RESUMO
Epizootiological study of Anaplasma marginale in regions that contain various reservoir hosts, co-existence of rickettsia pathogens, and common vectors is a complicated task. To achieve diagnosis of this rickettsia in cattle and campeiro deer of Brazilian Pantanal, a comparison was made between a real time polymerase chain reaction (RT-PCR) with intercalating Sybr Green fluorochrome and primers based on msp5 gene of A. marginale; a conventional PCR (C-PCR); and parasitological examination using thin blood smear stained with Giemsa-MayGrunwald. Both PCRs showed good performance in the diagnosis of A. marginale in cattle, and were superior to the parasitological exam. The RT-PCR detected seven positive campeiro deer (16.3 percent). This rate was significantly higher compared to C-PCR, which identified one animal as positive (2.3 percent), and also compared to parasitological diagnosis, which did not find any positive animals. The dissociation temperature average of positive reactions in cattle (81.72 ºC ± 0.20) was identical to dissociation temperature found in the cervids (81.72 ºC ± 0.12), suggesting that both animal species were infected with A. marginale. We concluded that RT-PCR can be used for A. marginale diagnosis and in epizootiological studies of cattle and cervids; in spite of the small number of campeiro deer samples, the results indicated that this wildlife species has importance in the Anaplasma epizootiology in the Brazilian Pantanal.
O estudo epizootiológico de Anaplasma marginale em regiões que existem vários reservatórios, co-existência de espécies de riquétsias patógenas e vetores comuns é uma tarefa complicada. Com o objetivo de obter o diagnóstico dessa riquétsia em bovinos e veado campeiro do Pantanal brasileiro foi avaliada uma reação da polimerase em cadeia em tempo real (PCR-TR) com o fluoróforo intercalante de fita dupla de DNA Sybr Green e iniciadores baseados na seqüência do gene msp5 de A. marginale comparando-a a uma PCR convencional (PCR-C) e ao exame parasitológico de esfregaço fino de sangue corado com Giemsa-MayGrunwald. Ambas PCRs apresentaram bom desempenho no diagnóstico de A. marginale nos bovinos, o qual foi superior ao exame parasitológico. O PCR-TR detectou sete veados campeiros positivos (16,3 por cento), o que foi significativamente maior comparado ao PCR-C identificando um animal como positivo (2,3 por cento), e ao exame parasitológico não encontrou nenhum animal positivo. A média da temperatura de dissociação das reações positivas para amostras de bovinos (81,72 ºC ± 0,20) foi idêntica àquelas dos cervídeos ( 81,72 ºC ± 0,12), o que sugere que ambas espécies animais foram infectadas por A. marginale. Concluímos que PCR-TR pode ser utilizada para diagnóstico e estudos epizootiológicos de A. marginale em bovinos e cervídeos. Apesar da pequena amostragem de veado campeiro os resultados indicam que essa espécie de animal selvagem tem importância na epizootiologia do Anaplasma no Pantanal brasileiro.
Assuntos
Animais , Bovinos , Anaplasma marginale/isolamento & purificação , Anaplasmose/diagnóstico , Anaplasmose/microbiologia , Doenças dos Bovinos/diagnóstico , Doenças dos Bovinos/microbiologia , Cervos/microbiologia , Reação em Cadeia da Polimerase , Anaplasma marginale/genética , Brasil , Reação em Cadeia da Polimerase/métodos , Fatores de TempoRESUMO
Epizootiological study of Anaplasma marginale in regions that contain various reservoir hosts, co-existence of rickettsia pathogens, and common vectors is a complicated task. To achieve diagnosis of this rickettsia in cattle and campeiro deer of Brazilian Pantanal, a comparison was made between a real time polymerase chain reaction (RT-PCR) with intercalating Sybr Green fluorochrome and primers based on msp5 gene of A. marginale; a conventional PCR (C-PCR); and parasitological examination using thin blood smear stained with Giemsa-MayGrunwald. Both PCRs showed good performance in the diagnosis of A. marginale in cattle, and were superior to the parasitological exam. The RT-PCR detected seven positive campeiro deer (16.3%). This rate was significantly higher compared to C-PCR, which identified one animal as positive (2.3%), and also compared to parasitological diagnosis, which did not find any positive animals. The dissociation temperature average of positive reactions in cattle (81.72 ºC ± 0.20) was identical to dissociation temperature found in the cervids (81.72 ºC ± 0.12), suggesting that both animal species were infected with A. marginale. We concluded that RT-PCR can be used for A. marginale diagnosis and in epizootiological studies of cattle and cervids; in spite of the small number of campeiro deer samples, the results indicated that this wildlife species has importance in the Anaplasma epizootiology in the Brazilian Pantanal.
O estudo epizootiológico de Anaplasma marginale em regiões que existem vários reservatórios, co-existência de espécies de riquétsias patógenas e vetores comuns é uma tarefa complicada. Com o objetivo de obter o diagnóstico dessa riquétsia em bovinos e veado campeiro do Pantanal brasileiro foi avaliada uma reação da polimerase em cadeia em tempo real (PCR-TR) com o fluoróforo intercalante de fita dupla de DNA Sybr Green e iniciadores baseados na seqüência do gene msp5 de A. marginale comparando-a a uma PCR convencional (PCR-C) e ao exame parasitológico de esfregaço fino de sangue corado com Giemsa-MayGrunwald. Ambas PCRs apresentaram bom desempenho no diagnóstico de A. marginale nos bovinos, o qual foi superior ao exame parasitológico. O PCR-TR detectou sete veados campeiros positivos (16,3%), o que foi significativamente maior comparado ao PCR-C identificando um animal como positivo (2,3%), e ao exame parasitológico não encontrou nenhum animal positivo. A média da temperatura de dissociação das reações positivas para amostras de bovinos (81,72 ºC ± 0,20) foi idêntica àquelas dos cervídeos ( 81,72 ºC ± 0,12), o que sugere que ambas espécies animais foram infectadas por A. marginale. Concluímos que PCR-TR pode ser utilizada para diagnóstico e estudos epizootiológicos de A. marginale em bovinos e cervídeos. Apesar da pequena amostragem de veado campeiro os resultados indicam que essa espécie de animal selvagem tem importância na epizootiologia do Anaplasma no Pantanal brasileiro.
RESUMO
Epizootiological study of Anaplasma marginale in regions that contain various reservoir hosts, co-existence of rickettsiapathogens, and common vectors is a complicated task. To achieve diagnosis of this rickettsia in cattle and campeiro deer ofBrazilian Pantanal, a comparison was made between a real time polymerase chain reaction (RT-PCR) with intercalating SybrGreen fluorochrome and primers based on msp5 gene of A. marginale; a conventional PCR (C-PCR); and parasitologicalexamination using thin blood smear stained with Giemsa-MayGrunwald. Both PCRs showed good performance in thediagnosis of A. marginale in cattle, and were superior to the parasitological exam. The RT-PCR detected seven positive campeirodeer (16.3%). This rate was significantly higher compared to C-PCR, which identified one animal as positive (2.3%), andalso compared to parasitological diagnosis, which did not find any positive animals. The dissociation temperature average ofpositive reactions in cattle (81.72 °C ± 0.20) was identical to dissociation temperature found in the cervids (81.72 °C ± 0.12),suggesting that both animal species were infected with A. marginale. We concluded that RT-PCR can be used for A. marginalediagnosis and in epizootiological studies of cattle and cervids; in spite of the small number of campeiro deer samples, theresults indicated that this wildlife species has importance in the Anaplasma epizootiology in the Brazilian Pantanal.(AU)
O estudo epizootiológico de Anaplasma marginale em regiões que existem vários reservatórios, co-existência de espéciesde riquétsias patógenas e vetores comuns é uma tarefa complicada. Com o objetivo de obter o diagnóstico dessa riquétsia embovinos e veado campeiro do Pantanal brasileiro foi avaliada uma reação da polimerase em cadeia em tempo real (PCR‑TR)com o fluoróforo intercalante de fita dupla de DNA Sybr Green e iniciadores baseados na seqüência do gene msp5 deA. marginale comparando-a a uma PCR convencional (PCR-C) e ao exame parasitológico de esfregaço fino de sangue coradocom Giemsa-MayGrunwald. Ambas PCRs apresentaram bom desempenho no diagnóstico de A. marginale nos bovinos,o qual foi superior ao exame parasitológico. O PCR-TR detectou sete veados campeiros positivos (16,3%), o que foisignificativamente maior comparado ao PCR-C identificando um animal como positivo (2,3%), e ao exame parasitológiconão encontrou nenhum animal positivo. A média da temperatura de dissociação das reações positivas para amostras debovinos (81,72 °C ± 0,20) foi idêntica àquelas dos cervídeos ( 81,72 °C ± 0,12), o que sugere que ambas espécies animaisforam infectadas por A. marginale. Concluímos que PCR-TR pode ser utilizada para diagnóstico e estudos epizootiológicosde A. marginale em bovinos e cervídeos. Apesar da pequena amostragem de veado campeiro os resultados indicam que essaespécie de animal selvagem tem importância na epizootiologia do Anaplasma no Pantanal brasileiro.(AU)
Assuntos
Humanos , Anaplasma marginale , Diagnóstico , Cervos/parasitologia , Bovinos/parasitologiaRESUMO
This study was conducted in two private properties in the municipality of Piraí do Sul (Paraná state, southern Brazil). Sixteen monthly visits were made each one lasting three days between February 2001 and May 2002. The study aimed at the observation of pampas deer biology (Ozotoceros bezoarticus Linnaeus, 1758), and the evaluation of main impacts to this population. We computed 1,065 observations of estimated 71.45 individuals. The average size of the groups was 2.29 (SD ± 0.55) animals, and the sexual ratio was 0.83. Isolated deer accounted for 40% of the observations, whereas the largest group comprised 10 individuals. It was recorded a peack period of births between September and November, although births were observed along all the studied period. Thirty-four deaths were recorded corresponding to a 47.6% death rate. The main causes of death were predatory actions by cougar Puma concolor (Linnaeus, 1771), hunting and individuals being run over by motor vehicles. The studied population is seriously endangered and it will not escape extinction unless certain policies to guarantee its conservation are adopted. These policies should include correct management of the areas and control of pressure vectors.
Este estudo foi realizado em duas propriedades particulares, situadas no município de Piraí do Sul, sul do Brasil. Foram realizadas 16 fases de campo mensais, com três dias de duração, no período compreendido entre fevereiro de 2001 e maio de 2002, com o objetivo de obter informações sobre a biologia do veado-campeiro (Ozotoceros bezoarticus Linnaeus, 1758) e identificar os principais fatores de impacto sobre o mesmo. Foram computadas 1.065 observações, estimando-se 71,45 indivíduos na população, sendo o tamanho médio dos grupos de 2,29 (DV ± 0,55), e a razão sexual de 0,83. Indivíduos isolados corresponderam a 40% das observações, sendo o maior grupo composto por 10 indivíduos. Registrou-se um pico de nascimentos entre setembro e novembro, embora esses tenham acontecido ao longo de todo o estudo. Foram registrados 34 óbitos, correspondendo a uma mortalidade de 47,6%, sendo as principais causas a predação por Puma concolor (Linnaeus, 1771), a caça e os atropelamentos. A população estudada encontra-se severamente ameaçada, e não sobreviverá por muito tempo a menos que políticas que garantam a sua conservação sejam adotadas. Estas políticas devem incluir o manejo adequado das áreas e o controle dos vetores de pressão.
RESUMO
This study was conducted in two private properties in the municipality of Piraí do Sul (Paraná state, southern Brazil). Sixteen monthly visits were made each one lasting three days between February 2001 and May 2002. The study aimed at the observation of pampas deer biology (Ozotoceros bezoarticus Linnaeus, 1758), and the evaluation of main impacts to this population. We computed 1,065 observations of estimated 71.45 individuals. The average size of the groups was 2.29 (SD ± 0.55) animals, and the sexual ratio was 0.83. Isolated deer accounted for 40% of the observations, whereas the largest group comprised 10 individuals. It was recorded a peack period of births between September and November, although births were observed along all the studied period. Thirty-four deaths were recorded corresponding to a 47.6% death rate. The main causes of death were predatory actions by cougar Puma concolor (Linnaeus, 1771), hunting and individuals being run over by motor vehicles. The studied population is seriously endangered and it will not escape extinction unless certain policies to guarantee its conservation are adopted. These policies should include correct management of the areas and control of pressure vectors.
Este estudo foi realizado em duas propriedades particulares, situadas no município de Piraí do Sul, sul do Brasil. Foram realizadas 16 fases de campo mensais, com três dias de duração, no período compreendido entre fevereiro de 2001 e maio de 2002, com o objetivo de obter informações sobre a biologia do veado-campeiro (Ozotoceros bezoarticus Linnaeus, 1758) e identificar os principais fatores de impacto sobre o mesmo. Foram computadas 1.065 observações, estimando-se 71,45 indivíduos na população, sendo o tamanho médio dos grupos de 2,29 (DV ± 0,55), e a razão sexual de 0,83. Indivíduos isolados corresponderam a 40% das observações, sendo o maior grupo composto por 10 indivíduos. Registrou-se um pico de nascimentos entre setembro e novembro, embora esses tenham acontecido ao longo de todo o estudo. Foram registrados 34 óbitos, correspondendo a uma mortalidade de 47,6%, sendo as principais causas a predação por Puma concolor (Linnaeus, 1771), a caça e os atropelamentos. A população estudada encontra-se severamente ameaçada, e não sobreviverá por muito tempo a menos que políticas que garantam a sua conservação sejam adotadas. Estas políticas devem incluir o manejo adequado das áreas e o controle dos vetores de pressão.
RESUMO
This investigation was carried out in beef cattle (n=219), sheep (n=55), and pampas deer (Ozotoceros bezoarticus) (n=49) from Nhecolândia, sub region of Brazilian Pantanal in Mato Grosso do Sul State, Brazil. It was aimed to assess the seropositivity of these species to bluetongue virus (BTV) by agar gel immunodiffusion test. Seropositivity rates were 42.0% for cattle and 10.9% for sheep. The pampas deer showed to be all seronegative. In cattle, seropositivity to BTV significantly increased with age (P<0.001). These data, the favorable environmental conditions to development of BTV vectors, and the bovine reproductive disorders reported by farmers may indicate that BTV infection occurrs in herds of Brazilian Pantanal, and probably induces to economical losses.(AU)