RESUMO
This work aimed at investigatimg whether the culture medium used in viability tests affects the conidial germination of Lecanicillium lecanii, Beauveria bassiana and Paecilomyces fumosoroseus isolates. The tests were performed on microscope slides containing one of the culture media: agar-water (AW), minimal medium (MM), potato-dextrose agar (PDA), potato-dextrose-1% yeast extract agar (PDAY), Sabouraud-dextrose-yeast extract agar (SDAY), and complete medium (CM). Three areas per slide were delimited and 0.05ml of a 5.5 x 105 conidia ml-1 suspension was applied to each area. One bioassay was performed for each isolate. Germination was determined after 15 hours of incubation at 26±0.5°C. The culture media influenced the germination of the species studied, verifying within and inter specific variations. CM and PDA provided the highest germination of L. lecanii isolates and the lowest was obtained on SDAY and AW. The germination of B. bassiana isolates was favoured by CM, PDA and PDAY media, a fact not observed in AW and MM. P. fumosoroseus isolates showed the highest germination on CM and PDA media and the lowest on SDAY. However, some isolates presented high germination on nutrient-poor media (AW and MM).
O presente trabalho objetivou investigar se meios de cultura utilizados em teste de viabilidade afetam a germinação de conídios de cinco isolados de Lecanicillium lecanii, cinco de Beauveria bassiana e quatro de Paecilomyces fumosoroseus. Os testes foram realizados em lâminas de microscopia contendo um dos seguintes meios de cultura: Ágar-água (AA), Meio Mínimo (MM), Batata, dextrose e ágar (BDA), Batata, dextrose, ágar e 1% de extrato de levedura (BDAL), Sabouraud, dextrose, ágar e extrato de levedura (SDAL) e Meio Completo (MC). Delimitaram-se três áreas por lâmina e em cada uma aplicou-se 0,05mL de uma suspensão com concentração de 5,5 x 105 conídios ml-1. Para cada isolado foi realizado um bioensaio, com seis tratamentos e cinco repetições. Avaliou-se a germinação 15 horas após incubação, a 26±0,5ºC. Os meios de cultura influíram na capacidade de germinação das três espécies estudadas, ocorrendo variações inter e intraespecíficas. Verificou-se que os meios Completo e BDA proporcionaram as maiores porcentagens de germinação dos isolados de L. lecanii, sendo que e as menores foram obtidas nos meios SDAL e AA. Os meios ricos em nutrientes (BDA, BDAL e Completo) favoreceram a germinação dos isolados de B. bassiana, o que não ocorreu com os meios pobres (AA e MM). Nos meios Completo e BDA foram obtidas as maiores porcentagens de germinação dos isolados de P. fumosoroseus. As menores percentagens, por sua vez, foram obtidas no meio SDAL. Entretanto, alguns isolados apresentaram alta germinação em meios pobres em nutrientes (AA e MM).
RESUMO
This work aimed at investigatimg whether the culture medium used in viability tests affects the conidial germination of Lecanicillium lecanii, Beauveria bassiana and Paecilomyces fumosoroseus isolates. The tests were performed on microscope slides containing one of the culture media: agar-water (AW), minimal medium (MM), potato-dextrose agar (PDA), potato-dextrose-1% yeast extract agar (PDAY), Sabouraud-dextrose-yeast extract agar (SDAY), and complete medium (CM). Three areas per slide were delimited and 0.05ml of a 5.5 x 105 conidia ml-1 suspension was applied to each area. One bioassay was performed for each isolate. Germination was determined after 15 hours of incubation at 26±0.5°C. The culture media influenced the germination of the species studied, verifying within and inter specific variations. CM and PDA provided the highest germination of L. lecanii isolates and the lowest was obtained on SDAY and AW. The germination of B. bassiana isolates was favoured by CM, PDA and PDAY media, a fact not observed in AW and MM. P. fumosoroseus isolates showed the highest germination on CM and PDA media and the lowest on SDAY. However, some isolates presented high germination on nutrient-poor media (AW and MM).
O presente trabalho objetivou investigar se meios de cultura utilizados em teste de viabilidade afetam a germinação de conídios de cinco isolados de Lecanicillium lecanii, cinco de Beauveria bassiana e quatro de Paecilomyces fumosoroseus. Os testes foram realizados em lâminas de microscopia contendo um dos seguintes meios de cultura: Ágar-água (AA), Meio Mínimo (MM), Batata, dextrose e ágar (BDA), Batata, dextrose, ágar e 1% de extrato de levedura (BDAL), Sabouraud, dextrose, ágar e extrato de levedura (SDAL) e Meio Completo (MC). Delimitaram-se três áreas por lâmina e em cada uma aplicou-se 0,05mL de uma suspensão com concentração de 5,5 x 105 conídios ml-1. Para cada isolado foi realizado um bioensaio, com seis tratamentos e cinco repetições. Avaliou-se a germinação 15 horas após incubação, a 26±0,5ºC. Os meios de cultura influíram na capacidade de germinação das três espécies estudadas, ocorrendo variações inter e intraespecíficas. Verificou-se que os meios Completo e BDA proporcionaram as maiores porcentagens de germinação dos isolados de L. lecanii, sendo que e as menores foram obtidas nos meios SDAL e AA. Os meios ricos em nutrientes (BDA, BDAL e Completo) favoreceram a germinação dos isolados de B. bassiana, o que não ocorreu com os meios pobres (AA e MM). Nos meios Completo e BDA foram obtidas as maiores porcentagens de germinação dos isolados de P. fumosoroseus. As menores percentagens, por sua vez, foram obtidas no meio SDAL. Entretanto, alguns isolados apresentaram alta germinação em meios pobres em nutrientes (AA e MM).
RESUMO
In function of the development resistance to the several existent quimiotherapics, biological control has being a promising alternative to the control of Boophilus microplus. In this work, the pathogenic action of Sporothrix insectorum and Paecilomyces fumosoroseus in the different stages of life cycle of Boophilus microplus was evaluated. The fungis in study were cultivated in appropriate culture medium and suspensions in the concentrations of 105, 106, 107, 108, 109 conidia/mL for both fungis were prepared, starling from stock suspension. The eggs and the larvaes were treated by spray, and the engorged tick were immersed in the different conidia suspensions. The pathogenicity of the fungis were appraised for the reproductive performance of the ticks. The experimental was accomplished with five repetitions for each treatment group, in the different fungal concentrations. The fungis S. insectorum and P. fumosoroseus reduced in 50,19% and 49,34%, respectively, the posture of the infected engorged female ticks, in the concentration 108 conidia/mL. In relation to effectiveness, the fungis S. insectorum and P. fumosoroseus, they reached the values 82,99%, in the concentration 108 conidia/mL, and 82,93% in the concentration 109 conidia/mL, for the respective fungis. In the eggs treatment with the S. insectorum and P. fumosoroseus, the fungi P. fumosoroseus presented a superiority wi
Em função do desenvolvimento de resistência aos diversos quimioterápicos existentes, o controle biológico vem sendo uma alternativa promissora no controle do Boophilus microplus. Neste trabalho foi avaliada a ação patogênica de Sporothrix insectorum e de Paecilomyces fumosoroseus nas diferentes fases do ciclo de vida do Boophilus microplus. Para isso, os fungos em estudo foram cultivados em meio de cultura apropriado, obtendo-se a suspensão estoque, a partir da qual foram preparadas suspensões nas concentrações de 105, 106, 107, 108, 109 conídios/mL para ambos os fungos. Os ovos e as larvas foram tratados por aspersão, e as partenóginas foram imersas nas diferentes suspensões de conídios. A patogenicidade dos fungos foi avaliada pela performance reprodutiva das carrapatas. O delineamento experimental foi realizado com cinco repetições para cada grupo de tratamento, nas diferentes concentrações fúngicas. Os fungos S. insectorum e P. fumosoroseus reduziram em 50,19% e 49,34%, respectivamente, a postura das partenóginas, quando utilizados na concentração de 108 conídios/mL. Em relação à eficácia, tais fungos alcançaram os valores de 82,99% e 82,93% na concentração de 108 conídios/mL e na de 109 conídios/mL, respectivamente. Sobre ovos de B. microplus, a atividade de P. fumosoroseus foi superior a de S. insectorum, reduzindo a eclodibilidade em 79,04% na concentração de 106 coníd
RESUMO
ITS and RAPD analyses were used to investigate molecular variations within samples of Paecilomyces isolates and to resolve five morphologically atypical isolates resembling P. fumosorosus, obtained from whitefly in Northern Paraná State. The ITS4-ITS5 amplicon was 700 base pairs (bp) long in all isolates. The five isolates of Paecilomyces not assigned to species produced restriction profiles identical to all the reference strains of P. fumosoroseus. The extent of fingerprint variability observed by RAPD was sufficient to discriminate all the isolates. The genetic similarity among unidentified isolates and strains of P. fumosoroseus was even higher than that observed among reference strains of this species, allowing us to conclude that isolates CNPso-P77, CNPso-P78, CNPso-P80, CNPso-P85 and CNPso-P91 are P. fumosoroseus.
As análises de RAPD (Polimorfismo de DNA Amplificado ao Acaso) e ITS (Sequências Internas Transcritas) foram utilizadas para investigar a variabilidade molecular entre isolados de Paecilomyces e para identificar cinco isolados morfologicamente atípicos, obtidos a partir de mosca branca no Norte do Estado do Paraná, que possuíam alguma semelhança com P. fumosoroseus. O produto da amplificação com os primers ITS4 e ITS5 apresentou 700 pares de bases para todos os isolados investigados. Os cinco isolados não identificados deram origem a padrões de restrição idênticos a todas as linhagens de P. fumosoroseus utilizadas como referência. A variabilidade observada nos perfis de RAPD foi suficiente para discriminar todos os isolados. A similaridade genética entre os isolados não identificados e as linhagens de P. fumosoroseus foi maior do que aquela observada entre as linhagens referência desta espécie. Este fato permitiu concluir que os isolados CNPso-P77, CNPso-P78, CNPso-P80, CNPso-P85 and CNPso-P91 pertencem à espécie P. fumosoroseus.
RESUMO
ITS and RAPD analyses were used to investigate molecular variations within samples of Paecilomyces isolates and to resolve five morphologically atypical isolates resembling P. fumosorosus, obtained from whitefly in Northern Paraná State. The ITS4-ITS5 amplicon was 700 base pairs (bp) long in all isolates. The five isolates of Paecilomyces not assigned to species produced restriction profiles identical to all the reference strains of P. fumosoroseus. The extent of fingerprint variability observed by RAPD was sufficient to discriminate all the isolates. The genetic similarity among unidentified isolates and strains of P. fumosoroseus was even higher than that observed among reference strains of this species, allowing us to conclude that isolates CNPso-P77, CNPso-P78, CNPso-P80, CNPso-P85 and CNPso-P91 are P. fumosoroseus.
As análises de RAPD (Polimorfismo de DNA Amplificado ao Acaso) e ITS (Sequências Internas Transcritas) foram utilizadas para investigar a variabilidade molecular entre isolados de Paecilomyces e para identificar cinco isolados morfologicamente atípicos, obtidos a partir de mosca branca no Norte do Estado do Paraná, que possuíam alguma semelhança com P. fumosoroseus. O produto da amplificação com os primers ITS4 e ITS5 apresentou 700 pares de bases para todos os isolados investigados. Os cinco isolados não identificados deram origem a padrões de restrição idênticos a todas as linhagens de P. fumosoroseus utilizadas como referência. A variabilidade observada nos perfis de RAPD foi suficiente para discriminar todos os isolados. A similaridade genética entre os isolados não identificados e as linhagens de P. fumosoroseus foi maior do que aquela observada entre as linhagens referência desta espécie. Este fato permitiu concluir que os isolados CNPso-P77, CNPso-P78, CNPso-P80, CNPso-P85 and CNPso-P91 pertencem à espécie P. fumosoroseus.