RESUMO

Desde o incremento das pesquisas das células-tronco em 1961, por cientistas canadenses, os avanços em estudos, pesquisas e o desenvolvimento de novos tratamentos com esse tipo de recurso se mostram promissores. O uso de células-tronco é uma grande aposta tanto para a medicina quanto para a odontologia regenerativa. Os tratamentos com essa terapia podem oferecer mais qualidade de vida para as pessoas. O potencial dessas células tão especiais se encontra em duas características peculiares: elas são capazes de se multiplicarem e de se diferenciarem em outros tipos de células, como de tecidos, cartilagens e neurônios. É dessa maneira que elas têm um papel fundamental para estudos e tratamentos relacionados à regeneração. O uso de células-tronco na Odontologia torna possível diferentes processos odontológicos que oferecem mais qualidade de vida ao paciente. Isso porque fatores como defeitos genéticos, hábitos nocivos, cáries dentárias e perdas precoces dos dentes contribuem com a perda de dentes ao longo da vida. No início do século XXI, por volta dos anos de 2005, 2006, pesquisadores começaram a publicar em revistas internacionais da área uma nova técnica baseada no uso de célulastronco existentes no osso de sustentação dos dentes e na articulação dento alveolar. Esta técnica, chamada de Revascularização, promove o aparecimento de um novo tecido pulpar sadio, devolvendo ao dente sua vitalidade e higidez(AU)

Since the increase in stem cell research in 1961 by Canadian scientists, advances in studies, research and the development of new treatments with this type of resource have shown promise. The use of stem cells is a big bet for both medicine and regenerative dentistry. Treatments with this therapy can offer more quality of life for people. The potential of these very special cells lies in two peculiar characteristics: they are able to multiply and differentiate into other types of cells, such as tissues, cartilage and neurons. It is in this way that they play a key role for studies and treatments related to regeneration. The use of stem cells in dentistry makes possible different dental processes that offer more quality of life to the patient. That's because factors such as genetic defects, harmful habits, tooth decay, and early tooth loss all contribute to lifelong tooth loss. At the beginning of the twenty-first century, around the years 2005, 2006, researchers began to publish in international journals of the area a new technique based on the use of existing stem cells in the supporting bone of the teeth and in the alveolar tooth joint. This technique, called Revascularization, promotes the appearance of a new healthy pulp tissue, returning to the tooth its vitality and hygiene(AU)

Assuntos

RESUMO

É sabido que a cavidade oral é a porta de entrada para muitos microrganismos e que possui alguns gêneros de bactérias que quando se associam ou proliferam em excesso, com a falta de higienização correta, fatores ambientais e imunológicos podem causar danos em algumas partes dos dentes como no tecido pulpar e canais radiculares. Neste sentido, a endodontia tem sido capaz de tratar pessoas com problemas dentários em fases muito precoces como as medidas profiláticas até casos infeciosos que afetam a polpa dos dentes causando as lesões perirradiculares que são infecções causadas por microrganismos, Para tanto, é necessário que a odontologia ofereça transformações positivas por meio de técnicas que sejam mais previsíveis para os tratamentos. A literatura tem indicado o uso da laserterapia como técnica auxiliar para o tratamento endodôntico pelo seu potencial mínimo invasivo, preciso e eficaz em menor tempo de cura de patologias orais como as lesões perirradiculares. Este estudo pretendeu abordar a importância da laserterapia sobre as variáveis patológicas de pacientes com lesão perirradiculares. Para realiza-lo foi necessário buscar na literatura estudos que associem este tipo de tratamento e sua eficiência no tratamento desta patologia. Para realizar esta pesquisa foi necessário buscar dados na literatura que tratam sobre o tema para investigar o tempo indicado ao tratamento com a laserterapia bem como o estágio em que as lesões podem ser tratadas com auxílio deste método. Corroborando com o estudo apresentamos um caso clínico(AU)

It is known that the oral cavity is the gateway to many microorganisms and that it has some genera of bacteria that when they associate or proliferate in excess, with the lack of correct hygiene, environmental and immunological factors can cause damage in some parts of the teeth such as in pulp tissue and root canals. In this sense, endodontics has been able to treat people with dental problems at very early stages such as prophylactic measures to infectious cases that affect the pulp of teeth causing perirradicular lesions that are infections caused by microorganisms, therefore, it is necessary that dentistry offer positive transformations through techniques that are more predictable for treatments. The literature has indicated the use of laser therapy as an auxiliary technique for endodontic treatment for its minimal invasive, precise and effective potential in shorter time of cure of oral pathologies such as perirradicular lesions. This study aimed to address the importance of laser therapy on the pathological variables of patients with perirradicular lesions. To accomplish this, it was necessary to seek studies in the literature that associate this type of treatment and its efficiency in the treatment of this pathology. To carry out this research it was necessary to seek data in the literature that deal with the subject to investigate the time indicated for treatment with laser therapy as well as the stage at which lesions can be treated with the aid of this method. Corroborating the study, we present a clinical case(AU)

Assuntos

RESUMO

Objective: To assess the effect of application of Biodentine (BD), Photobiomodulation (PBM) using 810 nm diode laser and both on the proliferation and odontogenic differentiation of human dental pulp stem cells (HDPSCs). Material and Methods: HDPSCs were collected, isolated, and characterized and then divided into six groups: groups 1, control; groups 2, biodentine (BD); group 3, irradiation at 1 J/cm 2 of 810-nm diode laser; group 4, irradiation at 1 J/cm 2 and culture with BD; group 5, irradiation at 2 J/cm 2, and group 6, irradiation at 2 J/cm 2 and culture with BD. Viability assay was measured through MTT assay and Alkaline phosphatase (ALP) enzyme activity and mRNA levels of RUNX2, collagen 1 (Col-1) and BMP2 were also assessed. Results: Photobiomodulation at 1 and 2 J/cm 2 combined with biodentine significantly promoted HDPSCs proliferation (in MTT assay results) and odontogenic differentiation (through the gene expression of RUNX2, Col-1 and BMP2 levels (p < 0.05). Conclusion: Photobiomodulation at 2 J/cm 2 combined with biodentine enhanced proliferation and odontogenic differentiation of cultured HDPSCs and thus could further be beneficial for dentin regeneration (AU)

Objetivo: Avaliar o efeito da aplicação de Biodentina (BD), Fotobiomodulação (PBM) usando diodo de laser de 810 nm e ambos na proliferação e diferenciação odontogênica de células tronco cultivadas da polpa dental (HDPSCs). Material e Métodos: HDPSCs foram coletadas, isoladas, caracterizadas e então divididas em seis grupos: grupo 1, controle; grupo 2, biodentina (BD); grupo 3, irradiação com diodo de laser a 1 J/cm2 de 810- nm; grupo 4, irradiação a 1 J/cm 2 e cultivo com BD; grupo 5, irradiação a 2 J/cm2, e grupo 6, irradiação a 2 J/cm2 e cultivo com BD. A viabilidade foi mensurada através do teste MTT e a atividade da enzima Fosfatase alcalina (ALP), e níveis de RNAm de RUNX2, de colágeno 1 (Col-1) e de BMP2 foram também mensurados. Resultados: Fotobiomodulação a 1 e 2 J/cm 2 combinada com biodentina promoveu significativa proliferação de HDPSCs (nos resultados do teste MTT) e diferenciação odontogênica (através da expressão genética dos níveis de RUNX2, Col-1 e BMP2 (p < 0.05)). Conclusão: Fotobiomodulação a 2 J/cm2 combinada com biodentina aumentou a proliferação e diferenciação odontogênica de HDPSCs cultivadas e dessa forma poderia ser benéfica para a regeneração dentinária. (AU)

Assuntos

RESUMO

ABSTRACT Paraendodontic surgery is a procedure that aims to solve problems that could not be solved by, or when it is not possible to perform conventional endodontic treatment. The aim of this experimental study was to compare the apical microleakage of teeth sectioned at 45° or 90° to the long axis of the tooth and root-end filled with mineral trioxide aggregate (MTA) using stereomicroscopy. In this study, 26 maxillary central incisors were used. Cleaning and shaping were performed with use of the Oregon technique and the samples were randomly divided into two groups. In Group A (n=10) apical section was performed at an angle of 90°, making a retrocavity with an ultrasonic tip and retrofilling with MTA. In group B (n=10) the same procedures were performed, but the apical section was at a 45° angle. Then the samples were immersed in a dye (India ink), placed in an oven at 37° for 48 h before applying the clearing technique. Afterwards the teeth were assessed by stereomicroscope at 20x magnification to analyze dye leakage. Data were submitted to the Student's-t test with significance level p<0.05. There was statistically significant difference between groups. Group B showed higher apical microleakage values compared with group A (P=0.004), but both groups showed dye leakage. The results showed that the 90° apical section promoted lower dye microleakage values at the dentin-retrofilling material interface than the 45°-section and could be considered the most effective technique for apical preparation in paraendodontic surgery.

RESUMO A cirurgia paraendodontica é um procedimento que visa resolver problemas que nao poderiam ser resolvidos, ou quando nao é possível realizar o tratamento endodontico convencional. O objetivo deste estudo experimental foi comparar a microinfiltragao apical de dentes seccionados a 45° ou 90° em relagao ao longo eixo do dente e extremidade radicularpreenchida com agregado de trióxido mineral (MTA) utilizando estereomicroscopia. Neste estudo, 26 incisivos centrais superiores foram utilizados. Limpeza e modelagem foram realizadas com o uso da técnica de Oregon e as amostras foram divididas aleatoriamente em dois grupos. No Grupo A (n = 10) foi realizada segao apical em ángulo de 90°, realizando retrocavidade com ponta ultrassonica e retrobturagao com MTA. No grupo B (n = 10), os mesmos procedimentos foram realizados, mas a segao apical estava em um ángulo de 45°. Em seguida, as amostras foram imersas em um corante (nanquim), colocadas em estufa a 37°Cpor 48 h, antes da aplicagao da técnica de clareamento. Posteriormente, os dentes foram avaliados por estereomicroscópio, com aumento de 20x, para análise do vazamento de corante. Os dados foram submetidos ao teste t de Student, com nivel de significáncia p <0,05. Houve diferenga estatisticamente significante entre os grupos. O grupo B apresentou maiores valores de microinfil-tragao apical em comparagao ao grupo A (P = 0,004), mas ambos os grupos apresentaram vazamento de corante. Os resultados mostraram que a segao apical de 90° promoveu menores valores de microinfiltragao de corante na interface do material retrobturador dentinário do que a segao 45° e pode ser considerada a técnica mais efetiva para preparo apical em cirurgia paraendodontica.

Assuntos

RESUMO

Objetivo: Avaliar, o reparo pulpar diante de dois antibióticos de uso sistêmico, tetraciclina e amoxicilina, em casos de reposicionamento (luxação extrusiva) ou reimplante (avulsão) dentários imediatos em ratos. Material e Métodos: Incisivos centrais maxilares superiores de ratos foram luxados e reposicionados após 5 minutos (n=90) ou extraídos, imersos em soro fisiológico por 5min e reimplantados (n=90). Os grupos foram divididos em três subgrupos (n=30) conforme o antibiótico e o controle (soro fisiológico) administrado após o ato cirúrgico e até sete dias. Os animais foram eutanasiados após 7, 15 ou 30 dias. Cortes histológicos longitudinais foram corados com HE para análise histomorfológica da camada de odontoblastos, deposição de dentina reparativa, bainha epitelial de Hertwig mantida junto com o dente, necrose e infiltrado inflamatório periapical. Para a análise estatística, utilizaram-se os testes de Mann-Whitney, Kruskal-Wallis e de Dunns (p<0,05). Resultado: Verificou-se haver diferença estatisticamente significativa entre os grupos amoxicilina e tetraciclina apenas na deposição de dentina reparativa no terço médio aos 15 dias após a luxação extrusiva. Para avulsão, a diferença ocorreu entre esses mesmos grupos aos 7 dias (presença da camada de odontoblastos, necrose e infiltrado inflamatório) e aos 15 dias (presença de necrose). Adicionalmente, verificaram-se diferenças entre o uso da amoxicilina ao longo do tempo tanto na avulsão como na luxação. Conclusão: A avaliação microscópica demonstrou a importância do uso de antibióticos de uso sistêmico na reação pulpar em casos de reposicionamento e reimplante dentários imediatos em ratos, uma vez que a amoxicilina contribuiu favoravelmente para o reparo pulpar após a realização de reimplante subsequente à avulsão dentária, porém, isto não ocorreu com a tetraciclina. No reposicionamento dentário após luxação extrusiva, o uso de antibióticos não afetou o reparo obtido(AU)

Aim: To evaluate the pulp repair in the presence of two systemic antibiotics, tetracycline and amoxicillin, in cases of immediate dental repositioning (extrusive luxation) or replantation (avulsion), in rats. Material and Methods: Upper maxillary central incisors of rats were dislocated and repositioned after 5min (n = 90), or extracted, immersed in physiological solution for 5min, and reimplanted (n = 90). The groups were divided into three subgroups (n=30) according to the antibiotic or saline (control) administered after the surgery and up to seven days. The animals were euthanized after 7, 15 or 30 days. Longitudinal histological sections were stained with HE for histomorphological analysis of the odontoblast layer, reparative dentin deposition, Hertwig epithelial sheath maintained along with the tooth, necrosis, and periapical inflammatory infiltrate. For the statistical analysis the Mann-Whitney, Kruskal-Wallis e de Dunns (p<0,05). Results: There was a statistically significant difference between the amoxicillin and tetracycline groups only in the reparative dentin deposition in the middle third at 15 days after the extrusive luxation. For avulsion, the difference occurred between these same groups at 7 days (presence of odontoblasts layer, necrosis and inflammatory infiltrate) and at 15 days (presence of necrosis). Additionally, there were differences between the use of amoxicillin over time in both avulsion and luxation. Conclusion: Microscopic evaluation demonstrated the importance of the use of systemic antibiotics in the pulp reaction in cases of immediate dental repositioning and reimplantation, in rats, since amoxicillin contributed favorably to the repair after reimplantation after dental avulsion, but this did not occur with tetracycline. In dental repositioning after extrusive luxation, the use of antibiotics did not affect the repair obtained(AU)

Assuntos

RESUMO

Objetivo: Avaliar, o reparo pulpar diante de dois antibióticos de uso sistêmico, tetraciclina e amoxicilina, em casos de reposicionamento (luxação extrusiva) ou reimplante (avulsão) dentários imediatos em ratos. Material e Métodos: Incisivos centrais maxilares superiores de ratos foram luxados e reposicionados após 5 minutos (n=90) ou extraídos, imersos em soro fisiológico por 5min e reimplantados (n=90). Os grupos foram divididos em três subgrupos (n=30) conforme o antibiótico e o controle (soro fisiológico) administrado após o ato cirúrgico e até sete dias. Os animais foram eutanasiados após 7, 15 ou 30 dias. Cortes histológicos longitudinais foram corados com HE para análise histomorfológica da camada de odontoblastos, deposição de dentina reparativa, bainha epitelial de Hertwig mantida junto com o dente, necrose e infiltrado inflamatório periapical. Para a análise estatística, utilizaram-se os testes de Mann-Whitney, Kruskal-Wallis e de Dunns (p<0,05). Resultado: Verificou-se haver diferença estatisticamente significativa entre os grupos amoxicilina e tetraciclina apenas na deposição de dentina reparativa no terço médio aos 15 dias após a luxação extrusiva. Para avulsão, a diferença ocorreu entre esses mesmos grupos aos 7 dias (presença da camada de odontoblastos, necrose e infiltrado inflamatório) e aos 15 dias (presença de necrose). Adicionalmente, verificaram-se diferenças entre o uso da amoxicilina ao longo do tempo tanto na avulsão como na luxação. Conclusão: A avaliação microscópica demonstrou a importância do uso de antibióticos de uso sistêmico na reação pulpar em casos de reposicionamento e reimplante dentários imediatos em ratos, uma vez que a amoxicilina contribuiu favoravelmente para o reparo pulpar após a realização de reimplante subsequente à avulsão dentária, porém, isto não ocorreu com a tetraciclina. No reposicionamento dentário após luxação extrusiva, o uso de antibióticos não afetou o reparo obtido(AU)

Aim: To evaluate the pulp repair in the presence of two systemic antibiotics, tetracycline and amoxicillin, in cases of immediate dental repositioning (extrusive luxation) or replantation (avulsion), in rats. Material and Methods: Upper maxillary central incisors of rats were dislocated and repositioned after 5min (n = 90), or extracted, immersed in physiological solution for 5min, and reimplanted (n = 90). The groups were divided into three subgroups (n=30) according to the antibiotic or saline (control) administered after the surgery and up to seven days. The animals were euthanized after 7, 15 or 30 days. Longitudinal histological sections were stained with HE for histomorphological analysis of the odontoblast layer, reparative dentin deposition, Hertwig epithelial sheath maintained along with the tooth, necrosis, and periapical inflammatory infiltrate. For the statistical analysis the Mann-Whitney, Kruskal-Wallis e de Dunns (p<0,05). Results: There was a statistically significant difference between the amoxicillin and tetracycline groups only in the reparative dentin deposition in the middle third at 15 days after the extrusive luxation. For avulsion, the difference occurred between these same groups at 7 days (presence of odontoblasts layer, necrosis and inflammatory infiltrate) and at 15 days (presence of necrosis). Additionally, there were differences between the use of amoxicillin over time in both avulsion and luxation. Conclusion: Microscopic evaluation demonstrated the importance of the use of systemic antibiotics in the pulp reaction in cases of immediate dental repositioning and reimplantation, in rats, since amoxicillin contributed favorably to the repair after reimplantation after dental avulsion, but this did not occur with tetracycline. In dental repositioning after extrusive luxation, the use of antibiotics did not affect the repair obtained(AU)

Assuntos

RESUMO

Abstract Endodontic disease has mainly a microbial origin. It is caused by biofilms capable of attaching and surviving in the root canal. Therefore, it is important to study the conditions in which those biofilms grow, develop and colonize the root canal system. However, few studies have used natural teeth as models, which would take into account the root canal anatomical complexity and simulate the clinical reality. In this study, we used human premolar root canals to standardize in vitro biofilm optimal formation conditions for microorganisms such as Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus and Candida albicans. 128 lower premolars underwent canal preparation using K-type files, and were treated with 5.25% sodium hypochlorite and EDTA. Samples were inoculated with microorganisms and incubated for 15, 30, 45, and 60 days under anaerobiosis (CO2 atmosphere) and aerobiosis. Microorganism presence was confirmed by Gram staining, cell culture, and electron microscopy. Exopolysaccharide matrix and microorganism aggregation were observed following 15 days of incubation. Bacterial growth towards the apical third of the root canal and biofilm maturation was detected after 30 days. CO2 atmosphere favored microbial growth the most. In vitro biofilm maturation was confirmed after 30 days of incubation under a CO2 atmosphere for both bacteria and yeast.

Resumen La enfermedad endodóntica tiene principalmente un origen microbiano. Es causada por biopelículas capaces de adherirse y sobrevivir en el conducto dental. Por ello es importante estudiar las condiciones en las que estas biopelículas crecen, se desarrollan y colonizan el conducto. Sin embargo, pocos trabajos han utilizado como modelos dientes naturales, que tengan en cuenta la complejidad anatómica de los conductos y simular la realidad clínica. En este estudio se utilizaron conductos de premolares para estandarizar las condiciones óptimas de formación in vitro de la biopelícula de microorganismos como Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus and Candida albicans. Se prepararon los conductos de 128 premolares inferiores usando limas para endodoncia tipo-K, y fueron tratados con 5.25 % hipodorito de sodio y EDTA. Las muestras se inocularon con microrganismos y fueron incubadas por 15, 30, 45 y 60 días en anaerobiosis (atmósfera de CO2) y aerobiosis. La presencia de microorganismos fue confirmada por tinción de Gram, cultivo celular y microscopia electrónica. Se observó una matriz de exopolisacáridos y agregación de microorganismos a los 15 días de incubación. Después de 30 días se detectó crecimiento bacteriano hacia el tercio apical del conducto, así como maduración de la biopelícula. La atmósfera de CO2 fue la que más favoreció el crecimiento microbiano. La maduración in vitro de la biopelícula se confirmó después de 30 días de incubación en atmósfera de CO2 tanto para la bacteria como para el hongo.

Resumo A doença endodôntica tem principalmente uma origem microbiana. É causada por biofilmes capazes de se fixar e sobreviver no canal radicular. Portanto, é importante estudar as condições em que esses biofilmes crescem, se desenvolvem e colonizam o sistema de canais radiculares. No entanto, poucos estudos utilizaram dentes naturais como modelo, os quais consideram a complexa anatomia dos canais radiculares e simulam a realidade clínica. Neste estudo, utilizamos canais radiculares pré- molares para padronizar as condições de formação ótima in vitro de biofilme para microrganismos como Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus e Candida abicans. Foram preparados os canais de 128 pré-molares inferiores usando limas odontológicas tipo K, e foram tratados com hipoclorito de sódio 5,25 % e EDTA. As amostras foram inoculadas com microrganismos e incubadas por 15, 30, 45 e 60 dias em anaerobiose (atmosfera de CO2) e aerobiose. A presença de microrganismos foi confirmada por coloração de Gram, cultura celular e microscopia eletrônica. Observou-se uma matriz de exopolisacáridos e um agregado de microrganismos depois de 15 dias de incubação. Após 30 dias de incubação foram detectados crescimento bacteriano no terço apical do canal radicular e maduração do biofilme. A atmosfera de CO2 foi a que mais favoreceu o crescimento microbiano. A maduração in vitro do biofilme foi confirmada depois de 30 dias de incubação em atmosfera de CO2 tanto para bactérias como para fungos.

Assuntos

RESUMO

A configuração de canais em formato de C em molares é uma variação anatômica que dificulta o diagnóstico e tratamento. O objetivo deste estudo foi relatar um caso de configuração de canal em C no segundo molar inferior. O exame radiográfico do paciente revelou uma cárie extensa na porção mesial do segundo molar inferior, sem a presença de lesão periapical e foi clinicamente observada a configuração em C do canal radicular, que se estendeu desde o canal mesiovestibular até o canal distal. A terapia endodôntica foi realizada e após a obturação dos canais, o dente foi restaurado. Concluiu-se que após 12 meses de acompanhamento clínico e radiográfico, verificou-se que a terapia teve um resultado satisfatório.

C-shape configuration in molars is an anatomical variation that difficults diagnosis and treatment. The aim of this study was to report a case of C-shape endodontic configuration in a mandibular second molar. The radiographic examination of one patient revealed the extent of caries in the mesial aspect of mandibular second molar, without the presence of periapical lesion and was clinically noted the C-shape configuration of the root canal, extending from the mesiobuccal to the distal canal. Endodontic therapy was performed and after the root canal filling, the tooth was restored. We conclude that after 12 months of clinical and radiographic follow-up, satisfactory outcome of the treatment was observed

Assuntos

RESUMO

Células-tronco da polpa dental humana têm sido amplamente investigadas em razão da sua capacidade de diferenciar-se tanto em células dentais quanto não dentais, com potencial de utilização em terapias envolvendo a engenharia de tecidos. A técnica de criopreservação celular representa uma alternativa viável para a conservação dessas células, já que cessa reversivelmente, de forma controlada, todas as suas funções biológicas em uma temperatura ultra-baixa. O presente estudo teve como objetivo avaliar, através de experimentos in vitro, a influência de um protocolo de criopreservação na atividade biológica de células-tronco da polpa de dentes humanos decíduos esfoliados (SHED). Células obtidas da polpa de três dentes decíduos em estágio final de esfoliação ou com exodontia indicada foram expandidas em meio de cultivo α-MEM suplementado com antibióticos e 15% de soro fetal bovino. No segundo subcultivo (P2), um grupo de células foi submetido a criopreservação por 30 dias em DMSO diluído a 10% em soro fetal bovino, a 80ºC negativos, enquanto o restante seguiu em condições normais de cultivo. A proliferação celular em ambos os grupos (criopreservado e não criopreservado) foi avaliada através do método de coloração por azul de Tripan nos intervalos de 24, 48 e 72 horas após o plaqueamento. Nestes mesmos intervalos foi realizada a análise do ciclo celular das SHEDs submetidas ou não ao protocolo de criopreservação. Os eventos relacionados à morte celular foram analisados através da expressão de Anexina V e PI em citometria de fluxo, nos intervalos de 24 e 72 horas. A presença de alterações morfológicas nucleares foi avaliada através da marcação por DAPI no intervalo de 72 horas. Observou-se que ambos os grupos exibiram uma curva de proliferação celular ascendente, sem alterações consideráveis na viabilidade celular ao longo do experimento. A distribuição das células nas fases do ciclo celular foi coerente com células em proliferação nos dois grupos. Não foram observados danos morfológicos nucleares no intervalo final do experimento. Deste modo, conclui-se que o protocolo de criopreservação proposto é eficiente para o armazenamento do tipo celular estudado, permitindo a sua utilização em futuros estudos experimentais. (AU)

Dental pulp stem cells have been widely investigated because of their ability to differentiate into both dental and non-dental cells, with potential use in therapies involving tissue engineering. The technique of cell cryopreservation represents a viable alternative for the conservation of these cells, since it stops reversibly, in a controlled manner, all of cell biological functions in an ultra low temperature. The present study aimed to evaluate, using in vitro experiments, the influence of a cryopreservation protocol on the biologic activity of stem cells from human exfoliated deciduous teeth (SHED). Cells obtained from the pulp of three deciduous teeth on end-stage exfoliation or with indicated extraction were expanded in α-MEM culture medium supplemented with antibiotics and 15% fetal bovine serum. At second subculture (P2), a group of cells were submitted to cryopreservation for 30 days in 10% DMSO diluted in fetal bovine serum, at - 80º C, while the remind cells continued under normal conditions of cell culture. Cell proliferation was evaluated in both groups (not cryopreserved or cryopreserved) by Trypan blue stain essay at intervals of 24, 48 and 72h after plating. Cell cycle analysis of SHEDs submitted or not to the cryopreservation protocol was performed in the same intervals. Events related to cell death were studied by Annexyn V and PI expression under flow cytometry at the intervals of 24 and 72h. The presence of nuclear morphological changes was evaluated by DAPI staining at 72h interval. It was observed that both groups exhibited an upward cell proliferation curve, without considerable changes in cell viability throughout the experiment. The distribution of cell in the cell cycle phasis was consistent with cell proliferation in both groups. There were no nuclear morphological damages in the end range of the experiment. therefore, it is concluded that the proposed cryopreservation protocol is efficient for storing the studied cell type, allowing its use in future experimental studies. (AU)

Assuntos

RESUMO

As células-tronco provenientes da polpa de dentes decíduos esfoliados (SHED) são uma fonte promissora de células-tronco para a terapia regenerativa. Já foi demonstrado que elas podem se diferenciar em células endoteliais, mas os mecanismos envolvidos nesse processo ainda são desconhecidos. Dessa forma, o presente estudo teve como objetivo elucidar os mecanismos moleculares relacionados à diferenciação endotelial dessas células. Para isso, um meio de cultura para células endoteliais (EGM-2MV), suplementado por 50ng/mL rhVEGF, foi utilizado com sucesso como estímulo para as SHED se diferenciarem em células endoteliais em cultura de monocamada. Uma vez que, elas expressaram os marcadores endoteliais VEGFR-2 e CD-31. Além disso, quando as SHED foram expostas ao meio de diferenciação, a fosforilação de STAT-3 (um marcador de células-tronco) foi inibida de acordo com a concentração utilizada, enquanto a fosforilação de ERK e AKT foi estimulada. Quando um inibidor de ERK foi adicionado ao meio, a fosforilação de STAT-3 aumentou. Por outro lado, quando um inibidor de STAT-3 foi adicionado ao meio de cultura, a fosforilação de ERK aumentou. A inibição de ERK também impediu a diferenciação endotelial. Para confirmar esse resultado, shRNA MEK-1 SHED também falharam em expressar VEGFR-2 quando estimuladas. Além disso, scaffolds de fatias dentais foram semeadas com shRNA VEGFR-1 SHED ou shRNA controle e implantadas no subcutâneo de camundongos imunodeficientes. Após recuperados, um tecido muito semelhante à polpa dental foi formado no interior das fatias. No entanto, havia menos células CD-31 positivas nos vasos sanguíneos dos implantes semeados com VEGFR-1 shRNA SHED, sugerindo um papel do VEGFR-1 na formação de vasos sanguíneos. Em conclusão, o VEGFR-1 e a via de sinalização de ERKestão envolvidos no processo de diferenciação das SHED em células endoteliais...

Stem Cells from Exfoliated Deciduous Teeth (SHED) are a promising source of stem cells for regenerative therapy. It was already shown they can differentiate into endothelial cells, but the mechanisms involved in this process remain unclear. Therefore, the following study aimed to elucidate the molecular mechanisms related to endothelial differentiation of SHED. For this purpose, a culture media for endothelial cells (EGM-2MV), supplemented with 50ng/ml rhVEGF, was successfully used as stimuli for SHED to undergo endothelial differentiation in monolayer culture, as they expressed the endothelial markers VEGFR-2 and CD- 31. Moreover, when SHED were exposed to the differentiation medium, STAT-3 phosphorilation (a stemness marker) was inhibited while the ERK and AKT phosphorilation was stimulated. When an ERK inhibitor was added to the medium, the STAT-3 phosphorilation increased in a dependent concentration manner. On the other hand, when a STAT-3 inhibitor was added the ERK phosphorilation increased. The ERK inhibition also arrested endothelial differentiation. To confirm this results, shRNA MEK-1 SHED also failed to express VEGFR-2 when stimulated. Additionally, tooth slice scaffolds were seeded with shRNA VEGFR-1 SHED or shRNA control SHED and implanted, subcutaneously, into immunodeficient mice. After retrieved, a dental pulp-like tissue had been formed inside the tooth slice. However, there were fewer CD-31 positive blood vessels in the shRNA VEGFR-1 implants suggesting a role of VEGFR-1 in the formation of blood vessels by SHED. In conclusion, the VEGFR-1 and ERK pathway are involved in the process of differentiation of SHED into endothelial cells...

Assuntos

RESUMO

O presente estudo teve por objetivo verificar a manutenção da vitalidade do remanescente pulpar, após curativo com óxido de zinco, com a finalidade de completar a gênese radicular sem a formação da barreira dentinária. Dos 11 dentes com rizogênese incompleta, selecionados em dez pacientes, nenhum formou barreira dentinária com o uso do óxido de zinco como recobrimento do tecido pulpar remanescente, empregando a técnica da pulpotomia como terapia pulpar conservadora. O tecido pulpar remanescente permaneceu com vitalidade e ocorreu desenvolvimento fisiológico e fechamento completo do final da raiz.

Assuntos

RESUMO

Objetivo: Avaliar a técnica da apicificação utilizando barreira apical com agregado trióxido mineral (MTA) por meio de estudos clínicos retrospectivos e prospectivos publicados na literatura especializada. Revisão de literatura: Fontes de catalogação bibliográfica identificadas eletronicamente por PUBMED/MEDLINE (http://www.pubmed.gov) foram utilizadas. Os termos apexification MTA, apexification mineral trioxide agreggate, apical closure MTA, apexification immature teeth MTA foram utilizados na busca. Os artigos foram selecionados no período de fevereiro de 2005 até abril de 2010, nos seguintes periódicos: Dental Traumatology, International Endodontic Journal, Journal of Endodontics e Oral Surgery, Oral Medicine, Oral Pathology, Oral Radiology and Endodontics. A busca resultou em 28 artigos, reduzidos a cinco após aplicação dos critérios de exclusão: estudos em animais e laboratoriais, relatos de caso, estudo série de casos, estudo epidemiológico descritivo, além de revisão de literatura narrativa. Considerações finais: Os estudos clínicos analisados indicaram que o MTA é apropriado para o manejo clínico endodôntico no processo de apicificação ou quando há reabsorção apical ou amplificação mecânica excessiva da região apical dentária. Esse material promove o reparo biológico e a regeneração do ligamento periodontal e tem boa capacidade de selamento. Porém, estudos clínicos mais conclusivos sobre o uso do MTA como barreira apical nos procedimentos de apicificação são necessários.

RESUMO

Células-tronco adultas já foram encontradas em uma variedade de tecidos humanos. Nos tecidos dentais essas células já foram isoladas da polpa de dentes permanentes e decíduos, do ligamento periodontal, da papila apical e do folículo dentário. A engenharia de tecidos mostra a utilização das células-tronco dentais como futura alternativa promissora para tratamentos restauradores. A construção de estruturas complexas como polpa e periodonto, por exemplo, poderá revolucionar a odontologia moderna. De modo geral, as células-tronco de origem dental são de fácil acesso e podem ser caracterizadas com base em propriedades específicas. Esta revisão de literatura trouxe um breve panorama sobre as células-tronco de origem dentária, mostrando as principais diferenças encontradas entre suas populações e discutindo conceitos básicos a seu respeito

Assuntos

RESUMO

O objetivo do presente trabalho foi realizar uma revisão da literatura a respeito dos efeitos do clareamento dental sobre a polpa dental, incluindo a penetração dos agentes clareadores na câmara pulpar, as ações destas substâncias no interior da polpa e, por fim, os efeitos das fontes de luz sobre a polpa. Concluiu-se que os estudos a respeito deste assunto ainda são limitados, portanto deve-se ter cautela na aplicação destes agentes, bem como das fontes luminosas, sempre respeitando as indicações para cada situação.

The aim of this paper was to review the literature about the negative effects of bleaching agents on dental pulp tissue, including the penetration of these substances on the pulp chamber, the actions of these agents inside the pulp, and the effects of light sources on pulp. It was concluded that the studies about this subject are still limited, therefore caution is necessary when these agents are used, as well as light sources, and the indications must always be respected for each situation.

Assuntos

RESUMO

The use of adhesives for direct dental pulp capping is not advisable, due to its harmful effects to the tissue. However, new adhesive systems are often released, and self-etching systems seem to be less toxic than conventional ones. The purpose of this study was to compare the in vitro cytotoxicity of substances leached from calcium hydroxide and two adhesive systems on human dental pulp fibroblasts. Cell culture media conditioned by Calcium Hydroxide (CH), Single Bond (SB), Clearfill Protect Bond primer (CP) or Clearfill Protect Bond resin (CB) were applied to human pulp fibroblasts. Fresh cell culture medium was used in the Control group. The number of viable cells was obtained through the MTT reduction assay. Data were compared by ANOVA and Tukey’s test (p≤0.05). The mean number of viable cells was 3.9x103(±0.75) for the control group, which was similar to those found in the CH group (4.31x103±0.87). Statistical differences were found among the groups (p<0.001), with the cell viability decreasing significantly with SB (0.09x103±0.06) and CP (0.28x103±0.08) when compared to CH and control groups. CB (2.37x103±0.72) was significantly less cytotoxic than CP and SB, but more cytotoxic than CH. It was concluded that Single Bond and Clearfill Protect Bond primer release substances that decrease cell viability of human dental pulp cells in culture. According to this study the use of bonding systems for direct pulp capping is not recommended, since they are cytotoxic

O uso de adesivos dentinários sobre a polpa não é recomendável, devido aos efeitos deletérios provocados sobre o tecido. Entretanto, novos sistemas adesivos são frequentemente lançados, e sistemas autocondicionantes parecem ser menos tóxicos que os sistemas convencionais. O objetivo deste estudo foi comparar in vitro, a citotoxicidade de substâncias liberadas pelo hidróxido de cálcio e dois sistemas adesivos utilizando fibroblastos de polpa humana. Meios de cultura celular condicionados por Hidróxido de cálcio (CH), Single Bond (SB), Clearfill Protect Bond primer (CP) ou Clearfill Protect Bond resin (CB) foram testados em fibroblastos de polpa humana. Meio fresco de cultivo celular foi utilizado no grupo centrole. O número de células viáveis foi obtido através do teste da redução do MTT. Os dados foram comparados por ANOVA e teste de Tukey (p≤0,05). O número médio de células viáveis foi de 3,9x103(±0,75) para o grupo controle, que foi similar ao encontrado para o grupo CH (4,31x103±0,87). Houve diferenças estatísticas entre os grupos (p<0.001), sendo que a viabilidade celular decresceu significantemente com SB (0,09x103±0,06) e CP (0,28x103±0,08), quando comparados ao CH e controle. CB (2,37x103±0,72) foi menos citotóxico que CP e SB, mas mais citotóxico que CH. Conclui-se que o Single Bond e o Clearfill Protect Bond primer liberam substâncias que diminuem a viabilidade celular de fibroblastos humanos em cultura. De acordo com este estudo, o uso de sistemas adesivos para capeamento direto não é recomendado, uma vez que são citotóxicos.

Assuntos

RESUMO

O presente estudo avaliou a atividade antiinflamatória de antiinflamatórios não-esteroidais (AINEs)em tecido pulpar de ratos, por meio de microscopia óptica. Preparos cavitários foram realizados nos incisivossuperiores de 40 ratos para a indução de processo inflamatório pulpar. Os animais foram distribuídos aleatoriamenteem 5 grupos segundo a medicação administrada: G1 - celecoxib; G2 - rofecoxib; G3 - diclofenacode sódio; G4 - ibuprofeno e G5 - solução fisiológica (controle). A terapia com AINEs foi iniciada apo?s 24 horasda realização da exposição pulpar. Nos períodos de 1, 3, 5 e 7 dias após o início da terapia medicamentosa,2 animais de cada grupo foram sacrificados e tiveram seus dentes extraídos para a análise histológica dotecido pulpar. Os índices utilizados para avaliação qualitativa variaram de 1 (tecido quase regenerado) até6 (inflamação severa). Os dados foram analisados por meio de Análise de Variância e teste de Tukey. Verificou-se que todos os medicamentos testados foram capazes de reduzir a inflamação quando comparadosao grupo controle. O grupo tratado com celecoxib apresentou os melhores resultados na redução do quadroinflamatório (p<0,01), seguido pelo rofecoxib e ibuprofeno, que se comportaram de maneira estatisticamentesemelhantes entre si (p>0,01) e superiores ao diclofenaco de sódio (p<0,01).

This study evaluated the anti-inflammatory effect of non-steroids anti-inflammatory (AINEs) in rat´s pulps,behind optic microscopy. Cavities were done in maxillary incisors of 40 rats to induce pulp inflammatory.The animals were divided in 5 groups according to medication: G1 - celecoxib; G2 - rofecoxib; G3 - diclofenacode sódio; G4 - ibuprofeno and G5 - saline (control). The therapy was initialized 24 hours after the pulpexposition. In the periods of 1, 3, 5 and 7 days after the therapy, 2 animals of each group were sacrificedand had their teeth extracted to histological analysis of pulp tissue. The scores were 1 (healed tissue) to 6(severe inflammation). The data were evaluated by Variance analysis and Tukey´s test. It was verified thatall medicaments were capable to reduce inflammation compared to control group. The celecoxib group presentedthe best results in reduction of inflammation (p<0,01), followed by rofecoxib and ibuprofeno, whichwere statistically equal (p>0,01) and better than diclofenaco de sódio (p<0,01).

RESUMO

O objetivo deste estudo foi verificar a inter-relação existente entre polpa e periodonto, avaliando-se a sensibilidade pulpar em dentes com diferentes graus de perda óssea periodontal. Avaliou-se 98 dentes uniradiculares, portadores de periodontite crônica não tratada, isentos de cárie, atrição, erosão ou restaurações, quanto à Perda Óssea Periodontal (PO) e presença/ausência de Sensibilidade Pulpar (SP). A PO foi registrada, considerando-se uma distância radiográfica da crista óssea à junção cemento-esmalte (JCE) > 2 mm e, classificada em leve (3 a 4 mm), moderada (5 a 6 mm) ou severa (> 6 mm). A SP foi verificada por um teste de estímulo a frio, utilizando-se um controle positivo contra-lateral. Os dados foram analisados estatisticamente pelo teste de Qui-quadrado (X2). Os achados mostraram SP positiva, respectivamente em 100% das PO leves e moderadas, enquanto a SP negativa esteve presente em 48% das PO severas. O valor de X2 (25, 104) foi significante porque p < 0,0001, com 2 graus de liberdade. Diante dos limites deste estudo, sugere-se haver uma associação entre o grau de perda óssea e a resposta ao teste de sensibilidade pulpar.

The aim of the present study was to analyze the interrelation between pulp and periodontium, by evaluating the clinical pulp sensitivity, in teeth with different degrees of periodontal bone loss. For this study, 98 single-rooted teeth were included, with no signs of caries, attrition, erosion, restoration, nor report of previous periodontal treatment, but with signs of chronic periodontitis. The following parameters were evaluated: periodontal bone loss (PBL) and pulp sensibility (PS). PBL was recorded if the distance between the crestal bone and cemento-enamel junction were > 2 mm, and then classified in light (3 to 4 mm), moderate (5 to 6 mm), and severe (> 6 mm). PS was evaluated after a cold stimulus, considering a contralateral tooth as positive control. Data was analyzed by Chi squared test (X2). PS was positivein 100% of sites with light and moderate PBL. On the other hand, PS was negative in 48% of sites with severe PBL. The X2 value (25, 104) was significant because p<0.0001, with 2 degree of freedom. Within the limits of the present study, it could be suggested that there is an association betweenthe bone loss degree and the response of the pulp sensitivity test.

Assuntos

RESUMO

This research evaluates the effects of the lipopolysaccharides (LPS) from Escherichia coli and lipoteichoic acid (LTA) from Enterococcus faecalis on dental pulp. These molecules are components of the Gram-negative and Gram-positive bacteria cell wall, respectively. Ten dogs were used in the experiment. Inoculation in surgically opened pulp and coronal restoration with glass ionomer was the method chosen. The evaluation times were 1, 7, 15, 30 and 60 days. The results showed that the LPS and LTA, at 150 µg/ml, produced a negative interference in the pulp leading to destruction. LTA caused less damage than LPS.

O presente trabalho avaliou os efeitos do ácido lipoteicóico (LTA) e do lipopolissacarídeo (LPS) no tecido pulpar. Essas moléculas estão presentes nas paredes das bactérias Gram-positivas e Gram-negativas, respectivamente. Utilizaram-se dez cães para inoculação das substâncias em polpas expostas cirurgicamente. Os períodos de avaliação foram de 1, 7, 15, 30 e 60 dias. Os resultados demonstraram que 150 µg/ml de LPS e LTA interferem negativamente na polpa promovendo destruição tecidual. O LTA estabeleceu um padrão citotóxico menos agressivo que o LPS.