RESUMO

Objetivos: A cavidade oral pode atuar como reservatório de vários patógenos de importância clínica, incluindo bacilos Gram-negativos (BGN) e Enterococcus spp. Essas espécies podem ainda aumentar em uma condição disbiótica, como ocorre nas doenças periodontais. Assim, este estudo teve como objetivo determinar a prevalência, susceptibilidade antimicrobiana e presença de fatores de virulência de BGN e enterococos isolados do biofilme subgengival de indivíduos com diferentes condições periodontais, correlacionando esses achados com parâmetros clínicos e composição da microbiota subgengival. Métodos: Na análise dos BGN, amostras de biofilme subgengival foram obtidas de indivíduos com Saúde Periodontal (SP, n=81), Gengivite (G, n=74) e Periodontite (P, n=207); para Enterococcus spp., amostras foram coletadas de 139 indivíduos com SP, 103 com G e 305 com P. As amostras foram cultivadas em meio seletivo e as colônias isoladas e identificadas por MALDI-ToF. A susceptibilidade antimicrobiana foi determinada por disco-difusão (CLSI); já os genes de virulência de enterococos e genes codificadores de ESBL e carbapenemases em BGN foram pesquisados por PCR. A produção de ESBL e carbapenemases por BGN foi avaliada pelo teste de sinergia de disco duplo e hidrólise de imipenem por espectrofotometria, respectivamente. A microbiota subgengival desses indivíduos foi determinada pelo Checkerboard. Diferenças entre os grupos foram avaliadas pelos testes de KruskalWallis, Mann-Whitney e Qui-quadrado. Resultados: BGN foram isolados em 36.2% das amostras, com maior prevalência (p<0,001) em pacientes com P (46.4%) em comparação com SP (22.2%) e G (22.9%). Pseudomonas aeruginosa (27.5%), Enterobacter cloacae (16.8%) e Enterobacter asburiae (10.7%) foram as espécies mais predominantes. Resistência/sensibilidade reduzida a ≥ 1 antimicrobiano foi encontrada em 60% dos BGN, mas apenas 4.6% eram multirresistentes. Altas taxas de resistência (>40%) foram observadas na família Enterobacteriacea para cefoxitina, cefalotina, amoxicilina- clavulanato e cefazolina. Uma única cepa de K. pneumoniae apresentou resistência/sensibilidade reduzida ao imipenem, embora o fenótipo ESBL e a detecção dos genes codificadores de beta-lactamases foram negativos. Enterococcus spp. foram isolados em 7.4% de todas as amostras, 53.7% eram E. faecalis. Essas espécies foram mais predominantes na P (9.8%) e G (7.8%) do que na SP (2.2%, p< 0,05); entretanto não houve correlação com os níveis de gravidade da P. Altas taxas de resistência/susceptibilidade reduzida foram observadas para ciprofloxacina, eritromicina e rifampicina. Os fatores de virulência mais predominantes incluíram ace, asa e esp, todos relacionados à formação de biofilme e colonização. F. nucleatum foi mais prevalente na microbiota de indivíduos enterococos +. Por outro lado, Dialister pneumosintes foi pouco detectado em indivíduos portadores de enterococos bopD+. Estreptococos orais foram prevalentes (>70%) na microbiota de pacientes que apresentavam enterococos suceptíveis à doxiciclina (p<0,05), frequentemente bopD- e esp- (p<0,01). Conclusão: Uma prevalência elevada de BGN da família Enterobacteriacea com resistência a cefalosporinas e penicilina é observada na microbiota subgengival de indivíduos com P. Enterococcus spp., principalmente E. faecalis são pouco frequentes na microbiota subgengival associada à SP, porém aumentam significativamente nas doenças periodontais. Os mesmos apresentam diversos genes de virulência compatíveis com destruição tecidual, bem como resistência a antimicrobianos de uso na clínica periodontal, o que pode limitar uma resposta terapêutica favorável. (AU)

Background/Aim: The oral cavity can act as a reservoir for several pathogens of clinic importance, including Gram-negative bacilli (GNB) and Enterococcus spp. These species may increase even more in a dysbiotic condition as seen in periodontal diseases. Thus, this study aimed to determine the prevalence, antimicrobial susceptibility and virulence factors of GNB and enterococci isolated from subgingival biofilm of individuals with different periodontal conditions, correlating these findings with clinical parameters and the composition of the subgingival microbiot. Methods: For GNB analysis, subgingival biofilm was obtained from individuals with periodontal health (PH, n=81), gingivitis (G, n=74) and periodontitis (P, n=207), whereas for enterococci isolation samples were taken from 139 patients with PH, 103 with G, and 305 with P. Samples were cultivated in selective media and isolated colonies were identified by MALDI-ToF. Antimicrobial susceptibility was determined by CLSI disk diffusion, whereas virulence genes by PCR. Production of ESBL and carbapenemases were evaluated by double disk synergy test and spectrophotometric detection of imipenem hydrolysis, respectively, and ESBL and carbapenemase encoding genes were surveyed by PCR. The subgingival microbiota was determined by checkerboard. Differences among groups were examined by Chi-square, Kruskal-Wallis or Mann-Whitney tests. Results: GNB were isolated from 36.2% of all samples, with a significantly greater prevalence (p<0.001) in P patients (46.4%) compared to PH (22.2%) and G (22.9%). Pseudomonas aeruginosa (27.5%), Enterobacter cloacae (16.8%) and Enterobacter asburiae (10.7%) were the most predominant species. Resistance/reduced sensitivity to ≥ 1 antimicrobial was found in 60% of GNB, but only 4.6% were multidrug resistant. High resistance rates (>40%) were seen in the Enterobacteriaceae family for cefoxitin, cephalotin, amoxicillin-clavulanate, and cefazolin. One strain of K. pneumoniae showed resistance/reduced sensitivity to imipenem, although the ESBL-phenotype and PCR targeting beta-lactamase encoding genes were negative. Enterococcus spp. were isolated from 7.4% of all samples; 53.7% were E. faecalis. Enterococci were more predominant in P (9.8%) and G (7.8%) samples than PH (2.2%; p<0.05), however there were no associations with distinct levels of disease severity. High rates of low susceptibility/resistance were seen for ciprofloxacin, erythromycin and rifampicin. Predominant virulence factors included ace, asa and esp, all related to colonization and biofilm formation. F. nucleatum was prevalent in the microbiota of enterococci+ individuals. In contrast, lower frequency of Dialister pneumosintes was found in patients carrying bopD+ enterococci. Oral streptococci were prevalent (>70%) in the microbiota of patients carrying enterococci susceptible to doxycycline (p<0.05), which were also frequently bopD- and esp- (p<0.01). Conclusion: A high prevalence of GNB of the Enterobacteriacea family, resistant to cephalosporins and penicillins is observed in the subgingival microbiota of patients with P, Enterococcus spp., mainly E.faecalis are not commonly detected in the healthy-related subgingival microbiota, however their frequency increases significantly in patients with periodontal diseases. These species carry several genes related to tissue destruction, as well as resistance to antimicrobials routinely used in the periodontal clinic, which may hinder a successful therapeutic response. (AU)

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Periodontitis is an inflammatory response in a susceptible host caused by complex microbiota, predominantly composed of Gram-negative anaerobic bacteria. Aiming to characterize the subgingival bacterial microbiota associated with ovine periodontitis, polymerase chain reaction (PCR) was performed in subgingival periodontal pocket samples of 14 sheep with severe periodontitis and in subgingival sulcus biofilm of 14 periodontally healthy sheep in search mainly of Gram-negative and Gram-positive microorganisms considered important periodontopathogens. The most prevalent bacteria in the sheep with periodontal lesions were Tannerella forsythia (78.6%), Treponema denticola (78.6%), Fusobacterium nucleatum (64.3%), and Porphyromonas gingivalis (50%), whereas in the healthy sheep, F. nucleatum (42.8%) was the most often detected bacterium. Statistically significant differences were observed for Campylobacter rectus, Enterococcus faecium, Prevotella nigrescens, T. forsythia, and T. denticola (p<0.05) in the sheep with periodontitis in the comparison between groups. Aggregatibacter actinomycetemcomitans, Enterococcus faecalis, and Porphyromonas gulae were not detected in any of the samples analyzed. In conclusion, C. rectus, E. faecium, P. nigrescens, T. forsythia, and T. denticola were associated with severe lesions caused by ovine periodontitis, and F. nucleatum was the most prevalent microorganism in the subgengival sulcus biofilm of healthy sheep.(AU)

Periodontite é a resposta inflamatória de um hospedeiro suscetível causada por complexa microbiota, composta predominantemente por bactérias anaeróbias Gram-negativas. Com o objetivo de caracterizar a microbiota bacteriana subgengival associada à periodontite ovina foi realizada a reação em cadeia da polimerase (PCR) de amostras de biofilme subgengival de 14 ovinos com a enfermidade e 14 ovinos periodontalmente saudáveis, com destaque para micro-organismos Gram-negativos e Gram-positivos considerados importantes periodontopatógenos. As bactérias mais prevalentes em 14 animais com lesões periodontais foram Tannerella forsythia (78,6%), Treponema denticola (78,6%), Fusobacterium nucleatum (64,3%) e Porphyromonas gingivalis (50%). Entretanto, nos 14 ovinos sem lesões periodontais, F. nucleatum (42,8%) foi a bactéria mais detectada. Associação estatisticamente diferente foi observada para Campylobacter rectus, Enterococcus faecium, Prevotella nigrescens, T. forsythia e T. denticola (p<0,05) nos ovinos com periodontite em comparação entre os dois grupos. Aggregatibacter actinomycetemcomitans, Enterococcus faecalis e Porphyromonas gulae não foram detectados em nenhuma das amostras pesquisadas. Conclui-se que C. rectus, E. faecium, P. nigrescens, T. forsythia e T. denticola estão associados às lesões resultantes da periodontite ovina com manifestação clínica grave e F. nucleatum o micro-organismo mais prevalente no biofilme subgengival de animais periodontalmente sadios.(AU)

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Periodontitis is an inflammatory response in a susceptible host caused by complex microbiota, predominantly composed of Gram-negative anaerobic bacteria. Aiming to characterize the subgingival bacterial microbiota associated with ovine periodontitis, polymerase chain reaction (PCR) was performed in subgingival periodontal pocket samples of 14 sheep with severe periodontitis and in subgingival sulcus biofilm of 14 periodontally healthy sheep in search mainly of Gram-negative and Gram-positive microorganisms considered important periodontopathogens. The most prevalent bacteria in the sheep with periodontal lesions were Tannerella forsythia (78.6%), Treponema denticola (78.6%), Fusobacterium nucleatum (64.3%), and Porphyromonas gingivalis (50%), whereas in the healthy sheep, F. nucleatum (42.8%) was the most often detected bacterium. Statistically significant differences were observed for Campylobacter rectus, Enterococcus faecium, Prevotella nigrescens, T. forsythia, and T. denticola (p<0.05) in the sheep with periodontitis in the comparison between groups. Aggregatibacter actinomycetemcomitans, Enterococcus faecalis, and Porphyromonas gulae were not detected in any of the samples analyzed. In conclusion, C. rectus, E. faecium, P. nigrescens, T. forsythia, and T. denticola were associated with severe lesions caused by ovine periodontitis, and F. nucleatum was the most prevalent microorganism in the subgengival sulcus biofilm of healthy sheep.(AU)

Periodontite é a resposta inflamatória de um hospedeiro suscetível causada por complexa microbiota, composta predominantemente por bactérias anaeróbias Gram-negativas. Com o objetivo de caracterizar a microbiota bacteriana subgengival associada à periodontite ovina foi realizada a reação em cadeia da polimerase (PCR) de amostras de biofilme subgengival de 14 ovinos com a enfermidade e 14 ovinos periodontalmente saudáveis, com destaque para micro-organismos Gram-negativos e Gram-positivos considerados importantes periodontopatógenos. As bactérias mais prevalentes em 14 animais com lesões periodontais foram Tannerella forsythia (78,6%), Treponema denticola (78,6%), Fusobacterium nucleatum (64,3%) e Porphyromonas gingivalis (50%). Entretanto, nos 14 ovinos sem lesões periodontais, F. nucleatum (42,8%) foi a bactéria mais detectada. Associação estatisticamente diferente foi observada para Campylobacter rectus, Enterococcus faecium, Prevotella nigrescens, T. forsythia e T. denticola (p<0,05) nos ovinos com periodontite em comparação entre os dois grupos. Aggregatibacter actinomycetemcomitans, Enterococcus faecalis e Porphyromonas gulae não foram detectados em nenhuma das amostras pesquisadas. Conclui-se que C. rectus, E. faecium, P. nigrescens, T. forsythia e T. denticola estão associados às lesões resultantes da periodontite ovina com manifestação clínica grave e F. nucleatum o micro-organismo mais prevalente no biofilme subgengival de animais periodontalmente sadios.(AU)

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ABSTRACT: Periodontitis is an inflammatory response in a susceptible host caused by complex microbiota, predominantly composed of Gram-negative anaerobic bacteria. Aiming to characterize the subgingival bacterial microbiota associated with ovine periodontitis, polymerase chain reaction (PCR) was performed in subgingival periodontal pocket samples of 14 sheep with severe periodontitis and in subgingival sulcus biofilm of 14 periodontally healthy sheep in search mainly of Gram-negative and Gram-positive microorganisms considered important periodontopathogens. The most prevalent bacteria in the sheep with periodontal lesions were Tannerella forsythia (78.6%), Treponema denticola (78.6%), Fusobacterium nucleatum (64.3%), and Porphyromonas gingivalis (50%), whereas in the healthy sheep, F. nucleatum (42.8%) was the most often detected bacterium. Statistically significant differences were observed for Campylobacter rectus, Enterococcus faecium, Prevotella nigrescens, T. forsythia, and T. denticola (p 0.05) in the sheep with periodontitis in the comparison between groups. Aggregatibacter actinomycetemcomitans, Enterococcus faecalis, and Porphyromonas gulae were not detected in any of the samples analyzed. In conclusion, C. rectus, E. faecium, P. nigrescens, T. forsythia, and T. denticola were associated with severe lesions caused by ovine periodontitis, and F. nucleatum was the most prevalent microorganism in the subgengival sulcus biofilm of healthy sheep.

RESUMO: Periodontite é a resposta inflamatória de um hospedeiro suscetível causada por complexa microbiota, composta predominantemente por bactérias anaeróbias Gram-negativas. Com o objetivo de caracterizar a microbiota bacteriana subgengival associada à periodontite ovina foi realizada a reação em cadeia da polimerase (PCR) de amostras de biofilme subgengival de 14 ovinos com a enfermidade e 14 ovinos periodontalmente saudáveis, com destaque para micro-organismos Gram-negativos e Gram-positivos considerados importantes periodontopatógenos. As bactérias mais prevalentes em 14 animais com lesões periodontais foram Tannerella forsythia (78,6%), Treponema denticola (78,6%), Fusobacterium nucleatum (64,3%) e Porphyromonas gingivalis (50%). Entretanto, nos 14 ovinos sem lesões periodontais, F. nucleatum (42,8%) foi a bactéria mais detectada. Associação estatisticamente diferente foi observada para Campylobacter rectus, Enterococcus faecium, Prevotella nigrescens, T. forsythia e T. denticola (p 0,05) nos ovinos com periodontite em comparação entre os dois grupos. Aggregatibacter actinomycetemcomitans, Enterococcus faecalis e Porphyromonas gulae não foram detectados em nenhuma das amostras pesquisadas. Conclui-se que C. rectus, E. faecium, P. nigrescens, T. forsythia e T. denticola estão associados às lesões resultantes da periodontite ovina com manifestação clínica grave e F. nucleatum o micro-organismo mais prevalente no biofilme subgengival de animais periodontalmente sadios.

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Background: Control of oral lesions contributes directly to the survival, and welfare of captive animals, and studies show that the genus Ateles has a higher prevalence of widespread periodontal disease compared to other genera. Anaerobic microbial species, considered as periodontal pathogens, are part of the biofilm community that contributes to the development of periodontitis. The present study aimed to detect periodontopathogenos in the oral cavity of two captive white-cheeked spider monkeys (Ateles marginatus) submitted for assessment oral and subgingival curettage.Case: We evaluated one pair of captive white-cheeked spider monkeys, one male (A) and one female (B), of 15 years of age with an average weight of 7 kg. Animals were fed daily with rations for primates, including fruit, vegetables, and raw eggs. The animals underwent oral evaluation, and following the charting of odontogram and photographic documentation, both were classified with periodontal disease stage III, according to the AVDC (American College of Veterinary Dentistry). They presented with moderate periodontitis, characterized by a loss of 25 to 50% of periodontal insertion and exposure of furcation degree 2, measured through clinical survey. During intraoral review, animals underwent subgingival curettage with curette of Gracey on the surface of the canine vestibular (C) and four top bilateral premolars (4PM). Antibiotics were not used at the time of collection, for dealing with routine procedures of clinical evaluation. The animals showed an increase in the volume of hemorrhagic features in the vestibular region between C and the second pre molar (2PM) on the upper right. Incisional biopsy was collected immediately at the end of the assessment, for the purpose of histopathological analyses. The samples from subgingival collection were immediately deposited in microtubes containing 500 µL of 0.9% saline solution and kept at -18°C until the time of genomic DNA extraction.[...](AU)

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Background: Control of oral lesions contributes directly to the survival, and welfare of captive animals, and studies show that the genus Ateles has a higher prevalence of widespread periodontal disease compared to other genera. Anaerobic microbial species, considered as periodontal pathogens, are part of the biofilm community that contributes to the development of periodontitis. The present study aimed to detect periodontopathogenos in the oral cavity of two captive white-cheeked spider monkeys (Ateles marginatus) submitted for assessment oral and subgingival curettage.Case: We evaluated one pair of captive white-cheeked spider monkeys, one male (A) and one female (B), of 15 years of age with an average weight of 7 kg. Animals were fed daily with rations for primates, including fruit, vegetables, and raw eggs. The animals underwent oral evaluation, and following the charting of odontogram and photographic documentation, both were classified with periodontal disease stage III, according to the AVDC (American College of Veterinary Dentistry). They presented with moderate periodontitis, characterized by a loss of 25 to 50% of periodontal insertion and exposure of furcation degree 2, measured through clinical survey. During intraoral review, animals underwent subgingival curettage with curette of Gracey on the surface of the canine vestibular (C) and four top bilateral premolars (4PM). Antibiotics were not used at the time of collection, for dealing with routine procedures of clinical evaluation. The animals showed an increase in the volume of hemorrhagic features in the vestibular region between C and the second pre molar (2PM) on the upper right. Incisional biopsy was collected immediately at the end of the assessment, for the purpose of histopathological analyses. The samples from subgingival collection were immediately deposited in microtubes containing 500 µL of 0.9% saline solution and kept at -18°C until the time of genomic DNA extraction.[...]

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O objetivo do presente estudo foi avaliar a progressão da periodontite experimental (PE) e a resposta tecidual periodontal frente à raspagem e alisamento radicular (RAR) durante tratamento com dose oncológica de zoledronato. Foram utilizados 100 ratos (6 meses de idade) distribuídos aleatoriamente em 4 grupos experimentais: SAL (n=30), ZOL (n=30), SAL-RAR (n=20) e ZOL-RAR (n=20). O plano de tratamento medicamentoso teve duração de 8 semanas. Os ratos receberam injeções intraperitoneais de 0,45 ml de solução de cloreto de sódio 0,9% (Grupos SAL e SALRAR) ou 0,45 ml da mesma solução acrescida de 100 µg/Kg de zoledronato (ZOL e ZOL-RAR) com um intervalo de três dias entre as aplicações. Decorridas duas semanas de tratamento medicamentoso, foi instalada uma ligadura de algodão ao redor do primeiro molar inferior esquerdo. Nos grupos SAL e ZOL essa ligadura permaneceu até o final do experimento. Nos grupos SAL-RAR e ZOL-RAR após outras duas semanas a ligadura foi removida, e foi efetuada a RAR. A eutanásia foi efetuada nos grupos SAL e ZOL aos 14, 21 e 42 dias pós instalação da ligadura e nos grupos SAL-RAR e ZOL-RAR aos 7 e 28 dias pós tratamento local com RAR. Foi executado o processamento histológico das hemi-mandíbulas e os cortes histológicos foram submetidos à coloração pela hematoxilina-eosina (HE). Na região de furca do primeiro molar inferior foram efetuadas: análise histopatológica dos tecidos peridontais e análise histométrica da porcentagem de osso na região de furca (POF) e da porcentagem de osso necrótico na região de furca (PON). Os resultados foram submetidos a análise estatística. O grupo ZOL apresentou uma resposta inflamatória local mais exacerbada, maior POF e maior PON aos 14d, 21d e 42 pós instalação da ligadura em relação ao grupo SAL. Em ZOL-RAR a resposta inflamatória se mostrou mais exacerbada, não houve alteração da POF, e a PON se mostrou maior ao longo do tempo e em relação ao grupo que não recebeu tratamento periodontal. Conclui-se que o tratamento com dose oncológica de zoledronato reduz a perda óssea alveolar induzida pela PE, todavia, aumenta a quantidade de tecido ósseo alveolar necrótico, exacerba e prolonga a resposta inflamatória local, tanto nos sítios sem tratamento periodontal quanto nos sítios submetidos à RAR, ou seja, a doença periodontal e o tratamento mecânico periodontal convencional são importantes fatores de risco local para a ONM-M(AU)

The present study aims to assess the progression of experimental periodontitis (EP) and the periodontal tissue response to scaling and root planing (SRP) during treatment with oncological dose of zoledronate. A total of 100 rats were used (6 months old) randomically distributed into 4 experimental groups: SAL (n=30), ZOL (n=30), SALSRP (n=20) e ZOL-SRP (n=20). Drug treatment plan lasted for 8 weeks. Intraperitoneal injections of 0,45 ml of sodium chloride solution 0,9% (Groups SAL and SAL-SRP) or 0,45 ml of the same solution adding 100 µg/Kg of zoledronate (ZOL and ZOL-SRP) were given to the rats within intervals of three days between injections. A cotton ligature was installed around the first left lower molar after two weeks of medicative treatment. At SAL and ZOL groups such ligature endured until the end of the experiment. At the groups SAL-SRP and ZOL-SRP ligature was removed two more weeks later and SRP was executed. Euthanasia was done at the groups SAL and ZOL after 14, 21 and 42 days from the ligature installation and at the groups SAL-SRP and ZOL-SRP after 7 and 28 days after local treatment with SRP. Hemimandibula was histological processing and executed and histological sections went under Hematoxylin and eosin staining (HE). At the furcal region of the first lower molar were executed: histopathological analysis of periodontal tissues and histometric analysis of bone percentage at the furcal region (BPF) and necrotic bone percentage at the furcal region (NPF). Results went under statistical analysis. ZOL group presented increased local inflammatory response, higther BPF and higher NPF at days 14, 21 and 42 after ligature installation in relation to SAL group. At ZOL-SRP, inflammatory response was increased, there was no BFP alteration, and NPF was higher throughout time in comparison to the group that had not received periodontal treatment. It can be concluded that treatment with oncological dose of zoledronate decreases alveolar bone loss induced by EP, on the other hand, it increases the amount of alveolar necrotic bone tissue, increases and extends local inflammatory response, either at sites with no periodontal treatment or the ones that went under SRP, in other words, periodontal disease and conventional mechanical periodontal treatment are important local risk factor for medication-related osteonecrosis of the jaw (MRONJ)(AU)

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Periodontitis in cattle is an infectious purulent progressive disease associated with strict anaerobic subgingival biofilm and is epidemiologically related to soil management at several locations of Brazil. This study aimed to detect Treponema species in periodontal pockets of cattle with lesions deeper than 5mm in the gingival sulcus of 6 to 24-month-old animals considered periodontally healthy. We used paper cones to collect the materials, after removal of supragingival plaques, and kept frozen (at -80°C) up to DNA extraction and polymerase chain reaction (PCR) using T. amylovorum, T. denticola, T. maltophilum, T. medium and T. vincentii primers. In periodontal pocket, it was possible to identify by PCR directly, the presence of Treponema amylovorum in 73% of animals (19/26), T. denticola in 42.3% (11/26) and T. maltophilum in 54% (14/26). Among the 25 healthy sites, it was possible to identify T. amylovorum in 18 (72%), T. denticola in two (8%) and T. maltophilum in eight (32%). Treponema medium and T. vincentii were not detected over all 51 evaluated samples. The presence of Treponema amylovorum, T. maltophilum and, in particular, the widely recognized T. denticola in subgingival microflora brings an original and potencially important contribution in studies of the bovine periodontitis.

A periodontite bovina é um processo infeccioso purulento e progressivo associado à presença de biofilme subgengival anaeróbio estrito e epidemiologicamente relacionada ao manejo do solo em amplas áreas geográficas do Brasil. O trabalho teve por objetivo detectar espécies de Treponema presentes na bolsa periodontal de bovinos com lesões de profundidade maior que 5mm e do sulco gengival de animais com idade de 6 a 24 meses e considerados periodontalmente sadios. Os materiais foram colhidos por meio de cones de papel, após a remoção do biofilme supragengival, e mantidos sob congelamento (-80°C) até a extração do DNA e realização da reação em cadeia da polimerase (PCR) com o emprego de iniciadores de T. amylovorum, T. denticola, T. maltophilum, T. medium e T. vincentii. Na bolsa periodontal de 73% (19/26) dos animais foi possível detectar diretamente, pela PCR, a presença de Treponema amylovorum, de 42,3% (11/26) T. denticola e de 54% (14/26) T. maltophilum. Dos 25 sítios sadios, em 18 (72%) foi possível identificar T. amylovorum, em dois (8%) T. denticola e em oito (32%) T. maltophilum. Treponema medium e T. vincentii não foram detectados nas 51 amostras avaliadas. A presença de Treponema amylovorum, T. maltophilum na microbiota subgengival, e em especial do amplamente reconhecido periodontopatógeno T. denticola, traz uma contribuição original de importância potencial nos estudos da periodontite bovina.

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Periodontitis in cattle is an infectious purulent progressive disease associated with strict anaerobic subgingival biofilm and is epidemiologically related to soil management at several locations of Brazil. This study aimed to detect Treponema species in periodontal pockets of cattle with lesions deeper than 5mm in the gingival sulcus of 6 to 24-month-old animals considered periodontally healthy. We used paper cones to collect the materials, after removal of supragingival plaques, and kept frozen (at -80°C) up to DNA extraction and polymerase chain reaction (PCR) using T. amylovorum, T. denticola, T. maltophilum, T. medium and T. vincentii primers. In periodontal pocket, it was possible to identify by PCR directly, the presence of Treponema amylovorum in 73% of animals (19/26), T. denticola in 42.3% (11/26) and T. maltophilum in 54% (14/26). Among the 25 healthy sites, it was possible to identify T. amylovorum in 18 (72%), T. denticola in two (8%) and T. maltophilum in eight (32%). Treponema medium and T. vincentii were not detected over all 51 evaluated samples. The presence of Treponema amylovorum, T. maltophilum and, in particular, the widely recognized T. denticola in subgingival microflora brings an original and potencially important contribution in studies of the bovine periodontitis.(AU)

A periodontite bovina é um processo infeccioso purulento e progressivo associado à presença de biofilme subgengival anaeróbio estrito e epidemiologicamente relacionada ao manejo do solo em amplas áreas geográficas do Brasil. O trabalho teve por objetivo detectar espécies de Treponema presentes na bolsa periodontal de bovinos com lesões de profundidade maior que 5mm e do sulco gengival de animais com idade de 6 a 24 meses e considerados periodontalmente sadios. Os materiais foram colhidos por meio de cones de papel, após a remoção do biofilme supragengival, e mantidos sob congelamento (-80°C) até a extração do DNA e realização da reação em cadeia da polimerase (PCR) com o emprego de iniciadores de T. amylovorum, T. denticola, T. maltophilum, T. medium e T. vincentii. Na bolsa periodontal de 73% (19/26) dos animais foi possível detectar diretamente, pela PCR, a presença de Treponema amylovorum, de 42,3% (11/26) T. denticola e de 54% (14/26) T. maltophilum. Dos 25 sítios sadios, em 18 (72%) foi possível identificar T. amylovorum, em dois (8%) T. denticola e em oito (32%) T. maltophilum. Treponema medium e T. vincentii não foram detectados nas 51 amostras avaliadas. A presença de Treponema amylovorum, T. maltophilum na microbiota subgengival, e em especial do amplamente reconhecido periodontopatógeno T. denticola, traz uma contribuição original de importância potencial nos estudos da periodontite bovina.(AU)

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Objetivo: Investigar a associação entre carga viral no biofilme subgengival (CVS) e carga viral plasmática (CVP) do HIV-1 e os parâmetros clínicos periodontais em indivíduos infectados pelo HIV. Metodologia: Quarenta e um pacientes com sorologia positiva para HIV-1 foram distribuídos em dois grupos: 20 com CVP detectável e 21 com CVP indetectável (< 50 cópias/mL). Amostras do biofilme subgengival foram coletadas de 12 sítios de cada paciente com periodontite, sendo 6 sítios com as maiores PBS, preferencialmente não adjacentes, e 6 sítios com periodonto sadio. Nos pacientes com saúde periodontal, foram coletadas 6 amostras de sítios periodontais sadios aleatórios. Das 6 amostras dos sítios com maiores PBS dos pacientes com periodontite, foram realizados 3 pools, com 2 amostras cada, de sítios com parâmetros clínicos semelhantes. O mesmo foi feito para as 6 amostras de periodontos sadios (tanto para os pacientes com periodontite como para aqueles com saúde periodontal), resultando em 3 pools. A detecção e quantificação da CVS foram realizadas através do PCR em Tempo Real. Os níveis de linfócitos T CD4+, T CD8+, neutrófilos e CVP foram obtidos dos resultados desses exames presentes nos prontuários médicos de cada paciente. Diferenças significativas entre os grupos para todos os parâmetros estudados foram avaliadas pelos testes Qui-quadrado, exato de Fisher e Mann-Whitney. O modelo de regressão utilizado foi a Equação de Estimação Generalizada (GEE) para testar a associação entre as co-variáveis e a CVS. Resultados: A maioria dos indivíduos era composta por homens (51,2%), não usuários de drogas (85,4%), não tabagistas (63,4%) e não consumidores diários de álcool (87,8%). Os dados laboratoriais demonstraram diferenças significantes entre os dois grupos estudados somente para os níveis de linfócitos T CD4+ (p = 0,038), porém não houve diferença estatisticamente significante entre os grupos em relação aos parâmetros clínicos periodontais. Não houve associação estatisticamente significante entre CV plasmática e CV subgengival, sendo a contagem de linfócitos TCD4+ a única co-variável que apresentou efeito estatisticamente significante sobre o desfecho CV subgengival indetectável (p = 0,017). A interpretação dos resultados demonstrou que indivíduos com níveis mais altos de linfócitos T CD4+ (> 500 células/mm3 ) tem uma chance muito maior de apresentar CV subgengival indetectável em relação aos indivíduos com níveis de linfócito T CD4+ < 200 células/mm3 . Conclusão: Não há associação entre a carga viral no biofilme subgengival e a carga viral plasmática do HIV-1 e os parâmetros clínicos periodontais em pacientes infectados pelo HIV.(AU)

Aim: To investigate the association between subgingival viral load in biofilm and plasmatic viral load and clinical periodontal parameters in HIV-1 infected patients. Methods: Fortyone HIV-positive patients were divided into two groups: detectable and undetectable plasmatic viral load (< 50 copies/mL). Subgingival biofilm samples were collected from 12 sites in each patient with periodontitis, 6 sites with the deepest PBS, preferably not adjacent, and 6 sites with healthy periodontium. In patients with periodontal health, 6 samples were collected from random healthy periodontal sites. Of the six samples of periodontal lesions were performed 3 pools, with 2 samples from each site with similar clinical parameters. The same was done with the 6 samples from healthy periodontium, resulting in three pools. Detection and quantification of subgingival viral load were determined by Real Time PCR. The levels of CD4, CD8, neutrophils and plasmatic viral load were obtained from the medical records of each patient. Significant differences between groups for all parameters were evaluated by Chi-square, Fisher's exact test and Mann-Whitney. The utilized regression model consisted of a test called Generalized Estimation Equation (GEE) to test the association between the co-variables and the subgingival viral load. Results: The majority of the patients were male (51,2%), non-drug users (85,4%), non-smokers (63,4%) and nonalcohol users (87,8%). The laboratory data demonstrated significant differences between groups only for levels of TCD4+ cells (p=0,038), however there was no significant difference between groups for clinical periodontal parameters. There was no statistically significant association between plasmatic viral load and subgingival viral load, and only the levels of TCD4+ cells demonstrated significant effect on the undetectable subgingival viral load (p=0,017). The interpretation of the results demonstrated that patients with higher levels of TCD4+ cells (> 500 cells/mm3 ) have a much higher chance of presenting undetectable subgingival viral load compared to patients with levels of TCD4+ cells < 200 cells/mm3. Conclusion: There is no association between subgingival viral load in biofilm and plasmatic viral load and clinical periodontal parameters in HIV-1 infected patients(AU)

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O objetivo do presente estudo foi comparar a expressão de IL-1β, IL-4, IL-8, interferon-γ, atividade de elastase e a composição do perfil microbiano subgengival antes e depois do tratamento periodontal não cirúrgico em pacientes com doença peridontal crônica generalizada (PC) e agressiva generalizada (PA). Vinte pacientes com PC e quatorze com PA foram avaliados. Dados clínicos, fluido gengival e biofilme subgengival foram analisados na visita inicial (VI) e 3 meses (3M) após o tratamento periodontal não cirúrgico. Amostras de fluido gengival (FG) foram coletadas com tiras de papel e os níveis de: IL-1β, IL-4, IL-8 e INF-γ foram medidos, utilizando um tipo de imunoensaio multiplexado (Luminex). Atividade da elastase foi avaliada por um ensaio enzimático. Amostras de placa subgengival foram analisadas através do checkerboard DNA-DNA hybridization. Na avaliação de 3 meses após terapia periodontal foi encontrado melhora significativa para todos os parâmetros clínicos em ambos os grupos. Foram encontradas reduções significativas na atividade de elastase nos sítios rasos e profundos dos pacientes do grupo PA e nos sítios profundos do grupo PC, também foi achado um aumento significativo de INF-γ nos sítios rasos do grupo PA. Os dados microbiológicos, mostraram reduções significativas para os níveis dos membros do complexo vermelho (P. gingivalis, T. forsythia, T.denticola), e para as espécies E.nodatum e P.micra no grupo PC. No grupo PA, ocorreram reduções significativas no níveis de P. gingivalis, T. forsythia, Fusobacterium nucleatum ss polymorphum e Fusobacterium periodonticum. Quando as respostas clínica e imunológica 3M após terapia foram comparadas entre os grupos, apenas diferenças sutis foram observadas. Nenhuma diferença microbiológica foi encontrada entre os grupos após a terapia. Em conclusão, os achados suportam nossa hipótese de que as periodontites cronica e agressiva respondem de forma semelhante ao tratamento periodontal nao cirúrgico.

Our aim was to compare the expression of IL1β, IL-4, IL-8, INF-γ, elastase activity and the composition of the subgingival microbiota profile before and after non-surgical periodontal treatment in patients with untreated generalized chronic (GCP) and aggressive periodontitis (GAgP). Twenty patients with GCP and 14 with GAgP were evaluated. Clinical data, GCF and plaque were analyzed at baseline and 3 months after non-surgical periodontal treatment. IL-1β, IL-4, IL-8 and INFγ were analyzed in a luminex assay. Elastase activity was assessed by an enzymatic assay. Subgingival plaque samples were analyzed using checkerboard DNA-DNA hybridization. Three months after periodontal therapy significant improvement for all clinical parameters in both groups were found. We have found significant reductions in the elastase activity in shallow and deep sites from GAgP and in deep sites from GCP group. A significant increase in INF-γ in the shallow sites from GAgP group were also found. Microbiological data showed significant reductions in the levels of members of the red complex (P. gingivalis, T. forsythia, T. denticola), and for the species E.nodatum and P.micra on GCP group. In the GAgP group, there were significant reductions in levels of P. gingivalis, T. forsythia, Fusobacterium nucleatum and Fusobacterium polymorphum ss periodonticum. When the clinical and immunological responses after therapy were compared between groups, only slight differences were found. No microbiological difference was found between groups after therapy. In conclusion, the findings support our hypothesis that the chronic and aggressive periodontitis respond equally well to non-surgical periodontal treatment.

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O tratamento convencional da doença periodontal é feito pela raspagem e alisamento radicular (RAR). No entanto, este procedimento apresenta limitações como, dificuldade de acesso a áreas de furcas, bolsas profundas e sítios distais de molares. Nesse sentido, a terapia fotodinâmica (TFD) poderia ser benéfica, pois não induz resistência bacteriana e surge como um método de redução microbiana por necrose celular, por meio da associação de uma fonte de luz (laser) e um agente fotossensibilizante. Esta técnica apresenta mínimos efeitos colaterais e sistêmicos, sendo capaz de aumentar o conforto do paciente reduzindo a necessidade de retalhos, o tempo de tratamento e o risco de bacteremias. A despeito dessas qualidades, estudos clínicos controlados ainda são requeridos para que se estabeleça um protocolo de uso da TFD que seja efetivo, seguro e que proporcione benefícios significativos quando comparado à terapia convencional. O objetivo deste trabalho é fazer uma revisão de literatura sobre os efeitos da TFD como adjuvante ao tratamento periodontal não-cirúrgico.

The conventional treatment of periodontitis is accomplished by scaling and root planning (SRP). However, this procedure has limitations, difficulty to access furcations areas, deep and distal sites of molars. On the other hand, photodynamic therapy (PDT), could be beneficial, because it does not induc bacterial resistance and comes as a method of microbial reduction, cellular necrosis by the association of a light (laser) and a photosensitizing agent. This technique has minimal systemic side effects and, is able to increase patient comfort by minimizing need for flaps, treatment time and the risk of bacterial infections. Despite those qualities, controlled clinical studies are still necessary to establish a protocol for PDT use that is effective, safe and that provides significant benefits when compared to conventional therapy. This work aims to review the literature on PDT as an adjuvant to non-surgical periodontal treatment.

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O objetivo deste estudo foi determinar a prevalência e a susceptibilidade antimicrobiana de Staphylococcus spp. em quadros de saúde e doença periodontal, relacionando-as com fatores do hospedeiro, do meio ambiente local e próprios das doenças. Para tanto, foram selecionados 30 indivíduos adultos, entre 19 e 55 anos, que apresentassem sítios periodontais saudáveis, com gengivite crônica e/ou periodontite crônica, sem tratamento periodontal, e que não tivessem usado antibiótico ou antimicrobiano nos últimos três meses. De cada paciente foram coletadas 18 amostras de biofilme subgengival, sendo 6 por elemento dentário sorteado com as condições supracitadas. Com o auxílio de pontas de papel absorventes estéreis, tais amostras foram coletadas do sulco gengival ou bolsa periodontal, semeadas em Agar Manitol Salgado e incubadas a 370C por 48 horas. A identificação de Staphylococcus spp. se deu através da coloração de Gram, prova da catalase, susceptibilidade à bacitracina e prova da coagulase livre Após a identificação, as amostras foram submetidas ao teste de susceptibilidade a doze antimicrobianos, através da técnica de Kirby-Bauer. Para o estabelecimento da relação entre a presença de estafilococos coagulase-negativos, os níveis de infecção dos mesmos e os fatores do hospedeiro, do meio ambiente local e próprios das doenças, foram usados os testes do Qui- quadrado, Mann-Whitney e Kruskal-Wallis para um nível de confiança de 95%. Quanto à prevalência de estafilococos coagulase-negativos, 86,7% dos indivíduos albergavam este microrganismo em 11,7% dos sítios periodontais, sendo distribuídos em 12,1% entre os saudáveis, 11,7% com gengivite crônica, 13,5% com periodontite crônica leve, 6,75% com periodontite crônica moderada e nenhum sítio com periodontite crônica severa (p=0,672). Não houve associação significativa na freqüência de isolamento ou nos níveis de infecção de ECN com fatores do hospedeiro, do meio ambiente local e próprios das doenças. Dentre as 74 cepas isoladas de ECN, a maior resistência observada neste estudo foi à penicilina (55,4%), eritromicina (32,4%), tetraciclina (12,16%) e clindamicina (9,4%). Cinco vírgula três por cento das cepas foram resistentes à oxacilina e à meticilina. Nenhuma cepa apresentou resistência aos antibióticos ciprofloxacina, rifampicina e vancomicina. Conclui-se, portanto, que os estafilococos estão presentes em baixos números em sítios periodontais saudáveis e doentes numa proporção equivalente. Porém, uma tendência foi observada em relação ao decréscimo de sua ocorrência em quadros mais avançados da doença periodontal. Essa baixa prevalência de SCN não esteve associada a nenhuma das variáveis testadas nesse estudo. O perfil de susceptibilidade aos antimicrobianos demonstrou uma elevada resistência à penicilina, porém uma baixa resistência à meticilina. Para a eritromicina, tetraciclina e clindamicina foi encontrada uma resistência significativa (AU).

The aim of this study was determine the prevalence and antimicrobial susceptibility of Staphylococcus spp. from patients with periodontal disease and periodontally healthy, correlate them with factors to host, local environment and traits of the diseases. To this, thirty adults from 19 to 55 years old were selected. They had not periodontal treatment and no antibiotic or antimicrobial was administered during three previous months. From these individuals, sites periodontally healthy, with chronic gingivitis and/or periodontitis were analyzed. Eighteen subgingival dental biofilm samples were collected through sterile paper points being six from each tooth randomly selected, representing conditions mentioned. They were transported to Oral Microbiology laboratory, plated onto Mannitol Salt Agar (MSA) and incubated at 370C in air for 48 h. Staphylococcus spp. were identified by colonial morphology, Gram stain, catalase reaction, susceptibility to bacitracin and coagulase activity. After identification, strains were submitted to the antibiotic susceptibility test with 12 antimicrobials, based on Kirby-Bauer technique. To establish the relation between coagulase-negative Staphylococcus (CSN) presence and their infection levels and host factors, local environment and traits of diseases were used Chi-square, Mann-Whitney and Kruskal-Wallis tests to a confidence level of 95%. 86,7% subjects harbored CSN in 11,7% periodontal sites. These prevalence were 12,1% in healthy sites, 11,7% in chronic gingivitis, 13,5% in slight chronic periodontitis, 6,75% in moderate chronic periodontitis and in sites with advance chronic periodontitis was not isolated CSN, without difference among them (p = 0,672). There was no significant difference to presence and infection levels of CSN as related to host factors, local environment and traits of the diseases. Amongst the 74 samples of CSN isolated, the biggest resistance was observed to penicillin (55,4%), erythromycin (32,4%), tetracycline (12,16%) and clindamycin (9,4%). 5,3% of the isolates were resistant to oxacilin and methicillin. No resistance was observed to ciprofloxacin, rifampicin and vancomycin. It was concluded that staphylococci are found in low numbers in healthy or sick periodontal sites in a similar ratio. However, a trend was observed to a reduction in staphylococci occurrence toward more advanced stages of the disease. This low prevalence was not related to any variables analyzed. Susceptibility profile to antibiotics demonstrates a raised resistance to penicillin and a low one to methicillin. To erythromycin, tetracycline and clindamycin was observed a significant resistance (AU).

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Actinobacillus actinomycetemcomitans is considered a major etiologic agent of aggressive periodontitis but this species has also been associated with other forms of periodontal disease. Further, highly leukotoxic strains are related to severity of disease. This investigation determined the prevalence of A. actinomycetemcomitans and the occurrence of the leukotoxin gene 530-bp deletion in Brazilian subjects with chronic periodontitis. Twenty periodontally healthy and 20 chronic periodontitis subjects were selected. Full-mouth clinical examination was carried out at 6 sites/tooth. Subgingival biofilm samples were collected from the 3 deepest sites and 3 healthy sites from periodontitis subjects, as well as from 3 sites of individuals with periodontal health. A. actinomycetemcomitans and the genetic deletion were determined by the polymerase chain reaction. Significant differences were sought by Mann-Whitney, Chi-square, and Wilcoxon sign tests. Periodontitis subjects presented a higher prevalence (75%) of A. actinomycetemcomitans than individuals with health (45%) (p = 0.053). A mean frequency of 57.5% of A. actinomycetemcomitans - positive sites was observed in the periodontitis group. Of those, 75% were diseased, whereas 40% were healthy sites (p = 0.0001). Healthy subjects showed a mean frequency of 35% of positive sites. In contrast, the genetic deletion was detected only in 4 diseased sites from 2 chronic periodontitis patients. A high prevalence of A. actinomycetemcomitans was observed in Brazilians with chronic periodontitis. However, the leukotoxin gene 530-bp deletion was rarely detected in the subgingival biofilm of these subjects.

Actinobacillus actinomycetemcomitans tem sido associado com diferentes formas de doenças periodontais, mas tal espécie é considerada o principal agente etiológico da doença periodontal agressiva. Algumas cepas de A. actinomycetemcomitans apresentam uma deleção de 530 pb na região promotora do operon do gene da leucotoxina, produzindo assim maiores quantidades desta toxina. Tal fato pode ter um importante papel na patogênese das doenças periodontais. A proposta do presente estudo foi determinar a prevalência do A. actinomycetemcomitans em amostras de biofilme subgengival de indivíduos brasileiros com periodontite crônica e saúde periodontal; bem como avaliar a distribuição do tipo genético leucotóxico desta espécie nestes indivíduos. Vinte pacientes com periodontite crônica e 20 controles com saúde periodontal foram selecionados. O exame clínico periodontal foi realizado em 6 sítios/dente em todos os dentes. Amostras de biofilme subgengival foram coletadas de 3 sítios com a maior profundidade de bolsa e 3 sítios sem doença dos pacientes com periodontite, assim como de 3 sítios aleatórios dos controles. A detecção do A. actinomycetemcomitans e a ocorrência da deleção genética foram realizadas utilizando a técnica de PCR diretamente nas amostras de biofilme. Pacientes com periodontite crônica apresentaram uma alta prevalência de A. actinomycetemcomitans (75%) quando comparados aos indivíduos sem doença periodontal (45%), porém essa diferença não foi significativa (p = 0.053). Foi observada uma freqüência média de 57.5% de sítios com A. actinomycetemcomitans no grupo com periodontite. Destes sítios, 75% eram sítios com doença, enquanto 40% eram sítios saudáveis (p = 0.0001). Indivíduos sem doença periodontal apresentaram uma freqüência média de 35% de sítios com A. actinomycetemcomitans. A deleção de 530-pb foi encontrada somente em 4 sítios doentes de 2 pacientes com periodontite crônica. Uma alta prevalência de A. actinomycetemcomitans foi observada em pacientes Brasileiros com doença periodontal crônica. Entretanto, a deleção de 530 pb no gene da leucotoxina foi raramente detectada no biofilme subgengival desses indivíduos.

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Anaerobic bacteria associated with spontaneous periodontal disorders were studied. The samples were directly colected from the subgingival space with a odontologic curet, and they were plated in Central for Disease Control culture medium for anaerobic bacteria and incubated in anaerobic conditions at 37°C for seven days. The characterization of the colonies were done by the morphologic study and biochemical tests (API 20A). Prevotella spp., Bacteroides spp., Propionibacterium spp., Actinomyces spp., Eubacterium spp., Porphyromonas spp. and Gemella spp. were identified in the samples.

Realizou-se um estudo sobre a microbiota saprófita associada à doença periodontal espontânea em cães com o objetivo de identificar as bactérias anaeróbias predominantes nas lesões. Com auxílio de cureta odontológica, amostras colhidas diretamente do espaço subgengival foram semeadas em meio CDC (Central for Disease Control) para anaeróbios e incubadas, em anaerobiose, a 37°C, por sete dias. A caracterização das colônias foi realizada por meio da morfologia e do teste bioquímico (Sistema API 20A FONT FACE="Symbol">Ò /FONT>). Identificaram-se os seguintes gêneros: Prevotella spp., Bacteroides spp., Propionibacterium spp., Gemella spp., Actinomyces spp., Eubacterium spp. e Porphyromonas spp.