RESUMO

This study was carried out to evaluate the effect of breeder age and hatching temperature variations on chick quality. The experiment was a completely randomized design in a 3x2 factorial arrangement (three breeder ages and two hatching temperatures). We used 720 eggs from three breeder ages (30, 42, or 64 weeks). The hatching temperature for control group was 37.5 C during all the hatching period and for the elevated temperature group, it was 39.0 C during 6h between 10 and 18 days of incubation. Five chicks per treatment were euthanized by cervical dislocation for bursal and spleen morphological measurements. The data were analyzed using ANOVA and the differences among means were compared by Tukey test (5%). Chicks from older flock had larger follicular area of bursa de Fabricius when hatched under normal temperature. The higher hatching temperature induced intestinal development because chicks hatched under high temperature had bigger crypt depth. Changes in hatching machine temperature affected young flock chick quality. Chicks from older flocks had better immune response.(AU)

Objetivou-se avaliar o efeito da idade da matriz e da variação da temperatura de incubação sobre a qualidade do pinto neonato. O delineamento foi inteiramente causalizado em esquema fatorial 3x2 (três idades x duas temperaturas de incubação). Foram incubados 720 ovos, provenientes de matrizes com diferentes idades (30, 42 ou 64 semanas). A temperatura da máquina de incubar para os grupos controle foi mantida constante (37,5 ºC) e para os tratamentos com estresse por calor foi aplicada uma temperatura de 39,0 ºC por 6h durante o período de 10 a 18 dias de incubação. Cinco pintos por tratamento foram sacrificados para coletas de órgãos e realizada a histomorfometria intestinal, de baço e bursa. Os dados foram submetidos a análise de variância e foi utilizado o teste de Tukey (5%). A área dos folículos da bursa foi maior nos pintos oriundos de matrizes mais velhas quando os ovos foram incubados em temperatura ideal. A temperatura de 39,0 ºC estimulou o desenvolvimento intestinal. A variação na temperatura de incubação prejudicou a qualidade de pintos, sobretudo para pintos originados de matrizes jovens. Pintos oriundos de matrizes velhas apresentaram melhor resposta imune e desenvolvimento intestinal, independentemente da variação da temperatura de incubação.(AU)

Assuntos

RESUMO

This study was carried out to evaluate the effect of breeder age and hatching temperature variations on chick quality. The experiment was a completely randomized design in a 3x2 factorial arrangement (three breeder ages and two hatching temperatures). We used 720 eggs from three breeder ages (30, 42, or 64 weeks). The hatching temperature for control group was 37.5 C during all the hatching period and for the elevated temperature group, it was 39.0 C during 6h between 10 and 18 days of incubation. Five chicks per treatment were euthanized by cervical dislocation for bursal and spleen morphological measurements. The data were analyzed using ANOVA and the differences among means were compared by Tukey test (5%). Chicks from older flock had larger follicular area of bursa de Fabricius when hatched under normal temperature. The higher hatching temperature induced intestinal development because chicks hatched under high temperature had bigger crypt depth. Changes in hatching machine temperature affected young flock chick quality. Chicks from older flocks had better immune response.

Objetivou-se avaliar o efeito da idade da matriz e da variação da temperatura de incubação sobre a qualidade do pinto neonato. O delineamento foi inteiramente causalizado em esquema fatorial 3x2 (três idades x duas temperaturas de incubação). Foram incubados 720 ovos, provenientes de matrizes com diferentes idades (30, 42 ou 64 semanas). A temperatura da máquina de incubar para os grupos controle foi mantida constante (37,5 ºC) e para os tratamentos com estresse por calor foi aplicada uma temperatura de 39,0 ºC por 6h durante o período de 10 a 18 dias de incubação. Cinco pintos por tratamento foram sacrificados para coletas de órgãos e realizada a histomorfometria intestinal, de baço e bursa. Os dados foram submetidos a análise de variância e foi utilizado o teste de Tukey (5%). A área dos folículos da bursa foi maior nos pintos oriundos de matrizes mais velhas quando os ovos foram incubados em temperatura ideal. A temperatura de 39,0 ºC estimulou o desenvolvimento intestinal. A variação na temperatura de incubação prejudicou a qualidade de pintos, sobretudo para pintos originados de matrizes jovens. Pintos oriundos de matrizes velhas apresentaram melhor resposta imune e desenvolvimento intestinal, independentemente da variação da temperatura de incubação.

Assuntos

RESUMO

Abstract: This study was carried out to evaluate the effect of breeder age and hatching temperature variations on chick quality. The experiment was a completely randomized design in a 3x2 factorial arrangement (three breeder ages and two hatching temperatures). We used 720 eggs from three breeder ages (30, 42, or 64 weeks). The hatching temperature for control group was 37.5 ºC during all the hatching period and for the elevated temperature group, it was 39.0 ºC during 6h between 10 and 18 days of incubation. Five chicks per treatment were euthanized by cervical dislocation for bursal and spleen morphological measurements. The data were analyzed using ANOVA and the differences among means were compared by Tukey test (5%). Chicks from older flock had larger follicular area of bursa de Fabricius when hatched under normal temperature. The higher hatching temperature induced intestinal development because chicks hatched under high temperature had bigger crypt depth. Changes in hatching machine temperature affected young flock chick quality. Chicks from older flocks had better immune response.

Resumo: Objetivou-se avaliar o efeito da idade da matriz e da variação da temperatura de incubação sobre a qualidade do pinto neonato. O delineamento foi inteiramente casualizado em esquema fatorial 3x2 (três idades x duas temperaturas de incubação). Foram incubados 720 ovos, provenientes de matrizes com diferentes idades (30, 42 ou 64 semanas). A temperatura da máquina de incubar para os grupos controle foi mantida constante (37,5 ºC) e para os tratamentos com estresse por calor foi aplicada uma temperatura de 39,0 ºC por 6h durante o período de 10 a 18 dias de incubação. Cinco pintos por tratamento foram sacrificados para coletas de órgãos e realizada a histomorfometria intestinal, de baço e bursa. Os dados foram submetidos a análise de variância e foi utilizado o teste de Tukey (5%). A área dos folículos da bursa foi maior nos pintos oriundos de matrizes mais velhas quando os ovos foram incubados em temperatura ideal. A temperatura de 39,0 ºC estimulou o desenvolvimento intestinal. A variação na temperatura de incubação prejudicou a qualidade de pintos, sobretudo para pintos originados de matrizes jovens. Pintos oriundos de matrizes velhas apresentaram melhor resposta imune e desenvolvimento intestinal, independentemente da variação da temperatura de incubação.

RESUMO

The presence of Cryptosporidium spp. was detected in broiler chickens of 32-40 days of age, colonizing the bursa of Fabricius. The histologic study with haematoxylin and eosin staining was done on specimens of trachea, complete intestinal tract and bursa. Samples of intestinal content were also studied using Kinyoun staining technique. All birds with signs of illness were positive to the presence of parasite, showing a hypertrophic bursa of Fabricius, filled with caseous content. The bursal epithelial cells were full of different developmental stages of Cryptosporidium spp. This note describing the presence of Cryptosporidium spp. in industrial flocks of broiler chickens, is the first report of this parasite in Uruguay.(AU)

A presença de Cryptosporidium spp. foi detectada em frangos de corte de 32-40 dias de idade, colonizando a bursa de Fabrícius. O estudo histológico com hematoxilina e eosina foi feito em amostras de traqueia, trato intestinal completo e bursa. As amostras de conteúdo intestinal também foram estudadas utilizando a técnica de coloração de Kinyoun. Todas as aves com sinais de doença foram positivas para a presença do parasita, mostrando uma bursa de Fabrícius hipertrófica com grande quantidade de conteúdo caseoso. As células epiteliais bursais estavam repletas de diferentes estágios de desenvolvimento de Cryptosporidium spp. Esta nota, que descreve a presença de Cryptosporidium spp. em lotes industriais de frangos de corte, é o primeiro relato deste parasita no Uruguai.(AU)

Assuntos

RESUMO

The presence of Cryptosporidium spp. was detected in broiler chickens of 32-40 days of age, colonizing the bursa of Fabricius. The histologic study with haematoxylin and eosin staining was done on specimens of trachea, complete intestinal tract and bursa. Samples of intestinal content were also studied using Kinyoun staining technique. All birds with signs of illness were positive to the presence of parasite, showing a hypertrophic bursa of Fabricius, filled with caseous content. The bursal epithelial cells were full of different developmental stages of Cryptosporidium spp. This note describing the presence of Cryptosporidium spp. in industrial flocks of broiler chickens, is the first report of this parasite in Uruguay.

A presença de Cryptosporidium spp. foi detectada em frangos de corte de 32-40 dias de idade, colonizando a bursa de Fabrícius. O estudo histológico com hematoxilina e eosina foi feito em amostras de traqueia, trato intestinal completo e bursa. As amostras de conteúdo intestinal também foram estudadas utilizando a técnica de coloração de Kinyoun. Todas as aves com sinais de doença foram positivas para a presença do parasita, mostrando uma bursa de Fabrícius hipertrófica com grande quantidade de conteúdo caseoso. As células epiteliais bursais estavam repletas de diferentes estágios de desenvolvimento de Cryptosporidium spp. Esta nota, que descreve a presença de Cryptosporidium spp. em lotes industriais de frangos de corte, é o primeiro relato deste parasita no Uruguai.

RESUMO

Fifty Bursa of Fabricius (BF) were examined by conventional optical microscopy and digital images were acquired and processed using Matlab® 6.5 software. The Artificial Neuronal Network (ANN) was generated using Neuroshell® Classifier software and the optical and digital data were compared. The ANN was able to make a comparable classification of digital and optical scores. The use of ANN was able to classify correctly the majority of the follicles, reaching sensibility and specificity of 89 percent and 96 percent, respectively. When the follicles were scored and grouped in a binary fashion the sensibility increased to 90 percent and obtained the maximum value for the specificity of 92 percent. These results demonstrate that the use of digital image analysis and ANN is a useful tool for the pathological classification of the BF lymphoid depletion. In addition it provides objective results that allow measuring the dimension of the error in the diagnosis and classification therefore making comparison between databases feasible.(AU)

Cinquenta Bursa de Fabrícius (BF) foram examinadas através de microscopia óptica convencional e imagens digitais foram obtidas e processadas através do software Matlab® 6.5. Redes Neurais Artificiais (ANN) foram geradas com a utilização do software Neuroshell® Classifier, e os dados das análises óptica e digital foram comparados. A ANN classificou corretamente a maioria dos folículos, atingindo sensibilidade e especificidade de 89 por cento e 96 por cento, respectivamente. Quando os folículos foram agrupados de forma binária houve um aumento da sensibilidade para 90 por cento e obteve-se um valor máximo para a especificidade de 92 por cento. Estes resultados demonstram que o uso da análise digital de imagem associada à ANNé uma ferramenta bastante útil para a classificação patológica da depleção linfóide da BF. Além disso, fornece resultados objetivos que permitem medir a dimensão do erro classificatório, tornando possível a comparação entre distintos bancos de dados.(AU)

Assuntos

RESUMO

Fifty Bursa of Fabricius (BF) were examined by conventional optical microscopy and digital images were acquired and processed using Matlab® 6.5 software. The Artificial Neuronal Network (ANN) was generated using Neuroshell® Classifier software and the optical and digital data were compared. The ANN was able to make a comparable classification of digital and optical scores. The use of ANN was able to classify correctly the majority of the follicles, reaching sensibility and specificity of 89 percent and 96 percent, respectively. When the follicles were scored and grouped in a binary fashion the sensibility increased to 90 percent and obtained the maximum value for the specificity of 92 percent. These results demonstrate that the use of digital image analysis and ANN is a useful tool for the pathological classification of the BF lymphoid depletion. In addition it provides objective results that allow measuring the dimension of the error in the diagnosis and classification therefore making comparison between databases feasible.

Cinquenta Bursa de Fabrícius (BF) foram examinadas através de microscopia óptica convencional e imagens digitais foram obtidas e processadas através do software Matlab® 6.5. Redes Neurais Artificiais (ANN) foram geradas com a utilização do software Neuroshell® Classifier, e os dados das análises óptica e digital foram comparados. A ANN classificou corretamente a maioria dos folículos, atingindo sensibilidade e especificidade de 89 por cento e 96 por cento, respectivamente. Quando os folículos foram agrupados de forma binária houve um aumento da sensibilidade para 90 por cento e obteve-se um valor máximo para a especificidade de 92 por cento. Estes resultados demonstram que o uso da análise digital de imagem associada à ANNé uma ferramenta bastante útil para a classificação patológica da depleção linfóide da BF. Além disso, fornece resultados objetivos que permitem medir a dimensão do erro classificatório, tornando possível a comparação entre distintos bancos de dados.

Assuntos

RESUMO

Vinte e nove pintos SPF de um dia foram inoculados com o vírus da doença infecciosa da bursa de Fabricius (VDIB) para avaliar a ocorrência precoce de apoptose e a expressão da proteína viral 2 (VP2) e da enzima gliceraldeído fosfato dehidrogenase (GAPDH). Os animais foram distribuídos em cinco grupos: 1-controle; e 2 a 5- com 24, 48, 72 e 96 horas pós-inoculação, respectivamente. Fragmentos da bursa de Fabricius foram colhidos para processamento histológico e extração de RNA. Lâminas coradas em HE e TUNEL (marcação in situ da fragmentação do genoma com transferase terminal de deoxinucleotídeo) foram utilizadas na morfometria do índice apoptótico. Amostras de mRNA foram testadas para a expressão dos genes VP2 e GAPDH utilizando-se transcrição reversa e RT-PCR. Utilizou-se um kit SYBR GREEN PCR, e a reação foi desenvolvida em ABI Prism 7000 SDS. Os índices apoptóticos cresceram progressivamente indicando uma relação na atrofia bursal causada pelo VDIB. Paralelamente, os resultados da PCR em tempo real demonstraram queda da carga viral nas células linfóides da bursa nos diferentes intervalos de tempo do experimento. Esses resultados sugerem um papel protetor da apoptose na diminuição da replicação viral.(AU)

Twenty-nine SPF 1-day-old chicks were inoculated with infectious bursal disease virus (IBDV) to evaluate early apoptosis and the expression of viral protein 2 (VP2) and glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenease (GAPDH). Five groups were formed: G1-control -and G2 to G5, - 24, 48, 72 and 96 hours post inoculation, respectively. Half of each BF was fixed and processed by routine techniques. To quantify apoptosis, 5µm-thick sections were stained with HE and submitted to TUNEL (terminal transferase UDP nick end labeling) technique. mRNA was extracted from pooled samples of 3 animals/group and used for the expression of VP2 and GADPH genes using the reverse transcription and real-time polymerase chain reaction (RT-PCR). A SYBR GREEN PCR kit was used and the reaction was carried out in an ABI Prism 7000 SDS. Apoptotic indexes progressively increased indicating a role of IBDV in inducing hypotrophy of the BF. Also, it was showed that as long as apoptosis increased, viral protein expression decreased, which suggests that apoptosis plays a role as a defense mechanism against viral replication.(AU)

Assuntos

RESUMO

ABSTRACT The study was divided into three experiments. In the first one, broilers were distributed into six groups and vaccinated against infectious bursal disease at 14 days of age: T1-not vaccinated, T2-Lukert1 (intermediate), T3-Lukert2 (intermediate plus), T4-228E, T5-V877 and T6-Winterfield 2512 (hot strains). Bursas of Fabricius (BF) were collected at 17, 21, 28 and 35 days to measure BF relative weight (BFRW), diameter, histological examination and image processing analysis (IPA). At one, 14, 21, 28 and 35 days of age, samples of blood taken from eight birds from each group for serology analysis by ELISA test. Hot strains vaccines induced reduction of BFRW and BF diameter, higher histological score lesion degree, more lymphocyte depletion on the BF follicles and higher IBD antibody titer. In the second experiment, 16 birds from groups T1 to T6 were isolated and challenged with a very virulent strain of IBDV (vvIBDV) at 25 days of age. Only groups T4, T5 and T6 were totally protected against vvIBDV challenge. In the third experiment, the immunosuppressive potential of each vaccine was determined by examining the ability of IBDVvaccinated birds to respond to Newcastle disease (ND) vaccination and challenge. None of the vaccines was found to be immunodepressive.

RESUMO O estudo foi dividido em três experimentos. No primeiro, frangos foram distribuídos em seis grupos e vacinados contra a Doença Infecciosa da Bursa (IBD) aos 14 dias de idade: T1-não vacinados, T2-Lukert1 (intermediária), T3-Lukert2 (intermediária plus), T4-228E, T5-V877 e T6-Winterfield 2512 (cepa forte). As bursas de Fabrícius (BF) foram colhidas aos 17, 21, 28 e 35 dias para mensurar o seus pesos relativos da BF (BFRW), diâmetros, exames histológicos e processamento de imagem imagens(IPA). Ao primeiro, 14, 21, 28 e 35 dias de idade, foram colhidas amostras de sangue de oito aves de cada grupo para a realização de sorologia através do método ELISA indireto. As vacinas cepa forte induziram redução do BFRW peso e do diâmetro da BF, maior grau de lesão histológica e depleção linfocitária e títulos mais elevados de anticorpos. No segundo experimento, 16 aves dos grupos T1 ao T6 foram isoladas e desafiadas com o vírus muito virulento da IBD (vvIBDV) aos 25 dias de idade. Somente os grupos T4, T5 e T6 foram completamente protegidos do desafio com vvIBDV. No terceiro experimento, o potencial imunossupressor de cada vacina foi determinado através da capacidade das aves vacinadas responderem à vacinação contra a Doença de Newcastle (ND) e posterior desafio. Nenhuma vacina apresentou-se imunossupressora.

RESUMO

Parasites of the gennus Cryptosporidium infect several animal species.The disease resultant is the criptosporidiosis, an important zoonosis spreaded worldwide. In poultry, the infection has been reported in several species. This study goal was to identify the parasite presence in 208 bursa of Fabricius samples, 208 intestine and 208 of trachea, collected at chicks (Gallus gallus sp) of different ages, killed at three farms in Santa Maria city, Rio Grande do Sul State, Brazil. Three printings of each sample were done,on glass slides colored through the Ziehl Neelsen technique modified with Dimetil Sulfóxido (DMSO), Ziehl Neelsen modifed by Henriksen and Pohlens (HP), Ziehl Neelsen (ZN) and Kinyoun (K), completing 1872 printings analyzed in optical microscopy (1000 x). At this final number, at the different colorations done, oocysts of the parasite Cryptosporidium sp. were viewed in 18 trachea printings, 42 of bursa de Fabricius and 29 of intestine, resulting positive, 89 printings. From these 89, 44 were identified through the technique DMSO, 32 through HP, three through ZN and 10 through K. Cryptosporidium sp. parasites oocysts were found with more frequency from printings of bursa the Fabricius. The coloration method, of those utilized, was the one which had the better visualization of the oocysts was the DMSO.

Parasitas do gênero Cryptosporidium infectam várias espécies de animais, e a enfermidade resultante é a criptosporidiose, importante zoonose de distribuição mundial. Em aves, a infecção tem sido reportada em várias espécies. Este trabalho objetivou identificar a presença do parasita em 208 amostras de bursa de Fabricius, 208 amostras de intestino e 208 de traquéia, coletadas de frangos (Gallus gallus sp) de diferentes idades, abatidos em três propriedades rurais do município de Santa Maria, RS. Foram feitas três impressões de cada amostra em lâminas para microscopia, coradas pelas técnicas de Ziehl Neelsen modificada com Dimetil Sulfóxido (DMSO), Ziehl Neelsen modificada por Henriksen e Pohlens (HP), Ziehl Neelsen (ZN) e Kinyoun (K), perfazendo 1872 impressões analisadas em microscopia óptica (1000 x). Neste total, nas diferentes colorações empregadas, oocistos do parasita Cryptosporidium sp. foram visualizados em 18 impressões de traquéia, 42 de bursa de Fabricius e 29 de intestino, resultando positivas, portanto, 89 impressões. Destas, 44 foram identificadas pela técnica de DMSO, 32 por HP, três por ZN e 10 por K. Pode-se concluir que os oocistos do parasita Cryptosporidium sp. foram visualizados com maior freqüência nas impressões de bursa de Fabricius, e que o método de coloração, dentre os utilizados, que proporcionou a maior visualização dos oocistos foi o DMSO.

RESUMO

Parasites of the gennus Cryptosporidium infect several animal species.The disease resultant is the criptosporidiosis, an important zoonosis spreaded worldwide. In poultry, the infection has been reported in several species. This study goal was to identify the parasite presence in 208 bursa of Fabricius samples, 208 intestine and 208 of trachea, collected at chicks (Gallus gallus sp) of different ages, killed at three farms in Santa Maria city, Rio Grande do Sul State, Brazil. Three printings of each sample were done,on glass slides colored through the Ziehl Neelsen technique modified with Dimetil Sulfóxido (DMSO), Ziehl Neelsen modifed by Henriksen and Pohlens (HP), Ziehl Neelsen (ZN) and Kinyoun (K), completing 1872 printings analyzed in optical microscopy (1000 x). At this final number, at the different colorations done, oocysts of the parasite Cryptosporidium sp. were viewed in 18 trachea printings, 42 of bursa de Fabricius and 29 of intestine, resulting positive, 89 printings. From these 89, 44 were identified through the technique DMSO, 32 through HP, three through ZN and 10 through K. Cryptosporidium sp. parasites oocysts were found with more frequency from printings of bursa the Fabricius. The coloration method, of those utilized, was the one which had the better visualization of the oocysts was the DMSO.

Parasitas do gênero Cryptosporidium infectam várias espécies de animais, e a enfermidade resultante é a criptosporidiose, importante zoonose de distribuição mundial. Em aves, a infecção tem sido reportada em várias espécies. Este trabalho objetivou identificar a presença do parasita em 208 amostras de bursa de Fabricius, 208 amostras de intestino e 208 de traquéia, coletadas de frangos (Gallus gallus sp) de diferentes idades, abatidos em três propriedades rurais do município de Santa Maria, RS. Foram feitas três impressões de cada amostra em lâminas para microscopia, coradas pelas técnicas de Ziehl Neelsen modificada com Dimetil Sulfóxido (DMSO), Ziehl Neelsen modificada por Henriksen e Pohlens (HP), Ziehl Neelsen (ZN) e Kinyoun (K), perfazendo 1872 impressões analisadas em microscopia óptica (1000 x). Neste total, nas diferentes colorações empregadas, oocistos do parasita Cryptosporidium sp. foram visualizados em 18 impressões de traquéia, 42 de bursa de Fabricius e 29 de intestino, resultando positivas, portanto, 89 impressões. Destas, 44 foram identificadas pela técnica de DMSO, 32 por HP, três por ZN e 10 por K. Pode-se concluir que os oocistos do parasita Cryptosporidium sp. foram visualizados com maior freqüência nas impressões de bursa de Fabricius, e que o método de coloração, dentre os utilizados, que proporcionou a maior visualização dos oocistos foi o DMSO.