RESUMO

The snake venom metalloproteinases (SVMPs) are abundant enzymes in the venoms of viper snakes and responsible for most of the symptoms of envenoming. Their actions are related to the hydrolysis of extracellular matrix components, plasma proteins and hydrolysis or binding to cell surface proteins resulting in the activation or inhibition of their activity. In this work, the main objective was to analyze the implications of the structural and functional diversity of B. neuwiedi venom SVMPs, evaluating their effects on mammal’s hemostatic disorders and against prey or predator of snakes. Initially, we elucidated the partial amino acid sequence of class P-I SVMPs (which presented only 78% similarity to each other), in addition to obtaining the crystal of one. Subsequently we identified different degrees of hemorrhage induced by class P-III SVMPs (with hemorrhagic minimum doses of: 3.08 μg for Ic, 5.67 μg for IIb and 7.55 μg for IIc). In addition, different actions of the SVMPs tested (both P-I and P-III) were observed against extracellular matrix components (adhesion and cleavage) and against endothelial cells (adhesion and viability). It was also observed in the coagulation experiment, the presence of SVMPs that specifically acted on mammalian blood, as well as others that acted only on bird blood, demonstrating a selective action of SVMPs. With this we conclude that there must be the contribution of other factors, besides the structural domains, to the functional diversity of SVMPs. Therefore, the functional diversity of SVMPs contributed to the adaptive role of snake venoms. Key words: Bothrops, metalloproteinases, hemostasis, proteolytic e

As metaloproteinases de venenos de serpentes (SVMPs) são enzimas abundantes em venenos de espécies da família Viperidae e responsáveis por grande parte dos sintomas do envenenamento. Sua ação está relacionada com a proteólise dos componentes da matriz extracelular, proteínas plasmáticas e também com hidrólise ou ligação a proteínas de superfície celular induzindo a ativação ou inibição da atividade das mesmas. Neste trabalho, o principal objetivo foi analisar as implicações da diversidade estrutural e funcional das SVMPs do veneno de B. neuwiedi, avaliando seus efeitos em distúrbios hemostáticos de mamíferos e frente a presa ou predador de serpentes. Inicialmente, elucidamos a sequência parcial de aminoácidos das SVMPs de classe P-I (que apresentaram apenas 78% de similaridade entre si), além de obter o cristal de uma. Posteriormente identificamos diferentes graus de hemorragia induzidos pelas SVMPs de classe P-III (com doses mínimas hemorrágicas de: 3,08 μg para Ic; 5,67 μg para IIb e 7,55 μg para IIc). Além disso, foram observadas diferentes ações das SVMPs testadas (tanto P-I quanto PIII) frente aos componentes de matriz extracelular (adesão e clivagem) e frente às células endoteliais (adesão e viabilidade). Observou-se também, no experimento de coagulação, a presença de SVMPs que atuaram especificamente no sangue de mamífero, assim como outras que atuaram apenas em sangue de ave, demonstrando uma ação seletiva das SVMPs. Deste modo, concluímos que deve haver a contribuição de outros fatores, além dos domínios estruturais, para a diversidade funcional de SVMPs. Não obstante, a diversidade funcional das SVMPs contribuiu para o papel adaptativo dos venenos ofídicos.