RESUMO
O desenvolvimento do dente depende de uma série de interações sinalizadoras recíprocas entre o epitélio oral (EO) e o ectomesênquima derivado da crista neural, a via WNT com o TGF-ß e BMP4 tem sido implicada na tumorigênese. A via de sinalização tipo Wingless (Wnt) / ß-catenina é essencial para a ativação precoce da odontogênese e no desenvolvimento de tumores odontogênicos. O TGF-ß e as BMPs tem sido associadas aos processos de dentinogênese reacionária e reparadora. A sinalização de Shh pode regular a proliferação celular no ectomesênquima dentário, controlando assim a morfogênese dentária. O objetivo da pesquisa foi investigar a atuação de algumas proteínas das vias na odontogênese e na formação de odontomas e tumores odontogênicos mistos benignos, para isto, foi desenvolvido um estudo seccional restrospectivo e imuno-histoquímico contendo 23 odontomas compostos, 21 odontomas complexos, 17 germes dentários, 05 fibro-odontomas ameloblásticos e 01 fibroma ameloblástico. Os resultados encontrados demonstraram maiores imunoexpressões da via WNT/ß-catenina no epitélio dos germes dentários (p<0,001) e no fibroma ameloblástico, enquanto que, esteve no ectomesênquima dos odontomas (p<0,001) e fibro-odontomas ameloblásticos. A via WNT/ßcatenina correlacionou-se moderadamente e significativamente com a CK14 no epitélio (p = 0,007) dos odontomas. A BMP4 foi imunoexpressa, especialmente, no ectomesênquima dos odontomas complexos (mediana = 33,7; p<0,001). A via Shh foi mais imunoexpressa no epitélio dos germes dentários (p<0,001) e no ectomesênquima dos odontomas complexos (p=0,029). De forma similar, o TGFß apresentou maior imunoexpressão no epitélio dos germes dentários (p<0,001) e no ectomesênquima dos odontomas complexos (p = 0,002). O dente em desenvolvimento exibiu maiores concentrações para estas proteínas no epitélio odontogênico nas fases de botão e capuz e a expressão diferencial ocorreu, principalmente, no ectomesênquima dos tumores, o que indica que esse componente é de fato mais proliferativo (AU).
Tooth development depends on a series of reciprocal signaling interactions between oral epithelium (EO) and neural crest-derived ectomesenchyme, the WNT pathway with TGF-ß and BMP4 has been implicated in tumorigenesis. The Wingless (Wnt)/ß-catenin signaling pathway is essential for the early activation of odontogenesis and the development of odontogenic tumors. TGF-ß and BMPs have been associated with reactionary and reparative dentinogenesis processes. Shh signaling can regulate cell proliferation in dental ectomesenchyme, thus controlling dental morphogenesis. The objective of the research was to investigate the role of some proteins in the pathways in odontogenesis and in the formation of odontomas and benign mixed odontogenic tumors. tooth germs, 05 ameloblastic fibro-odontomas and 01 ameloblastic fibroma. The results found showed higher immunoexpressions of the WNT/ß-catenin pathway in the epithelium of tooth germs (p<0.001) and in ameloblastic fibroma, while it was in the ectomesenchyme of odontomas (p<0.001) and ameloblastic fibroodontomas. The WNT/ß-catenin pathway correlated moderately and significantly with CK14 in the epithelium (p = 0.007) of odontomas. BMP4 was immunoexpressed, especially in the ectomesenchyme of complex odontomas (median = 33.7; p<0.001). The Shh pathway was more immunoexpressed in the epithelium of tooth germs (p<0.001) and in the ectomesenchyme of complex odontomas (p=0.029). Similarly, TGF-ß showed higher immunoexpression in the epithelium of tooth germs (p<0.001) and in the ectomesenchyme of complex odontomas (p = 0.002). The developing tooth exhibited higher concentrations of these proteins in the odontogenic epithelium in the bud and cap phases and the differential expression occurred mainly in the ectomesenchyme of the tumors, which indicates that this component is in fact more proliferative (AU).
Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Odontoma/patologia , Fator de Crescimento Transformador beta , Proteínas Hedgehog , Via de Sinalização Wnt , Odontogênese , Imuno-Histoquímica , Tumores Odontogênicos/patologia , Estudos Transversais/métodos , Estatísticas não Paramétricas , DentinogêneseRESUMO
O presente trabalho tem como proposição avaliar a expressão de genes da via de sinalização Wnt no carcinoma de células escamosas bucal (CCE). Foram avaliados dois grupos: Grupo controle (GCO): 12 amostras de mucosa bucal com aspecto de normalidade. Grupo carcinoma (GCA): 30 amostras com diagnóstico histopatológico de CCE. As informações quanto ao hábito tabágico, consumo de etílicos, gradação e estágio da doença foram extraídas dos prontuários. A expressão dos genes WNT5A, APC, CTNNB1, CCND1, MYC foi avaliada por meio de RT-qPCR e, os resultados de expressão gênica foram correlacionados com os dados clinicopatológicos dos pacientes. Os dados foram analisados por meio do software GraphPad Prism 5.03. Utilizou-se o teste t de Student e os coeficientes de correlação de Pearson e de Sperman, com nível de significância de 5% para todos os testes. Houve superexpressão dos genes, WNT5A (fold increase=0,28; p=0,034), APC (fold increase=0,74; p=0,043), CTNNB1 (fold increase=0,36; p=0,493), CCND1 (fold increase=0,67; p= 0,049) e MYC (fold increase=0,99; p=0,001) no GCA, quando comparado ao GCO. Ainda, a expressão do gene MYC apresentou correlação inversamente proporcional com o consumo de cigarros por dia (-3,76; p=0,040) e carga tabágica (-3,73; p=0,043). Já a expressão do gene CTNNB1 apresentou correlação inversamente proporcional ao Teste de Fagerström (-0,405; p=0,026) e a gradação histopatológica (-0,419; p=0,021). A via de sinalização Wnt/ßcatenina mostrou-se envolvida na carcinogênese bucal das amostras estudadas, por meio da superexpressão dos genes WNT5A, APC, CCND1 e MYC. Interessantemente, o aumento da expressão de CTNNB1 correlacionou-se com menor carga tabágica da mesma forma que o MYC com menor número de cigarros diários e menor carga tabágica. Assim, sugere-se que o papel da via Wnt parece ser importante nos estágios iniciais da carcinogênese bucal e que a ativação ou superexpressão dos genes se dá de maneira independente ao hábito tabágico(AU)
This study aim was to investigate the Wnt signaling genes expression in oral squamous cell carcinoma (SCC). Patients were divided into 2 groups: Control group (COG): 12 samples of oral mucosa with normal appearance. Carcinoma group (CAG): 30 samples of histopathological SCC diagnosis. Smoking habits, alcohol consumption, disease histopathological grade and clinical staging were accessed from medical records. The expression of the WNT5A, APC, CTNNB1, CCND1 and MYC genes was evaluated by RT-qPCR and the gene expression profile were correlated with the clinicopathological data of the patients. The groups were compared by the Student t-test, with p < 0.05 indicating a significant difference. The gene expression results were correlated with clinical data with Pearson's and Sperman's correlation coefficient. It was seen an overexpression of WNT5A (fold increase=0,28; p=0,034), APC (fold increase=0,74; p=0,043), CTNNB1 (fold increase=0,36; p=0,493), CCND1 (fold increase=0,67; p= 0,049) e MYC (fold increase=0,99; p=0,001) compared to COG. The Wnt / ß-catenin signaling pathway was shown to be involved in the oral carcinogenesis of the studied samples, through the overexpression of the WNT5A, APC, CCND1 and MYC genes. Interestingly, the increased expression of CTNNB1 was correlated to a lower load in the same way as MYC was correlated to a lower number of daily cigarettes and a lower smoking load. Thus, it is suggested that the role of the Wnt pathway appears to be important in the early stages of oral carcinogenesis and that the activation or overexpression of genes occurs independently of smoking(AU)
Assuntos
Carcinoma de Células Escamosas/diagnóstico por imagem , Tabagismo/tratamento farmacológico , Expressão Gênica/genética , Via de Sinalização Wnt , Mucosa Bucal/imunologiaRESUMO
ABSTRACT Objectives To study the effects of contusion and exhaustive exercise on gene expression of MG53, PTRF, Pax7 and β-catenin in skeletal muscle of rats, and reveal the repair mechanism of skeletal muscle injury. Methods Forty-two male Wistar rats were randomly divided into 7 groups, with 6 rats in each group. All groups were euthanized at different time points after exhaustive exercise and contusion, respectively, while the control group was euthanized in resting state. The right gastrocnemius muscles were measured for mRNAs of MG53, PTRF, Pax7 and β-catenin by real time PCR. Results MG53 mRNA and PTRF mRNA of skeletal muscle in groups immediately after exhaustive exercise and after contusion increased significantly (p<0.05), while the two indices decreased constantly at 24 and 48 hours after injury with a similar change trend. Compared with the control group, Pax7 mRNA of skeletal muscle as a marker showed no significant difference in exhaustive exercise groups, but decreased at 48 hours after contusion (p<0.05). β-catenin mRNA of skeletal muscle down-regulated significantly over 24 hours after injury, then activated with an increased value at 48 hours after contusion (p<0.05). As a whole, the variations in the above indices in the contusion groups covered a wider range than in the exhaustive exercise groups. Conclusion The cytomembrane repair mechanism of MG53 and PTRF began immediately after the end of exhaustive exercise and contusion. Activation of Pax7 as the satellite cell marker took longer, and Wnt/β-catenin pathway showed first a decrease and then an increase resulting from the time-dependent gene expression during the repair of skeletal muscle injury. Level of evidence III, Therapeutic studies investigating the results of treatment.
RESUMO Objetivos Estudar os efeitos da contusão e do exercício exaustivo sobre a expressão de MG53, PTRF, Pax7 e β-catenina no músculo esquelético de ratos e revelar o mecanismo de reparo da lesão desses músculos. Métodos Quarenta e dois ratos Wistar machos foram divididos randomicamente em 7 grupos, com 6 ratos em cada grupo. Todos os grupos foram sacrificados em diferentes momentos após exercícios exaustivos e contusão, respectivamente, enquanto o grupo controle foi sacrificado em repouso. O músculo gastrocnêmio direito de todos os ratos foi analisado por PCR em tempo real, quanto ao RNAm de MG53, PTRF, Pax7 e β-catenina. Resultados O RNAm de MG53 e de PTRF no músculo esquelético dos grupos imediatamente após o exercício exaustivo e após a contusão aumentou significativamente (p < 0,05), enquanto a diminuição foi constante 24 e 48 horas depois da lesão, com tendência de mudança semelhante. Comparado com o grupo controle, o RNAm de Pax7 do músculo esquelético não mostrou diferença significativa como marcador nos grupos de exercício exaustivo, mas diminuiu 48 horas depois da contusão (p < 0,05). O RNAm da β-catenina do músculo esquelético diminuiu significativamente ao longo de 24 horas após a lesão e, a seguir, voltou para um valor elevado 48 horas depois da contusão (p < 0,05). Como um todo, as variações nos grupos de contusão tiveram uma faixa mais ampla do que a dos grupos de exercícios exaustivos. Conclusões O mecanismo de reparação da citomembrana de MG53 e PTRF começou imediatamente depois do término de exercício exaustivo e contusão. A ativação do Pax7 como marcador das células satélite demorou mais tempo e a via Wnt/β-catenina mostrou primeiro diminuição e depois aumento decorrente da expressão gênica dependente do tempo durante o reparo da lesão muscular esquelética. Nível de Evidência III, Estudos Terapêuticos - Investigação de resultados do tratamento.
RESUMEN Objetivos Estudiar los efectos de la contusión y del ejercicio exhaustivo sobre la expresión de MG53, PTRF, Pax7 y β-catenina en el músculo esquelético de ratones y revelar el mecanismo de reparación de la lesión de esos músculos. Métodos Cuarenta y dos ratones Wistar machos fueron divididos aleatoriamente en 7 grupos, con 6 ratones en cada grupo. Todos los grupos fueron sacrificados en diferentes momentos después de ejercicios exhaustivos y contusión, respectivamente, mientras que el grupo control fue sacrificado en reposo. El músculo gastrocnemio derecho de todos los ratones fue analizado por PCR en tiempo real, cuanto al RNAm de MG53, PTRF, Pax7 y β-catenina. Resultados El RNAm de MG53 y de PTRF en el músculo esquelético de los grupos inmediatamente después del ejercicio exhaustivo y después de la contusión aumentó significativamente (p < 0,05), mientras que la disminución fue constante 24 y 48 horas después de la lesión, con tendencia de cambio semejante. Comparado con el grupo control, el RNAm de Pax7 del músculo esquelético no mostró diferencia significativa como marcador en los grupos de ejercicio exhaustivo, pero disminuyó 48 horas después de la contusión (p < 0,05). El RNAm de la β-catenina del músculo esquelético disminuyó significativamente a lo largo de 24 horas después de la lesión y, a continuación, volvió para un valor elevado 48 horas después de la contusión (p < 0,05). Como un todo, las variaciones en los grupos de contusión tuvieron una franja más amplia que la de los grupos de ejercicios exhaustivos. Conclusiones El mecanismo de reparación de la citomembrana de MG53 y PTRF comenzó inmediatamente después del término de ejercicio exhaustivo y contusión. La activación del Pax7 como marcador de las células satélite demoró más tiempo y la vía Wnt/β-catenina mostró primero disminución y después aumento proveniente de la expresión génica dependiente del tiempo durante la reparación de la lesión muscular esquelética. Nivel de Evidencia III, Estudios Terapéuticos - Investigación de resultados del tratamiento.
RESUMO
ABSTRACT Background : It is believed that the Wnt pathway is one of the most important signaling involved in gastric carcinogenesis. Aim : To analyze the protein expression of canonical and non-canonical Wnt pathways in gastric carcinoma. Method : The immunohistochemistry was performed in 72 specimens of gastric carcinomas for evaluating the expression of Wnt-5a, FZD5, GSK3β, axin, CK1, ubiquitin, cyclin D1 and c-myc. Results : There were significant differences for cytoplasm and nucleus ubiquitin for moderately and well differentiated tumors (p=0.03) and for those of the intestinal type of the Lauren classification (p=0.03). The absence of c-myc was related to Lauren's intestinal tumors (p=0.03). Expression of CK1 in the cytoplasm was related to compromised margin (p=0.03). Expression of cyclin D1 protein was more intense in male patients (p=0.03) There was no relation of the positive or negative expression of the Wnt-5a, FZD5, GSK3 and Axin with any clinicopathological variables. Conclusion: The canonical WNT pathway is involved in gastric carcinoma.
RESUMO Racional : Acredita-se que a via Wnt é uma das mais importantes da sinalização envolvidas na carcinogênese gástrica. Objetivos : Analisar a expressão das proteínas das vias Wnt canônicas e não-canônicas no carcinoma gástrico e relacionar sua expressão com as variáveisclinicopatológicas. Método : Foram coletadas 72 amostras de carcinoma gástrico, e áreas representativas do tumor foram selecionadas para o Tissue Microarray. Imunoistoquímica foi realizada para avaliar a expressão de Wnt-5a, FZD5, GSK3β, axina, CK1, ubiquitina, ciclina D1 e c-myc. Resultados : Houve diferenças significativas para a expressão de ubiquitina no citoplasma e núcleo para tumores moderadamente e bem diferenciados (p=0,03) e para aqueles do tipo intestinal da classificação de Lauren (p=0,03). A expressão negativa da proteína c-myc no citoplasma foi relacionada aos tumores intestinais de Lauren (p=0,028). A expressão positiva de CK1 no citoplasma das células neoplásicas foi relacionada a tumores com margens cirúrgicas livre de envolvimento neoplásico (p=0,03). A expressão positiva da proteína ciclina D1 foi maior nos tumores dos homens (p=0,03). Não houve relação da expressão positiva ou negativa das proteínas Wnt-5a e FZD5 no citoplasma ou núcleo com quaisquer variáveis clinicopatológicas. O mesmo foi observado para GSK3β e Axin. Conclusões : A relação da expressão das proteínas da via canônica com as variáveis epidemiológicas e tumorais sugere sua participação na carcinogênese gástrica. Por outro lado, a ausência da relação das expressões das proteínas da via não-canônica sugere sua não participação na carcinogênese gástrica.
Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Neoplasias Gástricas/química , Carcinoma/química , Via de Sinalização Wnt , Proteínas de Neoplasias/análise , Valores de Referência , Neoplasias Gástricas/patologia , Imuno-Histoquímica , Carcinoma/patologia , Proteínas Proto-Oncogênicas c-myc/análise , Ciclina D1/análise , Ubiquitina/análise , Caseína Quinase I/análise , Receptores Frizzled/análise , Proteína Axina/análise , Carcinogênese , Glicogênio Sintase Quinase 3 beta/análise , Proteína Wnt-5a/análise , Estadiamento de NeoplasiasRESUMO
ABSTRACT Background: Gastric cancer is the fifth most frequent cancer and the third most common cause of cancer-related deaths worldwide.It has been reported that Wnt/ betacatenin pathway is activated in 30-50% of these tumors. However,the deregulation of this pathway has not been fully elucidated. Aim: To determine the expression of E-cadherin, betacatenin, APC, TCF-4 and survivin proteins in gastric adenocarcinoma tissues and correlate with clinical and pathological parameters. Method: Seventy-one patients with gastric adenocarcinoma undergoing gastrectomy were enrolled. The expression of E-cadherin, betacatenin, APC, TCF-4 and survivin proteins was detected by immunohistochemistryand related to the clinical and pathological parameters. Results: The expression rates of E-cadherin in the membrane was 3%; betacatenin in the cytoplasm and nucleus were 23,4% and 3,1% respectively; APC in the cytoplasm was 94,6%; TCF-4 in the nucleus was 19,4%; and survivin in the nucleus 93,9%. The expression rate of E-cadherin was correlated with older patients (p=0,007), while betacatenin with tumors <5 cm (p=0,041) and APC with proximal tumors (p=0,047). Moreover, the expression of TCF-4 was significantly higher in the diffuse type (p=0,017) and T4 tumors (p=0,002). Conclusion: The Wnt/betacatenin is not involved in gastric carcinogenesis. However, the high frequency of survivin allows to suggest that other signaling pathways must be involved in the transformation of gastric tissue.
RESUMO Racional: O câncer gástrico encontra-se entre as principais neoplasias malignas do mundo sendo o quinto mais incidente e o terceiro em relação ao índice de mortalidade. Acredita-se que a via Wnt/betacatenina esteja ativada em 30-50% desses tumores, porém a desregulação dela ainda não está completamente esclarecida. Objetivo: Avaliar a imunoexpressão das proteínas E-caderina, betacatenina, APC, TCF-4 e survivina em tecidos de adenocarcinoma gástrico e correlacioná-las com as variáveis clínicas dos doentes e anatomopatológicas do tumor. Método: Foram coletados os dados clínicos e anatomopatológicos dos prontuários de 71 doentes com adenocarcinoma gástrico submetidos à gastrectomia. O material obtido na operação foi submetido à análise imunoistoquímica e a frequência da expressão de cada proteína pôde ser analisada de acordo com a sua localização na célula e relacionada com as variáveis clinicopatológicas. Resultados: A graduação percentualda expressão e da localização das proteínas foi a seguinte: E-caderina em 3% na membrana; betacatenina em 23,4% no citoplasma e 3,1% no núcleo; APC em 94,6% no citoplasma; TCF-4 em19,4% no núcleo; e survivina em 93,9% no núcleo. Houve relação entre expressão da proteína E-caderina com a idade mais avançada (p=0,007); betacatenina com tumores <5 cm de diâmetro (p=0,041);APC com tumores proximais (p=0,047); e TCF-4 com tipo difuso da classificação de Lauren (p=0,017) e com o grau de penetração tumoral (p=0,002). Conclusão: A via Wnt/betacatenina não está envolvida na carcinogênese gástrica. Porém, a frequência elevada de survivina permite sugerir que outras vias sinalizadoras devam estar envolvidas na transformação do tecido gástrico.
Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Pessoa de Meia-Idade , Neoplasias Gástricas/metabolismo , Adenocarcinoma/metabolismo , Caderinas/biossíntese , Proteínas Wnt/biossíntese , Fatores de Transcrição/biossíntese , Antígenos CD , Proteína da Polipose Adenomatosa do Colo/biossíntese , Proteínas Inibidoras de Apoptose/biossíntese , Fatores de Transcrição de Zíper de Leucina e Hélice-Alça-Hélix Básicos/biossíntese , Via de Sinalização Wnt , Fator de Transcrição 4 , SurvivinaRESUMO
Por muchos años los osteocitos han sido las células óseas "olvidadas" y consideradas espectadores inactivos enterrados en la matriz ósea. Hoy en día se sabe que los osteocitos detectan y responden a estímulos mecánicos y hormonales para coordinar tanto la resorción como la formación ósea. Actualmente se considera que los osteocitos proveen la mayoría de las moléculas que regulan la actividad de los osteoclastos y de los osteoblastos, como RANKL y esclerostina, ya que manipulaciones genéticas y famacológicas de cualquiera de estas dos moléculas afectan marcadamente la homeostasis ósea. Este artículo resume hallazgos recientes que delinean los mecanismos por los cuales los osteocitos regulan el número y actividad de los osteoblastos afectando de esta manera la formación ósea.
For many years, osteocytes have been the forgotten bone cells and considered as inactive spectators buried in the bone matrix. We now know that osteocytes detect and respond to mechanical and hormonal stimuli to coordinate bone resorption and bone formation. Osteocytes are currently considered a major source of molecules that regulate the activity of osteoclasts and osteoblasts, such as RANKL and sclerostin; and genetic and pharmacological manipulations of either molecule markedly affect bone homeostasis. This article summarizes recent findings demonstrating the mechanisms by which osteocytes regulate the number and activity of osteoblasts and thus affect bone formation.
Durante muitos anos, os osteócitos têm sido células ósseas "esquecidas" e consideradas como espectadores inativos enterrados na matriz óssea. Hoje sabemos que os osteócitos são capazes de detectar e responder a estímulos mecânicos e hormonais para coordenar tanto a reabsorção quanto a formação óssea. Os osteócitos são considerados atualmente como aquelesque fornecema maioria das moléculas que regulam a atividade dos osteoclastos e dos osteoblastos, tais como RANKL e a esclerostina,visto que manipulações genéticas e farmacológicas de qualquer uma destas moléculas afetam consideravelmente a homeostase óssea. Este artigo resume as recentes descobertas que demarcam os mecanismos pelos quais os osteócitos regulam o número e atividade dos osteoblastos, afetando assim a formação óssea.
Assuntos
Camundongos , Remodelação Óssea , Osteoblastos , OsteócitosRESUMO
ABSTRACT Objective To evaluate the destruction complex of beta-catenin by the expression of the proteins beta-catetenin, adenomatous polyposis coli, GSK3β, axin and ubiquitin in colorectal carcinoma and colonic adenoma. Methods Tissue samples from 64 patients with colorectal carcinoma and 53 patients with colonic adenoma were analyzed. Tissue microarray blocks and slides were prepared and subjected to immunohistochemistry with polyclonal antibodies in carcinoma, adjacent non-neoplastic mucosa, and adenoma tissues. The immunoreactivity was evaluated by the percentage of positive stained cells and by the intensity assessed through of the stained grade of proteins in the cytoplasm and nucleus of cells. In the statistical analysis, the Spearman correlation coefficient, Student’s t, χ2, Mann-Whitney, and McNemar tests, and univariate logistic regression analysis were used. Results In colorectal carcinoma, the expressions of beta-catenin and adenomatous polyposis coli proteins were significantly higher than in colonic adenomas (p<0.001 and p<0.0001, respectively). The immunoreactivity of GSK3β, axin 1 and ubiquitin proteins was significantly higher (p=0.03, p=0.039 and p=0.03, respectively) in colorectal carcinoma than in the colonic adenoma and adjacent non-neoplastic mucosa. The immunohistochemistry staining of these proteins did not show significant differences with the clinical and pathological characteristics of colorectal cancer and colonic adenoma. Conclusions These results suggest that, in adenomas, the lower expression of the beta-catenin, axin 1 and GSK3β proteins indicated that the destruction complex of beta-catenin was maintained, while in colorectal carcinoma, the increased expression of beta-catenin, GSK3β, axin 1, and ubiquitin proteins indicated that the destruction complex of beta-catenin was disrupted.
RESUMO Objetivo Avaliar o complexo de destruição da betacatenina no carcinoma colorretal e no adenoma do colo pela expressão das proteínas betacatenina, adenomatous polyposis coli, GSK3β, axina e ubiquitina. Métodos Amostras de tecidos de 64 doentes com carcinoma colorretal e de 53 pacientes com adenoma do colo foram analisadas. Blocos de tecidos foram submetidos ao estudo imuno-histoquímico com anticorpos policlonais nos tecidos do carcinoma, mucosa não neoplásica adjacente e adenoma. A imunorreatividade foi avaliada pela porcentagem de positividade de células coradas e pela intensidade do grau de coloração das proteínas no citoplasma e no núcleo das células. Na análise estatística, foram utilizados o coeficiente de correlação de Spearman, os testes t de Student, χ2, Mann-Whitney e de McNemar, e a análise de regressão logística univariada. Resultados No carcinoma colorretal, as expressões da betacatenina e da adenomatous polyposis coli foram significativamente maiores do que em adenomas do colo (p<0,001 e p<0,0001, respectivamente). A imunorreatividade das proteínas GSK3β, axina 1 e ubiquitina foi significativamente maior (p=0,03, p=0,039 e p=0,03, respectivamente) no carcinoma colorretal do que no adenoma e na mucosa não neoplásica adjacente. A coloração imuno-histoquímica dessas proteínas não apresentou diferenças significantes em relação às características clinicopatológicas do câncer colorretal e do adenoma. Conclusões Em adenomas, as menores expressões de betacatenina, axina 1 e GSK3β indicaram que o complexo de destruição da betacatenina estava conservado, enquanto que, no carcinoma colorretal, o aumento das expressões da betacatenina, GSK3β, 1 axina, e ubiquitina indicaram que o complexo de destruição de betacatenina estava alterado.
Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Pessoa de Meia-Idade , Idoso , Idoso de 80 Anos ou mais , Neoplasias Retais/metabolismo , Carcinoma/metabolismo , Adenoma/metabolismo , Neoplasias do Colo/metabolismo , Complexo de Sinalização da Axina/metabolismo , Proteínas de Neoplasias/metabolismo , Neoplasias Retais/patologia , Imuno-Histoquímica , Carcinoma/patologia , Adenoma/patologia , Estudos Retrospectivos , Estudos Longitudinais , Neoplasias do Colo/patologia , Polipose Adenomatosa do Colo/metabolismo , Ubiquitina/metabolismo , beta Catenina/metabolismo , Proteína Axina/metabolismo , Via de Sinalização Wnt , Glicogênio Sintase Quinase 3 beta/metabolismoRESUMO
Introdução: A incidência de tumores adrenocorticais em crianças é particularmente elevada nas regiões sudeste e sul do Brasil, correlacionandose com a ocorrência da mutação germinativa p.R337H do supressor tumoral p53, entretanto, o carcinoma adrenocortical é uma neoplasia endócrina maligna rara em todo o mundo com uma incidência aproximada de 0,5 - 2 casos por milhão por ano. Esta condição é uma doença heterogênea, apresentando frequentemente comportamento clínico agressivo e letal. A cascata de sinalização Wnt é uma via importante de transdução de sinal em cânceres humanos e tem sido implicada na tumorigênese adrenocortical. A atividade desta via de sinalização é dependente da quantidade de beta-catenina citoplasmática e nuclear. Mutações ativadoras no gene da beta-catenina (CTNNB1) foram relatadas em diversas neoplasias humanas. Estudos demonstraram que mutações no gene CTNNB1 são os defeitos genéticos mais frequentemente encontrados em adenomas e em carcinomas adrenocorticais. O estudo destas mutações demonstrou que as alterações no gene CTNNB1 localizam-se principalmente exon 3, que codifica a porção amino terminal da beta- catenina. Objetivos: determinar a ocorrência e a frequência das mutações somáticas no exon 3 do gene CTNNB1. Adicionalmente, determinar a imunorreatividade de beta-catenina e de p53 em tumores adrenocorticais benignos e malignos de crianças e adultos. Correlacionar os resultados da análise de mutações gênicas e os dados de imunorreatividade com as características hormonais, a mutação p.R337H do p53, o diagnóstico histológico e a evolução dos tumores adrenocorticais de crianças e adultos. Métodos: Neste estudo, a análise de imunohistoquímica para beta-catenina e p53 foi realizada em 103 tumores adrenocorticais benignos e malignos (40 crianças e 63 adultos), estando as amostras histológicas alocadas em micromatriz tecidual (TMA). A pesquisa de mutações no exon 3 do gene CTNNB1 foi determinada por seqüenciamento automático em 64 tumores...
Introduction: The incidence of adrenocortical tumors in children is particularly high in the southeastern and southern regions of Brazil, correlating with the occurrence of p.R337H p53 tumor suppressor germline mutation. However, adrenocortical carcinoma is a worldwide rare endocrine malignancy with an approximate incidence of 0.5 to 2 cases per million per year. This condition is a heterogeneous disease and is often lethal. The Wnt signaling pathway is an important signal transduction pathway in human cancers and has been implicated in adrenocortical tumorigenesis. The activity of this signaling pathway is dependent on the amount of nuclear and cytoplasmic beta-catenin. Activating mutations of ?-catenin (CTNNB1) gene have been reported in several human malignancies. Studies have shown that CTNNB1 mutations are the most common genetic defect found in adrenocortical adenomas and carcinomas. The study of these mutations demonstrated that the changes in CTNNB1 gene are mainly located in exon 3, which encodes the amino terminal portion of the beta- catenin. Objectives: to determine the occurrence and frequency of CTNNB1 somatic mutations and the abnormal beta-catenin and p53 accumulation in benign and malignant adrenocortical tumors in both children and adults. We also evaluated the correlation of the gene mutations analysis and immunohistochemistry data with the hormonal characteristics, the p.R337H germline mutation, the histological diagnosis and the prognosis of adrenocortical tumors in children and adults. Methods: In this study, immunohistochemistry for beta-catenin and p53 was performed in 103 benign and malignant (40 children and 63 adults) adrenocortical tumors. The histological samples were allocated in a tissue microarray (TMA). The study of the CTNNB1 gene was performed by direct sequencing of 64 adrenocortical tumors. Results: The beta-catenin abnormal accumulation was similar in benign and malignant adrenocortical tumors of children and adults (15...(au)
Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Criança , Adulto , Neoplasias do Córtex Suprarrenal , beta Catenina , Corticosteroides , Análise Mutacional de DNA , Mutação em Linhagem Germinativa , /genética , Invasividade Neoplásica , Via de Sinalização WntRESUMO
O câncer do colo do útero é um importante problema de saúde em todo o mundo, principalmente nos países em desenvolvimento. A análise dos mecanismos das múltiplas etapas da carcinogênese do colo do útero propiciou melhor compreensão das vias de sinalização intracelulares alteradas na evolução das lesões intraepiteliais (LIEs) para o carcinoma invasivo. A interação das proteínas E6 e E7 do HPV de alto risco com vias de sinalização do NOTCH, NF-kB e WNT parece constituir uma importante via carcinogênica no colo do útero. Estudos recentes demonstram interação entre tais vias no desenvolvimento de neoplasias malignas de outros órgãos. No entanto poucos estudos analisaram conjuntamente a expressão dessas proteínas na transição das LIEs de baixo e alto graus (LIEBG e LIEAG) para o carcinoma invasor em amostras de tecido. Para analisar a expressão destas proteínas durante as etapas da progressão do carcinoma epidermóide do colo do útero, foram selecionadas amostras de 84 pacientes com diagnósticos de neoplasias intraepiteliais e carcinomas invasores do colo uterino, contendo 15 casos de LIEBG, 30 casos de LIEAG e 39 casos de carcinoma epidermóide (CEC) do arquivo de Anatomia Patológica do A.C. Camargo Cancer Center. Foram avaliadas, através da imunoistoquímica, as expressões das proteínas das vias NOTCH, WNT E NF-kB nas lesões intraepiteliais de baixo e alto graus e em carcinomas invasores do colo do útero estádio clínico I da FIGO, verificando suas relações com a sua evolução patológica sequencial. As expressões imunoistoquímicas das proteínas Notch 1 e NFkB p105 se correlacionaram com a progressão das LIEs para o carcinoma invasor com p < 0,0001 e 0,005 respectivamente. O presente estudo demonstra que essas vias intracelulares podem estar envolvidas na progressão do câncer de colo uterino.
Cervical cancer is a major health problem worldwide, especially in developing countries. The analysis of the mechanisms of multistep carcinogenesis of cervical cancer provided better understanding of altered intracellular signaling pathways during the development of squamous intraepithelial lesions (IELs) to invasive carcinoma. The high-risk HPV proteins E6 and E7 interaction with NOTCH, NF - kB and WNT signaling appears to be an important carcinogenic pathway in cervical cancer. Recent studies have shown interaction between these pathways in development of malignant neoplasms of other organs. However, few studies analyzed the expression of these proteins together in the transition from low and high-grade (LSIL and HSIL) to invasive carcinoma in tissue samples. To analyze the expression of these proteins during the progression stages of squamous cell carcinoma of the cervix, samples from 84 patients were selected with diagnoses of intraepithelial neoplasia and invasive carcinoma of the cervix, whereas 15 cases of LSIL, 30 cases of HSIL and 39 cases of squamous cell carcinoma (SCC) from the Pathology's Department files, in A.C.Camargo Cancer Center. The protein's expressions of NOTCH, WNT and NF - kB pathways were evaluated by immunohistochemical staining in LSIL, HSIL and FIGO's stage I invasive carcinoma of the cervix, correlating with the pathological sequential of progression. The immunohistochemical expression of Notch 1 and NF - kB p105 proteins correlated with the progression of IELs for invasive carcinoma with p <0.0001 and 0.005 respectively. The present study demonstrates that these intracellular pathways may play a role in the progression of cervical cancer.