RESUMO
Bovine respiratory syncytial virus (BRSV) causes pneumonia in young cattle. Modified-live-virus (MLV) and inactivated vaccines are currently used for the control of clinical effects of BRSV infections in cattle. On the present research, the stimulation of specific anti-BRSV immunoglobulin isotypes was investigated, through the use of different commercially available adjuvants (Water-in-oil emulsion, Quil A, Aluminum-hydroxide) in inbred mice (Balb/C and C57BL/6). BRSV antibodies were measured using an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and the results were compared to the antibody levels induced by immunization of animals using live-BRSV-virus. Water-in-oil emulsion and alum- adjuvant preparations induced higher levels of IgG1 immunoglobulins, whereas Quil A favored the production of IgG2 antibodies, this last being a more appropriate response profile for the specific case of BRSV. Not using adjuvants resulted in poor levels of specific antibodies. The isotype profile of specific antibodies obtained varied greatly depending on the adjuvants used. This information may be useful for the formulation of more effective BRSV inactivated vaccines; however, these findings have to be confirmed in cattle.
O vírus respiratório sincicial bovino (BRSV) causa pneumonia em bovinos jovens. Vacinas de vírus vivo modificado (MLV) e vacinas inativadas são atualmente utilizadas para o controle dos efeitos clínicos de infecções pelo BRSV em bovinos. No presente trabalho, investigou-se a estimulação dos isotipos de imunoglobulinas específicas anti-BRSV, através da utilização de diferentes adjuvantes disponíveis comercialmente (água em óleo de emulsão, Quil A, hidróxido de alumínio) em camundongos isogênicos (Balb/C e C57BL/6). Anticorpos contra o BRSV foram medidos usando-se um ensaio imunoenzimático (ELISA), e os resultados foram comparados com os níveis de anticorpos induzidos pela imunização de animais utilizando-se o BRSV vivo. As preparações em que se empregou óleo mineral e alumínio como adjuvantes induziram altos níveis de imunoglobulinas IgG1, enquanto QuilA favoreceu a produção de anticorpos de classe IgG2, sendo este último um perfil de resposta mais desejável para o caso específico de BRSV. A não utilização de adjuvantes resultou em baixa produção de anticorpos específicos. O perfil de isotipos de imunoglobulinas secretados variou bastante conforme o adjuvante utilizado. Esta informação pode ser útil futuramente na formulação de vacinas inativadas mais eficazes contra o BRSV. Todavia, esses achados devem ser confirmados em bovinos.
RESUMO
Bovine respiratory syncytial virus (BRSV) causes pneumonia in young cattle. Modified-live-virus (MLV) and inactivated vaccines are currently used for the control of clinical effects of BRSV infections in cattle. On the present research, the stimulation of specific anti-BRSV immunoglobulin isotypes was investigated, through the use of different commercially available adjuvants (Water-in-oil emulsion, Quil A, Aluminum-hydroxide) in inbred mice (Balb/C and C57BL/6). BRSV antibodies were measured using an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and the results were compared to the antibody levels induced by immunization of animals using live-BRSV-virus. Water-in-oil emulsion and alum- adjuvant preparations induced higher levels of IgG1 immunoglobulins, whereas Quil A favored the production of IgG2 antibodies, this last being a more appropriate response profile for the specific case of BRSV. Not using adjuvants resulted in poor levels of specific antibodies. The isotype profile of specific antibodies obtained varied greatly depending on the adjuvants used. This information may be useful for the formulation of more effective BRSV inactivated vaccines; however, these findings have to be confirmed in cattle.
O vírus respiratório sincicial bovino (BRSV) causa pneumonia em bovinos jovens. Vacinas de vírus vivo modificado (MLV) e vacinas inativadas são atualmente utilizadas para o controle dos efeitos clínicos de infecções pelo BRSV em bovinos. No presente trabalho, investigou-se a estimulação dos isotipos de imunoglobulinas específicas anti-BRSV, através da utilização de diferentes adjuvantes disponíveis comercialmente (água em óleo de emulsão, Quil A, hidróxido de alumínio) em camundongos isogênicos (Balb/C e C57BL/6). Anticorpos contra o BRSV foram medidos usando-se um ensaio imunoenzimático (ELISA), e os resultados foram comparados com os níveis de anticorpos induzidos pela imunização de animais utilizando-se o BRSV vivo. As preparações em que se empregou óleo mineral e alumínio como adjuvantes induziram altos níveis de imunoglobulinas IgG1, enquanto QuilA favoreceu a produção de anticorpos de classe IgG2, sendo este último um perfil de resposta mais desejável para o caso específico de BRSV. A não utilização de adjuvantes resultou em baixa produção de anticorpos específicos. O perfil de isotipos de imunoglobulinas secretados variou bastante conforme o adjuvante utilizado. Esta informação pode ser útil futuramente na formulação de vacinas inativadas mais eficazes contra o BRSV. Todavia, esses achados devem ser confirmados em bovinos.
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Bovine respiratory syncytial virus (BRSV) causes pneumonia in young cattle. Modified-live-virus (MLV) and inactivated vaccines are currently used for the control of clinical effects of BRSV infections in cattle. On the present research, the stimulation of specific anti-BRSV immunoglobulin isotypes was investigated, through the use of different commercially available adjuvants (Water-in-oil emulsion, Quil A, Aluminum-hydroxide) in inbred mice (Balb/C and C57BL/6). BRSV antibodies were measured using an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and the results were compared to the antibody levels induced by immunization of animals using live-BRSV-virus. Water-in-oil emulsion and alum- adjuvant preparations induced higher levels of IgG1 immunoglobulins, whereas Quil A favored the production of IgG2 antibodies, this last being a more appropriate response profile for the specific case of BRSV. Not using adjuvants resulted in poor levels of specific antibodies. The isotype profile of specific antibodies obtained varied greatly depending on the adjuvants used. This information may be useful for the formulation of more effective BRSV inactivated vaccines; however, these findings have to be confirmed in cattle.
O vírus respiratório sincicial bovino (BRSV) causa pneumonia em bovinos jovens. Vacinas de vírus vivo modificado (MLV) e vacinas inativadas são atualmente utilizadas para o controle dos efeitos clínicos de infecções pelo BRSV em bovinos. No presente trabalho, investigou-se a estimulação dos isotipos de imunoglobulinas específicas anti-BRSV, através da utilização de diferentes adjuvantes disponíveis comercialmente (água em óleo de emulsão, Quil A, hidróxido de alumínio) em camundongos isogênicos (Balb/C e C57BL/6). Anticorpos contra o BRSV foram medidos usando-se um ensaio imunoenzimático (ELISA), e os resultados foram comparados com os níveis de anticorpos induzidos pela imunização de animais utilizando-se o BRSV vivo. As preparações em que se empregou óleo mineral e alumínio como adjuvantes induziram altos níveis de imunoglobulinas IgG1, enquanto QuilA favoreceu a produção de anticorpos de classe IgG2, sendo este último um perfil de resposta mais desejável para o caso específico de BRSV. A não utilização de adjuvantes resultou em baixa produção de anticorpos específicos. O perfil de isotipos de imunoglobulinas secretados variou bastante conforme o adjuvante utilizado. Esta informação pode ser útil futuramente na formulação de vacinas inativadas mais eficazes contra o BRSV. Todavia, esses achados devem ser confirmados em bovinos.
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Bovine respiratory syncytial virus (BRSV) causes pneumonia in young cattle. Modified-live-virus (MLV) and inactivated vaccines are currently used for the control of clinical effects of BRSV infections in cattle. On the present research, the stimulation of specific anti-BRSV immunoglobulin isotypes was investigated, through the use of different commercially available adjuvants (Water-in-oil emulsion, Quil A, Aluminum-hydroxide) in inbred mice (Balb/C and C57BL/6). BRSV antibodies were measured using an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and the results were compared to the antibody levels induced by immunization of animals using live-BRSV-virus. Water-in-oil emulsion and alum- adjuvant preparations induced higher levels of IgG1 immunoglobulins, whereas Quil A favored the production of IgG2 antibodies, this last being a more appropriate response profile for the specific case of BRSV. Not using adjuvants resulted in poor levels of specific antibodies. The isotype profile of specific antibodies obtained varied greatly depending on the adjuvants used. This information may be useful for the formulation of more effective BRSV inactivated vaccines; however, these findings have to be confirmed in cattle.
O vírus respiratório sincicial bovino (BRSV) causa pneumonia em bovinos jovens. Vacinas de vírus vivo modificado (MLV) e vacinas inativadas são atualmente utilizadas para o controle dos efeitos clínicos de infecções pelo BRSV em bovinos. No presente trabalho, investigou-se a estimulação dos isotipos de imunoglobulinas específicas anti-BRSV, através da utilização de diferentes adjuvantes disponíveis comercialmente (água em óleo de emulsão, Quil A, hidróxido de alumínio) em camundongos isogênicos (Balb/C e C57BL/6). Anticorpos contra o BRSV foram medidos usando-se um ensaio imunoenzimático (ELISA), e os resultados foram comparados com os níveis de anticorpos induzidos pela imunização de animais utilizando-se o BRSV vivo. As preparações em que se empregou óleo mineral e alumínio como adjuvantes induziram altos níveis de imunoglobulinas IgG1, enquanto QuilA favoreceu a produção de anticorpos de classe IgG2, sendo este último um perfil de resposta mais desejável para o caso específico de BRSV. A não utilização de adjuvantes resultou em baixa produção de anticorpos específicos. O perfil de isotipos de imunoglobulinas secretados variou bastante conforme o adjuvante utilizado. Esta informação pode ser útil futuramente na formulação de vacinas inativadas mais eficazes contra o BRSV. Todavia, esses achados devem ser confirmados em bovinos.
RESUMO
An experimental inactivated, oil assisted Aujeszky"s disease virus vaccine was tested for its ability to induce immunity, clinical protection level and reduction of viral infection after challenge by the nasal route. Groups of 6 pigs, 45 days-old, were vaccinated once or twice, by either intramuscular or subcutaneous routes. A group of unvaccinated animals was used as control. All the vaccinated pigs developed neutralizing antibodies, detected by serum-neutralization test. In pigs vaccinated twice the levels of neutralizing antibodies were higher than in pigs vaccinated once, and this difference was statistically significant. In vaccinated animals, the severity of clinical signs decreased with increasing antibodies titres. Aujeszky"s disease virus was detected in tonsils of vaccinated and unvaccinated pigs by immunofluorescence method. However, the rate of positive tonsils in pigs vaccinated twice was reduced when compared with unvaccinated pigs on the 2nd and 7th days post-infection. The level of infection was statistically reduced in twice vaccinated pigs by subcutaneous route as compared with vaccinated once and unvaccinated animals.
Uma vacina experimental contra a doença de Aujeszky (DA), inativada e adsorvida em adjuvante oleoso, foi testada em relação à indução de imunidade, grau de proteção clínica e capacidade de reduzir a infecção, após desafio pela via intranasal. Grupos de 6 suínos, com 45 dias de idade, foram vacinados com uma ou duas doses de vacina, pelas vias intramuscular ou subcutânea, sendo mantido um grupo-testemunha, sem vacinação. Todos os suínos vacinados apresentaram títulos de anticorpos neutralizantes, detectáveis através da prova de soroneutralização, sendo estatisticamente superiores nos animais que receberam duas doses de vacina. A vacinação preveniu as manifestações clínicas da doença, após desafio, principalmente nos animais que receberam duas doses de vacina quando comparado com os que receberam 1 dose. Em todos os animais, vacinados e não-vacinados, foi possível a detecção do vírus da doença de Aujeszky (VDA) nas amígdalas, através da técnica de imunofluorescência direta. A porcentagem de amígdalas positivas nos suínos vacinados com duas doses foi inferior quando comparada àquela de suínos não-vacinados, no 2º e 7º dias pós-infecção. Em suínos vacinados com duas doses de vacina, pela via subcutânea, a taxa de infecção foi estatisticamente menor que naqueles vacinados com uma dose, pelas vias intramuscular ou subcutânea, e não-vacinados.
RESUMO
SUMMARY The efficacy of three different formulations of vaccines against Aujeszky's disease was tested. Vacine I was formulated with antigen in oil, simple emulsion; vaccine II in oil, with a coadjuvam of cell immunity; vaccine III with the antigen plus DEAE-dextran (DEAE-d) as the adjuvant. Efficacy tests were conducted in 48 piglets, Landrace and Large White, divided in four groups of 12 animais. Each vaccine was applied in one group and another served as the control group. The piglets received two doses of 1ml of the vaccines, intramuscular, with 15 days interval. Twenty-one days after the second shot, the piglets were challenged with crescent doses of the vírus, log 10/ml (6.25, 7.25. 8.25 for the vaccinated and 4.25, 5.25, 6.25 for the controls) and four animais per dilution. The three vaccines conferred protection against the different concentrations of virus utilized: vaccine I protected 96.1%; vaccine II 90.9% and vaccine III protected 83.3%. The differences were statistically analyzed and not significant (p 0.05). The animais in the control group presented the clinical symptons of Aujeszky's disease although they had the smallest dose in the challenge test. There were also four tests conducted with rabbits and none of the vaccines conferred protection to them.
RESUMO Foi testada a eficiência de três diferentes formulações de vacina contra a doença de Aujeszky (DA). A vacina I foi formulada com antígeno em óleo com emulsão simples; a vacina II em óleo, acrescida de coadjuvante de imunidade celular e a vacina III constituída de antígeno e DEAE-dextran (DEAE-D) como adjuvante. Os testes de eficiência foram conduzidos em 48 leitões das raças Landrace e Large White, divididos em quatro grupos de 12 animais. Cada vacina foi aplicada em um grupo, ficando um como testemunha. Os leitões receberam duas doses de vacina no volume de 1ml, via intramuscular, com intervalo de 15 dias. Vinte e um dias após a segunda dose, foram desafiados com doses crescentes de vírus, log 10/ml (6,25; 7,25 e 8,25 para os vacinados e 4,25; 5,25 e 6,25 para os testemunhas) em 4 animais por diluição. As três vacinas conferiram proteção frente às diferentes concentrações de vírus utilizadas. A vacina l protegeu 96,1%, a vacina II, 90,9% e vacina III, protegeu 83,3%. Essas diferenças analisadas estatisticamente (p 0,05) não foram significativas. Os animais do lote testemunha, adoeceram com o quadro da DA, apesar da menor dose de desafio. Foram realizados quatro testes em coelhos. Nenhuma das três vacinas conferiu proteção aos coelhos.
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SUMMARY The efficacy of three different formulations of vaccines against Aujeszky's disease was tested. Vacine I was formulated with antigen in oil, simple emulsion; vaccine II in oil, with a coadjuvam of cell immunity; vaccine III with the antigen plus DEAE-dextran (DEAE-d) as the adjuvant. Efficacy tests were conducted in 48 piglets, Landrace and Large White, divided in four groups of 12 animais. Each vaccine was applied in one group and another served as the control group. The piglets received two doses of 1ml of the vaccines, intramuscular, with 15 days interval. Twenty-one days after the second shot, the piglets were challenged with crescent doses of the vírus, log 10/ml (6.25, 7.25. 8.25 for the vaccinated and 4.25, 5.25, 6.25 for the controls) and four animais per dilution. The three vaccines conferred protection against the different concentrations of virus utilized: vaccine I protected 96.1%; vaccine II 90.9% and vaccine III protected 83.3%. The differences were statistically analyzed and not significant (p 0.05). The animais in the control group presented the clinical symptons of Aujeszky's disease although they had the smallest dose in the challenge test. There were also four tests conducted with rabbits and none of the vaccines conferred protection to them.
RESUMO Foi testada a eficiência de três diferentes formulações de vacina contra a doença de Aujeszky (DA). A vacina I foi formulada com antígeno em óleo com emulsão simples; a vacina II em óleo, acrescida de coadjuvante de imunidade celular e a vacina III constituída de antígeno e DEAE-dextran (DEAE-D) como adjuvante. Os testes de eficiência foram conduzidos em 48 leitões das raças Landrace e Large White, divididos em quatro grupos de 12 animais. Cada vacina foi aplicada em um grupo, ficando um como testemunha. Os leitões receberam duas doses de vacina no volume de 1ml, via intramuscular, com intervalo de 15 dias. Vinte e um dias após a segunda dose, foram desafiados com doses crescentes de vírus, log 10/ml (6,25; 7,25 e 8,25 para os vacinados e 4,25; 5,25 e 6,25 para os testemunhas) em 4 animais por diluição. As três vacinas conferiram proteção frente às diferentes concentrações de vírus utilizadas. A vacina l protegeu 96,1%, a vacina II, 90,9% e vacina III, protegeu 83,3%. Essas diferenças analisadas estatisticamente (p 0,05) não foram significativas. Os animais do lote testemunha, adoeceram com o quadro da DA, apesar da menor dose de desafio. Foram realizados quatro testes em coelhos. Nenhuma das três vacinas conferiu proteção aos coelhos.