RESUMO
Os carcinomas cervicais expressam as oncoproteínas E6 e E7 de Papilomavírus Humano (HPV) de alto-risco, neutralizando a supressão tumoral. A oncoproteína E6 codificada pelo vírus é multifuncional, apresentando inúmeros alvos celulares; entretanto, ainda não está claro se todas essas atividades estão relacionadas à malignidade do tumor. Neste estudo avaliamos a distribuição de onconproteínas virais E6 e E7, mitocôndrias, receptor de transferrina (TfR), transferrina (Tf), ferritina (Fe) e citocromo c, em células humanas transformadas e não-transformadas por HPV, para um padrão de endocitose de ferro em células humanas e animais, como uma via alternativa de infecção por HPV. Linhagens celulares HPV-negativas foram transfectadas com vetores pLXSN, contendo as seqüências completas dos genes E6 e E7, sendo então usadas como controle positivo. As células foram plaqueadas e aderidas em lamínulas de vidro, para os ensaios de imunofluorescência; ensaios de fracionamento celular e isolamento da fração mitocondrial realizados em células HPV-positivas e HPV-negativas, para imunocitoquímica ultraestrutural. Foram utilizados os anticorpos primários anti-ferritina, anti-transferrina, anti-E6, anti-E7 e anti-citocromo c e os respectivos anticorpos secundários. Os anticorpos reconheceram as oncoproteínas E6 e E7 expressas em células HPV-positivas e HPV-negativas transfectadas pelo pLXSN. O TfR foi detectado em abundância na membrana plasmática das células, assim como a Fe no citoplasma, núcleo e mitocôndrias e a citocromo c preferencialmente localizada nas mitocôndrias. A grande quantidade de ferro sugere sua participação na transformação de células por HPV, mantendo os níveis de citocromo c mitocondrial. A co-localização de E6 e mitocôndrias nas células transformadas por HPV apontam um envolvimento na inibição do processo de apoptose. Nossos resultados estão em concordância com os achados de...