2; DEA 1.3); DEA 3; DEA 4; DEA 5; DEA 6; DEA 7 and DEA 8, and recently a new system referred to as Dal. No serum is yet available for DEA 6 and DEA 8 systems, hindering the research on those antigens.(AU)

La inmunohematología veterinaria ha ganado atención en los últimos años debido mayor accesibilidad a tecnologías de detección de antígenos y anticuerpos, interés de dueños y médicos veterinarios en buscar mejor calidad de vida para los animales y las necesidades de transfusiones con menor índice posible de reacciones indeseadas. Los perros poseen antígenos presentes en la membrana de sus células rojas, pudiendo causar reacciones durante y después de transfusiones. Diferentemente de humanos y felinos, perros no tienen anticuerpos naturales para los principales antígenos, a priori, pudiendo ser transfundidos con cualquier tipo de sangre sin consecuencias posteriores, todavía, si sometidos a una segunda transfusión, siendo esa de un tipo sanguíneo incompatible y previamente sensibilizados, la posibilidad de ocurrir reacciones transfusional grave aumenta drásticamente, ocasionando daños al animal, pudiendo llevarlo a la muerte. Por esos riesgos se hace necesario más atención a los tipos sanguíneos de esos animales, donde 8 sistemas son reconocidos internacionalmente y clasificados como sistema DEA, siendo ellos DEA 1 y sus subtipos (DEA 1.1; DEA 1.2; DEA 1.3); DEA 3; DEA 4; DEA 5; DEA 6; DEA 7 y DEA 8, y recién un nuevo sistema denominado Dal. No hay aún disponible sueros para los sistemas DEA 6 y DEA 8, haciendo dificultosa la investigación sobre esos antígenos.(AU)

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In domestic cats, blood group AB consists of three blood types A, B and AB. A preliminary identification by typing technique is essential to minimize the occurrence of transfusion reactions and neonatal isoerythrolysis. Therefore, the aim of this study was to determine the frequency of blood types and estimate the probability of random transfusion reactions in domestic cats from Pará state, Brazil. Two-hundred thirty five animals were examined in Belém and Castanhal municipalities. Blood samples were collected by puncture of the cephalic or jugular vein, stored in EDTA tubes and refrigerated until analysis. The hemagglutination and reverse typing techniques were used to confirm the blood types of cats. Type A is the most frequently detected (98.3%), followed by type AB (1.28%) and B (0.42%). Likelihood of adverse reactions in random transfusion was 2.09%, with 1.67% mild to moderate and 0.42% potentially fatal. The results showed a higher frequency of A blood type and that the frequency of AB type was higher than B type. In conclusion, to know the frequency of the blood types according to geographic region minimizes the risk of transfusion reactions.(AU)

Em felinos domésticos, o grupo sanguíneo AB é constituído por três tipos de sangue A, B e AB. A identificação prévia, por meio da técnica de tipagem, é essencial para minimizar a ocorrência de reações transfusionais e isoeritrólise neonatal. Este estudo teve por objetivos determinar a frequência dos tipos sanguíneos e estimar a probabilidade de ocorrência de reações transfusionais aleatórias em gatos domésticos oriundos do estado do Pará, Brasil. Foram utilizados 235 animais domiciliados nos municípios de Belém e Castanhal. As amostras de sangue foram coletadas por punção da veia cefálica ou jugular, armazenadas em tubos com EDTA e refrigeradas até as análises. As técnicas de hemaglutinação e tipagem reversa foram utilizadas para confirmar os tipos sanguíneos dos felinos. O tipo A foi ao mais detectado (98,3%), seguido pelo tipo AB (1,28%) e B (0,42%). A probabilidade de ocorrência de reações adversas em transfusões aleatórias foi de 2,09%, sendo 1,67% leves a moderadas e 0,42% potencialmente fatais. Os resultados encontrados demonstram que na população de felinos estudada há uma maior frequência de gatos do tipo A e que a frequência do tipo AB foi maior que o tipo B. Em conclusão, conhecer a frequência dos tipos sanguíneos de acordo com a região geográfica minimiza o risco de reações transfusionais.(AU)

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In domestic cats, blood group AB consists of three blood types A, B and AB. A preliminary identification by typing technique is essential to minimize the occurrence of transfusion reactions and neonatal isoerythrolysis. Therefore, the aim of this study was to determine the frequency of blood types and estimate the probability of random transfusion reactions in domestic cats from Pará state, Brazil. Two-hundred thirty five animals were examined in Belém and Castanhal municipalities. Blood samples were collected by puncture of the cephalic or jugular vein, stored in EDTA tubes and refrigerated until analysis. The hemagglutination and reverse typing techniques were used to confirm the blood types of cats. Type A is the most frequently detected (98.3%), followed by type AB (1.28%) and B (0.42%). Likelihood of adverse reactions in random transfusion was 2.09%, with 1.67% mild to moderate and 0.42% potentially fatal. The results showed a higher frequency of A blood type and that the frequency of AB type was higher than B type. In conclusion, to know the frequency of the blood types according to geographic region minimizes the risk of transfusion reactions.

Em felinos domésticos, o grupo sanguíneo AB é constituído por três tipos de sangue A, B e AB. A identificação prévia, por meio da técnica de tipagem, é essencial para minimizar a ocorrência de reações transfusionais e isoeritrólise neonatal. Este estudo teve por objetivos determinar a frequência dos tipos sanguíneos e estimar a probabilidade de ocorrência de reações transfusionais aleatórias em gatos domésticos oriundos do estado do Pará, Brasil. Foram utilizados 235 animais domiciliados nos municípios de Belém e Castanhal. As amostras de sangue foram coletadas por punção da veia cefálica ou jugular, armazenadas em tubos com EDTA e refrigeradas até as análises. As técnicas de hemaglutinação e tipagem reversa foram utilizadas para confirmar os tipos sanguíneos dos felinos. O tipo A foi ao mais detectado (98,3%), seguido pelo tipo AB (1,28%) e B (0,42%). A probabilidade de ocorrência de reações adversas em transfusões aleatórias foi de 2,09%, sendo 1,67% leves a moderadas e 0,42% potencialmente fatais. Os resultados encontrados demonstram que na população de felinos estudada há uma maior frequência de gatos do tipo A e que a frequência do tipo AB foi maior que o tipo B. Em conclusão, conhecer a frequência dos tipos sanguíneos de acordo com a região geográfica minimiza o risco de reações transfusionais.

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Objetivou-se com este estudo determinar a frequência de antígenos eritrocitários do sistema AB em felinos domésticos da Paraíba, Brasil. Foram selecionados aleatoriamente 178 gatos, clinicamente saudáveis, sem pré-requisitos quanto a sexo ou raça, com peso corporal acima de 1,5 kg e faixa etária acima de um ano de idade, abordados no ato da consulta ambulatorial em clínicas médicas de pequenos animais distribuídas entre três cidades da Paraíba (João Pessoa, Campina Grande e Patos). A determinação dos tipos sanguíneos foi realizada através do teste de hemaglutinação em tubo de ensaio e, a tipagem reversa foi realizada para as amostras tipos B e AB para confirmação e evidenciação de aloanticorpos naturais. Neste estudo a frequência relativa de antígenos eritrocitários A, B e AB em sua totalidade para felinos sem raça foram 98,1%, 1,21% e 0,69%, respectivamente. Todos os felinos com definição racial foram do tipo sanguíneo A. Diante destes, a probabilidade de ocorrência de reações transfusionais aleatórias obtidas foi de 2,78%, sendo cerca 40% (1,11%) potencialmente fatais. Desta forma, dado o conhecimento da frequência dos diferentes tipos sanguíneos em felinos, de uma determinada região, conclui-se que a tipagem sanguínea e o teste de compatibilidade, são importantes ferramentas que permitem ao médico veterinário tomar medidas preventivas que minimizem riscos de ocorrência de reações transfusionais e isoeletrólise neonatal e, estabelece pré-requisitos a respeito dos riscos de procedimentos hemoterápicos em felinos que circunstancialmente necessitem serem conduzidos de forma aleatória.

The objective of this study was to determine the frequency of the AB blood group antigens system in domestic cats of Paraíba, Brazil. We randomly selected 178 cats which were clinically healthy, with no prerequisites in terms of gender or race, weighing above 1.5 kg, and were over one year of age. These cats were randomly selected when they entered the small animal clinic facilities in the cities of João Pessoa, Campina Grande and Patos. The determination of blood types was made using the hemagglutination test tube, and the reverse typing was performed for samples B and AB types and for confirmation of alloantibodies natural disclosure. In this study the relative frequency of A, B and AB blood group antigens in cats without a determined breed was 98.1%, 1.21% and 0.69% respectively. All cats with breed definition were blood type A. The likelihood of random transfusion reactions was 2.78%, approximately 40% (1.11%) potentially fatal. Thus, given knowledge of the frequency of different blood types in cats, from a given region, it is concluded that blood typing and compatibility test are important tools that enable the veterinarian to take preventative measures to minimize risks of isoelectrolisys reactions and neonatal transfusion, and establishes prerequisites about the risks of hemotherapic procedures in cats that require circumstantially to be conducted randomly.

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Objetivou-se com este estudo determinar a frequência de antígenos eritrocitários do sistema AB em felinos domésticos da Paraíba, Brasil. Foram selecionados aleatoriamente 178 gatos, clinicamente saudáveis, sem pré-requisitos quanto a sexo ou raça, com peso corporal acima de 1,5 kg e faixa etária acima de um ano de idade, abordados no ato da consulta ambulatorial em clínicas médicas de pequenos animais distribuídas entre três cidades da Paraíba (João Pessoa, Campina Grande e Patos). A determinação dos tipos sanguíneos foi realizada através do teste de hemaglutinação em tubo de ensaio e, a tipagem reversa foi realizada para as amostras tipos B e AB para confirmação e evidenciação de aloanticorpos naturais. Neste estudo a frequência relativa de antígenos eritrocitários A, B e AB em sua totalidade para felinos sem raça foram 98,1%, 1,21% e 0,69%, respectivamente. Todos os felinos com definição racial foram do tipo sanguíneo A. Diante destes, a probabilidade de ocorrência de reações transfusionais aleatórias obtidas foi de 2,78%, sendo cerca 40% (1,11%) potencialmente fatais. Desta forma, dado o conhecimento da frequência dos diferentes tipos sanguíneos em felinos, de uma determinada região, conclui-se que a tipagem sanguínea e o teste de compatibilidade, são importantes ferramentas que permitem ao médico veterinário tomar medidas preventivas que minimizem riscos de ocorrência de reações transfusionais e isoeletrólise neonatal e, estabelece pré-requisitos a respeito dos riscos de procedimentos hemoterápicos em felinos que circunstancialmente necessitem serem conduzidos de forma aleatória.(AU)

The objective of this study was to determine the frequency of the AB blood group antigens system in domestic cats of Paraíba, Brazil. We randomly selected 178 cats which were clinically healthy, with no prerequisites in terms of gender or race, weighing above 1.5 kg, and were over one year of age. These cats were randomly selected when they entered the small animal clinic facilities in the cities of João Pessoa, Campina Grande and Patos. The determination of blood types was made using the hemagglutination test tube, and the reverse typing was performed for samples B and AB types and for confirmation of alloantibodies natural disclosure. In this study the relative frequency of A, B and AB blood group antigens in cats without a determined breed was 98.1%, 1.21% and 0.69% respectively. All cats with breed definition were blood type A. The likelihood of random transfusion reactions was 2.78%, approximately 40% (1.11%) potentially fatal. Thus, given knowledge of the frequency of different blood types in cats, from a given region, it is concluded that blood typing and compatibility test are important tools that enable the veterinarian to take preventative measures to minimize risks of isoelectrolisys reactions and neonatal transfusion, and establishes prerequisites about the risks of hemotherapic procedures in cats that require circumstantially to be conducted randomly.(AU)

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